知母的主要化學(xué)成分的研究45

1、知母的主要化學(xué)成分的研究 班級：10藥分 學(xué)號：10321033 姓名：呂培 摘要：知母是臨床常用藥材，在很多中醫(yī)復(fù)方中都有應(yīng)用，其研究具有重要的臨床意義。近年來藥學(xué)工作者對知母進行了較為系統(tǒng)的研究，為臨床治療提供了啟示作用。知母富含甾體皂苷，雙苯吡酮類，木脂素類，黃酮類，多糖類，有機酸以及其他成分，而其中，甾體皂苷類和雙苯吡酮為主要成分。本文對知母中主要化學(xué)成分進行匯總，并綜述近年知母中單體成分的藥理學(xué)進展，研究表明，知母皂苷及其苷元具有防治老年癡呆癥、保護腦缺血損傷、抗凝血、抗氧化、抗腫瘤、抗骨質(zhì)疏松、抗炎、降血壓、降血糖及降血脂等藥理活性。本文對知母皂苷及其苷元的上述藥理作用研究進展進行

2、綜述，為進一步開發(fā)利用提供參考。其中值得關(guān)注的是知母皂苷改善老年性癡呆和抗腫瘤活性的研究。 關(guān)鍵詞：知母，知母皂苷，雙苯吡酮 引言：知母,別名羊胡子根、蒜辮子草等,為百合科植物的干燥根莖。知母為多年生草本，全株無毛。根莖肥厚，橫走，殘留許多黃褐色纖維狀的舊葉殘基，下部生有多數(shù)肉質(zhì)須根。生長適應(yīng)性很強,喜暖濕氣候；耐寒冷，喜陽光,以肥沃疏松的沙質(zhì)壤土栽培較佳。主產(chǎn)于河北、山西、內(nèi)蒙古、陜西及我國東北地區(qū)的西等地。中醫(yī)理論認為,知母性寒,味苦、甘入肺、腎、胃經(jīng)；具有清熱瀉火，生津潤燥之功效，是一常用的苦寒清熱藥。臨床用于外感熱病、高熱煩渴、肺熱燥咳、骨蒸潮熱、內(nèi)熱消渴、腸燥便秘等。 1 知母皂苷

3、甾體皂苷在知母中數(shù)量多、含量高，已經(jīng)鑒定的化合物有20多種。其皂苷元有菝葜皂苷元，也稱薩爾薩皂苷元、馬爾可皂苷元、新吉托皂苷元和薯蕷皂苷元，均為螺甾皂苷元。知母皂苷AIII以薩爾薩皂苷元為母核，知母皂苷B 又叫知母皂苷E、知母皂苷BII、知母皂苷BIII，又叫知母皂苷B、知母皂苷E1和知母皂苷I的苷元為呋甾皂苷元但水解脫糖后可轉(zhuǎn)化生成菝葜皂苷元。 2 知母皂苷的藥理作用 （1）抗炎作用 Lu等1提出知母皂苷BII可以在mRNA和蛋白質(zhì)水平上減 少炎性細胞因子如白介素-1（IL-1），瘤壞死因子-（TNF-）和白細胞介素-6（IL-6）的生成，且呈現(xiàn)劑依賴性知母皂苷BII還可以抑制核因子NFB的

4、活性。Kim等2認為知母皂苷B具有抗炎作用，與知母皂苷BII一樣，也可以阻斷細胞炎癥因子NF-B的生成，是通過抑制p38絲裂素活化蛋白激酶（MAPK）途徑實現(xiàn)的。 （2）降血糖、血脂作用 李春梅等研究表明,知母皂苷15 g/L能顯著抑制-葡萄糖苷酶的活性,抑制率達73.09%,且能顯著提高四氧嘧啶模型小鼠的糖耐量及降低餐后血糖。說明知母皂苷的降血糖作用可能是通過抑制-葡萄糖苷酶的活性,從而抑制肝臟的氨基酸轉(zhuǎn)化成葡萄糖(即糖異生作用)或抑制糖原分解而實現(xiàn)的。糖尿病常伴有血脂升高,韓兵等3以高脂飼料喂養(yǎng)鵪鶉建立高血脂癥和動脈粥樣硬化模型,連續(xù)觀察知母皂苷兩周后發(fā)現(xiàn),其血清中TG、TC、LDL、HD

5、L明顯降低,HDL/TC比值提高,斑塊面積縮小,表明知母皂苷對鵪鶉實驗性高脂血癥及動脈粥樣硬化具有明顯的抑制作用。（3）對大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響成之福等4研究知母皂苷對谷氨酸所致癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力、腦內(nèi)膽胺類遞質(zhì)和海馬內(nèi)pAPP陽性神經(jīng)元的影響,結(jié)果顯示知母皂苷(100, 200 mg·kg-1, ig),能明顯對抗老年性癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的下降,增加腦內(nèi)膽胺類遞質(zhì)的含量,抑制背海馬和齒狀回內(nèi)-APP陽性神經(jīng)元的生成。 （4）抗血小板聚集作用叢悅等5研究知母中螺甾烷型甾體皂苷對血小板聚集的影響實驗結(jié)果顯示:知母皂苷A對血小板聚集的抑制作用最強,在體外給藥50g/ml時可以完全

6、抑制由20mol/LADP誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集,最大抑制率為97·7%±4·3%;知母皂苷A異構(gòu)體和知母皂苷A對大鼠血小板聚集的抑制作用次之,在體外給藥劑量在50g/ml時的最大抑制率分別為37·6%±2·1%和47·3%±2·8%;,50g/ml時的最大抑制率僅為4·3%±0·2%;薩爾薩皂苷元對ADP誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集沒有明顯的抑制作用(最大抑制率1·8%±0·1%)。(5) 抗抑郁作用路明珠等6采用小鼠懸尾實驗、小鼠強迫游泳實驗、開野實驗

7、;阿樸嗎啡致小鼠刻板行為實驗;抑制單胺(去甲腎上腺素NE和多巴胺DA)重攝取實驗;育亨賓毒性增強實驗;以及5-羥色胺酸(5-HTP)致甩頭作用等動物模型來考察知母皂苷B-抗抑郁作用及其可能的機制。分別以小鼠不動時間、自主活動數(shù)、刻板行為評分、死亡率作為評價指標。其實驗結(jié)果表明：在小鼠懸尾實驗中,知母皂苷B-(100、150 mg/kg)能夠明顯縮短小鼠的不動時間;在小鼠強迫游泳實驗中,知母皂苷B-(50、100、150 mg/kg)均能夠明顯縮短小鼠的不動時間;對開野實驗中小鼠的自主活動次數(shù)無明顯影響。在抑制NE和DA重攝取實驗中,知母皂苷B-高劑量(150 mg/kg)顯著增加多巴胺(DA)

8、致小鼠死亡作用,但對去甲腎上腺素(NE)重攝取抑制作用不明顯。阿樸嗎啡致小鼠刻板運動實驗顯示,知母皂苷B-(100、150 mg/kg)對注射阿樸嗎啡后的小鼠刻板運動有顯著增強作用,差異具有顯著意義(P<0. 05);具有增加5-羥色胺酸(5-HTP)致甩頭作用;知母皂苷B-不具有增加育亨賓毒性的作用。最終結(jié)論得出：知母皂苷B-有抗抑郁活性,其作用機制可能與增強腦內(nèi)5-HT、DA神經(jīng)系統(tǒng)作用有關(guān)。 3 雙苯吡酮目前，已知知母中所含雙苯吡酮類化合物主要為芒果苷(1)、異芒果苷(2)、新芒果苷(3)，芒果普別名芒果試;杜果貳;知母寧芒果昔是具有酚輕基的雙苯毗酮類化合物，略溶于甲醇、乙醇、水。

9、可溶于熱的稀乙醇，溶液顏色為淡黃色。不溶于非極性溶劑。芒果營，廣泛存在于百合科植物知母，漆樹科芒果樹、扁桃樹的葉、果實和樹皮，龍膽科植物東北龍膽、川西樟芽菜，水龍骨科植物光石韋等植物中。芒果營為芒果葉的主要成分，含量達1.92%。芒果葉具有分布地域廣，藥材具有資源豐富，原料易得，價格低廉，四季可采等優(yōu)點。隨著其含量測定、提取分離、藥理作用及藥代動力學(xué)研究的深入,今后開發(fā)芒果苷作為免疫調(diào)節(jié)、防治腫瘤、白血病等藥物的前景十分廣闊。4 芒果苷的藥理作用(1) 免疫調(diào)節(jié)鄧家剛等7探討芒果苷對免疫抑制小鼠T淋巴細胞增殖的影響,以環(huán)磷酰胺復(fù)制免疫抑制小鼠模型,發(fā)現(xiàn)以刀豆蛋白A(ConA)刺激時,芒果苷可顯

10、著提高免疫抑制小鼠的T淋巴細胞增殖能力。結(jié)果顯示:芒果苷可拮抗環(huán)磷酰胺對ConA誘導(dǎo)的T淋巴細胞增殖反應(yīng)的抑制作用。秦懷洲等8實驗研究芒果苷對小鼠免疫功能的影響。結(jié)果:芒果苷能對抗氫化可的松引起的小鼠脾、胸腺萎縮;顯著增加氫化可的松免疫抑制小鼠的碳粒廓清率;增加小鼠血清溶血素IgG、IgM的生成;芒果苷還能顯著增強小鼠脾細胞和腹腔巨噬細胞的增殖。(2) 抗菌及鎮(zhèn)痛解熱劉雪萍等9研究芒果葉提取物的體外抗菌效果,結(jié)果:芒果葉提取物對6種常見的呼吸道感染菌有較強的體外抑制作用。鄧家剛等10研究芒果苷對內(nèi)毒素致熱家兔體溫的影響,結(jié)果:芒果苷對內(nèi)毒素致熱,有明顯解熱作用,且與劑量成正相關(guān),對熱損傷有較好

11、保護作用。(3) 抗病毒鄭作文等11研究發(fā)現(xiàn)芒果苷對HBV基因傳感染的人肝癌細胞系2215細胞HbeAg的分泌有明顯抑制作用,但對HbsAg分泌的抑制作用較差。鄧家剛等12觀察芒果苷對鴨乙型肝炎病毒感染模型的抑制作用,結(jié)果:芒果苷100、200 mg/kg在給藥期間對DHBV-DNA有明顯抑制作用,且在停藥后未見明顯反跳現(xiàn)象。 (4) 抗炎作用芒果苷具有良好的抗炎效果。黃敏琪等13發(fā)現(xiàn)芒果苷對二甲苯導(dǎo)致的小鼠耳腫脹有很好的治療作用。鄧家剛等14通過紫外分光光度法和放射免疫法研究發(fā)現(xiàn)，不同劑量的芒果苷均能減少小鼠背部氣囊炎性滲出液和全身炎癥家兔下丘腦中PGE2(前列腺素E2)的水平;通過對豚鼠組

12、織中慢反應(yīng)物質(zhì)(SRS-A)水平及豚鼠回腸收縮幅度進行測定，他們還發(fā)現(xiàn)芒果苷能抑制豚鼠回腸收縮、減少肺組織SRS-A的釋放，說明芒果苷具有明顯的抗炎作用15。此外，芒果苷還能抑制肥大細胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，對花生四烯酸誘導(dǎo)的小鼠炎癥性耳浮腫有很好的治療效果，同時還能控制巨噬細胞中花生四烯酸的量16.(5)對糖尿病的治療作用李學(xué)堅等17研究發(fā)現(xiàn)，芒果苷小檗堿組合物對小鼠的高血糖癥狀有明顯的治療作用，而對正常小鼠的血糖則無明顯作用。藍萍等18也發(fā)現(xiàn)，芒果苷抗糖尿病作用比較明顯。Muruganandan等19在鏈尿霉素誘導(dǎo)的患糖尿病小鼠體內(nèi)驗證芒果苷治療高血糖癥和動脈粥樣硬化效果實驗中也發(fā)現(xiàn)，芒果苷能明

13、顯降低小鼠的血糖水平，并且能減少血漿內(nèi)總膽固醇的水平，顯示出較好的抗血脂過多和抗動脈粥樣硬化的治療效果;在正常小鼠體內(nèi)，注射芒果苷提高了小鼠對口服葡萄糖的耐受程度。王露霏等20用芒果苷對糖尿病大鼠進行藥效學(xué)作用研究時發(fā)現(xiàn)，芒果苷可能通過抑制糖異生來增加胰島素的分泌，發(fā)揮其治療糖尿病及其并發(fā)癥的作用。黃芳等21以四氧嘧啶及鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的患糖尿病小鼠進行實驗發(fā)現(xiàn)，知母提取物能明顯抑制-葡萄糖苷酶的活性、降低小鼠血糖水平，以此認為芒果苷降血糖作用可能是通過抑制-葡萄糖苷酶的活性來實現(xiàn)的。Li等22對患有糖尿病的小鼠進行研究，結(jié)果顯示芒果苷能有效地治療糖尿病腎病，并且能改善小鼠的腎功能。Im等23研

14、究發(fā)現(xiàn)在小鼠肝臟細胞中芒果苷能降低血糖水平，并且推測其快速降血糖機理可能是通過1，6二磷酸果糖激酶來實現(xiàn)的。Lin等24利用熒光測定法對芒果苷與胰島素和胰高血糖素的結(jié)合物構(gòu)像進行測定，研究出隨著芒果苷含量的增加，其與胰島素和胰高血糖素的結(jié)合物構(gòu)象發(fā)生改變，這就進一步證明了芒果苷具有治療糖尿病的作用.(5) 抗腫瘤農(nóng)少云等25研究發(fā)現(xiàn)P120在肝癌細胞黏附和惡性行為中起重要作用,酪氨酸磷酸化后的P120與細胞惡性行為的增強有關(guān),結(jié)果進一步提示芒果苷對P120ctn酪氨酸磷酸化有抑制作用。程鵬等26研究芒果苷對K562細胞端粒酶活性及凋亡的影響,以進一步研究芒果苷抗白血病作用的分子機制,結(jié)果:芒果

15、苷能顯著抑制K562細胞端粒酶活性,其作用可能與誘導(dǎo)細胞凋亡有關(guān)。彭志剛等27觀察芒果苷對白血病K562細胞周期分布及細胞周期素A、細胞周期素表達的影響。結(jié)果顯示:芒果苷阻滯白血病K562細胞周期于G2/M期,明顯上調(diào)K562細胞CyclinA和CyclinB1mRNA表達水平,芒果苷誘導(dǎo)K562細胞G2/M期阻滯可能是其抗白血病作用的分子機制之一。5 結(jié)語知母使用歷史悠久，近年的藥理研究有長足的發(fā)展，其中的皂苷類成分，如知母皂苷BII、AIII等，是治療老年性癡呆、心血管疾病、抗癌，以及輔助改善骨質(zhì)疏松癥狀方面的有效成分，因此具有研究價值和非常好的開發(fā)前景。其苷元成分拔葜皂苷元活性類似，已經(jīng)

16、有不少涉及知母皂苷（元）活性、制備工藝等國內(nèi)外專利被申請，相應(yīng)的高類別新藥也在多個研究單位研究開發(fā)過程中。而雙苯吡酮類化合物中芒果苷和異芒果苷的抗氧化、降血糖和抗炎方面的活性也十分肯定，在相應(yīng)藥物和保健食品中的廣泛應(yīng)用具有不錯的前景。但是對其各類成分深層次的活性機制方面的研究還不夠深入，兩類成分之間在構(gòu)成知母藥材各自承擔(dān)的角色和相互的協(xié)同作用方面尚無研究；對于含有知母的成藥根據(jù)功效取向的不同應(yīng)該如何訂立更合理的質(zhì)量控制標準也需要關(guān)注。另外知母中多糖含量很高，而相應(yīng)的研究還比較薄弱，也是以后需要深入開展的方面。 參考文獻1Lu W Q,Qiu Y,Li T J,et al.Timosaponin

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