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文檔簡(jiǎn)介
1、 基因工程是指按照人們的意愿,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),基因工程是指按照人們的意愿,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過(guò)并通過(guò)體外體外DNADNA重組重組和和轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNADNA分子水平分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)。專(zhuān)題一專(zhuān)題一 基因工程基因工程一、一、DNADNA重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具(一)限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”1.1.分布:分布
2、:2.2.特點(diǎn):特點(diǎn): 特異性特異性,即能夠識(shí)別雙,即能夠識(shí)別雙鏈鏈DNADNA分子的某種分子的某種特定核苷特定核苷酸序列酸序列,并且切割每一條鏈,并且切割每一條鏈中中特定部位特定部位的兩個(gè)核苷酸之的兩個(gè)核苷酸之間的間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵,使之?dāng)嚅_(kāi),使之?dāng)嚅_(kāi)。主要從原核生物中分離純化出來(lái)主要從原核生物中分離純化出來(lái)G A AG A A T T CT T CC T TC T T A A GA A GG GC T T C T T A AA AG GA AA A T T C T T CC C CC C C G G GG G GG G GG G G C C CC C CC C CC C CG G G
3、G G GG G GG G GC C CC C C 中軸線中軸線 EcoEcoRR(在(在G G與與A A之間切割)之間切割)SmaSma(在(在G G與與C C之間切割)之間切割)粘性末端粘性末端平末端平末端切割切割DNADNA分子產(chǎn)生的兩種不同的末端(箭頭表示酶的切割位點(diǎn))分子產(chǎn)生的兩種不同的末端(箭頭表示酶的切割位點(diǎn))3.3.結(jié)果:結(jié)果:在識(shí)別序列中軸線兩側(cè)切割,產(chǎn)生粘性末端;在識(shí)別序列中軸線兩側(cè)切割,產(chǎn)生粘性末端;在識(shí)別序列中軸線處切割,產(chǎn)生平末端。在識(shí)別序列中軸線處切割,產(chǎn)生平末端。GC T T A AA A T T CGGC T T A AA A T T CG(二)DNA連接酶“分
4、子縫合針”GC T T A AA A T T CG(二)(二)DNA連接酶連接酶“分子縫合針?lè)肿涌p合針”(二)DNA連接酶“分子縫合針”2.2.連接酶的部位:連接酶的部位:磷酸二酯鍵,不是氫鍵磷酸二酯鍵,不是氫鍵GC T T A AA A T T CG磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵1.連接酶的作用:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為一個(gè)完整的使之成為一個(gè)完整的DNADNA分子分子3.3.連接酶的類(lèi)型連接酶的類(lèi)型(按來(lái)源分類(lèi))(按來(lái)源分類(lèi))(1)E.coli DNA連接酶:連接酶:(來(lái)源于大腸桿菌來(lái)源于大腸桿菌)只能連接雙鏈只能連接雙鏈DNA片
5、段互補(bǔ)片段互補(bǔ)的粘性末端的粘性末端(2) T4 DNA連接酶:連接酶:(來(lái)源于(來(lái)源于T4噬菌體)噬菌體)既可以連接雙鏈既可以連接雙鏈DNA片段片段 互補(bǔ)的互補(bǔ)的粘性末端,又可以粘性末端,又可以“縫合縫合”雙鏈雙鏈DNA片段的平末端片段的平末端(三)基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體(三)基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體“分子運(yùn)輸車(chē)分子運(yùn)輸車(chē)”1.1.作用:作用:2.2.條件:條件: 能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存;能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存; 具有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)具有多個(gè)限制酶切位點(diǎn), ,便于目的基因插入;便于目的基因插入; 具有標(biāo)記基因,便于篩選;具有標(biāo)記基因,便于篩選; 必需是安全的,對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害。必需
6、是安全的,對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害。 將外源基因送入受體細(xì)胞將外源基因送入受體細(xì)胞3.3.種類(lèi):種類(lèi): 質(zhì)粒、質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒質(zhì)粒質(zhì)粒 細(xì)菌擬核細(xì)菌擬核DNA之外能自主之外能自主復(fù)制的小型雙鏈環(huán)狀復(fù)制的小型雙鏈環(huán)狀DNA分子;分子; DNA分子上具有多個(gè)限制分子上具有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);酶切割位點(diǎn); 只能在宿主細(xì)胞中進(jìn)行自只能在宿主細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制;我復(fù)制; DNA分子上具有特殊的標(biāo)分子上具有特殊的標(biāo)記基因;記基因; 對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)影響。對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)影響。二、基因工程的基本操作程序二、基因工程的基本操作程序獲取目的基因獲取目的基因構(gòu)建表達(dá)載體構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入受體
7、細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞目的基因檢測(cè)與鑒定目的基因檢測(cè)與鑒定第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步(一)目的基因的獲?。ㄒ唬┠康幕虻墨@取1.1.從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因(1 1)基因組文庫(kù))基因組文庫(kù) 將含有某種生物不同基因的許多片段,導(dǎo)入受體菌的將含有某種生物不同基因的許多片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因,群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因,稱(chēng)為基因文庫(kù)。稱(chēng)為基因文庫(kù)。 受體菌包含了某種生物所有的基因,該受體菌群受體菌包含了某種生物所有的基因,該受體菌群體稱(chēng)為這種生物的基因組文庫(kù)。體稱(chēng)為這種生物的基因組文庫(kù)。(2
8、 2)部分基因文庫(kù))部分基因文庫(kù) 受體菌包含了一種生物部分基因,該受體菌群體稱(chēng)受體菌包含了一種生物部分基因,該受體菌群體稱(chēng)為這種生物的部分基因文庫(kù),如為這種生物的部分基因文庫(kù),如cDNA文庫(kù)。文庫(kù)。(3 3)基因文庫(kù)的構(gòu)建)基因文庫(kù)的構(gòu)建l基因組文庫(kù)的構(gòu)建基因組文庫(kù)的構(gòu)建提取某生物提取某生物全部全部DNA用適當(dāng)用適當(dāng)限制酶切割限制酶切割許許 多多DNA片段片段與載體連接與載體連接導(dǎo)入受體菌群導(dǎo)入受體菌群該生物基該生物基因組文庫(kù)因組文庫(kù)(每個(gè)受體菌含有一段不同的(每個(gè)受體菌含有一段不同的DNA片段)片段)lcDNA文庫(kù)的構(gòu)建文庫(kù)的構(gòu)建mRNA反轉(zhuǎn)錄形成反轉(zhuǎn)錄形成mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶雜交雙鏈雜
9、交雙鏈核酸酶核酸酶H單鏈單鏈DNADNA聚合酶聚合酶雙鏈雙鏈DNA與載體連接與載體連接導(dǎo)入受體菌群導(dǎo)入受體菌群該生物該生物cDNA文庫(kù)文庫(kù)2.2.利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1) (1) 原理原理PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction),它它是利用是利用DNA 雙鏈復(fù)制的原理,將基因的核苷酸序列不斷雙鏈復(fù)制的原理,將基因的核苷酸序列不斷的加以復(fù)制,使其數(shù)量呈的加以復(fù)制,使其數(shù)量呈指數(shù)方式指數(shù)方式增加。因?yàn)檎麄€(gè)過(guò)程增加。因?yàn)檎麄€(gè)過(guò)程是在是在體外體外進(jìn)行,所以又叫做進(jìn)行,所以又叫做體外體外DNA擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)。(2)
10、 (2) 過(guò)程過(guò)程高溫變性高溫變性(9095)低溫退火低溫退火(5560)中溫延伸中溫延伸(7075)p雙鏈雙鏈DNA是在高溫條件下解鏈為單鏈?zhǔn)窃诟邷貤l件下解鏈為單鏈DNA的,因此整個(gè)的,因此整個(gè) 過(guò)程不需要解旋酶。過(guò)程不需要解旋酶。 多次多次重復(fù)重復(fù)(3)(3)特點(diǎn):特點(diǎn):指數(shù)形式擴(kuò)增指數(shù)形式擴(kuò)增p雙鏈雙鏈DNA是在高溫條件下解鏈為單鏈?zhǔn)窃诟邷貤l件下解鏈為單鏈DNA的,因此整個(gè)的,因此整個(gè) 過(guò)程不需要解旋酶。過(guò)程不需要解旋酶。 推推測(cè)測(cè)推推測(cè)測(cè)合合成成3.3.通過(guò)通過(guò)DNADNA合成儀直接合成目的基因合成儀直接合成目的基因DNA合成儀合成儀蛋白質(zhì)的氨蛋白質(zhì)的氨基酸順序基酸順序mRNA核苷酸序
11、列核苷酸序列基因基因DNA的的核苷酸序列核苷酸序列目的目的基因基因 當(dāng)基因比較小、蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測(cè)得或核當(dāng)基因比較小、蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測(cè)得或核苷酸序列已知時(shí),可采用此種方法。苷酸序列已知時(shí),可采用此種方法。(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 用限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口,將目用限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口,將目的基因插入切口處,讓目的基因的黏性末端與切的基因插入切口處,讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)后,在連接酶的作用下口上的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)后,在連接酶的作用下連接形成連接形成重組重組DNA分子分子,即,即基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體。質(zhì)粒質(zhì)粒目的基
12、因目的基因限制酶限制酶DNA連接酶連接酶重組重組DNA(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建1.1.構(gòu)建目的構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在穩(wěn)定存在,并且,并且可遺傳可遺傳給下給下一代,同時(shí),使目的基因能夠一代,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)表達(dá)和和發(fā)揮作用發(fā)揮作用。2.2.構(gòu)建零件及其作用構(gòu)建零件及其作用(1 1)目的基因)目的基因(2 2)啟動(dòng)子)啟動(dòng)子 RNA聚合酶識(shí)聚合酶識(shí)別和結(jié)合的一段特殊結(jié)構(gòu)的別和結(jié)合的一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段片段,位于基因的首端,位于基因的首端,RNA聚合酶與之結(jié)合才能驅(qū)動(dòng)聚合酶與之結(jié)合才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,進(jìn)而獲
13、得,進(jìn)而獲得需要的蛋白質(zhì)。需要的蛋白質(zhì)。(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(3)終止子)終止子 一段特殊結(jié)構(gòu)一段特殊結(jié)構(gòu)的的DNA片段片段,位于基因的尾,位于基因的尾端,作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要端,作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止。的地方停止。(4)標(biāo)記基因)標(biāo)記基因 鑒別受體細(xì)胞中鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建(二)基因表達(dá)載體的構(gòu)建2.2.構(gòu)建零件及其作用構(gòu)建零件及其作用復(fù)制原點(diǎn):真核生物不需要復(fù)制原點(diǎn):真核生物不需要(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)
14、胞 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞并且在受體細(xì)胞內(nèi)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)維持穩(wěn)定和表達(dá)定和表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化。 基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、枯草桿菌、基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。土壤農(nóng)桿菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。 導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法主要是借鑒導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞胞的途徑,且因受體細(xì)胞的不同而不同。的途徑,且因受體細(xì)胞的不同而不同。(1 1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法1.1.導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入植物細(xì)胞(2 2)其他方法)其他方法 基因槍法基因槍法 花粉管通道法(我國(guó)科學(xué)家首創(chuàng))花粉管通
15、道法(我國(guó)科學(xué)家首創(chuàng))移移 植植顯微顯微注射注射發(fā)發(fā)育育2.2.導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞 ( (顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)) )含目的基因含目的基因的表達(dá)載體的表達(dá)載體動(dòng)動(dòng) 物物 的的受受 精精 卵卵含目的基因含目的基因的受精卵的受精卵早早 期期胚胚 胎胎雌性動(dòng)物輸雌性動(dòng)物輸卵管或子宮卵管或子宮轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因動(dòng)動(dòng) 物物分裂分裂 分化分化3.3.導(dǎo)入微生物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞(2)(2)優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、操繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉。作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉。(3)(3)常用受體細(xì)胞常用受體細(xì)胞 大腸桿菌(大腸桿菌(E.coliE.coli)(1)(
16、1)過(guò)程過(guò)程 制備感受態(tài)細(xì)胞:用制備感受態(tài)細(xì)胞:用Ca2+(CaCl2)處理細(xì)菌,使細(xì)菌易于接)處理細(xì)菌,使細(xì)菌易于接 受外源受外源DNA分子。分子。 重組重組DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合孵育,完成轉(zhuǎn)化。分子與感受態(tài)細(xì)胞混合孵育,完成轉(zhuǎn)化。(Ca(Ca2+2+ 處理法處理法) )(四)目的基因的檢測(cè)與鑒定(四)目的基因的檢測(cè)與鑒定 目的基因目的基因是否真正插入受體細(xì)胞的是否真正插入受體細(xì)胞的DNA中,中,是否能是否能夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá)夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá),只有通過(guò)檢測(cè)、,只有通過(guò)檢測(cè)、鑒定才能得知。鑒定才能得知。 常用的檢測(cè)手段主要從常用的檢測(cè)手段主要從分子水平分子水平
17、和和個(gè)體水平個(gè)體水平進(jìn)行。進(jìn)行。適當(dāng)限制適當(dāng)限制酶切割酶切割用同位素標(biāo)記的用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交目的基因片段雜交1.1.分子水平分子水平(1)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因 提取受體生提取受體生物全部物全部DNA許多許多DNA片段片段顯顯 出出雜交帶雜交帶(表明目的基因已插入)(表明目的基因已插入)(分子雜交技術(shù))(分子雜交技術(shù))(2) 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA 提取受體生提取受體生物的物的mRNA用同位素標(biāo)記的用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交目的基因片段雜交顯顯 出出雜交帶雜交帶(表明目的基因
18、已轉(zhuǎn)錄出了(表明目的基因已轉(zhuǎn)錄出了mRNA) 檢測(cè)檢測(cè)DNA利用的是利用的是DNA與與DNA雜交,檢測(cè)雜交,檢測(cè)mRNA利利用的是用的是DNA與與mRNA雜交。雜交。1.1.分子水平分子水平 (分子雜交技術(shù))(分子雜交技術(shù))(3)檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì))檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) (抗原(抗原抗體雜交技術(shù))抗體雜交技術(shù))提取受體生提取受體生物的蛋白質(zhì)物的蛋白質(zhì)與相應(yīng)抗體雜交與相應(yīng)抗體雜交顯顯 出出雜交帶雜交帶(表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品)(表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品)1.1.分子水平分子水平 (分子雜交技術(shù))(分子雜交技術(shù))2.2.個(gè)體水平個(gè)體水平例:例:用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng),如蟲(chóng)吃后
19、不出現(xiàn)中毒癥狀,用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng),如蟲(chóng)吃后不出現(xiàn)中毒癥狀,說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲(chóng)吃說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲(chóng)吃后中毒死亡,則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。后中毒死亡,則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。1.用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì)。下列敘述用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì)。下列敘述 不正確的是不正確的是 ( ) A.常用相同的限制性?xún)?nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒常用相同的限制性?xún)?nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒 B.導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá) C.DNA連接酶和連接酶和 RNA聚合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需
20、的工具酶聚合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶 D.可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)??捎煤股氐呐囵B(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒 C2.下列關(guān)于基因工程中限制性?xún)?nèi)切酶的描述,錯(cuò)誤的是(下列關(guān)于基因工程中限制性?xún)?nèi)切酶的描述,錯(cuò)誤的是( )A.一種限制性?xún)?nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列一種限制性?xún)?nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列B.限制性?xún)?nèi)切酶的活性受溫度的影響限制性?xún)?nèi)切酶的活性受溫度的影響C.限制性?xún)?nèi)切酶能識(shí)別和切割限制性?xún)?nèi)切酶能識(shí)別和切割RNAD.限制性?xún)?nèi)切酶可從原核生物中提取限制性?xún)?nèi)切酶可從原核生物中提取C含重組質(zhì)粒含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌土壤農(nóng)桿菌抗蟲(chóng)基因抗蟲(chóng)基
21、因含含kanr質(zhì)質(zhì)粒粒重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒A構(gòu)建構(gòu)建土壤農(nóng)桿菌土壤農(nóng)桿菌導(dǎo)入導(dǎo)入B培養(yǎng)選擇培養(yǎng)選擇侵侵 染染轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株抗蟲(chóng)植株離體棉花離體棉花葉片組織葉片組織愈傷組織愈傷組織C誘導(dǎo)選擇誘導(dǎo)選擇再生植株再生植株分化分化D檢測(cè)檢測(cè)3.3.在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kankanr r)常作為標(biāo)記)常作為標(biāo)記 基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)?;?,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。 下圖為獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程。下圖為獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程。 請(qǐng)據(jù)圖回答:請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)A過(guò)程需要的酶
22、有過(guò)程需要的酶有_。(2)B過(guò)程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個(gè)條件是過(guò)程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個(gè)條件是 _。(3)C過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加 入入_。(4)如果利用)如果利用DNA分子雜交原理對(duì)再生植株進(jìn)行檢測(cè),分子雜交原理對(duì)再生植株進(jìn)行檢測(cè),D過(guò)程應(yīng)該用過(guò)程應(yīng)該用 _ _ _作為探針。作為探針。限制性?xún)?nèi)切酶和限制性?xún)?nèi)切酶和DNA連接酶連接酶具有標(biāo)記基因;能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因;能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存卡那霉素卡那霉素放射性同位素(或熒光分子)標(biāo)記后的抗蟲(chóng)基因
23、放射性同位素(或熒光分子)標(biāo)記后的抗蟲(chóng)基因(5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德?tīng)枺┛茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德?tīng)?遺傳規(guī)律。遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與將轉(zhuǎn)基因植株與_雜交,其后代中抗卡那霉素雜交,其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1:1。若該轉(zhuǎn)基因植株自交,則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型若該轉(zhuǎn)基因植株自交,則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型 的數(shù)量比為的數(shù)量比為_(kāi)。若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng),則獲得若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng),則獲得 的再生植株群體中抗
24、卡那霉素型植株占的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占_%。含重組質(zhì)粒含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌土壤農(nóng)桿菌抗蟲(chóng)基因抗蟲(chóng)基因含含kanr質(zhì)粒質(zhì)粒重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒A構(gòu)建構(gòu)建土壤農(nóng)桿菌土壤農(nóng)桿菌導(dǎo)入導(dǎo)入B培養(yǎng)選擇培養(yǎng)選擇侵侵 染染轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植株抗蟲(chóng)植株離體棉花離體棉花葉片組織葉片組織愈傷組織愈傷組織C誘導(dǎo)選擇誘導(dǎo)選擇再生植株再生植株分化分化D檢測(cè)檢測(cè)非轉(zhuǎn)基因植株非轉(zhuǎn)基因植株3:1100三、基因工程的應(yīng)用三、基因工程的應(yīng)用(一)植物基因工程(一)植物基因工程u抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物u抗病轉(zhuǎn)基因植物抗病轉(zhuǎn)基因植物u抗逆轉(zhuǎn)基因植物抗逆轉(zhuǎn)基因植物u改良植物品質(zhì)改良植物品質(zhì)如如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉(水稻)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)
25、棉(水稻) 減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染抗病毒(細(xì)菌、真菌)轉(zhuǎn)基因植物,抗病毒(細(xì)菌、真菌)轉(zhuǎn)基因植物,如如抗病毒轉(zhuǎn)基因小麥、抗病毒轉(zhuǎn)基因抗病毒轉(zhuǎn)基因小麥、抗病毒轉(zhuǎn)基因煙草等煙草等如如轉(zhuǎn)魚(yú)抗凍蛋白基因番茄、轉(zhuǎn)魚(yú)抗凍蛋白基因番茄、轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米如如富含賴(lài)氨酸的轉(zhuǎn)基因玉米、富含賴(lài)氨酸的轉(zhuǎn)基因玉米、轉(zhuǎn)番茄基因的延熟番茄轉(zhuǎn)番茄基因的延熟番茄(二)動(dòng)物基因工程(二)動(dòng)物基因工程三、基因工程的應(yīng)用三、基因工程的應(yīng)用u提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度u改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)u生產(chǎn)藥物生產(chǎn)藥物u做器官移植供體做器官移植供體如如轉(zhuǎn)生長(zhǎng)激素基因鯉魚(yú)轉(zhuǎn)生長(zhǎng)激素基因鯉魚(yú)如如
26、低乳糖轉(zhuǎn)基因牛(轉(zhuǎn)腸乳糖酶基因)低乳糖轉(zhuǎn)基因牛(轉(zhuǎn)腸乳糖酶基因)如如乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器利用基因工程利用基因工程改造供體器官改造供體器官,抑制或去抑制或去除除供體器官供體器官抗原決定基因的表達(dá)抗原決定基因的表達(dá),獲得,獲得沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官(三)基因工程藥物三、基因工程的應(yīng)用利用基因工程技術(shù),通過(guò)微生物生產(chǎn)蛋白質(zhì)類(lèi)藥品。u生長(zhǎng)激素u干擾素u胰島素(四)基因治療三、基因工程的應(yīng)用 基因治療就是將正?;?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療疾病的目的。基因治療是治療遺傳病最有效的手段。u體外基因治療 從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞
27、,進(jìn)行培養(yǎng),在體外完成基因轉(zhuǎn)移,篩選成功轉(zhuǎn)移的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng),再重新輸入患者體內(nèi)的治療方法。(四)基因治療u體內(nèi)基因治療直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因的治病方法。SCID的基因工程治療的基因工程治療四、蛋白質(zhì)工程四、蛋白質(zhì)工程 以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)為基礎(chǔ),通過(guò)基因修飾基因修飾或或基因合成基因合成,對(duì),對(duì)現(xiàn)有現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行蛋白質(zhì)進(jìn)行改造改造,或,或制造一種新的蛋白質(zhì)制造一種新的蛋白質(zhì),以滿(mǎn)足人類(lèi)對(duì)生產(chǎn)和生,以滿(mǎn)足人類(lèi)對(duì)生產(chǎn)和生活的需求。活的需求。四、蛋白質(zhì)工程四、蛋白質(zhì)工程(一)原理(一)原理(二)過(guò)程(二)過(guò)程基因基因
28、DNA生物功能生物功能預(yù)期功能預(yù)期功能mRNA轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄氨基酸序列氨基酸序列多肽鏈多肽鏈翻譯翻譯蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)三維結(jié)構(gòu)折疊折疊DNA合成合成分子設(shè)計(jì)分子設(shè)計(jì)中心法則的逆推中心法則的逆推專(zhuān)題二專(zhuān)題二 細(xì)胞工程細(xì)胞工程 細(xì)胞工程細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法,通過(guò)原理和方法,通過(guò)細(xì)胞整體水平細(xì)胞整體水平或或細(xì)胞器水平細(xì)胞器水平上的上的操作,按照人們的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或操作,按照人們的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門(mén)綜合科學(xué)技術(shù)。獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門(mén)綜合科學(xué)技術(shù)。 按照操作對(duì)象不同,可分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)按照操作對(duì)象不同,
29、可分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程兩大領(lǐng)域。物細(xì)胞工程兩大領(lǐng)域。植植 物物 細(xì)細(xì) 胞胞 工工 程程 植物組織培養(yǎng)是在無(wú)菌和人工控制條件下,植物組織培養(yǎng)是在無(wú)菌和人工控制條件下,將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人工配將離體的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。一、理論基礎(chǔ)一、理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性1.1.概念:概念:細(xì)胞全能性是指細(xì)胞全能性是指細(xì)胞細(xì)胞具有具有形成機(jī)體形成機(jī)體所有細(xì)胞類(lèi)型所有細(xì)胞類(lèi)型 的能力,是細(xì)胞的一種特征。的
30、能力,是細(xì)胞的一種特征。2.2.基礎(chǔ):基礎(chǔ):生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套 遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部 基因?;颉?.3.全能性大小全能性大小 受精卵受精卵 生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞 體細(xì)胞(分化程度低的細(xì)胞體細(xì)胞(分化程度低的細(xì)胞 分化程度高的細(xì)胞)分化程度高的細(xì)胞) 植物細(xì)胞植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞二、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)二、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)離體器官離體器官組織細(xì)胞組織細(xì)胞 脫分化:已經(jīng)高度分化的植物細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后,脫分
31、化:已經(jīng)高度分化的植物細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后,失去失去特有的結(jié)構(gòu)和特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞未分化細(xì)胞的過(guò)程,即形成愈傷組織。的過(guò)程,即形成愈傷組織。 再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又重新分化重新分化成根成根或芽等器官?;蜓康绕鞴?。植物體植物體愈傷組織愈傷組織脫分化脫分化營(yíng)養(yǎng)激素營(yíng)養(yǎng)激素根、芽根、芽再分化再分化營(yíng)養(yǎng)激素營(yíng)養(yǎng)激素1、過(guò)程、過(guò)程2、條件、條件 離體、提供營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基、激素及其他適宜條件離體、提供營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基、激素及其他適宜條件(溫度、(溫度、O2、pH、無(wú)菌、光照)。、無(wú)菌、光照)。二、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)二、植物
32、細(xì)胞工程的基本技術(shù)(一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(二)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(二)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)AB去去掉掉細(xì)細(xì)胞胞壁壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合融合原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞 1、過(guò)程、過(guò)程愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株植物細(xì)胞植物細(xì)胞A A植物細(xì)胞植物細(xì)胞B B愈傷組織愈傷組織脫分化脫分化雜種植物雜種植物再分化再分化植植物物組組織織培培養(yǎng)養(yǎng)去去壁壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞生壁生壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B酶解法酶解法 融合原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體誘誘 導(dǎo)導(dǎo) 融融合合2、意義、意義 與有性雜交(種內(nèi))相比,植物體細(xì)胞雜交與有性
33、雜交(種內(nèi))相比,植物體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)克服了遠(yuǎn)緣雜交不親合的障礙緣雜交不親合的障礙,大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合,大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合范圍(種間、屬間),并且培育出了許多在生產(chǎn)上有較高范圍(種間、屬間),并且培育出了許多在生產(chǎn)上有較高應(yīng)用價(jià)值的雜種植株品種。應(yīng)用價(jià)值的雜種植株品種。三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用1 1、微型繁殖、微型繁殖u概念:概念:快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù),快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù),也叫也叫快速繁殖技術(shù)快速繁殖技術(shù)。u特點(diǎn):特點(diǎn): 繁殖速度快,即具有繁殖速度快,即具有高效性高效性 保持優(yōu)良品種的遺傳特性,即具有保持優(yōu)良品
34、種的遺傳特性,即具有高保真性高保真性2 2、培育脫毒作物、培育脫毒作物u 原因:原因:無(wú)性繁殖的作物,感染的病毒易傳播給無(wú)性繁殖的作物,感染的病毒易傳播給后代,病毒在作物體內(nèi)逐年積累,會(huì)導(dǎo)致作物產(chǎn)后代,病毒在作物體內(nèi)逐年積累,會(huì)導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差。量降低,品質(zhì)變差。u 材料:材料:植物分生區(qū)(如莖尖)。植物分生區(qū)(如莖尖)。u 方法:方法:切取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng),獲得切取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng),獲得脫毒苗脫毒苗。三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用u技術(shù):技術(shù):組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)u特性:特性:在適宜條件下可以萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗在適宜條件下可以萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗u優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)后代無(wú)性狀分離,保持優(yōu)
35、良特性后代無(wú)性狀分離,保持優(yōu)良特性不受季節(jié)、氣候和地域的限制不受季節(jié)、氣候和地域的限制3 3、人工種子、人工種子 植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等包裹在人工薄膜(腋芽等包裹在人工薄膜(人工種皮人工種皮)內(nèi)形成的結(jié)構(gòu)。)內(nèi)形成的結(jié)構(gòu)。三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用三、植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用 某二倍體植物是雜合子,圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)某二倍體植物是雜合子,圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過(guò)程。據(jù)圖回答:基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過(guò)程。據(jù)圖回答:(1)圖中表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的)圖中表示的是該花粉培養(yǎng)過(guò)程中的 過(guò)
36、程,表示過(guò)程,表示的是的是 過(guò)程,過(guò)程,X代表的是代表的是 ,表示的是,表示的是 過(guò)過(guò)程,表示的是誘導(dǎo)程,表示的是誘導(dǎo) 過(guò)程。過(guò)程。(2)圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條,具體通過(guò)那一條途)圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條,具體通過(guò)那一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中徑主要取決于培養(yǎng)基成分中 的種類(lèi)及其濃度配比,最后獲得的種類(lèi)及其濃度配比,最后獲得的來(lái)源與未成熟花粉的完整植株都稱(chēng)為的來(lái)源與未成熟花粉的完整植株都稱(chēng)為 植株(甲)。未成植株(甲)。未成熟花粉經(jīng)培養(yǎng)能形成完整植株,說(shuō)明為成熟花粉具有熟花粉經(jīng)培養(yǎng)能形成完整植株,說(shuō)明為成熟花粉具有 。愈傷組織愈傷組織花藥中未花藥中未成熟的花粉成
37、熟的花粉叢芽(芽)叢芽(芽)完整植株完整植株X脫分化脫分化再分化再分化胚狀體胚狀體分化分化( (發(fā)育發(fā)育) )生根生根激素激素單倍體單倍體細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性愈傷組織愈傷組織花藥中未花藥中未成熟的花粉成熟的花粉叢芽(叢芽(芽)芽)完整植株完整植株X(3 3)對(duì)植株進(jìn)行)對(duì)植株進(jìn)行 ,才能使其結(jié)實(shí),才能使其結(jié)實(shí)產(chǎn)生后代(乙),否則植株甲只有通過(guò)產(chǎn)生后代(乙),否則植株甲只有通過(guò) 的方式的方式才能產(chǎn)生后代(丙)。乙、丙兩種植株中,能產(chǎn)生可育花粉的是才能產(chǎn)生后代(丙)。乙、丙兩種植株中,能產(chǎn)生可育花粉的是 植株,該植株群體中每一植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類(lèi)為植株,該植株群體中每一植株產(chǎn)生可育花
38、粉的基因組成種類(lèi)為 種,花藥培養(yǎng)在育種上的特殊意義是種,花藥培養(yǎng)在育種上的特殊意義是 ,從而開(kāi)辟育種新途徑。從而開(kāi)辟育種新途徑。染色體加倍處理染色體加倍處理無(wú)性繁殖無(wú)性繁殖乙乙一一縮短育種周期縮短育種周期動(dòng)動(dòng) 物物 細(xì)細(xì) 胞胞 工工 程程一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(一)概念(一)概念 從動(dòng)物機(jī)體中從動(dòng)物機(jī)體中取出取出相關(guān)組織,將它相關(guān)組織,將它分散分散成成單個(gè)細(xì)胞,放在適當(dāng)?shù)膯蝹€(gè)細(xì)胞,放在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基培養(yǎng)基中,使之中,使之生長(zhǎng)和生長(zhǎng)和增殖增殖的技術(shù)。的技術(shù)。動(dòng)物動(dòng)物組織塊組織塊剪碎剪碎胰蛋白酶胰蛋白酶單個(gè)單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞加培養(yǎng)加培養(yǎng)液制成液制成細(xì)胞細(xì)胞懸浮液懸浮液10501050代細(xì)胞代細(xì)胞
39、(二)過(guò)程(二)過(guò)程貼壁貼壁細(xì)胞細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)脫離、分瓶脫離、分瓶傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞群細(xì)胞群 少部分細(xì)胞突破細(xì)少部分細(xì)胞突破細(xì)胞壽限,獲得不死性胞壽限,獲得不死性(三)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(三)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1. 1. 無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液。添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液。2. 2. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素以及糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素以及動(dòng)物或人血清動(dòng)物或人血清等。等。3. 溫度和溫度和pH溫度溫度pH4. 氣體環(huán)境氣體環(huán)境與體內(nèi)相近與體內(nèi)相近 36.50.57.27.4O2CO2細(xì)
40、胞代謝所必需細(xì)胞代謝所必需維持維持pH大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品(病毒疫苗、干大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品(病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體)擾素、單克隆抗體)獲得大量自體的皮膚細(xì)胞,解決燒傷病人的植皮獲得大量自體的皮膚細(xì)胞,解決燒傷病人的植皮問(wèn)題問(wèn)題檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷某種物質(zhì)的細(xì)胞毒性檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷某種物質(zhì)的細(xì)胞毒性篩選抗癌藥物,為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提篩選抗癌藥物,為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)供理論依據(jù)(四)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用(四)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用二、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物二、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(一)概念(一)概念 動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物的一個(gè)
41、細(xì)胞的細(xì)胞核,移動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入到一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成入到一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,該胚胎最終發(fā)育成完整的動(dòng)物個(gè)體。一個(gè)新的胚胎,該胚胎最終發(fā)育成完整的動(dòng)物個(gè)體。(二)類(lèi)型(二)類(lèi)型 胚胎細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植 體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植容易容易困難困難u利用核移植技術(shù)得到的動(dòng)物稱(chēng)為利用核移植技術(shù)得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物克隆動(dòng)物。(三)體細(xì)胞核移植的過(guò)程(三)體細(xì)胞核移植的過(guò)程(以高產(chǎn)奶牛為例)(以高產(chǎn)奶牛為例)體細(xì)胞體細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)取出核取出核甲牛甲牛乙牛乙牛M卵卵母細(xì)胞母細(xì)胞去除核去除核去核卵去核
42、卵母細(xì)胞母細(xì)胞重組重組卵細(xì)胞卵細(xì)胞核植入核植入卵裂卵裂早期早期胚胎胚胎代孕母牛丙代孕母牛丙移植移植體細(xì)胞群體細(xì)胞群克隆牛克隆牛細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植胚胎移植胚胎移植物理或化學(xué)方法激活物理或化學(xué)方法激活三、動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體三、動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體(一)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(一)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交,指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交,指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。u融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,融合后形成的具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱(chēng)為稱(chēng)為雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞。1 1、概念、概念2 2、過(guò)程、
43、過(guò)程不同不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞的兩個(gè)細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合(先質(zhì)后核先質(zhì)后核)融合后的雜交細(xì)胞進(jìn)融合后的雜交細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂行有絲分裂(二)單克隆抗體技術(shù)(二)單克隆抗體技術(shù)l 每一個(gè)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只合成和分泌一種特異性抗體。淋巴細(xì)胞只合成和分泌一種特異性抗體。 由單個(gè)由單個(gè)B B淋巴細(xì)胞克隆形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、淋巴細(xì)胞克隆形成的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體就是特異性強(qiáng)的抗體就是單克隆抗體單克隆抗體。l B淋巴細(xì)胞:能產(chǎn)生抗體,淋巴細(xì)胞:能產(chǎn)生抗體,體外培養(yǎng)不能無(wú)限增殖體外培養(yǎng)不能無(wú)限增殖。l 骨髓瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)可無(wú)限傳代,骨髓瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)可
44、無(wú)限傳代,不能產(chǎn)生抗體不能產(chǎn)生抗體。(二)單克隆抗體技術(shù)(二)單克隆抗體技術(shù)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞抗原抗原小鼠小鼠B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞融合融合 篩選篩選產(chǎn)生特定產(chǎn)生特定抗體抗體的雜交瘤細(xì)胞的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng) 篩選篩選 現(xiàn)有現(xiàn)有A和和B兩個(gè)肉牛品種,兩個(gè)肉牛品種,A品種牛的細(xì)胞組成可表示為品種牛的細(xì)胞組成可表示為A細(xì)胞核、細(xì)胞核、A細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì),B品種牛則為品種牛則為B細(xì)胞核、細(xì)胞核、B細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)。(1)如果要獲得一頭克隆牛,使其細(xì)胞由)如果要獲得一頭克隆牛,使其細(xì)胞由A細(xì)胞核和細(xì)胞核和B細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)組成,基本步驟是,從質(zhì)
45、組成,基本步驟是,從A品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞,進(jìn)行體品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)。然后再?gòu)呐囵B(yǎng)細(xì)胞中取出外培養(yǎng)。然后再?gòu)呐囵B(yǎng)細(xì)胞中取出_注入注入B品種牛的品種牛的_卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)某處刺激和培養(yǎng)后,可形成胚胎,卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)某處刺激和培養(yǎng)后,可形成胚胎,該胚胎被稱(chēng)為該胚胎被稱(chēng)為 ,將該胚胎移入代孕母牛的,將該胚胎移入代孕母牛的_中,通過(guò)培育可達(dá)到目的。中,通過(guò)培育可達(dá)到目的。細(xì)胞核細(xì)胞核去核去核重組胚胎重組胚胎子宮子宮(2)一般來(lái)說(shuō),要想大量獲得這種克隆牛比較難,原因)一般來(lái)說(shuō),要想大量獲得這種克隆牛比較難,原因之一是卵母細(xì)胞的數(shù)量之一是卵母細(xì)胞的數(shù)量_,為解決這一問(wèn)題,可以,為解決這一問(wèn)題
46、,可以用用_激素處理激素處理B品種母牛。品種母牛。(3)克隆牛的產(chǎn)生說(shuō)明)克隆牛的產(chǎn)生說(shuō)明_具有全能性。克隆具有全能性??寺∨5男誀钪饕憩F(xiàn)牛的性狀主要表現(xiàn)_品種牛的特征。由品種牛的特征。由A、B兩品種兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比,雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)雜交得到的牛與克隆牛相比,雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)自自_個(gè)親本,細(xì)胞質(zhì)來(lái)自個(gè)親本,細(xì)胞質(zhì)來(lái)自_性親本,克隆牛和性親本,克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成雜交牛的遺傳物質(zhì)組成_(相同,不同)。(相同,不同)。不足不足促性腺促性腺A動(dòng)物體細(xì)胞核動(dòng)物體細(xì)胞核2雌雌不同不同2.2.下圖表示用生物工程制備人抗下圖表示用生物工程制備人抗A A抗體的過(guò)程。請(qǐng)回
47、答下列問(wèn)題??贵w的過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)(1)人的紅細(xì)胞膜表面有被稱(chēng)為人的紅細(xì)胞膜表面有被稱(chēng)為凝集原的特異凝集原的特異_:從免疫:從免疫學(xué)角度看,這種凝集原是學(xué)角度看,這種凝集原是_。(2)(2)圖中細(xì)胞中圖中細(xì)胞中1 1是小鼠體內(nèi)注入是小鼠體內(nèi)注入人人A A型血紅細(xì)胞后而獲得的型血紅細(xì)胞后而獲得的_細(xì)胞,這種細(xì)胞具有產(chǎn)細(xì)胞,這種細(xì)胞具有產(chǎn)生生_的的特點(diǎn),但難以在體外培養(yǎng)。甲培特點(diǎn),但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2 2,是從患骨,是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞,這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能胞,這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能_,但不會(huì)產(chǎn)生,但不
48、會(huì)產(chǎn)生抗體??贵w。糖蛋白糖蛋白抗原抗原漿漿單一的特異性(抗單一的特異性(抗A A)抗體)抗體快速大量增殖快速大量增殖(3)(3)為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn),經(jīng)特殊處理,在促各自的特點(diǎn),經(jīng)特殊處理,在促細(xì)胞融合因子的作用下,使兩種細(xì)胞融合因子的作用下,使兩種細(xì)胞發(fā)生融合,形成圖中的細(xì)胞細(xì)胞發(fā)生融合,形成圖中的細(xì)胞3 3,這種細(xì)胞稱(chēng)為這種細(xì)胞稱(chēng)為_(kāi)。把它。把它在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng),則能產(chǎn)在乙培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng),則能產(chǎn)生大量的細(xì)胞群,這種方法稱(chēng)為生大量的細(xì)胞群,這種方法稱(chēng)為_(kāi)。(4)(4)過(guò)程的主要目的過(guò)程的主要目的_。通過(guò)過(guò)程或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)通過(guò)過(guò)程或的培養(yǎng)方法能
49、產(chǎn)生大量生大量_抗體。抗體。雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞克隆克隆篩選出能篩選出能產(chǎn)生單一抗產(chǎn)生單一抗A A抗體的雜交瘤細(xì)胞抗體的雜交瘤細(xì)胞抗抗A單克隆單克隆專(zhuān)題三專(zhuān)題三 胚胎胚胎工程工程 胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),如體外受精、胚胎移植、種顯微操作和處理技術(shù),如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過(guò)處理后獲胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過(guò)處理后獲得的胚胎,還需要移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代,得的胚胎,還需要移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿(mǎn)足人類(lèi)的各種需求。以滿(mǎn)足人類(lèi)的各種需求。體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育體內(nèi)受精和
50、早期胚胎發(fā)育一、精子和卵子的發(fā)生一、精子和卵子的發(fā)生(一)精子的發(fā)生(一)精子的發(fā)生1.1.場(chǎng)所場(chǎng)所睪丸睪丸2.2.時(shí)間時(shí)間初情期初情期生殖機(jī)能衰退生殖機(jī)能衰退DNADNA復(fù)制復(fù)制生長(zhǎng)、生長(zhǎng)、DNA復(fù)制復(fù)制減數(shù)分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂精原細(xì)胞(精原細(xì)胞(2N)初級(jí)精母細(xì)胞(初級(jí)精母細(xì)胞(2N)次級(jí)精母細(xì)胞(次級(jí)精母細(xì)胞(N)精細(xì)胞(精細(xì)胞(N)精子(精子(N )變形變形減數(shù)分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂精原細(xì)胞(精原細(xì)胞(初級(jí)精母細(xì)胞(初級(jí)精母細(xì)胞()次級(jí)精母細(xì)胞(次級(jí)精母細(xì)胞(精細(xì)胞(精細(xì)胞(精子(精子(變形變形3.3.過(guò)程過(guò)程精細(xì)胞變形為精子精細(xì)胞變形為精子細(xì)胞核細(xì)胞核高爾基體高爾基體中
51、心體中心體線粒體線粒體細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)精子頭的主要部分精子頭的主要部分頭部的頂體頭部的頂體精子的尾精子的尾線粒體鞘線粒體鞘( (尾的基部尾的基部) )原生質(zhì)滴原生質(zhì)滴( (球狀球狀, ,最后脫落最后脫落) )精細(xì)胞變形為精子精細(xì)胞變形為精子1.1.場(chǎng)所:場(chǎng)所: 卵巢卵巢2.2.時(shí)間:時(shí)間: 性別分化以后性別分化以后(二)卵子的發(fā)生(二)卵子的發(fā)生3.3.過(guò)程過(guò)程卵原細(xì)胞卵原細(xì)胞有絲分裂有絲分裂初級(jí)卵母細(xì)胞初級(jí)卵母細(xì)胞胎兒期胎兒期初級(jí)卵母細(xì)胞生初級(jí)卵母細(xì)胞生長(zhǎng),透明帶形成長(zhǎng),透明帶形成MM分裂分裂合子合子+ +第二極體第二極體初情期后初情期后初級(jí)卵母細(xì)胞初級(jí)卵母細(xì)胞次級(jí)卵母細(xì)胞次級(jí)卵
52、母細(xì)胞第一極體第一極體MM分裂分裂透明帶透明帶受精受精2N2N2NN卵黃膜卵黃膜2N排卵排卵二、受精二、受精1.1.概念概念精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精卵)的過(guò)程。卵)的過(guò)程。2.2.場(chǎng)所場(chǎng)所輸卵管輸卵管3.3.過(guò)程過(guò)程準(zhǔn)備階段準(zhǔn)備階段受精階段受精階段 準(zhǔn)備階段準(zhǔn)備階段(1 1)精子獲能)精子獲能: :精子在雌性動(dòng)物的生殖道發(fā)精子在雌性動(dòng)物的生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化,獲得受精能力的生理過(guò)生相應(yīng)的生理變化,獲得受精能力的生理過(guò)程。程。(2 2)卵子的準(zhǔn)備)卵子的準(zhǔn)備: :在輸卵管中發(fā)育到在輸卵管中發(fā)育到減數(shù)第減數(shù)第二次分裂的中期二次分裂的中期。此期的卵子才具有與精
53、子。此期的卵子才具有與精子受精的能力。受精的能力。 受精階段受精階段(1 1)精子穿越放射冠和透明帶)精子穿越放射冠和透明帶l頂體反應(yīng):頂體反應(yīng):頂體內(nèi)的酶釋放出來(lái),并溶解放射頂體內(nèi)的酶釋放出來(lái),并溶解放射冠的卵丘細(xì)胞之間以及透明帶的組成物質(zhì),形成冠的卵丘細(xì)胞之間以及透明帶的組成物質(zhì),形成精子穿越放射冠和透明帶的通道。精子穿越放射冠和透明帶的通道。l透明帶反應(yīng):透明帶反應(yīng):精子接觸卵黃膜的瞬間,產(chǎn)生阻精子接觸卵黃膜的瞬間,產(chǎn)生阻止其他精子進(jìn)入透明帶的反應(yīng)。這是防止多精入止其他精子進(jìn)入透明帶的反應(yīng)。這是防止多精入卵受精的第一道屏障。卵受精的第一道屏障。(2 2)精子進(jìn)入卵黃膜)精子進(jìn)入卵黃膜卵黃
54、膜封閉作用:卵黃膜封閉作用:精子入卵后,卵黃膜會(huì)立即發(fā)精子入卵后,卵黃膜會(huì)立即發(fā)生一種生理反應(yīng),阻止其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。這生一種生理反應(yīng),阻止其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。這是防止多精入卵受精的第二道屏障。是防止多精入卵受精的第二道屏障。 當(dāng)精子與卵黃膜接觸時(shí),立即被卵黃膜的微絨當(dāng)精子與卵黃膜接觸時(shí),立即被卵黃膜的微絨毛抱合,隨后,精子外膜與卵黃膜融合,精子頭毛抱合,隨后,精子外膜與卵黃膜融合,精子頭部進(jìn)入卵細(xì)胞質(zhì)。部進(jìn)入卵細(xì)胞質(zhì)。(3 3)原核形成)原核形成 雄原核形成和雌原核形成雄原核形成和雌原核形成 精子入卵后,核膜破裂,接著形成新的核膜,精子入卵后,核膜破裂,接著形成新的核膜,最后形成一個(gè)比原來(lái)
55、精子核還大的核,即最后形成一個(gè)比原來(lái)精子核還大的核,即雄原核雄原核,也稱(chēng)也稱(chēng)精原核精原核。 精子入卵后,激活了靜息在減數(shù)第二次分裂中精子入卵后,激活了靜息在減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞,使其很快完成第二次分裂,排期的次級(jí)卵母細(xì)胞,使其很快完成第二次分裂,排出第二極體后,形成一個(gè)成熟的卵子,即出第二極體后,形成一個(gè)成熟的卵子,即雌原核雌原核,也稱(chēng)也稱(chēng)卵原核卵原核。(4 4)配子結(jié)合)配子結(jié)合 雌雄原核融合形成合子雌雄原核融合形成合子( (受精卵受精卵) ) 雌雄原核充分發(fā)育后,相互靠近,彼此接觸,雌雄原核充分發(fā)育后,相互靠近,彼此接觸,二者體積縮小、合并,核膜解體,兩組核染色體二者體積縮小、
56、合并,核膜解體,兩組核染色體合為一組,形成一個(gè)含二倍染色體的合子,即受合為一組,形成一個(gè)含二倍染色體的合子,即受精卵。精卵。卵子受精的標(biāo)志卵子受精的標(biāo)志 卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)兩個(gè)極體極體時(shí),說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精。時(shí),說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精。三、胚胎發(fā)育三、胚胎發(fā)育受精卵受精卵桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚(內(nèi)含囊胚腔)(內(nèi)含囊胚腔)原腸胚原腸胚(內(nèi)含原腸腔)(內(nèi)含原腸腔)胎兒胎兒卵卵裂裂試管動(dòng)物技術(shù)試管動(dòng)物技術(shù) 通過(guò)人工操作使卵子和精子在通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外體外條件下條件下成成熟熟和和受精受精,并通過(guò),并通過(guò)培養(yǎng)培養(yǎng)發(fā)育成發(fā)育成早期胚胎早期胚胎后,
57、再經(jīng)后,再經(jīng)移植移植產(chǎn)生產(chǎn)生后代后代的技術(shù)。的技術(shù)。一、體外受精一、體外受精1.卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)卵母細(xì)胞的收集和培養(yǎng)u超數(shù)排卵技術(shù):超數(shù)排卵技術(shù): 利用利用促性腺激素促性腺激素處理,使得卵巢中有更多處理,使得卵巢中有更多的卵泡發(fā)育,更多的卵被排出,這個(gè)過(guò)程就稱(chēng)為的卵泡發(fā)育,更多的卵被排出,這個(gè)過(guò)程就稱(chēng)為超數(shù)排卵超數(shù)排卵。 分別分別采集雌性動(dòng)物的卵細(xì)胞和雄性動(dòng)物的采集雌性動(dòng)物的卵細(xì)胞和雄性動(dòng)物的精子,使其在精子,使其在體外體外完成受精的過(guò)程。完成受精的過(guò)程。u精子的獲能精子的獲能2.精子的收集和獲能精子的收集和獲能 一、體外受精一、體外受精 培養(yǎng)法培養(yǎng)法 化學(xué)誘導(dǎo)法化學(xué)誘導(dǎo)法人工配制的人工配
58、制的獲能液獲能液處理(嚙齒類(lèi)動(dòng)處理(嚙齒類(lèi)動(dòng)物、家兔、豬等動(dòng)物精子)物、家兔、豬等動(dòng)物精子)一定濃度的肝素溶液或鈣離子載體一定濃度的肝素溶液或鈣離子載體A23187A23187溶液處理(牛、羊等動(dòng)物精子)。溶液處理(牛、羊等動(dòng)物精子)。3.受精受精 在在獲能溶液獲能溶液或?qū)S玫幕驅(qū)S玫氖芫芤菏芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程。中完成受精過(guò)程。二、胚胎的早期培養(yǎng)二、胚胎的早期培養(yǎng)將受精卵在人工環(huán)境下培養(yǎng)成早期胚胎的過(guò)程。將受精卵在人工環(huán)境下培養(yǎng)成早期胚胎的過(guò)程。培養(yǎng)液:培養(yǎng)液:水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等。激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等。三
59、、胚胎移植三、胚胎移植 將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎, ,或者通過(guò)其他方式或者通過(guò)其他方式得到的胚胎,移植到得到的胚胎,移植到同種同種的、的、生理狀態(tài)相同生理狀態(tài)相同的其他的其他雌性動(dòng)物雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之的體內(nèi),使之發(fā)育為新個(gè)體發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。的技術(shù)。 供體:提供胚胎的個(gè)體供體:提供胚胎的個(gè)體 受體:接受胚胎的個(gè)體受體:接受胚胎的個(gè)體胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序選擇及同期發(fā)情處理選擇及同期發(fā)情處理超數(shù)排卵處理超數(shù)排卵處理配種或人工受精配種或人工受精胚胎收集胚胎收集胚胎檢測(cè)胚胎檢測(cè)胚胎保存胚胎保存胚胎移植胚胎移植妊娠檢查妊娠檢查分娩分娩 胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌
60、性供體和受體之間進(jìn)胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進(jìn)行。行。(不發(fā)生免疫排斥)(不發(fā)生免疫排斥) 進(jìn)行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。進(jìn)行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。(同期發(fā)情處理)(同期發(fā)情處理)u胚胎移植成功與否的兩個(gè)條件胚胎移植成功與否的兩個(gè)條件四、胚胎分割四、胚胎分割 采用機(jī)械方法將采用機(jī)械方法將早期胚胎早期胚胎切割成切割成2 2等份、等份、4 4等份等份或或8 8等份等,經(jīng)移植獲得等份等,經(jīng)移植獲得同卵雙胎同卵雙胎或或多胎多胎的技術(shù)。的技術(shù)。 來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì) 胚胎分割是動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一胚胎分
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