超低溫冷凍保存種質(zhì)

1、精選ppt第十章第十章 植物種質(zhì)的超低溫保存植物種質(zhì)的超低溫保存精選ppt種質(zhì)保存種質(zhì)保存 是指利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)是指利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境保存種質(zhì)資源，使個體中所含有境保存種質(zhì)資源，使個體中所含有的遺傳物質(zhì)保持其完整性，有高的的遺傳物質(zhì)保持其完整性，有高的活力，能通過繁殖將其遺傳特性傳活力，能通過繁殖將其遺傳特性傳遞下去。遞下去。精選ppt按保存類型分類按保存類型分類 按保存類型分類按保存類型分類可分為兩種類型可分為兩種類型非原生境保存非原生境保存 原生境保存原生境保存精選ppt亞馬遜熱帶雨林亞馬遜熱帶雨林精選ppt精選ppt精選ppt精選ppt離體保存離體保存種植保存種植保存

2、種子保存種子保存超低溫冷凍保存超低溫冷凍保存常用的種質(zhì)保存方法常用的種質(zhì)保存方法精選ppt抑抑制制外外植植體體生生長長n降降低低環(huán)環(huán)境境中中的的氧氧含含量：量：低低氣氣壓壓處處理、理、低低氧氧分分壓壓處處理理n使使用用生生長長延延緩緩劑：劑：多多效效唑、唑、矮矮壯壯素素n其其他他方方法：法：精選ppt種子保存種子保存 優(yōu)點：優(yōu)點：占用空間少，保存期較長，易干占用空間少，保存期較長，易干燥，易包裝和運輸。燥，易包裝和運輸。 缺點：缺點：不適用于無性繁殖的植物種類，不適用于無性繁殖的植物種類，隨著時間的延長，種子的生活力逐漸下隨著時間的延長，種子的生活力逐漸下降，同時易受到病蟲害的侵襲。降，同時易

3、受到病蟲害的侵襲。精選ppt種植保存種植保存w自然保護區(qū)，植物園，森林公園自然保護區(qū)，植物園，森林公園w缺點：缺點：占地多，需要大量的人力物力，占地多，需要大量的人力物力，費用高，易受到自然災(zāi)害的影響費用高，易受到自然災(zāi)害的影響精選ppt離體保存離體保存w優(yōu)點：優(yōu)點：占用空間少，無病蟲害以及自然災(zāi)害占用空間少，無病蟲害以及自然災(zāi)害的影響，不受季節(jié)限制。短時間可實現(xiàn)大量的影響，不受季節(jié)限制。短時間可實現(xiàn)大量植物的增殖，無病毒。植物的增殖，無病毒。w缺點：缺點：連續(xù)不斷的繼代培養(yǎng)可能會引起染色連續(xù)不斷的繼代培養(yǎng)可能會引起染色體和基因型的變異。體和基因型的變異。精選ppt精選ppt超低溫冰箱超低溫冰

4、箱精選ppt離體植物材料的超低溫冰凍保存技術(shù)離體植物材料的超低溫冰凍保存技術(shù)植物材料的選取植物材料的選取材料的預(yù)處理材料的預(yù)處理冰凍保護劑預(yù)處理冰凍保護劑預(yù)處理降溫冷凍操作降溫冷凍操作化凍操作化凍操作化凍材料的活力檢測化凍材料的活力檢測精選ppt材材料料材材料料l愈愈傷傷組組織、織、懸懸浮浮細細胞、胞、原原生生質(zhì)質(zhì)體體l花花粉粉和和花花粉粉胚胚l莖莖尖、尖、胚、胚、幼幼齡齡植植株株精選pptv材料的低溫材料的低溫預(yù)處理預(yù)處理v材料的預(yù)培養(yǎng)材料的預(yù)培養(yǎng)精選ppt精選ppt 所使用的冷凍保護劑所使用的冷凍保護劑應(yīng)具有以下特性：應(yīng)具有以下特性： 分子質(zhì)量較小分子質(zhì)量較小 易于與溶劑混合易于與溶劑混合

5、 快速滲入細胞快速滲入細胞 無毒或毒性小無毒或毒性小 易洗脫易洗脫 常用的是常用的是DMSO。精選ppt保保護護劑劑培培養(yǎng)養(yǎng)基基里，里，或或者者是是溶溶解解在在有有糖糖或或無無糖糖的的水水中。中。n保保護護劑劑應(yīng)應(yīng)當當緩緩慢慢加加入。入。n使使用用復(fù)復(fù)合合冰冰凍凍保保護護劑劑比比單單獨獨使使用用更更為為有有效。效。精選ppt降降溫溫冰冰法法n干干燥燥冷冷凍凍法法n包包埋埋脫脫水水法法n玻玻璃璃化化法法精選ppt1、快速冷凍法、快速冷凍法 指將植物材料從指將植物材料從0或者其他預(yù)處理溫度直接或者其他預(yù)處理溫度直接投入液氮中保存的方法，降溫速度投入液氮中保存的方法，降溫速度1000/min。 2、

6、慢速冷凍法、慢速冷凍法將處于將處于0或其他預(yù)處理溫度的材料以或其他預(yù)處理溫度的材料以12/min的降溫速度從起始溫度降到的降溫速度從起始溫度降到-100，穩(wěn)定穩(wěn)定1h后，投入到液氮保存或以此降溫速度連后，投入到液氮保存或以此降溫速度連續(xù)降溫至續(xù)降溫至-196的方法。的方法。 精選pptc、預(yù)冷凍法、預(yù)冷凍法 指將植物保存材料放入液氮前，需經(jīng)過短指將植物保存材料放入液氮前，需經(jīng)過短暫時間的低溫鍛煉的方法。暫時間的低溫鍛煉的方法。d、干燥冷凍法、干燥冷凍法 將材料置于將材料置于2729烘箱內(nèi)降低植物含水烘箱內(nèi)降低植物含水量，再投入液氮中保存的方法。量，再投入液氮中保存的方法。 精選ppt( (e包

7、埋凍存法包埋凍存法精選ppt精選ppt化凍操作化凍操作wa、快速解凍法、快速解凍法w指將液氮中保存的材料直接投入到指將液氮中保存的材料直接投入到3740溫水浴中進行解凍的方法。解凍的升溫速度溫水浴中進行解凍的方法。解凍的升溫速度為為500750/min。wb、慢速解凍法、慢速解凍法w將液氮中保存的材料先置于將液氮中保存的材料先置于0低溫下解凍，低溫下解凍，再逐漸升至室溫下進行解凍的方法。再逐漸升至室溫下進行解凍的方法。精選ppt化凍材料的活力檢測化凍材料的活力檢測 檢驗化凍后材料的生活力和存活率的最檢驗化凍后材料的生活力和存活率的最根本方法是再培養(yǎng)。根本方法是再培養(yǎng)。 FDAFDA、TTCTT

8、C等染色的方法進行快速檢測，等染色的方法進行快速檢測，只能作為生活力的預(yù)測指標只能作為生活力的預(yù)測指標精選ppt精選ppt 超低溫保存技術(shù)的發(fā)展超低溫保存技術(shù)的發(fā)展精選ppt超低溫保存種質(zhì)技術(shù)的應(yīng)用前景超低溫保存種質(zhì)技術(shù)的應(yīng)用前景 懸浮細胞和愈傷組織的保存懸浮細胞和愈傷組織的保存 生長點冷凍保存生長點冷凍保存 胚狀體（體細胞胚、花粉胚）冷凍保存胚狀體（體細胞胚、花粉胚）冷凍保存 原生質(zhì)體冷凍保存原生質(zhì)體冷凍保存精選ppt小結(jié)小結(jié)w生物細胞的低溫凍存是防止生物種質(zhì)滅絕的生物細胞的低溫凍存是防止生物種質(zhì)滅絕的重要途徑重要途徑w低溫凍存技術(shù)的應(yīng)用取決于凍存技術(shù)和在培低溫凍存技術(shù)的應(yīng)用取決于凍存技術(shù)和在培養(yǎng)技術(shù)的成熟程度養(yǎng)技術(shù)的成熟程度w根據(jù)細胞類型選擇凍存和解凍方法是再培養(yǎng)根據(jù)細胞類型選擇凍存和解