生物選修三知識點

1、1.基因工程（基因工程（DNA重組技術(shù)）重組技術(shù)）通過通過體外體外DNA重組重組(基因表達載體構(gòu)建，在體基因表達載體構(gòu)建，在體外）和外）和轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因等技術(shù)。等技術(shù)。 分析：分析：1.是是分子水平分子水平的技術(shù)的技術(shù) 2.理論基礎(chǔ)是理論基礎(chǔ)是“基因重基因重組組”3.先人工在體外實現(xiàn)先人工在體外實現(xiàn)基因基因重組，再導(dǎo)入受體細胞。目的基因能與載體重組，重組，再導(dǎo)入受體細胞。目的基因能與載體重組，又能整合到受體細胞的染色體又能整合到受體細胞的染色體DNA上（整合到受體細胞的基因組上），原因：上（整合到受體細胞的基因組上），原因：有相同的有相同的分子結(jié)構(gòu)分子結(jié)構(gòu)，組成單位和功能單位都是，組成單位和功能

2、單位都是脫氧核苷酸脫氧核苷酸，堿基配對方式相同。，堿基配對方式相同。外源基因可以在不同生物細胞內(nèi)表達原因：生物共用一套外源基因可以在不同生物細胞內(nèi)表達原因：生物共用一套遺傳密碼。遺傳密碼。都遵循中心都遵循中心法則。法則?；蚬こ虒ι锏男誀钸M行定向改造，產(chǎn)生的變異是定向變異。基因工程基因工程對生物的性狀進行定向改造，產(chǎn)生的變異是定向變異。基因工程育種的優(yōu)點是育種的優(yōu)點是定向改造生物的性狀，定向改造生物的性狀，可克服可克服遠緣雜交不親和的障礙遠緣雜交不親和的障礙。2.體外體外DNA重組操作的工具：重組操作的工具：限制酶限制酶、DNA連接酶連接酶、載體載體。限制酶主要來自。限制酶主要來自原原核核生

3、物，限制酶的功能：能識別雙鏈生物，限制酶的功能：能識別雙鏈DNA分子特定的分子特定的核苷酸序列核苷酸序列并在特定的位并在特定的位點將兩個核苷酸之間的點將兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵切斷。供體生物的切斷。供體生物的DNA（含目的基因）和載（含目的基因）和載體一般要被體一般要被同種同種限制酶切割，得到相同的黏性末端或者平末端，這樣才能將目限制酶切割，得到相同的黏性末端或者平末端，這樣才能將目的基因和載體拼接形成重組。的基因和載體拼接形成重組。DNA連接酶是將連接酶是將DNA片斷片斷連接起來，連接的不是連接起來，連接的不是堿基，兩個核苷酸之間的堿基，兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵（DN

4、A聚合酶聚合酶是以是以DNA母鏈為模板，將單母鏈為模板，將單個游離的脫氧核苷酸連在個游離的脫氧核苷酸連在DNA片段末端形成子鏈）。載體的化學(xué)本質(zhì)是片段末端形成子鏈）。載體的化學(xué)本質(zhì)是DNA，種類有質(zhì)粒、種類有質(zhì)粒、噬菌體噬菌體衍生物、動植物病毒等。它應(yīng)具備條件：衍生物、動植物病毒等。它應(yīng)具備條件：1.在受體細胞中在受體細胞中能進行能進行自我復(fù)制自我復(fù)制，或者整合到受體細胞的染色體上，隨染色體，或者整合到受體細胞的染色體上，隨染色體DNA同步復(fù)制。同步復(fù)制。2.有一個或者多個有一個或者多個限制酶限制酶的切點，的切點， 3.具有具有標(biāo)記基因標(biāo)記基因，便于重組，便于重組DNA的的鑒定和選擇鑒定和選擇

5、4.能在受體細胞穩(wěn)定存在和無害。能在受體細胞穩(wěn)定存在和無害。3.目的基因目的基因一般是一般是編碼蛋白質(zhì)編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，或的結(jié)構(gòu)基因，或調(diào)控因子調(diào)控因子。來源：可以從。來源：可以從基因基因文庫文庫獲取或者獲取或者人工合成人工合成 基因文庫：如果這個基因文庫含有這種生物的基因文庫：如果這個基因文庫含有這種生物的所有基因所有基因，則它叫做這種生物的，則它叫做這種生物的基因組基因組文文庫。庫。cDNA是由生物某時期的是由生物某時期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄得到的互補得到的互補DNA，cDNA是部分基因文庫。是部分基因文庫。獲得目的基因后，為了獲得大量的目的基因，要用獲得目的基因后，為了獲得大量的目的

6、基因，要用PCR技術(shù)擴增。原理：技術(shù)擴增。原理：DNA復(fù)制。過復(fù)制。過程：先合成引物（不說加入），目的基因受熱程：先合成引物（不說加入），目的基因受熱變性變性解旋成為單鏈（變性，不用解旋酶）解旋成為單鏈（變性，不用解旋酶）目的基因單鏈與引物互補結(jié)合（目的基因單鏈與引物互補結(jié)合（復(fù)性復(fù)性）在耐高溫在耐高溫DNA聚合酶（聚合酶（Taq酶）的作用下延酶）的作用下延伸合成互補伸合成互補DNA單鏈（單鏈（延伸延伸）重復(fù)此循環(huán)。重復(fù)此循環(huán)。4.基因工程的基因工程的4步驟：獲取目的基因、構(gòu)建步驟：獲取目的基因、構(gòu)建基因表達載體基因表達載體、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的的基因

7、的檢測與鑒定檢測與鑒定，最核心的是第二步，它可以使目的基因成功導(dǎo)入受體細胞，最核心的是第二步，它可以使目的基因成功導(dǎo)入受體細胞,并在受并在受體細胞體細胞穩(wěn)定存在穩(wěn)定存在和成功地和成功地復(fù)制和表達復(fù)制和表達基因表達載體本質(zhì)上是一個基因表達載體本質(zhì)上是一個DNA分子，必須含有啟分子，必須含有啟動子（與動子（與M-RNA上的起始密碼子區(qū)別）、目的基因、終止子、上的起始密碼子區(qū)別）、目的基因、終止子、標(biāo)記基因標(biāo)記基因四部分。啟動子四部分。啟動子是是RNA聚合酶聚合酶識別和結(jié)合的部位，啟動識別和結(jié)合的部位，啟動轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄過程。終止子位于目的基因的末端，是終止過程。終止子位于目的基因的末端，是終止轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄

8、的DNA片段。標(biāo)記基因作用是片段。標(biāo)記基因作用是鑒定和選擇鑒定和選擇。轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化：將目的基因?qū)胧荏w細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)：將目的基因?qū)胧荏w細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)穩(wěn)定維持穩(wěn)定維持和和表達表達的過程。的過程。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（雙子葉植物和裸子植物）方法是：將目的基因插入農(nóng)桿菌的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（雙子葉植物和裸子植物）方法是：將目的基因插入農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒質(zhì)粒的的T-DNA上上，整合到植物細胞的染色體，整合到植物細胞的染色體DNA上。還有上。還有基因槍法基因槍法和和花粉管通道法花粉管通道法。 導(dǎo)入動物細胞一般用導(dǎo)入動物細胞一般用顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。注射進。注射進受精卵受精卵內(nèi)（如果是植物，受體細

9、胞可以是內(nèi)（如果是植物，受體細胞可以是體細胞體細胞，有全能性），再進行，有全能性），再進行早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)和和胚胎移植胚胎移植 如果導(dǎo)入原核生物細胞，則一般先用如果導(dǎo)入原核生物細胞，則一般先用Ca2+（CaCl2）處理，增大細胞壁的通透性，使）處理，增大細胞壁的通透性，使其成為其成為感受態(tài)感受態(tài)細胞。在受體細胞是否細胞。在受體細胞是否導(dǎo)入？（導(dǎo)入？（DNA分子雜交分子雜交）轉(zhuǎn)錄？（）轉(zhuǎn)錄？（分子雜交分子雜交）表達？）表達？（ 抗原抗體雜交）個體生物學(xué)水平檢測：如抗蟲棉抗原抗體雜交）個體生物學(xué)水平檢測：如抗蟲棉接種接種對照試驗對照試驗EcoliDNA連接酶只能連接黏性末端，連接酶只能連接

10、黏性末端，T4DNA連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末端。終止子終止端。終止子終止轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄（是（是DNA序列），終止密碼子是終止翻譯，是序列），終止密碼子是終止翻譯，是mRNA上三個相鄰的上三個相鄰的堿基。啟動子是位于目的基因的首端，它是堿基。啟動子是位于目的基因的首端，它是RNA聚合酶聚合酶識別和結(jié)合的識別和結(jié)合的DNA序列，而起始序列，而起始密碼子是啟動密碼子是啟動翻譯翻譯的的mRNA上三個相鄰的堿基。終止子、啟動子的化學(xué)本質(zhì)是上三個相鄰的堿基。終止子、啟動子的化學(xué)本質(zhì)是DNA，而，而終止密碼子和起始密碼子的本質(zhì)是終止密碼子和起始密碼子的本質(zhì)是RNA。

11、應(yīng)用：將外源生長激素或某些藥用蛋白基因（如血清蛋白基）與乳腺蛋白基因的應(yīng)用：將外源生長激素或某些藥用蛋白基因（如血清蛋白基）與乳腺蛋白基因的啟動子啟動子等重組導(dǎo)入動物的受精卵內(nèi)，使動物的乳房能分泌血清蛋白（乳房等重組導(dǎo)入動物的受精卵內(nèi)，使動物的乳房能分泌血清蛋白（乳房生物反應(yīng)器生物反應(yīng)器）。）?；蛑委熁蛑委煱颜；?qū)氩∪梭w內(nèi)把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)(不用替換異?；颍┍磉_發(fā)揮作用。分為不用替換異?；颍┍磉_發(fā)揮作用。分為體外基體外基因治療因治療和體內(nèi)基因治療。因只有個別細胞獲得正常基因，所以病人基因型不變，和體內(nèi)基因治療。因只有個別細胞獲得正?；?，所以病人基因型不變，“轉(zhuǎn)基轉(zhuǎn)基因因”的

12、性狀也不能遺傳。的性狀也不能遺傳。蛋白質(zhì)工程：以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律與其生物功能的對應(yīng)關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過蛋白質(zhì)工程：以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律與其生物功能的對應(yīng)關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修基因修飾飾或者或者基因合成基因合成，對現(xiàn)有，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)進行改造。步驟：預(yù)期生物功能進行改造。步驟：預(yù)期生物功能設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)空間設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)推測氨基酸序列推測氨基酸序列推出相應(yīng)的的推出相應(yīng)的的脫氧核苷酸脫氧核苷酸序列序列合成基因（合成基因（DNA）轉(zhuǎn)錄、翻轉(zhuǎn)錄、翻譯譯蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)。 蛋白質(zhì)工程不是對蛋白質(zhì)直接進行改造，而是先改造蛋白質(zhì)工程不是對蛋白質(zhì)直接進行改造，而是先改造基因基因。細胞工程細

13、胞工程通過通過細胞細胞水平或者水平或者細胞器細胞器水平上的操作水平上的操作一、植物細胞工程（主要研究一、植物細胞工程（主要研究植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)和植物和植物體細胞雜交體細胞雜交）植物組織培養(yǎng)：原理植物組織培養(yǎng)：原理植物細胞植物細胞全能性全能性。在特定的時間和空間內(nèi)基因。在特定的時間和空間內(nèi)基因選擇性表選擇性表達達，分化分化成各種組織器官。只有成各種組織器官。只有離體離體的細胞才能使其全能性得到表達。是的細胞才能使其全能性得到表達。是無性無性繁繁殖，相當(dāng)于植物克隆。過程：離體的植物器官、組織、細胞，在殖，相當(dāng)于植物克隆。過程：離體的植物器官、組織、細胞，在無菌無菌和和人工控制人工控制的條件

14、下，離體植物器官、組織、細胞的條件下，離體植物器官、組織、細胞（脫分化）成為（脫分化）成為愈傷組織愈傷組織（再分化）（再分化）成為成為胚狀體胚狀體、叢芽、叢芽完整植株完整植株 條件：條件：離體離體，需要提供，需要提供無菌無菌條件，離體器官組織條件，離體器官組織要經(jīng)過要經(jīng)過消毒消毒，用具、培養(yǎng)基要，用具、培養(yǎng)基要滅菌滅菌，需要無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，植物激素（主要是，需要無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，植物激素（主要是細胞分裂素和生長素），在細胞分裂素和生長素），在再分化再分化需要光照，形成葉綠素，進行光合作用。需要光照，形成葉綠素，進行光合作用。植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用：植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用：1.微型繁殖快速繁殖大量的種

15、苗，無性狀分離，能保持優(yōu)微型繁殖快速繁殖大量的種苗，無性狀分離，能保持優(yōu)良品種的良品種的優(yōu)良特性優(yōu)良特性。 2.作物脫毒（培養(yǎng)無病毒植物）：（如莖尖）進行組織培養(yǎng)。作物脫毒（培養(yǎng)無病毒植物）：（如莖尖）進行組織培養(yǎng)。 3.生產(chǎn)人工種子：用組織培養(yǎng)得到胚狀體、不定芽等，包上人工薄膜（人工種皮生產(chǎn)人工種子：用組織培養(yǎng)得到胚狀體、不定芽等，包上人工薄膜（人工種皮要透水透氣）成為人工種子。要透水透氣）成為人工種子。4.單倍體育種：離體單倍體育種：離體花藥花藥單倍體植株單倍體植株用用秋水仙秋水仙素素使染色體數(shù)目加倍成為使染色體數(shù)目加倍成為純合純合植株（用了植株（用了“植物細胞全能性植物細胞全能性”和和“

16、染色體數(shù)目變?nèi)旧w數(shù)目變異異”原理?；ㄋ庪x體培養(yǎng)其實就植物組織培養(yǎng)技術(shù)。單倍體育種最后得到的不是原理。花藥離體培養(yǎng)其實就植物組織培養(yǎng)技術(shù)。單倍體育種最后得到的不是單倍體，而是正常純合子植株單倍體，而是正常純合子植株 生產(chǎn)細胞產(chǎn)物：利用愈傷組織細胞生產(chǎn)人參皂甙、生產(chǎn)細胞產(chǎn)物：利用愈傷組織細胞生產(chǎn)人參皂甙、紫草素、紫杉醇等物質(zhì)。紫草素、紫杉醇等物質(zhì)。（二）植物體細胞雜交：如白菜（二）植物體細胞雜交：如白菜-甘藍。甘藍。1.用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，原生質(zhì)體原生質(zhì)體（圓球形）（圓球形）（利用細胞膜具有一定的（利用細胞膜具有一定的流動性流動性）人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合）人

17、工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合物理法：物理法：離心、離心、振動、電激振動、電激；化學(xué)法：用；化學(xué)法：用PEG（聚乙二醇聚乙二醇）作為誘導(dǎo)劑）作為誘導(dǎo)劑雜種細胞雜種細胞用用植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技技術(shù)培育成新植物體。植物體細胞雜交成功的標(biāo)志是雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁（高爾基術(shù)培育成新植物體。植物體細胞雜交成功的標(biāo)志是雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁（高爾基體）。體）。 可能有可能有A、B、AA、BB、AB（后三種屬于融合后的細胞）（后三種屬于融合后的細胞） 體細胞雜交后的新體細胞雜交后的新品種是可育的。品種是可育的。 優(yōu)點、意義：優(yōu)點、意義：1.可以克服遠緣雜交不親和的障礙可以克服遠緣雜交不親和的障礙 2.可以培育出

18、兼有不同可以培育出兼有不同物種品質(zhì)的優(yōu)良新品質(zhì)。物種品質(zhì)的優(yōu)良新品質(zhì)。二、動物細胞工程（二、動物細胞工程（動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)、動物細胞、動物細胞核移植核移植、動物細胞融合動物細胞融合、生產(chǎn)單、生產(chǎn)單克隆抗體克隆抗體，最基礎(chǔ)的技術(shù)是最基礎(chǔ)的技術(shù)是動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)）（一）動物細胞培養(yǎng)過程：離體動物（一）動物細胞培養(yǎng)過程：離體動物胚胎胚胎組織、組織、幼齡幼齡動物的組織剪碎動物的組織剪碎用用胰蛋白酶胰蛋白酶或膠或膠原蛋白酶分散成單個細胞原蛋白酶分散成單個細胞投進培養(yǎng)液制成細胞懸液投進培養(yǎng)液制成細胞懸液原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)（第一次培養(yǎng)叫原代培（第一次培養(yǎng)叫原代培養(yǎng)）養(yǎng)）傳代培養(yǎng)（傳代培養(yǎng)（2-

19、50代，代，10代以后的叫代以后的叫細胞株細胞株）癌變，無限增殖（癌變，無限增殖（細胞系細胞系），它的），它的細胞核型（核基因）發(fā)生改變。細胞核型（核基因）發(fā)生改變。 有有貼壁生長貼壁生長現(xiàn)象，和現(xiàn)象，和接觸抑制接觸抑制。用。用胰蛋白酶胰蛋白酶處理，然處理，然后后分瓶分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。條件：繼續(xù)培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。條件：1.無菌、無毒，培養(yǎng)液和用具要滅菌，培養(yǎng)無菌、無毒，培養(yǎng)液和用具要滅菌，培養(yǎng)液添加液添加抗生素抗生素，定時更換培養(yǎng)液，定時更換培養(yǎng)液 2.營養(yǎng)：和體內(nèi)內(nèi)環(huán)境成分類似，合成培養(yǎng)基里一定要營養(yǎng)：和體內(nèi)內(nèi)環(huán)境成分類似，合成培養(yǎng)基里一定要添加添加動物血清或血漿動物血清或血

20、漿。 3.溫度和溫度和pH，36.5正負正負0.5，pH7.2-7.4（人內(nèi)環(huán)境（人內(nèi)環(huán)境7.35-7.45） 4.氣體環(huán)境氣體環(huán)境O2和和CO2，給，給95%空氣和空氣和5%CO2，CO2為了維持培養(yǎng)液的正常為了維持培養(yǎng)液的正常pH值。值。動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物（克隆原理：動物細胞核全能性）動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物（克隆原理：動物細胞核全能性）動物動物體細胞核體細胞核去核的卵母細胞（減數(shù)第二次分裂中期，去核的卵母細胞（減數(shù)第二次分裂中期，M中期）中，得到重組細胞，中期）中，得到重組細胞，由重組細胞發(fā)育成一個新的胚胎，由新的胚胎發(fā)育成動物（要進行胚胎移植）。卵母細由重組細胞發(fā)育成

21、一個新的胚胎，由新的胚胎發(fā)育成動物（要進行胚胎移植）。卵母細胞質(zhì)有全能性得以表達的胞質(zhì)有全能性得以表達的物質(zhì)和條件物質(zhì)和條件。且體積大，易操作?？寺游锏倪z傳特性多數(shù)與。且體積大，易操作?？寺游锏倪z傳特性多數(shù)與細胞核的細胞核的供體動物相同（如性別），但卵母細胞的供體動物相同（如性別），但卵母細胞的細胞質(zhì)基因細胞質(zhì)基因也有影響。核基因和細胞也有影響。核基因和細胞質(zhì)基因共同控制。應(yīng)用：保護瀕危動物；克隆組織和器官進行器官移植，避免質(zhì)基因共同控制。應(yīng)用：保護瀕危動物；克隆組織和器官進行器官移植，避免免疫排斥免疫排斥反應(yīng)；反應(yīng)；轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因的的克隆克隆動物的細胞、組織、器官可以作為異種移植的供體。動

22、物的細胞、組織、器官可以作為異種移植的供體。 動物核移植分為動物核移植分為胚胎細胞核移植胚胎細胞核移植和和體細胞核移植體細胞核移植。胚胎細胞分化程度低，容易恢復(fù)全能性。胚胎細胞分化程度低，容易恢復(fù)全能性。 （二）動物細胞融合與單克隆抗體（二）動物細胞融合與單克隆抗體動物細胞融合也叫動物細胞雜交：結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是細胞膜具有動物細胞融合也叫動物細胞雜交：結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是細胞膜具有一定的流動性一定的流動性。誘導(dǎo)融合的方。誘導(dǎo)融合的方法與植物類似，另外，還可以用法與植物類似，另外，還可以用滅活的病毒滅活的病毒（如滅活的仙臺病毒）做誘導(dǎo)劑。（如滅活的仙臺病毒）做誘導(dǎo)劑。單克隆抗體：特異性強、純度高、靈敏度高的產(chǎn)量高

23、特點和優(yōu)點。單克隆抗體：特異性強、純度高、靈敏度高的產(chǎn)量高特點和優(yōu)點。單克隆抗體的制備：分泌特異抗體的單克隆抗體的制備：分泌特異抗體的效應(yīng)效應(yīng)B細胞細胞和骨髓瘤細胞融合，得到雜交瘤細胞，和骨髓瘤細胞融合，得到雜交瘤細胞，雜交瘤細胞既能分泌單一的特異性抗體，又能無限增殖（特點、優(yōu)點）。兩次的篩選：雜交瘤細胞既能分泌單一的特異性抗體，又能無限增殖（特點、優(yōu)點）。兩次的篩選：第一次是用第一次是用選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基將融合的將融合的雜交瘤雜交瘤細胞選擇出來（就是細胞選擇出來（就是A、B、AA、BB細胞死細胞死亡，而亡，而AB型雜交瘤細胞存活）；第二次是將上述雜交瘤細胞進行克隆培養(yǎng)，然后進行型雜交瘤

24、細胞存活）；第二次是將上述雜交瘤細胞進行克隆培養(yǎng)，然后進行抗體抗體檢測，篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，得到雜交瘤細胞后，生產(chǎn)單克隆抗體檢測，篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，得到雜交瘤細胞后，生產(chǎn)單克隆抗體的途徑有的途徑有2條，一：在條，一：在體外體外細胞培養(yǎng)，從細胞培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；二：將雜交瘤細胞培養(yǎng)，從細胞培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；二：將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從小鼠腹水提取單克隆抗體。細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從小鼠腹水提取單克隆抗體。單克隆抗體用途的用作體外單克隆抗體用途的用作體外診斷試劑診斷試劑，單克隆抗體與藥物結(jié)合后，成為，單克隆抗體與藥物結(jié)合后，成為“生物導(dǎo)彈生

25、物導(dǎo)彈”，借助單克隆抗體的借助單克隆抗體的導(dǎo)向?qū)蜃饔脺?zhǔn)確導(dǎo)向作用準(zhǔn)確導(dǎo)向 細胞全能性比較：細胞全能性比較： 受精卵（全能）受精卵（全能）胚胎干細胞（多能）胚胎干細胞（多能）造血干細胞、（專能）造血干細胞、（專能）卵卵細胞細胞神經(jīng)細胞神經(jīng)細胞 （卵細胞、精子的分化程度較高）（卵細胞、精子的分化程度較高）胚胎工程胚胎工程定義：對動物定義：對動物早期胚胎早期胚胎或或配子配子進行處理，獲得胚胎，移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)進行處理，獲得胚胎，移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代，它的許多技術(shù)都在體外完成，如體外受精、早期胚胎的培養(yǎng)、胚胎分割后代，它的許多技術(shù)都在體外完成，如體外受精、早期胚胎的培養(yǎng)、胚胎分割等。等。

26、一、精子發(fā)生：睪丸的曲細精管。在一、精子發(fā)生：睪丸的曲細精管。在初情期初情期（人是青春期，卵細胞在胎兒期）（人是青春期，卵細胞在胎兒期）開始。第一階段精原細胞開始。第一階段精原細胞有絲分裂有絲分裂，產(chǎn)生多個精原細胞，染色體復(fù)制后成為初，產(chǎn)生多個精原細胞，染色體復(fù)制后成為初級精母細胞；第二階段：初級精母細胞級精母細胞；第二階段：初級精母細胞減數(shù)分裂減數(shù)分裂產(chǎn)生產(chǎn)生精子細胞精子細胞 ；第三階段：尖；第三階段：尖子細胞子細胞變形變形成精子，細胞核變成精子頭部，成精子，細胞核變成精子頭部，高爾基體高爾基體變成頂體；變成頂體；中心體中心體變成尾；變成尾；線粒體在尾部變成線粒體鞘；細胞的其他物質(zhì)濃縮成線粒

27、體在尾部變成線粒體鞘；細胞的其他物質(zhì)濃縮成原生質(zhì)滴原生質(zhì)滴。二、卵細胞發(fā)生：在胚胎產(chǎn)生在二、卵細胞發(fā)生：在胚胎產(chǎn)生在胎兒期胎兒期性別分化后，在雌性胎兒卵巢內(nèi)的卵原性別分化后，在雌性胎兒卵巢內(nèi)的卵原細胞細胞有絲分裂有絲分裂產(chǎn)生多個卵原細胞，并經(jīng)過染色體復(fù)制成為初級卵母細胞，被卵產(chǎn)生多個卵原細胞，并經(jīng)過染色體復(fù)制成為初級卵母細胞，被卵巢的卵泡包圍著。減數(shù)第一次分裂在巢的卵泡包圍著。減數(shù)第一次分裂在排卵排卵（即卵泡排出初級（即卵泡排出初級/或次級卵母細胞）或次級卵母細胞）前后完成，進入輸卵管。減數(shù)第二次分裂是在前后完成，進入輸卵管。減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合精子和卵子結(jié)合的過程中完成，的過程中

28、完成，產(chǎn)生一個成熟的卵子和第二極體。當(dāng)在產(chǎn)生一個成熟的卵子和第二極體。當(dāng)在卵黃膜和透明帶卵黃膜和透明帶之間看到兩個極體時，之間看到兩個極體時，標(biāo)志完成了受精作用。標(biāo)志完成了受精作用。形成精子的減數(shù)分裂是形成精子的減數(shù)分裂是連續(xù)連續(xù)的，精子要的，精子要變形變形。卵細胞減。卵細胞減1在排卵前后，減在排卵前后，減2在受在受精過程中，不連續(xù)。精過程中，不連續(xù)。排卵排卵是指初級是指初級/或次級或次級卵母細胞卵母細胞從從卵泡卵泡中排出（不是卵泡從中排出（不是卵泡從卵巢排出，進入輸卵管。卵巢排出，進入輸卵管。三、受精作用：精子在生殖道三、受精作用：精子在生殖道獲能獲能，在，在輸卵管輸卵管受精。受精階段：精子

29、穿越受精。受精階段：精子穿越放射放射冠冠和和透明帶透明帶，進入卵黃膜，進入卵黃膜形成雄原核與雌原核形成雄原核與雌原核兩個原核結(jié)合成合子。兩個原核結(jié)合成合子。1.頂體頂體反應(yīng)，穿越放射冠反應(yīng)，穿越放射冠穿越透明帶，接觸卵黃膜（頂體酶溶出一條通道），發(fā)生穿越透明帶，接觸卵黃膜（頂體酶溶出一條通道），發(fā)生透明帶反應(yīng)透明帶反應(yīng)，接觸卵細胞膜后，產(chǎn)生，接觸卵細胞膜后，產(chǎn)生卵細胞膜反應(yīng)（卵細胞膜反應(yīng)（第二道屏障第二道屏障）完成受精。完成受精。 個體發(fā)育個體發(fā)育從受精卵開始，分為胚胎發(fā)育（在母體內(nèi)的發(fā)育）和胎后發(fā)育。從受精卵開始，分為胚胎發(fā)育（在母體內(nèi)的發(fā)育）和胎后發(fā)育。四、胚胎發(fā)育：受精卵四、胚胎發(fā)育：受

30、精卵卵裂卵裂桑椹胚桑椹胚囊胚（開始出現(xiàn)細胞分化，個體較大囊胚（開始出現(xiàn)細胞分化，個體較大的細胞叫的細胞叫內(nèi)細胞團內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成各種組織，外層的叫，將來發(fā)育成各種組織，外層的叫滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層細胞，發(fā)育成細胞，發(fā)育成胎膜胎膜和胎盤和胎盤）原腸胚（出現(xiàn)原腸腔，出現(xiàn)內(nèi)、中、外三個胚層原腸胚（出現(xiàn)原腸腔，出現(xiàn)內(nèi)、中、外三個胚層胎兒胎兒 五、試管動物（是五、試管動物（是有性生殖有性生殖范疇）主要是范疇）主要是體外受精體外受精和和早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)。1.體外受精：體外受精：1.精子獲能，卵細胞要發(fā)育成熟（減精子獲能，卵細胞要發(fā)育成熟（減2中期）才能完成受精。中期）才能完成受精。2.胚胎早期培養(yǎng)：將

31、受精卵移入胚胎早期培養(yǎng)：將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)。當(dāng)胚胎發(fā)育到中培養(yǎng)。當(dāng)胚胎發(fā)育到桑椹胚桑椹胚或或囊胚囊胚階段，再做階段，再做胚胎移植胚胎移植或者冷凍保存?；蛘呃鋬霰４?。3.胚胎移植：移植到同種的、胚胎移植：移植到同種的、生理狀態(tài)生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。是胚相同的其他雌性動物體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。是胚胎工程的最后一道工序。為充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，供體要做胎工程的最后一道工序。為充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，供體要做超數(shù)超數(shù)排卵排卵處理，供體和受體要做處理，供體和受體要做同期發(fā)情同期發(fā)情處理。胚胎移植成功的原因是；處理。胚胎移植成功的原因是；1.哺乳動物哺乳動物同期發(fā)情后，供、受體生殖器官的同期發(fā)情后，供、受體生殖器官的生理變化生理變化是相同的，為供體胚胎的移入