刺五加對(duì)實(shí)驗(yàn)性蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣及內(nèi)皮素和降鈣素基因

1、    刺五加對(duì)實(shí)驗(yàn)性蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣及 內(nèi)皮素和降鈣素基因相關(guān)肽的影響        【摘要】目的探討中藥刺五加(AS)防治蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后腦血管痙攣(CVS)的作用機(jī)制。方法采用犬枕大池二次注血制作實(shí)驗(yàn)性犬SAH后CVS動(dòng)物模型。放免法測定SAH后30 min、2 d、4 d和7 d時(shí)血及腦脊液(CSF)中內(nèi)皮素(ET)和降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)含量。并于第二次注血后30 min靜脈滴注AS注射液，以后每日1次(40 mL/d)至第7天，

2、測定時(shí)間點(diǎn)同上。結(jié)果AS組在第二次注血后2 d、4 d、7 d血漿及CSF中ET含量較對(duì)照組高，較單純注血組低。而CGRP較對(duì)照組略低，較注血組高。結(jié)論刺五加可以通過抑制ET升高和CGRP降低而達(dá)到防治SAH后CVS的目的?！娟P(guān)鍵詞】蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣內(nèi)皮素降鈣素基因相關(guān)肽刺五加Effect of acanthopanax senticosus (AS) on levels of ET, CGRP and cerebral vascular spasm induced by experimental SAH in dogsZhou ChunkuiFeng JiachunWu JunRao

3、 Mingli（Department of Neurology, The First Teaching Hospital of Norman Bethune University of Medical Sciences. Chang Chun, 130021. Tel:2231.）【Abstract】Objective To explore neuroprotective effects of acanthopanax senticosus (AS) and mechanism of cerebral vascular spasm (CVS) induced by

4、experimental SAH. MethodsExperimental SAH in dogs was made by injecting blood for tow times, ET and CGRP in serum and CSF were measured by radioimmunoassay. AS injection was stated to use at 30 min after second time injecting blood and q.d iv drop. ResultsThe levels of ET in serum and CSF were incre

5、ased and CGRP decreased in injecting blood groups compared with controls after SAH. In the groups treated by AS, the level of ET was decreased and CGRP increased compared with the injecting blood groups. ConclusionsAS can inhibit increasing of ET and decreasing of CGRP to provent and treat CVS follo

6、wing SAH. 【Key words】SAH Cerebral vascular spasm ET CGRP Acanthopanax senticosus本文在采用枕大池二次注血法建立犬蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后腦血管痙攣(CVS)動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，動(dòng)態(tài)觀察了刺五加(AS)注射液對(duì)犬SAH后CVS，血漿和腦脊液(CSF)中內(nèi)皮素(ET)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)含量變化的影響。1材料和方法?1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型建立健康成犬?15只，體重2025 kg，氯胺酮注射液100 mg肌注基礎(chǔ)麻醉，然后給予3%戊巴比妥鈉3035 mg/kg靜脈麻醉。無菌穿刺枕大池。緩放CSF 0.2 mL/k

7、g，同時(shí)抽取股動(dòng)脈新鮮無抗凝血0.5 mL/kg，立即以0.25 mL/s的速度注入枕大池。保持頭低位30 min。48小時(shí)后重復(fù)上述過程。造模成功動(dòng)物表現(xiàn)為精神萎靡、嗜睡，進(jìn)食減少或咀嚼不能，項(xiàng)強(qiáng)、毛發(fā)雜亂無光、少數(shù)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙，多數(shù)在24小時(shí)內(nèi)有所緩解。但在第二次注血后上述癥狀加重而且持續(xù)時(shí)間長、恒定。1.2實(shí)驗(yàn)分組正常對(duì)照組：枕大池注血改用等量溫生理鹽水代替；單純注血組；AS組：在第二次枕大池注血后30 min開始給予AS注射液40 mL靜脈點(diǎn)滴，每日1次，至第7天。1.3血漿、腦脊液標(biāo)本采集處理及ET、CGRP測定各組動(dòng)物分別在第1次注血(或注水)前、注血后30 min、第2天、第4天

8、和第7天，采取肘靜脈血及腦脊液各4 mL，分別置于含10% EDTA二鈉50L和抑肽酶50L(1萬U/mL)的試管中混勻。血及血性腦脊液1?500 r/min離心?15 min后分離血漿及CSF上清液，測定ET及CGRP含量。2結(jié)果單純注血組注血后30 min至7 d血漿和CSF ET含量明顯增高，AS干預(yù)組與同期對(duì)照組比較均升高，但與單純注血組各時(shí)相比較均顯著降低，見表1。各組CGRP含量則在單純注血組于注血后低于同期對(duì)照組，AS干預(yù)組與同期對(duì)照比較略有降低，但差異不顯著。與同期的單純注血組比較則明顯升高，見表2。Table 1 Levels of ET of serum and CSF i

9、n CVS following SAH表1各組SAH后CVS血漿及腦脊液ET含量動(dòng)態(tài)變化?(±s,ng/L)Anterio-injectingblood 注血前Post-injecting blood for 30 min注血后30 minPost-injectingblood for 2 d注血后2 dPost-injectingblood for 4 d注血后4 dPost-injectingblood for 7 d注血后7 dControl group對(duì)照組Serum血漿29.56±6.4131.07±13.8734.01±26.9128.39&

10、#177;10.4831.68±7.14n=5CSF50.84±16.4863.24±23.1055.65±25.4255.05±23.54Injecting blood注血組Serum血漿31.08±17.99105.72±18.091）129.09±25.981）148.55±12.361）168.23±15.071）n=5CSF54.06±18.21145.66±22.391）157.99±43.691）198.03±9.791）AS group刺五

11、加組Serum血漿32.96±21.29102.38±14.251）90.36±16.551）2）94.87±22.731）2）88.97±20.081）2）n=5CSF50.94±18.6289.92±21.311）2）102.34±34.271）2）94.33±28.121）2）1)P0.01 compared with control group, 與對(duì)照組比較，P0.012)P0.01 compared with injecting blood group. 與單純注血組比較，P0.01 Tabl

12、e 2 Levels of CGRP of serum and CSF in CVS following SAH表2各組SAH前后血漿及腦脊液中CGRP含量變化?(±s,ng/L)Anterio-injectingblood 注血前Post-injecting blood for 30 min注血后30 minPost-injecting blood for 2 d注血后2 dPost-injectingblood for 4 d注血后4 dPost-injectingblood for 7 d注血后7 dControl group對(duì)照組Serum血漿59.03±11.35

13、57.35±12.0158.41±7.3858.21±10.9755.92±13.72CSF27.82±8.3128.29±7.9329.23±6.8427.98±5.61Injecting blood注血組Serum血漿58.42±6.4944.53±10.671）40.24±12.91）28.19±8.581）20.35±7.681）CSF26.22±4.5119.82±3.411）12.98±4.011）7.29±3.4

14、41）AS group刺五加組Serum血漿61.08±12.4740.27±17.971）54.45±12.042）55.97±19.292）53.22±17.012）CSF29.35±8.0426.27±5.212）27.22±10.482）25.34±9.762）1)P0.01 Compared with control group, 與對(duì)照組比較P0.01, 2)P0.01 compared with injecting blood group, 與單純注血組比較，P0.01 3討論SAH后CVS

15、一直是神經(jīng)內(nèi)外科重點(diǎn)科研課題，是SAH致殘和致死的重要原因。CVS的機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，早發(fā)性CVS可能是由于血小板大量釋放5-羥色胺所致，但是否還存在其它原因還不清楚。而遲發(fā)性痙攣可能與氧合血紅蛋白、花生酸類、內(nèi)皮素、自由基與脂質(zhì)過氧化物、血小板等因素有關(guān)。近年發(fā)現(xiàn)與一些小分子物質(zhì)如血管活性多肽有關(guān)1。上述各種因子有些互為因果、相互影響，有些有協(xié)同作用而有些有拮抗作用，所以SAH后CVS的發(fā)生可能是綜合因素所致。刺五加注射液是刺五加根莖葉經(jīng)精制加工而成的無菌水溶液2。刺五加是主要產(chǎn)于我國東北地區(qū)的一種植物，來源充足價(jià)格低廉。其主要有效成分有刺五加甙3，根部含多種甙4。本實(shí)驗(yàn)采用刺五加干預(yù)試對(duì)SAH

16、后CVS的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行研究。從先期的實(shí)驗(yàn)看刺五加對(duì)SAH后CVS所引起的癥狀有明顯改善作用，而且通過測量基底動(dòng)脈直徑觀察，該藥能明顯緩解SAH后的CVS5?；谏鲜鲈砦覀?cè)嚵私獯涛寮泳徑庋墀d攣是否由于影響了血漿和腦脊液中ET和CGRP的含量而起作用。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看刺五加組血漿和CSF中ET含量較單純注血組降低，但較同期對(duì)照組高，由此可見刺五加可降低SAH所致的ET含量。ET是迄今為止發(fā)現(xiàn)的體內(nèi)最為強(qiáng)烈持久的縮血管活性物質(zhì)，對(duì)體內(nèi)各臟器組織血管平滑肌均有強(qiáng)烈持久的收縮作用，其作用時(shí)間長且不易被清除。ET受體分布于腦和脊髓，也存在于腦血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞上，這樣大量的ET釋放可以使椎動(dòng)脈、

17、基底動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈、軟腦膜血管產(chǎn)生持續(xù)性收縮6。SAH時(shí)ET大量釋放，在血液和CSF中長期維持高濃度是SAH后CVS的重要原因。我們認(rèn)為刺五加對(duì)SAH后CVS的緩解作用之一就是刺五加抑制了SAH后血漿和CSF中ET的升高而起作用的。本實(shí)驗(yàn)還顯示SAH后血和CSF中CGRP含量明顯低于對(duì)照組，而刺五加組與同期的單純注血組相比CGRP含量又明顯升高。由此可見刺五加可提高SAH后所致的血和CSF中CGRP的含量。CGRP是目前已知的最強(qiáng)的舒血管活性物質(zhì)之一。廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)。在支配腦血管系統(tǒng)的三叉神經(jīng)末梢內(nèi)濃度較高7。CGRP可以拮抗ET的縮血管作用，二者在正常情況下保持動(dòng)態(tài)平衡，失平

18、衡時(shí)可出現(xiàn)血管的過度收縮或擴(kuò)張8。因此我們認(rèn)為刺五加緩解SAH后CVS的作用機(jī)制之一是調(diào)節(jié)并提高了CGRP的活性。提示刺五加很可能通過某種生理生化過程抑制了SAH后ET的過度分泌和促進(jìn)CGRP的合成或/和釋放而實(shí)現(xiàn)緩解CVS。本課題為吉林省衛(wèi)生廳資助課題(無課題編號(hào))周春奎（白求恩醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院神經(jīng)內(nèi)科130021）馮加純（白求恩醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院神經(jīng)內(nèi)科130021）吳軍（白求恩醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院神經(jīng)內(nèi)科130021）饒明俐（白求恩醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院神經(jīng)內(nèi)科130021）參考文獻(xiàn)1，胡維銘，王維治主編. 神經(jīng)內(nèi)科主治醫(yī)生699問. 北京：北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998. 4744752，杜正國，王純，王晉明，等. 刺五加注射液對(duì)冠心病患者血液流變學(xué)的影響. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1995,15(9):3963，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所等編. 中藥志. 第二版，北京：人民衛(wèi)生出版社出版，1993. 4594624，