從基因多態(tài)性到脂肪酸代謝

1、從基因多態(tài)性到脂肪酸從基因多態(tài)性到脂肪酸代謝代謝肥胖在全球的流行肥胖在全球的流行u截止到截止到2008年年, 全球成人中全球成人中 14.6億億超重超重(BMI 25 kg/m2) 5.02億億肥胖肥胖(BMI30 kg/m2) 約約1.70億億兒童兒童(18 歲歲)超重或肥胖超重或肥胖Finucane MM, et al. Lancet 2011; 377: 55767.Mendez MA, et al. Am J Clin Nutr 2005; 81: 71421.中國肥胖患病率中國肥胖患病率2002年全國居民營養(yǎng)與健康狀況調(diào)查年全國居民營養(yǎng)與健康狀況調(diào)查武陽豐等；中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志2005

2、年9 月第39卷第5 期患病率患病率 （%）WHO標準中國人肥胖及糖尿病特點中國人肥胖及糖尿病特點腹型肥胖為主腹型肥胖為主相同相同BMI,內(nèi)臟脂肪含量更多內(nèi)臟脂肪含量更多易并發(fā)易并發(fā)2型糖尿病及型糖尿病及心腦血管病心腦血管病蘋果型蘋果型3-AR3-AR和瘦素等脂肪因子和瘦素等脂肪因子脂肪酸代謝調(diào)控的關(guān)鍵酶脂肪酸代謝調(diào)控的關(guān)鍵酶目前糖尿病肥胖研究領(lǐng)域兩大重要靶點目前糖尿病肥胖研究領(lǐng)域兩大重要靶點臨床研究臨床研究在人群水平上，探討在人群水平上，探討3-AR3-AR基因型及脂肪因基因型及脂肪因子水平在漢族人群肥子水平在漢族人群肥胖、糖尿病及血管并胖、糖尿病及血管并發(fā)癥中的作用與影響發(fā)癥中的作用與影響

3、因素并進行干預(yù)研究因素并進行干預(yù)研究動物研究動物研究 在動物模型水平，探在動物模型水平，探討重組瘦素對糖尿病討重組瘦素對糖尿病大鼠的糖脂代謝及胰大鼠的糖脂代謝及胰島素抵抗的影響島素抵抗的影響組織及細胞研究組織及細胞研究利用人體脂肪組織及利用人體脂肪組織及脂質(zhì)沉積的細胞模型，脂質(zhì)沉積的細胞模型，對異常脂質(zhì)沉積的機對異常脂質(zhì)沉積的機制及干預(yù)進行探討制及干預(yù)進行探討研究思路研究思路問題一問題一 3 3腎上腺素能受體腎上腺素能受體在糖尿病肥胖中的作用如何在糖尿病肥胖中的作用如何33腎上腺素能受體（腎上腺素能受體（3-AR3-AR）33腎上腺素能受體是腎上腺素能受體家族中的一員腎上腺素能受體是腎上腺素能

4、受體家族中的一員主要分布于脂肪組織主要分布于脂肪組織, , 在機體能量和脂肪恒定調(diào)控中起重要作用在機體能量和脂肪恒定調(diào)控中起重要作用非顫栗產(chǎn)熱作用非顫栗產(chǎn)熱作用促進脂肪分解促進脂肪分解3-AR3-AR棕色脂肪棕色脂肪白色脂肪白色脂肪33腎上腺素能受體活性的降低腎上腺素能受體活性的降低糖尿病肥胖的發(fā)生糖尿病肥胖的發(fā)生 3-AR3-AR基因突變是否與糖尿病肥胖的發(fā)生相關(guān)基因突變是否與糖尿病肥胖的發(fā)生相關(guān) 肥胖及非肥胖的肥胖及非肥胖的糖尿病和對照人群糖尿病和對照人群體重指數(shù)，腰圍體重指數(shù)，腰圍腰臀比，體脂分析腰臀比，體脂分析ELISAELISA法檢測法檢測脂肪因子水平脂肪因子水平血糖血脂血糖血脂糖化

5、血紅蛋白糖化血紅蛋白胰島素，胰島素，計算計算HOMAHOMA指數(shù)等指數(shù)等PCRPCRRFLPRFLP法法檢測基因型，分析檢測基因型，分析等位基因頻率等位基因頻率統(tǒng)計分析統(tǒng)計分析3-AR3-AR基因型與肥胖，糖尿病基因型與肥胖，糖尿病及血管并發(fā)癥的關(guān)系，并探討臨床相關(guān)及血管并發(fā)癥的關(guān)系，并探討臨床相關(guān)影響因素影響因素3-AR3-AR基因多態(tài)性基因多態(tài)性在肥胖、糖尿病及血管并發(fā)癥中的作用在肥胖、糖尿病及血管并發(fā)癥中的作用漢族人群漢族人群3-AR3-AR基因基因Arg64Arg64多態(tài)等位頻率明顯高于白種人多態(tài)等位頻率明顯高于白種人 等等位位頻頻率率0.000.000.020.020.040.040

6、.060.060.080.080.100.100.120.120.140.140.160.160.180.180.200.20美國美國芬蘭芬蘭中國中國3-AR3-AR基因分布特征基因分布特征2 2型糖尿病型糖尿病3-AR3-AR基因基因Arg64Arg64變異攜帶者變異攜帶者胰島素抵抗狀態(tài)更明顯，體重指數(shù)更大，特別是腹型肥胖明顯胰島素抵抗狀態(tài)更明顯，體重指數(shù)更大，特別是腹型肥胖明顯項目項目Trp/TrpTrp/ArgWHR0.870.020.900.03BMI(kg/m2)24.142.0725.892.27HOMA-IR1.420.261.610.23 肥胖患者肥胖患者3-AR3-AR基因基

7、因Arg64Arg64等位基因頻率較體重正常者明顯升高等位基因頻率較體重正常者明顯升高21.5421.54 VS 11.26 VS 11.263-AR3-AR與與T2DMT2DM和肥胖關(guān)系和肥胖關(guān)系3-AR3-AR與血管并發(fā)癥的關(guān)系與血管并發(fā)癥的關(guān)系3-AR3-AR基因基因Arg64Arg64變異攜帶者更易發(fā)生糖尿病腎病變異攜帶者更易發(fā)生糖尿病腎病組別組別例數(shù)例數(shù)基因基因型型(%)(%)等位基因頻率等位基因頻率(%)(%)Trp64/Trp64 Trp64/Arg64 Trp64/Arg64 Trp64 Arg64 Normal 組組 54 37（0.685） 17（0.315） 0 84.3

8、 15.7DM組組 180 123（0.683） 53（0.295） 4（0.022） 83.1 16.9DMN組組 50 39（0.780） 10（0.200） 1（0.020） 88.0 12.0DN組組 52 26（0.500） 24（0.462） 2（0.038） 73.1 26.9DR組組 47 37（0.787） 9（0.192） 1（0.021） 88.3 11.7DPN組組 31 21（0.677） 10（0.323） 0 83.9 16.1 DNDN組與組與NormalNormal組比較，組比較， DNDN組與組與DMNDMN組比較，組比較，P0.05P0.05 DMNDMN

9、：糖尿病無血管并發(fā)癥；：糖尿病無血管并發(fā)癥；DNDN：糖尿病腎?。唬禾悄虿∧I??；DRDR：糖尿病視網(wǎng)膜病變；：糖尿病視網(wǎng)膜病變；DPNDPN：糖尿病神經(jīng)病變：糖尿病神經(jīng)病變小結(jié)一小結(jié)一u3-AR3-AR基因多態(tài)性與肥胖、尤其是腹型肥胖以及基因多態(tài)性與肥胖、尤其是腹型肥胖以及胰島素抵抗相關(guān)，可能促進肥胖和胰島素抵抗相關(guān)，可能促進肥胖和2 2型糖尿病的發(fā)型糖尿病的發(fā)生和發(fā)展生和發(fā)展u33腎上腺素能受體是潛在的抗肥胖癥和抗糖尿病腎上腺素能受體是潛在的抗肥胖癥和抗糖尿病的理想靶點。的理想靶點。問題二問題二 瘦素瘦素與糖尿病肥胖的關(guān)系如何與糖尿病肥胖的關(guān)系如何瘦素瘦素 近近1010余年最重要的脂肪因子之

10、一余年最重要的脂肪因子之一抑制食欲抑制食欲增加能量消耗增加能量消耗影響脂肪合成影響脂肪合成瘦素瘦素脂肪和體重調(diào)節(jié)脂肪和體重調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)攝食調(diào)節(jié)攝食細胞細胞: :胰島素分泌胰島素分泌肝臟肝臟: : 肝糖輸出肝糖輸出胃胃: : 調(diào)節(jié)胃排空調(diào)節(jié)胃排空骨骼肌骨骼肌: : 葡萄糖攝取葡萄糖攝取脂肪：脂肪：脂解作用脂解作用大鼠糖尿病模型大鼠糖尿病模型給予重組瘦素給予重組瘦素血糖血脂等代謝血糖血脂等代謝指標，胰島素等激指標，胰島素等激素水平素水平肥胖及非肥胖的肥胖及非肥胖的糖尿病和對照人群糖尿病和對照人群體重指數(shù)，腰圍體重指數(shù)，腰圍腰臀比，體脂分析腰臀比，體脂分析ELISAELISA法檢測法檢測血清瘦素水平血清

11、瘦素水平血糖血脂血糖血脂糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白胰島素，胰島素，計算計算HOMAHOMA指數(shù)等指數(shù)等統(tǒng)計分析血清瘦素水統(tǒng)計分析血清瘦素水平與肥胖，糖尿病及血管并發(fā)癥的平與肥胖，糖尿病及血管并發(fā)癥的關(guān)系，并探討臨床相關(guān)影響因素關(guān)系，并探討臨床相關(guān)影響因素飲食運動干預(yù)飲食運動干預(yù)瘦素瘦素在肥胖、糖尿病及血管并發(fā)癥中的作用及干預(yù)研究在肥胖、糖尿病及血管并發(fā)癥中的作用及干預(yù)研究 體脂含量越高，腰圍越大，胰島素水平越高，體脂含量越高，腰圍越大，胰島素水平越高，瘦素水平越高。瘦素水平越高。BetaBSEBp值值%Body Fat0.2560.3780.1610.021Sex0.60712.0172.038

12、0.0001FINS0.1510.2030.0650.002Waist0.2150.2690.0950.005多元逐步回歸分析多元逐步回歸分析瘦素與瘦素與T2DMT2DM和肥胖的關(guān)系和肥胖的關(guān)系血清瘦素水平與血清瘦素水平與DMDM血管并發(fā)癥的關(guān)系血管并發(fā)癥的關(guān)系 2 2型糖尿病患者有血管并發(fā)癥者血清瘦素水平型糖尿病患者有血管并發(fā)癥者血清瘦素水平顯著高于無血管并發(fā)癥組者顯著高于無血管并發(fā)癥組者0 05 51010151520202525血管并發(fā)癥（血管并發(fā)癥（+ +） 血管并發(fā)癥血管并發(fā)癥（- -） 肥胖組肥胖組非肥胖組非肥胖組* * * *血清瘦素血清瘦素單純性肥胖患者飲食控制加適當運動可有效

13、降單純性肥胖患者飲食控制加適當運動可有效降低體重和腰圍，改善胰島素抵抗及瘦素抵抗低體重和腰圍，改善胰島素抵抗及瘦素抵抗飲食運動干預(yù)對胰島素瘦素抵抗的影響飲食運動干預(yù)對胰島素瘦素抵抗的影響N=216N=216例例重組瘦素治療對糖尿病大鼠的影響重組瘦素治療對糖尿病大鼠的影響瘦素可影響瘦素可影響STZSTZ大鼠的血糖大鼠的血糖, , 攝食，體重及胰島素敏感性攝食，體重及胰島素敏感性小結(jié)二小結(jié)二瘦素抵抗參與肥胖瘦素抵抗參與肥胖,2,2型糖尿病及其并型糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展，與胰島素抵抗相發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展，與胰島素抵抗相互關(guān)聯(lián)互關(guān)聯(lián)改善瘦素抵抗必將為肥胖癥和糖尿病改善瘦素抵抗必將為肥胖癥和糖尿病的

14、治療提供新的手段和新思路的治療提供新的手段和新思路, ,具有具有廣闊的前景。廣闊的前景。 問題三問題三脂質(zhì)沉積的分子機制如何脂質(zhì)沉積的分子機制如何游離脂肪酸代謝在其中作用如游離脂肪酸代謝在其中作用如何何細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積與肥胖細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積與肥胖異位脂質(zhì)沉積在糖尿病肥胖的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用異位脂質(zhì)沉積在糖尿病肥胖的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用高游離脂肪酸作為脂肪代謝的樞紐是其中的高游離脂肪酸作為脂肪代謝的樞紐是其中的始動因素始動因素，然而當游離脂，然而當游離脂肪酸濃度過高時，過量的游離脂肪酸導(dǎo)致脂肪酸代謝紊亂，異位脂質(zhì)肪酸濃度過高時，過量的游離脂肪酸導(dǎo)致脂肪酸代謝紊亂，異位脂質(zhì)沉積發(fā)生。沉積發(fā)生。過量游

15、離脂肪酸過量游離脂肪酸細胞膜細胞膜游離脂肪酸攝取游離脂肪酸攝取FAFA酰基輔酶?；o酶A A 氧化氧化CPT-1CPT-1甘油二酯甘油二酯DGATDGAT甘油三酯合成甘油三酯合成 FABP4FABP4細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積肥胖及糖尿病肥胖及糖尿病游離脂肪酸代謝與細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積游離脂肪酸代謝與細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積 FABP4FABP4：脂肪酸結(jié)合蛋白脂肪酸結(jié)合蛋白4 4DGATDGAT： 二酯酰甘油?；D(zhuǎn)移酶二酯酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶CPT1CPT1：肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶人皮下及內(nèi)臟人皮下及內(nèi)臟脂肪組織脂肪組織 微小樣本同位素微小樣本同位素標記測定局部脂肪標記測定局部脂肪FFAFFA吸

16、收與釋放能力吸收與釋放能力 底物標記法，底物標記法，RT-PCRRT-PCR及及Western BlotWestern Blot測定測定 脂肪代謝酶活性及相關(guān)脂肪代謝酶活性及相關(guān)蛋白水平蛋白水平游離脂肪酸代謝通路及脂質(zhì)沉積機制研究游離脂肪酸代謝通路及脂質(zhì)沉積機制研究 組織水平組織水平細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的關(guān)鍵：甘油三細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的關(guān)鍵：甘油三酯合成酯合成二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)(DGAT)是是催化甘油三酯合成的最后一步限催化甘油三酯合成的最后一步限速酶速酶活性如何調(diào)節(jié)？活性如何調(diào)節(jié)？DGATDGAT在不同部位脂肪組織的活性在不同部位脂肪組織的活性*網(wǎng)膜脂肪的二脂酰甘油酰

17、基轉(zhuǎn)移酶網(wǎng)膜脂肪的二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)(DGAT)活性更高活性更高網(wǎng)膜脂肪網(wǎng)膜脂肪皮下脂肪皮下脂肪 二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)(DGAT)是催化甘油三酯合成的最是催化甘油三酯合成的最后一步限速酶。后一步限速酶。游離脂肪酸代謝通路及脂質(zhì)沉積干預(yù)研究游離脂肪酸代謝通路及脂質(zhì)沉積干預(yù)研究 棕櫚酸及棕櫚酸及二甲雙胍干預(yù)二甲雙胍干預(yù)構(gòu)建巨噬細胞構(gòu)建巨噬細胞脂質(zhì)沉積模型脂質(zhì)沉積模型 觀察觀察FOXO1-FOXO1-脂肪酸脂肪酸結(jié)合蛋白結(jié)合蛋白4 4信號通路信號通路作用作用細胞水平細胞水平細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積第一關(guān)：細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積第一關(guān)：游離游離脂肪酸攝取脂肪酸攝取該過程主要

18、由游離脂肪酸結(jié)合該過程主要由游離脂肪酸結(jié)合蛋白蛋白4(FABP4)4(FABP4)介導(dǎo)，介導(dǎo)，該蛋白如該蛋白如何調(diào)節(jié)何調(diào)節(jié)? ?細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積如何減少如何減少？-250棕櫚酸棕櫚酸 (0.1 mM)二甲雙胍二甲雙胍 (uM)500-+-+100+二甲雙胍對細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響二甲雙胍對細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響細胞水平細胞水平Why？ 棕櫚酸顯著棕櫚酸顯著增加細胞內(nèi)增加細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積脂質(zhì)沉積 二甲雙胍降低棕櫚酸所二甲雙胍降低棕櫚酸所致的細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積，致的細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積，且呈劑量依賴性且呈劑量依賴性+-+棕櫚酸棕櫚酸(0.1 mM) -FABP4 siRNA(100nM) -+作為介導(dǎo)

19、游離脂肪酸攝取的關(guān)鍵酶，脂肪酸結(jié)合蛋白作為介導(dǎo)游離脂肪酸攝取的關(guān)鍵酶，脂肪酸結(jié)合蛋白4 4是否參與高游離脂肪酸所致的細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積是否參與高游離脂肪酸所致的細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積 ？細胞水平細胞水平脂肪酸結(jié)合蛋白脂肪酸結(jié)合蛋白4 4對細胞脂質(zhì)沉積的影響對細胞脂質(zhì)沉積的影響采用采用siRNAsiRNA干擾技術(shù)沉默干擾技術(shù)沉默F(xiàn)ABP4FABP4基因，基因，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無論在基礎(chǔ)狀態(tài)還是高游離脂肪酸下，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無論在基礎(chǔ)狀態(tài)還是高游離脂肪酸下，F(xiàn)ABP4FABP4基因沉默基因沉默能減少細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。能減少細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。提示：脂肪酸結(jié)合蛋白提示：脂肪酸結(jié)合蛋白4 4參與高游離脂肪酸所致細胞參與高游離脂肪酸所

20、致細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的調(diào)節(jié)內(nèi)脂質(zhì)沉積的調(diào)節(jié)基礎(chǔ)狀態(tài)基礎(chǔ)狀態(tài)高游離脂肪酸狀態(tài)高游離脂肪酸狀態(tài)Met (uM)PA (0.1 mM)+-+100250500050100150200250FABP4 mRNA(% of Control)*300RT-PCRRT-PCR結(jié)果顯示二甲雙胍在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)脂肪酸結(jié)合蛋白結(jié)果顯示二甲雙胍在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)脂肪酸結(jié)合蛋白4 4的表達的表達 二甲雙胍對脂肪酸結(jié)合蛋白二甲雙胍對脂肪酸結(jié)合蛋白4 4的調(diào)節(jié)作用的調(diào)節(jié)作用基因轉(zhuǎn)錄水平基因轉(zhuǎn)錄水平v 目前研究表明參與脂肪酸代謝調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因目前研究表明參與脂肪酸代謝調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子非常多，叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子子非常多，叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子O1O1

21、（forkhead forkhead transcription factor O1,transcription factor O1,FoxO1FoxO1）作為）作為FoxFox蛋蛋白家族中的一員，常表達于肝臟，脂肪，骨骼白家族中的一員，常表達于肝臟，脂肪，骨骼肌等糖脂代謝活躍的器官。肌等糖脂代謝活躍的器官。vFoxO1FoxO1可參與多種脂代謝相關(guān)酶的調(diào)節(jié)，如脂蛋可參與多種脂代謝相關(guān)酶的調(diào)節(jié)，如脂蛋白脂肪酶（白脂肪酶（LPLLPL）等，可能是肥胖與糖尿病發(fā)?。┑?，可能是肥胖與糖尿病發(fā)病的聯(lián)系紐帶。的聯(lián)系紐帶。 野生型野生型 負顯性型負顯性型-持續(xù)激活型持續(xù)激活型Foxo1 質(zhì)粒質(zhì)粒DNAFA

22、BP4-actinAFABP4-actinFoxo1 siRNA(100nM) 棕櫚酸棕櫚酸 (0.1 mM)-+-+-+B轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄因子FOXO1FOXO1是否參與二甲雙胍對脂肪酸結(jié)合蛋白是否參與二甲雙胍對脂肪酸結(jié)合蛋白4 4表達的調(diào)節(jié)？表達的調(diào)節(jié)？ DNADNA轉(zhuǎn)染基因過表達轉(zhuǎn)染基因過表達 siRNAsiRNA基因沉默基因沉默 FOXO1FOXO1對脂肪酸結(jié)合蛋白對脂肪酸結(jié)合蛋白4 4的調(diào)節(jié)作用的調(diào)節(jié)作用我們采用我們采用FOXO1FOXO1質(zhì)粒質(zhì)粒DNADNA過表達過表達FABP4FABP4基因，發(fā)現(xiàn)基因，發(fā)現(xiàn)野生型野生型和和持續(xù)持續(xù)激活型激活型顯著增加顯著增加FABP4FABP4的表達

23、，的表達，而而負顯性型負顯性型顯著降低其表達顯著降低其表達采用采用siRNAsiRNA沉默沉默F(xiàn)OXO1FOXO1，發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)FOXO1siRNAFOXO1siRNA可降低可降低FABP4FABP4的表的表達，同時逆轉(zhuǎn)棕櫚酸所致的達，同時逆轉(zhuǎn)棕櫚酸所致的FABP4FABP4表達的升高表達的升高提示：轉(zhuǎn)錄因子提示：轉(zhuǎn)錄因子FOXO1FOXO1參與了二甲雙胍對脂肪酸結(jié)合蛋白參與了二甲雙胍對脂肪酸結(jié)合蛋白4 4表達調(diào)節(jié)表達調(diào)節(jié) 棕櫚酸棕櫚酸 (0.1 mM)-二甲雙胍二甲雙胍 (250uM)DAPI核染色核染色FOXO1染色染色合并合并+-+二甲雙胍通過二甲雙胍通過促進轉(zhuǎn)錄因子促進轉(zhuǎn)錄因子FOXO1

24、FOXO1核外排核外排，降低其轉(zhuǎn)錄，降低其轉(zhuǎn)錄活性，而抑制活性，而抑制脂肪酸結(jié)合蛋脂肪酸結(jié)合蛋白白4 4的轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄二甲雙胍對二甲雙胍對FOXO1FOXO1轉(zhuǎn)錄活性的影響轉(zhuǎn)錄活性的影響基礎(chǔ)狀態(tài)基礎(chǔ)狀態(tài)高游離脂肪酸狀態(tài)高游離脂肪酸狀態(tài)Foxo REB脂肪酸結(jié)合蛋白脂肪酸結(jié)合蛋白4Foxo1 脂肪酸結(jié)合蛋白脂肪酸結(jié)合蛋白4細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積二甲雙胍二甲雙胍二甲雙胍抑制細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積信號通路圖二甲雙胍抑制細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積信號通路圖二甲雙胍可通過二甲雙胍可通過促進促進FOXO1FOXO1核外排，核外排，抑制其轉(zhuǎn)錄活性抑制其轉(zhuǎn)錄活性進而抑制游離脂進而抑制游離脂肪酸結(jié)合蛋白肪酸結(jié)合蛋白4 4的的表

25、達，減少游離表達，減少游離脂肪酸攝取，進脂肪酸攝取，進而減少細胞內(nèi)脂而減少細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。質(zhì)沉積。游離脂肪酸代謝通路及脂質(zhì)沉積干預(yù)研究游離脂肪酸代謝通路及脂質(zhì)沉積干預(yù)研究 棕櫚酸及棕櫚酸及AMPKAMPK激動劑干預(yù)激動劑干預(yù)構(gòu)建巨噬細胞構(gòu)建巨噬細胞脂質(zhì)沉積模型脂質(zhì)沉積模型 觀察觀察AMPK-CPT1AMPK-CPT1通路通路對細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響對細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的影響細胞水平細胞水平脂肪酸脂肪酸氧化調(diào)控關(guān)鍵位點：氧化調(diào)控關(guān)鍵位點：肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶( (CPT-1CPT-1) )CPT-1CPT-1在在細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積中的作細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積中的作用如何？用如何？脂肪酸氧化與細胞內(nèi)

26、脂質(zhì)沉積脂肪酸氧化與細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積 0uM 25uM50uM 100uM200uM棕櫚酸棕櫚酸(uM)Palmitic acid (PA)02550100200C16H32O2 -actinCPT-1 棕櫚酸顯著增加細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積棕櫚酸顯著增加細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積結(jié)果結(jié)果: :棕櫚酸抑制肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（棕櫚酸抑制肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（CPT-1CPT-1）的表達）的表達提示提示: :棕櫚酸可能通過抑制脂肪酸氧化增加細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積棕櫚酸可能通過抑制脂肪酸氧化增加細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積棕櫚酸棕櫚酸脂肪酸脂肪酸氧氧化限速酶化限速酶CPT-1CPT-1的表達的表達如何變化如何變化 ？蛋白水平蛋白水平腺苷酸活化蛋白

27、激酶腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)(AMPK)與細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積與細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積uAMPK-AMPK-細胞內(nèi)細胞內(nèi)“代謝感受器代謝感受器”u參與細胞代謝多過程參與細胞代謝多過程脂肪酸氧化脂肪酸氧化葡萄糖轉(zhuǎn)運葡萄糖轉(zhuǎn)運甘油三脂合成甘油三脂合成脂脂 解解神經(jīng)酰胺合成神經(jīng)酰胺合成氧化應(yīng)激氧化應(yīng)激線粒體線粒體功能失調(diào)功能失調(diào)NF-KBNF-KB激活激活線粒體線粒體氧化酶氧化酶 已證實已證實AMPKAMPK可通過促進可通過促進下游乙酰輔下游乙酰輔酶酶A A羧化酶羧化酶（ACCACC）失活）失活增加增加CPT-1CPT-1表表達達脂肪酸氧化脂肪酸氧化脂質(zhì)沉積脂質(zhì)沉積肥胖肥胖AMPKAMPK能否通能否通過增加過增加CPT1CPT1表達，促進表達，促進