顯微鏡的原理和使用方法

1、顯微鏡的原理和使用方法-裝片的制作顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用（2）顯微鏡的成像 光源（天然光或人工光源）反光鏡光圈物體物鏡（凸透鏡）在鏡筒內(nèi)形成物體放大的實像目鏡把經(jīng)物鏡形成放大的實像進一步放大 顯微鏡放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù)（3）高倍顯微鏡的使用 用低倍顯微鏡觀察取鏡與安放： a. 右手握鏡臂，左手托鏡座。b. 顯微鏡放在實驗臺的前方稍偏左。對光 ： a. 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準通光孔。b. 選一較大的光圈對準通光孔，左眼注視目境，轉(zhuǎn)動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)，通過目鏡，可能看到自亮的視野。低倍鏡觀察： a. 把所要觀察的玻片標本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔

2、的中心。 b. 轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（此時實驗者的眼睛應當看物鏡鏡頭與標本之間，以免物鏡與標本相撞）。c. 左眼看目鏡內(nèi)，同時反向緩緩轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，使鏡筒上升，直到看到物像為止，再稍稍轉(zhuǎn)動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 高倍鏡觀察 a. 移動裝片，在低倍鏡下使需要放大觀察的部分移動到視野中央。b. 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，移走低倍物鏡，轉(zhuǎn)換為高倍物鏡。c. 調(diào)節(jié)光圈，使視野亮度適宜。 d. 緩緩調(diào)節(jié)細準焦螺旋，使物像清晰 注意事項a. 使用顯微鏡一定要嚴格按照取鏡安放對光壓片觀察的程序進行。b. 下降鏡筒時，一定要用雙眼從側(cè)面注視物鏡，使之接近裝片，但又要防止鏡頭

3、觸及裝片。否則會壓碎裝片和損壞物鏡（l0x物鏡的工作距離為0. 5-1 cm）。c. 有必要使用高倍物鏡時，必須先在低倍物鏡下將目標移到視野的中心，然后換用高倍物鏡。因為在低倍物鏡下看到的物像放大倍數(shù)小，但看到的標本實際面積大，容易找到目標；與低倍物鏡相比，高倍物鏡下看到的物像人，同樣的視野面積看到的標本的實際面積小，在裝片不動的情況下，高倍物鏡看到的只是低倍物鏡視野的中心部分。d. 換高倍物鏡時，千萬不可將鏡筒升高，正確的做法是直接轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，換上高倍物鏡即可。e. 使用高倍物鏡之后，透鏡與裝片之間的距離很近，使用粗準焦螺旋容易壓碎玻片和損壞透鏡，或者由于物像一閃而過，找不到要觀察的目標因此

4、，必須用細準焦螺旋調(diào)焦，細準焦螺旋只在調(diào)節(jié)圖像清晰度時使用。 原理說明1. 識別鏡頭：（1）目鏡：裝在鏡筒的上端，通常備有23個，上面刻有5、10或15符號以表示其放大倍數(shù)，一般裝的是10的目鏡。放大倍數(shù)越大鏡筒越短。（2）物鏡：裝在鏡筒下端的轉(zhuǎn)換器上，一般有2-3個物鏡，其中最短的刻有“10”符號的為低倍鏡，較長的刻有“40”符號的為高倍鏡，放大倍數(shù)越大鏡筒越長2. 放大倍數(shù)：顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積，如物鏡為10，目鏡為10，其放大倍數(shù)就為1010=100。放大的是物體的直線長度和寬度而不是面積。3. 工作距離：是指顯微鏡處于工作狀態(tài)（物象調(diào)節(jié)清楚）時物鏡的下

5、表面與蓋玻片（蓋玻片的厚度一般為0.17mm）上表面之間的距離，物鏡的放大倍數(shù)愈大，它的工作距離愈小。如物鏡是10的工作距離比物鏡是40的工作距離大。 4. 明暗程度：（1）顯微鏡用光源，自然光和燈光都可以，以燈光較好，因光色和強度都容易控制。（2）反光鏡它有平、凹兩面，再經(jīng)通光孔照至標本。可向任意方向轉(zhuǎn)動，凹面鏡聚光作用強，適于光線較弱時使用，平面鏡聚光作用弱，適于光線較強時使用。（3）光圈或遮光器在通光孔下方，光圈由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動它可調(diào)節(jié)其開孔的大小，以調(diào)節(jié)進光量；遮光器由幾個直徑大小不同的孔組成，選擇某一孔以確定進光量。5. 物像：鏡下見到的是完全的倒像，即標本

6、位于玻片右上角時在鏡下的左下角位置出現(xiàn)，移動的規(guī)律是物象在鏡下的左下角時將玻片向左下角移動可以將物象移到視野的中央來。但是物體的運動方向不變，即標本中細胞質(zhì)是順時針方向流動的，鏡下仍為順時針流動。6. 污物的位置：在視野中?？吹轿畚?，要明確污物不會在反光鏡上，因為反光鏡的作用是將光源光線反射到玻片標本上；確定污物的位置首先移動玻片如污物隨之移動即污物在玻片上；如污物不動，再轉(zhuǎn)動目鏡污物也隨之轉(zhuǎn)動即污物在目鏡上；否則在物鏡上。7. 普通光學顯微鏡下可以見到的細胞結(jié)構(gòu)有：細胞壁、細胞核、液泡、葉綠體、線粒體、核仁，在質(zhì)壁分離時可見到細胞膜，有絲分裂時可見到染色體。8. 玻片標本：必須是透明的，要使

7、光線能透過標本內(nèi)部。常用的種類有切片（洋蔥根尖縱切片）；裝片（洋蔥表皮臨時裝片）；壓片（洋蔥根尖臨時壓片觀察有絲分裂）；涂片（血涂片、自生固氮菌的臨時涂片）。 相關原理例析1. 物像放大問題 放大的對象：放大的是所觀察的物體的長或?qū)捈矗哼呴L被放大的倍數(shù)，不是指面積、體積的放大倍數(shù)。 放大倍數(shù)=目鏡倍數(shù)物鏡倍數(shù)如：目鏡為20；物鏡為10，則放大倍數(shù)為2010=200倍細胞面積的放大倍數(shù)為2002 =40000倍 放大倍數(shù)越大，物像越大，視野越小放大倍數(shù)越小，物像越小，視野越大如圖：左圖是放大10倍的物像，右圖是放大20倍時的物像，非常明顯放大倍數(shù)小，細胞物像小，但看到的細胞數(shù)目多，視野大；放大倍

8、數(shù)大，細胞物像大，但看到的細胞數(shù)目少，視野??； 物鏡越長，放大倍數(shù)越大；目鏡越長，放大倍數(shù)越小。2. 物像方位問題觀察著從顯微鏡看到的是上下顛倒、左右顛倒的象。 成像原理圖解如下：光線反光鏡遮光器通光孔標本（一定要透明）物鏡的透鏡（第一次放大成倒立實像）鏡筒目鏡（再放大成虛像）眼 舉例說明載玻片上物體形態(tài)與鏡中物像之間的對應關系：例一：分析：從例一可以讓學生體會顯微鏡下圖像與裝片上物體上下顛倒、左右顛倒的位置關系，進而得出判斷物像的簡便方法：即把紙張旋轉(zhuǎn)1800直接觀察。例二：分析：可以先讓學生判斷裝片下的物體狀態(tài)在鏡下的圖像，通過此例可以讓學生明白鏡下觀察到的物體旋轉(zhuǎn)的方向與實際旋轉(zhuǎn)方向相同

9、，并不是象部分學生所想當然的相反，而且也符合上下顛倒、左右顛倒的規(guī)律。3. 物像明暗問題 光圈小，成像暗；光圈大，成像亮 用平面反光鏡，成像相對暗；用凹面反光鏡，成像相對亮 高倍鏡下視野暗；低倍鏡下視野亮注：由于人眼感受物像的明暗是由進入人眼的光照強弱、光線多少決定的，因此對于不難理解，但在教學中會有很多師生對于的理解不是很好，其實就其原因還是由于進入人眼的光線多少造成的。因為低倍鏡視野大，看到的細胞多，高倍鏡視野小，看到的細胞少，即：高倍鏡下只有透過少量細胞的光線進入到人眼中，就感覺視野一些；低倍鏡下透過較多細胞的光線進入到人眼中，就感覺視野亮一些。臨時裝片的制作：（1）準備：1. 用潔凈的

10、紗布把載玻片和蓋玻片擦拭干凈。2. 把載玻片放在實驗臺上，用吸管在載玻片的中央滴一滴清水（2）制片3. 用鑷子取材。（如：從洋蔥鱗片葉子內(nèi)側(cè)的表皮上，撕取一小塊透明薄膜）4. 把材料（如：撕下的薄膜）浸入載玻片上的水滴中，用鑷子把薄膜展平。5. 用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后輕輕地蓋在薄膜上，避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡?！镜湫屠}】例1 觀察細胞中染色體行為并計數(shù)時，使用光學顯微鏡的正確方法是（ ）A. 低倍鏡對焦，將觀察目標移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并減少光量，調(diào)焦觀察B. 低倍鏡對焦，將觀察目標移至視野中央，轉(zhuǎn)用高倍鏡并增加光量，調(diào)焦觀察C. 低倍鏡對焦，換用高倍鏡，將觀

11、察目標移至視野中央，增加光量，調(diào)焦觀察D. 高倍鏡對焦，將觀察目標移至視野中央，增加光量，調(diào)焦觀察答案：B解析：正確使用低倍鏡 ：正確使用低倍鏡的操作程序是：取鏡、對光、安裝片、下降鏡筒、調(diào)焦。下降鏡筒時，必須雙眼注視鏡和裝片的距離，以免壓壞裝片和碰壞物鏡。高倍顯微鏡的使用：（1）在低倍鏡下將物像調(diào)到最清晰；（2）將所要放大的部位移至視野中央；（3）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，換高倍物鏡；（4）調(diào)整反光鏡和光圈，使視野亮度適宜；（5）左眼注視目鏡內(nèi)，同時轉(zhuǎn)動細準焦螺旋（約半圈），使鏡筒緩緩上升直到看清物像。例2 小華觀察同一標本4次，每次除調(diào)整放大倍率外，其他條件都未變動，結(jié)果如圖問：視野亮度最弱的是哪一個？

12、（ ）答案：B解析：低倍鏡換成高倍鏡后的視野變小，亮度變暗，細胞變大，數(shù)目變少；例3 使用顯微鏡觀察水中微小生物，若發(fā)現(xiàn)鏡中生物往圖7中圓圈內(nèi)所示方向游走，請問你該把載玻片往哪個方向移動才不至于使微小生物從視野中消失（ ）A. 甲 B. 乙 C. 丙 D. 丁答案：C解析：顯徽鏡下看到的是倒像例4 在光照明亮的實驗室中，用白色洋蔥表皮做質(zhì)壁分離實驗。在顯微鏡視野中清晰地看到細胞壁，但看不清細胞是否發(fā)生了質(zhì)壁分離，為了解決這一問題應（ ）A. 改用凹面反光鏡，放大光圈B. 改用凹面反光鏡，縮小光圈C. 改用平面反光鏡，放大光圈D. 改用平面反光鏡，縮小光圈答案：D 解析：顯徽鏡的用光（1）對于折

13、光性較強的材料，觀察視野光線過強，往往易看清結(jié)構(gòu)，卻極易造成眼睛疲勞，影響實驗效率。觀察洋蔥表皮細胞結(jié)構(gòu)時，由于原生質(zhì)層較薄，故在視野較暗時，觀察效果較好。（2）觀察視野過暗，也會看不清物像，影響效果。對比較厚的材料或顏色較深的材料，應增大通光量。觀察視野的明暗程度應以眼睛感到舒適為宜?！灸M試題】1. 下圖表示光學顯微鏡的一組鏡頭，目鏡標有5和15字樣，物鏡標有10和40字樣。請看圖回答：（1）要仔細觀察葉綠體的形態(tài)時，顯微鏡的目鏡、物鏡及其與蓋玻片間距離的組合為_（用標號作答）。此時放大的倍數(shù)為 。（2）在觀察中，和的顯微視野中比較明亮的是 。（3）若在低倍鏡視野中發(fā)現(xiàn)有一異物，當移動裝片

14、時，異物不動，轉(zhuǎn)換高倍鏡后，異物仍可觀察到，此異物可能存在于（ ）A. 物鏡上 B. 目鏡上 C. 裝片上 D. 反光鏡上2. 觀察葉綠體時，下列哪種材料不能直接放在載玻片上（ ）A. 葫蘆蘚的葉片 B. 黃楊葉橫切片C. 南瓜葉片 D. 沾有少數(shù)葉肉細胞3. 下列關于葉綠體在細胞中的分布，正確的是（ ）A. 在強光下，葉綠體以其較小的面對著光源，以利于接受較多的光B. 在弱光下，葉綠體以其較大的面對著光源，可以接受更多的光C. 在弱光下，葉綠體會較多地聚集在背光一側(cè)D. 在一般的葉片，背光面的細胞中含有較多的葉綠體4. 用小麥根尖成熟區(qū)表皮細胞觀察細胞質(zhì)流動時，由于根細胞的細胞質(zhì)無色透明，難

15、于觀察到細胞質(zhì)的流動，這時需采取的措施是（ ）A. 縮小光圈，用弱光線 B. 開大光圈，用弱光線C. 縮小光圈，用強光線 D. 開大光圈，用強光線5. 在觀察細胞質(zhì)流動時，把葉綠體等顆粒作為細胞質(zhì)流動的標志物是因為（ ）A. 光學顯微鏡下看到的細胞器只有葉綠體B. 如果沒有標志物，細胞質(zhì)的流動就難以察覺C. 只有葉綠體等顆?？梢砸苿樱毎|(zhì)基質(zhì)不流動D. 細胞質(zhì)基質(zhì)是流動的，細胞器是隨細胞質(zhì)基質(zhì)的流動被動運動的6. 在觀察顯微鏡時，經(jīng)常遇到以下4種現(xiàn)象：（1）視野太亮；（2）只見視野不見圖像；（3）圖象結(jié)構(gòu)不完整。試分析出現(xiàn)這些現(xiàn)象的可能原因，并提出排除方法。7. 用顯微鏡觀察同一材料的同一部

16、分時，高倍鏡視野與低倍鏡視野相比前者（ ）A. 亮，看到的細胞數(shù)目多 B. 暗，看到的細胞數(shù)目少C. 亮，看到的細胞數(shù)目少 D. 暗，看到的細胞數(shù)目多8,. 用顯微鏡觀察葫蘆蘚葉的裝片時，為使視野內(nèi)看到的細胞數(shù)目最多，應選用（ ）A. 目鏡5，物鏡10 B. 目鏡10，物鏡15C. 目鏡5，物鏡40 D. 目鏡10，物鏡409. 光學顯微鏡所能分辨的最小長度單位是（ ）A. 厘米（cm） B. 毫米（mm） C. 微米（m） D. 納米（nm）10. 用顯微鏡觀察裝片時，要將物像從視野的左方移到正中，裝片的移動方向應是（ ）A. 向右方 B. 向上方 C. 向左方 D. 向下方11. 某學生在

17、顯微鏡下觀察落花生子葉的切片，當轉(zhuǎn)動細準焦螺旋時，有部分細胞看得清晰，另一部分細胞較模糊，這是由于（ ）A. 反光鏡未調(diào)節(jié)好 B. 標本切得厚薄不均C. 細準焦螺旋未調(diào)節(jié)好 D. 顯微鏡物鏡損壞12. 下面是用普通光學顯微鏡觀察時的幾個操作步驟，在顯微鏡下要把視野中的物像從如圖中I轉(zhuǎn)為II，正確簡便的操作步驟一般是（ ） 轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋 調(diào)節(jié)光圈 轉(zhuǎn)動細準焦螺旋 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器 移動標本A. B. C. D. 13. 用顯微鏡的一個目鏡分別與4個不同倍數(shù)的物鏡組合起來觀察已發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞裝片。當成像清晰時，每一物鏡與載玻片的距離如圖6-3所示。如果載玻片位置不變，用哪一物鏡在一個視野中看到的細

18、胞最多？14. 一個細小物體被顯微鏡放大50倍，這里“被放大50倍”指放大該細小物體的（ ）A. 體積 B. 表面積 C. 像的面積 D. 長度或?qū)挾?5. 當顯微鏡的目鏡為10，物鏡為10時，在視野直徑范圍內(nèi)可看到相連的8個細胞。若目鏡不變，物鏡換成40時，則在視野中可以看到這8個細胞中的（ ）A. 2個 B. 4個 C. 16個 D. 32個16. 顯微鏡視野中用于指示的“指針”是用頭發(fā)制作的，這根頭發(fā)應安放在（ ）A. 物鏡內(nèi) B. 目鏡內(nèi) C. 鏡筒內(nèi) D. 裝片上17. 在光學顯微鏡下觀察細胞質(zhì)流動的實驗中，你看到細胞內(nèi)正在流動的結(jié)構(gòu)是（ ）A. 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B. 葉綠體 C. 高爾基體 D. 液泡18. 某同學做洋蔥根尖細胞有絲分裂實驗時，高倍鏡下觀察到一個呈正方體的細胞，染色體形態(tài)和數(shù)目非常清晰，但是染色體頒在整個細胞中。按形態(tài)和數(shù)目的清晰程度，此細胞應為中期；按染色體分布位置，此細胞應為前期。請你分析一下此細胞應為哪一時期，為什么？19. 如圖為黑藻細胞的細胞質(zhì)環(huán)流示意圖，視野中的葉綠體位于液泡的右方，細胞質(zhì)環(huán)流的方向為逆時針，則實際上，黑藻細胞中葉綠體的位置和細胞質(zhì)環(huán)流的方向分別為（ ）A. 葉綠體位于液泡的右方，細胞質(zhì)環(huán)流的方向為順時針B. 葉綠體位于液泡的左方，細胞質(zhì)環(huán)流的方向為逆時針C. 葉綠體位于液泡的右方，細胞質(zhì)環(huán)