實(shí)驗(yàn)二 手工法APTT測(cè)定

1、原理原理 在體外滿足內(nèi)源性凝血全部條件后的血漿凝固所需的時(shí)間。在在體外滿足內(nèi)源性凝血全部條件后的血漿凝固所需的時(shí)間。在3737條件下，以白陶土激活凝血因子條件下，以白陶土激活凝血因子，以腦磷脂代替血小板所提供，以腦磷脂代替血小板所提供凝血的催化表面，再加入適量的凝血的催化表面，再加入適量的CaCa2+2+, ,即可滿足內(nèi)源性凝血的全部條件。即可滿足內(nèi)源性凝血的全部條件。測(cè)定從加入測(cè)定從加入CaCa2+2+到血漿凝固所需的時(shí)間即為到血漿凝固所需的時(shí)間即為APTTAPTT。APTT Ca2+腦磷脂腦磷脂白陶土白陶土 Ca2+腦磷脂腦磷脂部分凝部分凝血活酶血活酶器材和試劑1. 1.水浴箱、試管、試管

2、架、加樣槍、離心機(jī)、秒表水浴箱、試管、試管架、加樣槍、離心機(jī)、秒表2. 2.凝血活酶試劑，氯化鈣溶液凝血活酶試劑，氯化鈣溶液標(biāo)本采集109mmol/L109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝的靜脈血（枸櫞酸鈉抗凝的靜脈血（1 1：9 9）1.8ml1.8ml血液和血液和0.2ml0.2ml抗凝劑抗凝劑操作步驟 1. 1.采血后分離貧血小板血漿：采血后分離貧血小板血漿：3000r/min3000r/min離心離心1010分鐘。分鐘。 2. 2.溫浴氯化鈣溶液：置于溫浴氯化鈣溶液：置于3737水浴箱溫浴水浴箱溫浴3min3min。 3. 3.測(cè)定待檢血漿測(cè)定待檢血漿APTTAPTT： （1 1）溫浴活化：在

3、試管中加入待檢血漿和）溫浴活化：在試管中加入待檢血漿和APTTAPTT試劑各試劑各0.1ml0.1ml，混勻，混勻，置于置于3737水浴箱中溫浴水浴箱中溫浴3min3min。輕輕振搖。輕輕振搖。 （2 2）加氯化鈣溶液計(jì)時(shí)：在試管中加入氯化鈣溶液）加氯化鈣溶液計(jì)時(shí)：在試管中加入氯化鈣溶液0.1ml0.1ml，立即混勻，立即混勻并開始計(jì)時(shí)，并置于水浴箱中不斷的振搖。約并開始計(jì)時(shí)，并置于水浴箱中不斷的振搖。約30s30s時(shí)，不時(shí)緩慢傾斜時(shí)，不時(shí)緩慢傾斜試管，觀察試管流動(dòng)狀態(tài)，當(dāng)液體不流動(dòng)停止計(jì)時(shí)，記錄時(shí)間。試管，觀察試管流動(dòng)狀態(tài)，當(dāng)液體不流動(dòng)停止計(jì)時(shí)，記錄時(shí)間。 4. 4.書寫報(bào)告單：待檢血漿書寫報(bào)告單：待檢血漿APTT=APTT=單位為單位為S S血漿0.1mlAPTT試劑各0.1ml +CaCl20.1ml （混勻計(jì)時(shí)） 結(jié)果觀察：緩慢傾斜試管，觀察液體流動(dòng)狀態(tài)，流動(dòng) 停止后停止計(jì)時(shí)3737水浴水浴5min思考題 1. 1. APTTAPTT檢測(cè)的臨床意義？檢測(cè)的臨床意