布魯氏菌病原學(xué)血清學(xué)診斷

1、1會(huì)計(jì)學(xué)布魯氏菌病原學(xué)血清學(xué)診斷布魯氏菌病原學(xué)血清學(xué)診斷主要內(nèi)容：主要內(nèi)容：1 1、布魯氏菌病原學(xué)；、布魯氏菌病原學(xué)；2 2、布魯氏菌診斷標(biāo)準(zhǔn)；、布魯氏菌診斷標(biāo)準(zhǔn)；3 3、布魯氏菌血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的幾種方法。、布魯氏菌血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的幾種方法。布魯氏菌的發(fā)展史布魯氏菌的發(fā)展史年份年份菌名菌名發(fā)現(xiàn)人發(fā)現(xiàn)人國(guó)家國(guó)家宿主宿主1887羊種菌羊種菌Bruce馬爾他馬爾他羊羊1897牛種菌牛種菌Bang丹麥丹麥牛牛1914豬種菌豬種菌Traun美國(guó)美國(guó)豬豬1953綿羊附睪種菌綿羊附睪種菌Buadle新西蘭新西蘭公綿羊公綿羊1956沙漠森林鼠種菌沙漠森林鼠種菌Stoennen美國(guó)美國(guó)沙漠森林野鼠沙漠森林野鼠1966犬

2、種菌犬種菌Carmichael美國(guó)美國(guó)小獵犬小獵犬自然條件自然條件生存時(shí)間（天）生存時(shí)間（天）自然條件自然條件生存時(shí)間（天）生存時(shí)間（天）水水50120奶油奶油2565塵塵4120奶酪奶酪2190糞糞2172凍肉凍肉1447畜舍墻棚畜舍墻棚4150腌肉腌肉2045地面地面4150培養(yǎng)基培養(yǎng)基60318衣服衣服3080干燥胎膜干燥胎膜120皮毛皮毛45120腐敗臟器腐敗臟器死亡死亡鮮牛乳鮮牛乳2550人工胃液人工胃液20500 010102020303040405050606070708080909010010020204040808016016032032064064012801280符合率符

3、合率（2 2）試管凝集試驗(yàn)）試管凝集試驗(yàn)原理：原理：Ag+AbAg-AbNaclNacl電介質(zhì)電介質(zhì)布氏菌侵入機(jī)體后，就會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生特布氏菌侵入機(jī)體后，就會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體，這種抗體可與相應(yīng)抗原（布氏異性抗體，這種抗體可與相應(yīng)抗原（布氏菌體）發(fā)生特異性結(jié)合，在電介質(zhì)作用下菌體）發(fā)生特異性結(jié)合，在電介質(zhì)作用下，就會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)，我們就，就會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)，我們就是用已知抗原查未知抗體。是用已知抗原查未知抗體。試管凝集反應(yīng)步驟試管凝集反應(yīng)步驟1 1、加入倍比稀釋受檢血清、加入倍比稀釋受檢血清0.50.5mlml2 2、加入、加入1 1：1010稀釋布氏菌抗原稀釋布氏菌抗原

4、0.50.5mlml3737度度2424小時(shí)觀察結(jié)果小時(shí)觀察結(jié)果同時(shí)配置比濁管便于結(jié)果判定同時(shí)配置比濁管便于結(jié)果判定0.50.50.50.5試管凝集反應(yīng)（試管凝集反應(yīng)（SATSAT）示意圖示意圖(1)(1)0.50.50.50.50.50.5稀釋血清稀釋血清1:251:501:1001:2001:4000.5棄去棄去稀釋度稀釋度比濁管的制備比濁管的制備管號(hào)1:20稀釋抗原生理鹽水清亮度標(biāo)記10.001.00100%+20.250.7575%+30.500.5050%+40.750.2525%+ +51.000.000%-結(jié)果判定：結(jié)果判定： 根據(jù)各管中上層液體的清亮度記錄凝集反根據(jù)各管中上層液

5、體的清亮度記錄凝集反應(yīng)程度（滴度），特別是應(yīng)程度（滴度），特別是50%50%清亮度（清亮度（+）對(duì)判）對(duì)判定結(jié)果關(guān)系較大，一定要與比濁管對(duì)比判定。定結(jié)果關(guān)系較大，一定要與比濁管對(duì)比判定。+ + 等于完全凝集，上層液等于完全凝集，上層液100%100%清亮。清亮。+ + 等于幾乎完全凝集，上層液等于幾乎完全凝集，上層液75%75%清亮。清亮。+ + 等于顯著凝集，上層液等于顯著凝集，上層液50%50%清亮。清亮。+ + 等于有凝集出現(xiàn)，液體等于有凝集出現(xiàn)，液體25%25%清亮。清亮。- - 等于無(wú)凝集，液體不清亮。等于無(wú)凝集，液體不清亮。人的診斷標(biāo)準(zhǔn)：人的診斷標(biāo)準(zhǔn)：1:100+1:100+為陽(yáng)性

6、，為陽(yáng)性，1:50+1:50+為可疑。為可疑。評(píng)價(jià)：試管凝集試驗(yàn)是評(píng)價(jià)：試管凝集試驗(yàn)是WrightWright和和SampleSample于于18981898年首先建立的，是布病診斷在國(guó)年首先建立的，是布病診斷在國(guó)際上唯一的全標(biāo)化方法，使用廣泛，際上唯一的全標(biāo)化方法，使用廣泛，經(jīng)久不衰。特異性好，也較敏感，實(shí)經(jīng)久不衰。特異性好，也較敏感，實(shí)用性強(qiáng)，診斷、流調(diào)、監(jiān)測(cè)均適用。用性強(qiáng)，診斷、流調(diào)、監(jiān)測(cè)均適用。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)： 有前帶現(xiàn)象。有前帶現(xiàn)象。 不能區(qū)別人工免疫和自然感染。不能區(qū)別人工免疫和自然感染。 產(chǎn)生一定的交叉反應(yīng)。產(chǎn)生一定的交叉反應(yīng)。 慢，需要兩天。慢，需要兩天?？贵w補(bǔ)體紅細(xì)胞溶血素陽(yáng)性陽(yáng)

7、性陰性陰性2.2.僅有抗原僅有抗原抗原紅細(xì)胞溶血素補(bǔ)體陽(yáng)性陽(yáng)性陰性陰性3.3.抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)抗原抗體補(bǔ)體紅細(xì)胞溶血素陰性陰性陽(yáng)性陽(yáng)性優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是一種傳統(tǒng)的免疫學(xué)技術(shù)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是一種傳統(tǒng)的免疫學(xué)技術(shù)，特異性強(qiáng)。它所查的免疫蛋白主要是，特異性強(qiáng)。它所查的免疫蛋白主要是IgGIgG類，此法不僅與布病臨床表現(xiàn)、病期類，此法不僅與布病臨床表現(xiàn)、病期有較好一致性，常用于鑒別診斷。有較好一致性，常用于鑒別診斷。缺點(diǎn)：參與反應(yīng)的成分多，缺點(diǎn)：參與反應(yīng)的成分多， 影響因素復(fù)雜，操作影響因素復(fù)雜，操作 煩瑣，不適與普查。煩瑣，不適與普查。注：試劑A：PBS稀釋液試劑B：金標(biāo)記抗體結(jié)合物DIGFA診斷布魯氏菌病結(jié)果上排：陽(yáng)性結(jié)果；上排：