微生物風(fēng)險評估報告-2017年版本

1、 abcd人民單位檢驗(yàn)科 程序文件文件編號： 版本/修訂號：a/0主題內(nèi)容關(guān)于發(fā)布程序文件的聲明生效日期：20060808 第 六十 頁 共343 頁病原微生物風(fēng)險評估報告 文件編號：第1版編制：陳志雄審核：林峰批準(zhǔn)：黃棉汝 生效日期：2017年 7月 1日 1瑞安疾控中心 病原微生物風(fēng)險評估報告文件編號： 版本/修訂號：a/0主題內(nèi)容 目錄生效日期： 20170701第 2 頁 共346 頁目 錄序號主 題 內(nèi) 容代 號頁 號1風(fēng)疹病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告4-292麻疹病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告30-573梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告58-834副溶血性弧菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告84-1165

2、志賀氏菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告117-1516腸致瀉性大腸埃希氏菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告152-1847艾滋病實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告185-2178乙型肝炎病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告218-2479禽流感病毒h5n1實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告248-26710禽流感病毒h7n9實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告268-28411艾滋病毒（i型型）病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告285-30112金黃色葡萄球菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告302-31413霍亂弧菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告315-32814沙門氏菌實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告329-342瑞安疾控中心 病原微生物風(fēng)險評估報告文件編號： 版本/修訂號：a/0主題內(nèi)容 修訂頁生效日期：20

3、170701 第 3 頁 共346 頁 修 訂 頁序號文件編號頁碼需更改的內(nèi)容更改內(nèi)容批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期1234567891011121314151617181920瑞安疾控中心 病原微生物風(fēng)險評估報告文件編號： 版本/修訂號：a/0主題內(nèi)容 風(fēng)疹病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告生效日期：20170701第 30 頁 共346 頁風(fēng)疹病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告一、生物學(xué)特性（一）種類和病毒分型風(fēng)疹病毒（rubella virus，rv）為披膜病毒科風(fēng)疹病毒屬的唯一成員，是風(fēng)疹的病原體。風(fēng)疹病毒為單正鏈rna病毒，直徑約60nm，有包膜，核衣殼為二十面體立體對稱，基因組全長9.7kb，含2個orf。酶切后形成

4、三種結(jié)構(gòu)蛋白，即衣殼蛋白c、包膜蛋白（e1和e2）。風(fēng)疹病毒只有一個血清型，但有多個基因型。截至目前，世界衛(wèi)生組織（who）將全球曾經(jīng)或正在流行傳播的風(fēng)疹病毒劃分為兩個進(jìn)化枝（cladel和clade2）,共13個基因型，包括9個已經(jīng)確定的基因型（1b、1c、1d、1e、1f、1g、2a、2b和2c）和4個暫定基因型（la、lh、li和lj）。而我國的風(fēng)疹分子流行病學(xué)研究顯示，有4種基因型（1e、1f、2a和2b）曾在我國流行，其中1f基因型目前只在中國發(fā)現(xiàn)。（二）來源風(fēng)疹又名德國麻疹，由風(fēng)疹病毒所引起。之所以常被稱為德國麻疹，是因?yàn)榇思膊∽钕扔谑耸兰o(jì)中期，由德國醫(yī)生確診。風(fēng)疹病毒能在細(xì)胞內(nèi)

5、增殖，1962年首次被分離成功。（三）傳染源人是風(fēng)疹病毒的唯一自然宿主，因此，病人是唯一的傳染源。（四）傳播途徑呼吸道傳播為其主要傳播途徑，而垂直傳播的危害是最嚴(yán)重的。（五）易感性未主動或被動免疫過，體內(nèi)無風(fēng)疹病毒抗體的人均極為易感。（六）潛伏期風(fēng)疹病毒潛伏期一般情況下為1020d。（七）劑量-效應(yīng)關(guān)系目前尚未見有風(fēng)疹病毒對人準(zhǔn)確感染劑量的報導(dǎo)，風(fēng)疹病毒的感染主要與暴露途徑和感染方式密切相關(guān)。（八）致病性風(fēng)疹是病毒性傳染病，感染后全身癥狀輕微，并發(fā)癥少見。從接觸感染到癥狀出現(xiàn)，要經(jīng)過1421d。病初12d的癥狀很輕，可有低熱或中度發(fā)熱，輕微咳嗽、乏力、胃口不好、咽痛和眼發(fā)紅等輕度上呼吸道癥狀。

6、病人口腔黏膜光滑，無充血及黏膜斑，耳后、枕部淋巴結(jié)腫大，伴輕度壓痛。通常于發(fā)熱12d后出現(xiàn)皮疹，皮疹先從面頸部開始，24h蔓延到全身。皮疹初為稀疏的紅色斑丘疹，之后面部及四肢皮疹可以融合，類似風(fēng)疹。出疹第二天開始，面部及四肢皮疹可變成針尖樣紅點(diǎn)，如猩紅熱樣皮疹。皮疹一般在3d內(nèi)迅速消退，留下較淺的色素沉著。在出疹期，體溫不再上升，病兒常無疾病感覺，飲食、嬉戲如常。但對于孕婦來說，風(fēng)疹病毒的侵入會導(dǎo)致胎兒畸形、早產(chǎn)或胎兒死亡，應(yīng)引起重視。孕婦感染風(fēng)疹病毒后，一部分人的癥狀較輕微，但也有一些孕婦會出現(xiàn)典型癥狀。懷孕3個月以內(nèi)的孕婦感染風(fēng)疹病毒后，風(fēng)疹病毒可通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，引起胎兒畸形。孕婦感

7、染風(fēng)疹病毒的時間越早，致畸的可能性越大。血清學(xué)研究表明，感染過風(fēng)疹病毒的育齡婦女即使再被感染，懷孕后也不會對胎兒造成危害。但是，約有10%的育齡婦女屬于風(fēng)疹易感者，如果她們在懷孕的頭3個月內(nèi)是初次感染風(fēng)疹病毒，那么胎兒致畸率高達(dá)80%以上。這是因?yàn)?個月以內(nèi)的胎兒尚不具備合成干擾素的能力，難以抵制風(fēng)疹病毒的感染，以致風(fēng)疹病毒大量繁殖，阻滯細(xì)胞分裂，妨礙組織的分化，從而形成畸形，如兔唇、腭裂、小頭、白內(nèi)障、先天性聾啞、骨發(fā)育障礙等。（九）變異性風(fēng)疹病毒只有一個血清型，較穩(wěn)定。曾在我國流行的基因型有4種（1e、1f、2a和2b）。周淑潔、朱貞等曾對19992011年安徽省境內(nèi)分離到的72株e1基因

8、型風(fēng)疹病毒流行株進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其739個核苷酸高度保守，除8株在個別重要位點(diǎn)發(fā)生變異外，其余毒株的重要位點(diǎn)均未發(fā)生改變。（十）環(huán)境中的穩(wěn)定性風(fēng)疹病毒在環(huán)境中的穩(wěn)定性很差，對干燥、日光、高溫都沒有抵抗力。（十一）藥物敏感性目前，尚無針對風(fēng)疹病毒的特效藥物。（十二）消毒劑敏感性風(fēng)疹病毒抵抗力弱，對過氧乙酸、乙醇、碘伏等一般消毒劑均敏感。（十三）物理滅活風(fēng)疹病毒不耐熱，5630mim或371.5h均可將其滅活。（十四）在宿主體外存活風(fēng)疹病毒在體外的生存力很弱，離開宿主后很容易死亡。4保存不穩(wěn)定，在-7060可保持活力3個月，干燥冰凍下可保存9個月。（十五）與其他生物和環(huán)境的交互作用在高溫干燥的環(huán)境中

9、及紫外線照射下，風(fēng)疹病毒均很容易死亡。（十六）預(yù)防和治療方案1.預(yù)防措施 關(guān)鍵是主動免疫，接種風(fēng)疹減毒活疫苗是預(yù)防風(fēng)疹的最有效措施，通常以麻疹一風(fēng)疹一腮腺炎三聯(lián)疫苗形式聯(lián)合使用。此外，應(yīng)減少與風(fēng)疹病人面對面的接觸，不要與風(fēng)疹病人面對面地談話。孕婦應(yīng)盡量避免去公共場所。如果孕婦接觸了風(fēng)疹患者，5d內(nèi)應(yīng)注射大劑量的胎盤球蛋白，進(jìn)行被動免疫。如果孕婦在妊娠頭3個月內(nèi)確診患了風(fēng)疹，則需要考慮進(jìn)行人工流產(chǎn)。風(fēng)疹初愈的育齡婦女6個月內(nèi)最好不要懷孕。2.治療措施 風(fēng)疹無特效治療，在發(fā)熱期間，要注意臥床休息，可服用溫?zé)峤舛镜闹兴?，給予流質(zhì)或半流質(zhì)飲食。有并發(fā)癥者，可按并發(fā)癥處理。二、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)活動風(fēng)險評估與控

10、制（一）實(shí)驗(yàn)室感染性因子的種類、來源和危害1.感染性因子種類 本實(shí)驗(yàn)室可能的感染因子的為風(fēng)疹病毒本身。2.感染性因子的的來源用于風(fēng)疹病毒抗體檢測的血液樣本。樣本采集與檢測過程涉及的所有實(shí)驗(yàn)場所。實(shí)驗(yàn)室操作中可能產(chǎn)生的含病毒的氣溶膠。3.感染性因子可能造成的危害被污染的實(shí)驗(yàn)器材、器皿等對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。實(shí)驗(yàn)室廢棄物對環(huán)境造成污染。實(shí)驗(yàn)人員暴露后感染。實(shí)驗(yàn)室含病毒的氣溶膠對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染。（二）實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動過程中的風(fēng)險評估與控制1.實(shí)驗(yàn)方法風(fēng)險點(diǎn)識別 若采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之外的其他未經(jīng)確認(rèn)的實(shí)驗(yàn)方法，或在使用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之前未進(jìn)行技術(shù)確認(rèn)，操作時可能存在安全風(fēng)險。風(fēng)險控制措施

11、盡量采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或經(jīng)過充分驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)方法；在使用新的或變更過的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之前，必須經(jīng)過嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。2.樣本采集所用器材一次性采血針、真空采血管、消毒棉簽及一次性利器盒。風(fēng)險點(diǎn)識別采血過程中，工作人員與患者近距離接觸，患者咳嗽、打噴嚏時，病毒隨飛沫排出，很容易通過口、咽、鼻部及眼結(jié)合膜入侵工作人員，此時，風(fēng)險最大。若采樣操作不規(guī)范，則會發(fā)生樣本滴灑或?yàn)R出的情況，產(chǎn)生的氣溶膠存在感染操作者的風(fēng)險。若被風(fēng)疹患者的血液污染了破損皮膚、黏膜，或被含有風(fēng)疹病毒的血液污染了的針頭刺破皮膚，這種情況也不能完全排除被感染的可能。血液標(biāo)本濺灑出來，對環(huán)境造成污染。風(fēng)險控制措施采血前做好個人防

12、護(hù)，穿戴防護(hù)服、手套、口罩、護(hù)目鏡和帽子，最好讓患者本人也戴上口罩；用過的針頭直接放入利器盒內(nèi)，禁止用手直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮尼橆^重新套上針頭套；采血管用真空抗凝管，采好血后直立于試管架中，防止倒翻；消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專用袋中，統(tǒng)一消毒處理。3.樣本的包裝和運(yùn)輸所用器材真空采血管、95千帕樣品運(yùn)輸罐、b類標(biāo)本運(yùn)輸箱（un3373冷藏箱）、運(yùn)送車輛。風(fēng)險點(diǎn)識別若使用不合格包裝進(jìn)行運(yùn)輸，容器密封不嚴(yán)，將不能安全有效地防止運(yùn)輸過程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生污染擴(kuò)散的可能。風(fēng)險控制措施嚴(yán)格按照生物安全的要求，采用三層容器包裝：第一層采用真空采血管裝樣本，應(yīng)密閉防滲漏；第二層采用

13、95千帕樣品運(yùn)輸罐，可容納并保護(hù)第一層容器，密封不易破碎、耐壓力、防滲漏且易消毒；第三層采用b類標(biāo)本運(yùn)輸箱，要容納并保護(hù)、固定第二層容器，且易于消毒。樣本應(yīng)由中心專車運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。4.樣本接收風(fēng)險點(diǎn)識別若運(yùn)輸途中出現(xiàn)樣本管破裂、血液溢漏的情況，則可能對樣本接收人員造成污染。風(fēng)險控制措施樣本直接送至實(shí)驗(yàn)室，由專業(yè)檢驗(yàn)人員接收，接收樣本前做好個人防護(hù)，穿戴防護(hù)服、手套、口罩和帽子。若發(fā)生樣本管破裂，應(yīng)立即在生物安全柜內(nèi)將尚存留的樣本移出，廢棄物放入帶蓋的防刺破的塑料罐中，被污染的容器用0.5%過氧乙酸等消毒液浸泡后再清洗。5.樣品檢測所用器材離心機(jī)、生物安全柜、移液器、洗板機(jī)及酶標(biāo)儀等設(shè)備。風(fēng)險點(diǎn)識

14、別離心過程中離心管破裂產(chǎn)生大量氣溶膠，并造成離心機(jī)污染。實(shí)驗(yàn)操作過程中血液樣本揮灑產(chǎn)生氣溶膠，并造成人員污染或臺面、地面等環(huán)境污染。洗板、讀板時液體濺出污染設(shè)備表面或工作臺面。風(fēng)險控制措施所有檢測操作均在bsl-2實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，檢測人員在實(shí)驗(yàn)前按照二級生物安全防護(hù)要求做好個人防護(hù)；加樣移液操作在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，動作輕緩；判讀結(jié)果時，酶標(biāo)板應(yīng)輕拿輕放，避免液體濺出；待實(shí)驗(yàn)完畢，先消毒手部，再脫去手套并立即洗手。6.陽性樣本的保存所用器材 生物安全柜、移液器、帶螺旋蓋的塑料管及可密封的塑料凍存盒。風(fēng)險點(diǎn)識別 風(fēng)疹igm抗體陽性樣本若保存不當(dāng)，易造成人員或環(huán)境污染。風(fēng)險控制措施 按照二級生物安全防

15、護(hù)要求做好個人防護(hù)；樣本的保留在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，動作要輕緩；所有樣本的血清或血漿都保留在帶螺旋蓋的塑料管內(nèi)，再裝入可密封的塑料凍存盒中，置20以下冰箱內(nèi)保存，雙人雙鎖管理。7.陽性復(fù)核樣本的上送所用器材 帶螺旋蓋的塑料管、95千帕樣品運(yùn)輸罐、b類標(biāo)本運(yùn)輸箱（un3373冷藏箱）、運(yùn)送車輛。風(fēng)險點(diǎn)識別 若包裝不符合相應(yīng)生物安全等級的要求，或運(yùn)輸工具無安全保障，則易造成污染擴(kuò)散，甚至樣本丟失。風(fēng)險控制措施 陽性樣本上送應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)范“un33733層包裝”（同樣品采集），攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸許可證”，并由專車運(yùn)送，專業(yè)人員全程護(hù)送。8.實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒風(fēng)險點(diǎn)

16、識別工作完畢后，若不及時對工作臺面、生物安全柜等進(jìn)行消毒，則有可能會造成實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染或人員感染。風(fēng)險控制措施工作完畢后，及時對檢測所涉及的工作臺面、地面和生物安全柜進(jìn)行消毒，使用100倍稀釋的84消毒液擦拭，用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70%75%的酒精進(jìn)行擦拭消毒。待實(shí)驗(yàn)和消毒完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，并正確使用肥皂和流水洗手。9.廢棄物處置所用器材醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器。風(fēng)險點(diǎn)識別剩余的陽性樣本管是很大的污染源，采血過的針頭若處理不當(dāng)，則易產(chǎn)生人員刺傷風(fēng)險。風(fēng)險控制措施實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣本、酶標(biāo)反應(yīng)板，

17、及其他物品，均視為感染性廢棄物，需置于裝有醫(yī)療廢棄物專用袋的硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶中，于121高壓滅菌1520min后再運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。針頭、破碎玻璃等損傷性廢棄物必須放入利器盒，利器盒嚴(yán)禁再次打開，裝滿針頭等利器的一次性利器盒嚴(yán)禁再次打開，須密封好后，同上述垃圾一起處理。所有處理完畢的廢棄物集中存放，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集、集中處置。同時，做好交接記錄，所有相關(guān)記錄定期整理歸檔。（三）實(shí)驗(yàn)室常規(guī)活動中其他風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.電力風(fēng)險點(diǎn)識別若實(shí)驗(yàn)室沒有布置雙路供電，或電力供應(yīng)不穩(wěn)定，則有可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)活動突然中斷、實(shí)驗(yàn)設(shè)備停止工作等意外情況的發(fā)生，從而帶來相關(guān)安全風(fēng)險。預(yù)防控

18、制措施實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡量布置雙路供電，沒有布置雙路供電的應(yīng)配置備用電源，以確保高壓滅菌器、生物安全柜等重要設(shè)備的安全運(yùn)行。2.電氣操作風(fēng)險點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室活動涉及的電氣操作，包括實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉、安裝和維修;設(shè)備層內(nèi)ups、空調(diào)機(jī)組等電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過程可能產(chǎn)生觸電、電擊、電氣故障等風(fēng)險。預(yù)防控制措施電氣設(shè)備的設(shè)計(jì)及制造應(yīng)符合相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域內(nèi)若有380v的電源插座，需明確標(biāo)識，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進(jìn)行操作。新的、改裝過的或修理過的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員（如有資質(zhì)的電工）完成電氣安全測試和設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許使用。電氣設(shè)備使用人

19、員應(yīng)接受正確操作的培訓(xùn)，操作方式不降低電氣安全性。電氣設(shè)備使用人員要定期檢查設(shè)備可能引起電氣故障的破損。只有專業(yè)人員才可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作。采取措施對設(shè)備去污染，以降低維護(hù)人員感染的風(fēng)險。3.實(shí)驗(yàn)室給排水設(shè)施設(shè)備風(fēng)險點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。管道意外破裂、排水管道阻塞均可能導(dǎo)致感染性材料溢出，有污染實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境的風(fēng)險。預(yù)防控制措施實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有染菌物及器具，必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌，產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池進(jìn)行消毒處理，嚴(yán)禁直接排放。至少每月監(jiān)測糞大腸菌群，定期檢查實(shí)驗(yàn)室給排水管道各界面的密封

20、性，及時發(fā)現(xiàn)安全隱患。4.實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道風(fēng)險點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位可能存在密封不嚴(yán)的情況。當(dāng)感染性材料溢出時，有污染環(huán)境的風(fēng)險。預(yù)防控制措施所有管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位應(yīng)嚴(yán)格密封，并定期進(jìn)行檢查，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境。5.主要檢測儀器設(shè)備離心機(jī)風(fēng)險點(diǎn)識別在分離血清的過程中，若沒有做好平衡，可能存在離心管破裂、離心管蓋脫落、離心轉(zhuǎn)子和離心腔被污染的風(fēng)險。預(yù)防控制措施離心時配備耐離心壓力的且?guī)菪苌w的離心管，離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力；規(guī)范正確操作，定期維護(hù)，確保離心機(jī)性能正常；每次使用后做好清潔消毒和使用記錄，并定期進(jìn)行功能檢查。酶標(biāo)儀和洗板機(jī)風(fēng)

21、險點(diǎn)識別在使用酶標(biāo)儀和洗板機(jī)的過程中，可能存在陽性對照或在測樣品污染設(shè)備表面和工作臺面的風(fēng)險。預(yù)防控制措施酶標(biāo)儀每年強(qiáng)檢一次，中途再做一次期間核查；洗板機(jī)每年進(jìn)行一次功能檢查；在洗板、讀板時，要做到動作輕緩，小心操作；倘若有液體濺出，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理。6.生物安全設(shè)施設(shè)備生物安全柜風(fēng)險點(diǎn)識別若不按照安全柜操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)與檢測，其防護(hù)屏障效果會明顯降低，甚至消失，失去安全防護(hù)效果；若長時間使用或未及時更換hepa過濾膜，會使其功能喪失，造成工作窗口氣流速度降低或流向紊亂；使用后若不徹底消毒處理，對于清潔、維護(hù)人員將會產(chǎn)生污染。預(yù)防控制措施正確選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受相關(guān)的操作、維

22、護(hù)培訓(xùn)，日常操作和維護(hù)應(yīng)嚴(yán)格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說明書進(jìn)行；每年請有檢測資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、氣流、塵埃粒子、紫外線強(qiáng)度等關(guān)鍵要素的檢測，確保其性能正常；一旦造成污染，應(yīng)及時進(jìn)行消毒處理。高壓滅菌器風(fēng)險點(diǎn)識別若不按照高壓滅菌器操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)，其效果會明顯降低，甚至失效，失去去污染與無害化的作用；若長時間使用又不定期檢測滅菌效果，對其滅菌效果無從考證，可能導(dǎo)致功能缺損，存在滅菌不徹底從而引起污染的隱患；在長期關(guān)停期間，若內(nèi)部水分不及時排干，將會導(dǎo)致內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。預(yù)防控制措施采用下排式高壓滅菌器，防止氣溶膠污染；規(guī)范操作，定期維護(hù)，確保高壓滅菌器性能正常；定

23、期檢定、核查，做好使用記錄，操作人員持證上崗；日常進(jìn)行滅菌效果監(jiān)測，以保證滅菌質(zhì)量。個人防護(hù)用品風(fēng)險點(diǎn)識別個人防護(hù)用品若穿戴不規(guī)范、大小不合適或使用過期的防護(hù)用品等，則將會導(dǎo)致防護(hù)效果降低，甚至失效。預(yù)防控制措施進(jìn)行與風(fēng)疹病毒血清學(xué)相關(guān)操作時要按二級生物安全防護(hù)水平進(jìn)行個人防護(hù)，必須選擇大小合適、有效的防護(hù)用品，穿戴時相互檢查確認(rèn)，避免使用有破損、缺陷和過期的防護(hù)用品。應(yīng)急救治設(shè)施和用品風(fēng)險點(diǎn)識別實(shí)驗(yàn)室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不合適或過期，則會導(dǎo)致急用時無法發(fā)揮作用。預(yù)防控制措施在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)正確配備洗眼器，確保其功能正常。配備的75%乙醇、碘伏

24、或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實(shí)驗(yàn)活動相適應(yīng)，并在有效期內(nèi)使用，專人負(fù)責(zé)管理，定期維護(hù)、清理和更新。消毒滅菌劑風(fēng)險點(diǎn)識別消毒產(chǎn)品無生產(chǎn)許可證、過期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，都將會導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低、或?qū)ξ锲犯g性增加、對皮膚造成刺激等問題。預(yù)防控制措施選擇符合國家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時間和消毒濃度（劑量）進(jìn)行消毒，避免使用過期產(chǎn)品；消毒過程中，消毒人員應(yīng)做好必要的個人防護(hù)，防止發(fā)生意外。風(fēng)疹病毒抵抗力弱，對一般消毒劑均敏感。本實(shí)驗(yàn)室選用84消毒液（主要成分為次氯酸鈉）、碘伏、75%酒精、漂白粉等，就作為常用消毒劑。

25、7.管理體系的風(fēng)險風(fēng)險點(diǎn)識別管理體系（包括應(yīng)急預(yù)案）、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程都是確保生物安全的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理，體系檔與實(shí)際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)?，就都可能帶來安全風(fēng)險。預(yù)防控制措施定期開展對管理體系的評審，發(fā)現(xiàn)問題及時修訂、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效地運(yùn)行。（四）工作人員的風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.風(fēng)險點(diǎn)識別人員數(shù)量人員過少會因缺少相互提示或因工作量增大而導(dǎo)致操作過程中工作失誤增加，風(fēng)險增加。人員結(jié)構(gòu)及資質(zhì)新進(jìn)人員若沒有高資歷人員帶教操作，則不能很好地處理意外事件，風(fēng)險會增加。實(shí)驗(yàn)人員不熟悉實(shí)驗(yàn)檢測方法及操作規(guī)范，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前未進(jìn)行

26、相關(guān)的專業(yè)知識培訓(xùn)，無法保證工作質(zhì)量和安全。職業(yè)操守責(zé)任心不強(qiáng)的人員參與該項(xiàng)工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會安定的可能性較大。健康管理健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng)身體出現(xiàn)呼吸道癥狀、腹瀉等胃腸道癥狀、手部皮膚有開放性損傷或其他不適合工作的情況，職業(yè)暴露風(fēng)險會增加。生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件處理能力工作人員上崗前沒有接受嚴(yán)格的生物安全和相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易導(dǎo)致生物安全事故的發(fā)生。上崗后，沒有接受實(shí)驗(yàn)室突發(fā)事件處理的培訓(xùn)，一旦發(fā)生意外事件，就不能有效地進(jìn)行早期處理和控制生物安全事件。2.預(yù)防控制措施人員數(shù)量盡量有2名工作人員同時進(jìn)行采樣、檢測或有質(zhì)量監(jiān)督

27、員對關(guān)鍵步驟進(jìn)行監(jiān)督。人員結(jié)構(gòu)及資質(zhì)實(shí)驗(yàn)室檢測人員的年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理，新進(jìn)人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作。檢測技術(shù)人員需經(jīng)過上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)。要求掌握相關(guān)專業(yè)知識和技能，能獨(dú)立熟練地操作，并經(jīng)考核合格，持證上崗。職業(yè)操守加強(qiáng)職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。健康管理健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng)身體出現(xiàn)呼吸道癥狀或其他不適合工作的情況，職業(yè)暴露風(fēng)險會增加。生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件處理能力檢測人員必須接受上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，每年參加本中心組織的生物安全知識或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室意外事故和職業(yè)性疾病報告制度和病原微生物生物安全應(yīng)急處置技

28、術(shù)方案中規(guī)定的要求進(jìn)行應(yīng)急事件的處置，強(qiáng)化職業(yè)暴露的應(yīng)急處理能力，規(guī)范工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場急救處理辦法。（五）實(shí)驗(yàn)室非常規(guī)活動中的風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.實(shí)驗(yàn)室主要的非常規(guī)活動檢測外專業(yè)人員對實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、維修、檢測驗(yàn)證（如主要設(shè)施設(shè)備的檢測驗(yàn)證）和更換（如高效過濾器等的更換）。實(shí)驗(yàn)室后勤保障人員對實(shí)驗(yàn)室及公共環(huán)境進(jìn)行保潔，對實(shí)驗(yàn)器材進(jìn)行洗刷消毒。外部人員來實(shí)驗(yàn)室參觀及上級部門對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查。任何其他人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動以外的行為。2.風(fēng)險點(diǎn)識別進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室可能存在實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險，特別是在不慎打翻、打破血管或損壞儀器部件情況下。實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過程中某些人員需要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室參觀，

29、存在影響實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)行的風(fēng)險。3.預(yù)防控制措施實(shí)行人員準(zhǔn)入、登記制度。外部人員來進(jìn)行參觀或檢查前，應(yīng)對實(shí)驗(yàn)室作徹底毒；任何外來人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時應(yīng)有實(shí)驗(yàn)室人員陪同。進(jìn)入人員絕對不能私自動用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有標(biāo)識的危險品，絕不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實(shí)驗(yàn)區(qū)。在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過程中，若發(fā)生意外事件，應(yīng)立即報告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，進(jìn)行風(fēng)險評估，并采取應(yīng)對措施。對實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)維修工作時應(yīng)動作輕柔，避免產(chǎn)生氣溶膠。檢測維修后、離開實(shí)驗(yàn)室前，必須洗手。（六）被誤用和惡意使用的風(fēng)險與預(yù)防控制措施1.風(fēng)險點(diǎn)識別 若陽性標(biāo)本未明確標(biāo)識并未實(shí)施雙人雙鎖管理，實(shí)驗(yàn)活動結(jié)束后不及時對操作場所進(jìn)行消毒，其

30、他工作人員在不知情的情況下可能會誤用標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備等，從而導(dǎo)致人員感染和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染等。2.預(yù)防控制措施實(shí)行嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。所有獲得批準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的人員，必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)施設(shè)備。發(fā)生事故時必須及時報告并作必要的處理和記錄。實(shí)驗(yàn)所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識。陽性標(biāo)本嚴(yán)格實(shí)施雙人雙鎖管理。（七）相關(guān)實(shí)驗(yàn)室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示目前，因風(fēng)疹病毒檢測明確引起實(shí)驗(yàn)室人員感染的相關(guān)報導(dǎo)很少，但任何一種病原微生物都有可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室感染的風(fēng)險。因此，工作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室相關(guān)規(guī)定，做好個人防護(hù)和規(guī)范操作，降低和規(guī)避職業(yè)暴露風(fēng)險。三、實(shí)驗(yàn)室理化因素風(fēng)險

31、評估及安全防護(hù)措施（）紫外線1.風(fēng)險點(diǎn)識別 生物安全柜及bsl-2實(shí)驗(yàn)室均使用紫外線燈進(jìn)行物體表面消毒。紫外線波長為250280nm，主要影響眼睛和皮膚，可引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼部疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈開啟時，若人員在不知情的情況下進(jìn)入，則可能會受到傷害。2.安全防護(hù)措施 在實(shí)驗(yàn)室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面應(yīng)貼有紫外線危害的標(biāo)識。在進(jìn)行紫外線消毒時，實(shí)驗(yàn)人員盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域，基本可以規(guī)避紫外線對人體的危害。（二）建設(shè)1.風(fēng)險點(diǎn)識別 實(shí)驗(yàn)室籌建選址時未對周圍輻射源進(jìn)行排查，使用含輻射的儀器時未進(jìn)行嚴(yán)格管理，存在輻射源或輻射事故間接導(dǎo)致病原微生

32、物屏障系統(tǒng)破壞的隱患。2.預(yù)防控制措施 實(shí)驗(yàn)室籌建選址時，嚴(yán)格排查周邊建筑群的輻射源。（三）84消毒劑1.風(fēng)險點(diǎn)識別 84消毒液屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為4.55%5.55%，次氯酸鈉為主要?dú)⒕蜃?。含氯的消毒液會殘留在空氣中不揮發(fā)，長期使用會使人感到頭疼、惡心。對于有過敏體質(zhì)的人，還容易引發(fā)過敏、哮喘等疾病。高濃度的含氯消毒劑對人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的刺激作用，可使人流淚、咳嗽，并刺激皮膚和黏膜，嚴(yán)重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者會出現(xiàn)躁動、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。2.安全防護(hù)措施 按照使用說明，根據(jù)消毒對象不同而配制不同的濃度，避免使用不必要的高濃度的消毒液，稀釋

33、和使用時戴好手套，消毒后及時開窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對人體的危害。（四）其他1.風(fēng)險點(diǎn)識別 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能因強(qiáng)光和噪聲而對人員造成損害。2.安全防護(hù)措施 對實(shí)驗(yàn)室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測，確保合格，避免強(qiáng)光和噪聲對人員造成損害。四、實(shí)驗(yàn)室火災(zāi)風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.風(fēng)險點(diǎn)識別超負(fù)荷用電，電線過長。電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，如電纜的絕緣層破舊或損壞。用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。儀器設(shè)備在不使用時未關(guān)閉電源。使用的儀器設(shè)備不是專為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)。易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。不兼容化學(xué)品沒有正確隔離。在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。2.預(yù)防

34、控制措施定期檢查電器插座、電線絕緣層是否完好，保證用電負(fù)荷，對易燃、易爆等危險品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。實(shí)驗(yàn)室配備滅火器。放置在易取的地點(diǎn)，擺放部位張貼滅火器標(biāo)識。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)，幫助人員撤離火場；對滅火器進(jìn)行定期檢查和維護(hù)，確保其有效使用。實(shí)驗(yàn)室需裝設(shè)應(yīng)急燈，所有出口都有黑暗中可見的“緊急出口”標(biāo)識。當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時，實(shí)驗(yàn)室所有出口的鎖必須處于開啟狀態(tài)，出口的設(shè)計(jì)應(yīng)確保不經(jīng)過高危險區(qū)域就能逃脫，所有出口都能通向一個開放空間。走廊、流通區(qū)域不放置障礙物，確保人員流動和滅火設(shè)備移動不受影響。在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標(biāo)識。實(shí)驗(yàn)室每年對工作人員進(jìn)行消防知識培訓(xùn)，包括消防器材的使用、

35、火災(zāi)發(fā)生時的應(yīng)急行動等。五、自然災(zāi)害風(fēng)險評估與安全防護(hù)措施自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。（一）水災(zāi)1.風(fēng)險點(diǎn)識別水災(zāi)可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性材料隨水外溢。2.安全防護(hù)措施在安全手冊中制訂實(shí)驗(yàn)室緊急事件應(yīng)急預(yù)案，并對所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生水災(zāi)報警時，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、中心主任根據(jù)條件及時采取對策，第一時間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)措施，并在受過訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)室工作人員陪同下，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室完成感染性物質(zhì)和人員的安全轉(zhuǎn)移。（二）地震1.風(fēng)險點(diǎn)識別 發(fā)生地震等自然災(zāi)害會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室維護(hù)

36、結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，導(dǎo)致人員傷害和實(shí)驗(yàn)室感染性材料外溢。2.風(fēng)險控制措施 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來的風(fēng)險，保證災(zāi)害發(fā)生后能夠安全撤離實(shí)驗(yàn)室，減少對人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立距實(shí)驗(yàn)室維護(hù)結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次，對封鎖區(qū)進(jìn)行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個人防護(hù)的前提下對實(shí)驗(yàn)內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理。如果保藏樣品的容器沒有被破壞，可把它安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實(shí)驗(yàn)室存放。如果保藏樣品的容器巳被破壞、發(fā)生外溢，則應(yīng)立即用可靠方法進(jìn)行徹底消毒滅菌。六、生物安全及其他緊急事件（事故）處理預(yù)案（一）實(shí)驗(yàn)室生物安全事件（事故）處理措施1.安全柜持續(xù)正壓 當(dāng)生物安全柜出現(xiàn)持續(xù)正壓時，應(yīng)立即停止操作

37、，通知運(yùn)行保障人員采取措施恢復(fù)負(fù)壓。如果不能及時恢復(fù)和保持負(fù)壓，應(yīng)停止實(shí)驗(yàn)。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電，造成具有傳染性物質(zhì)暴露潛在危險的事故和污染時，工作人員除了采取緊急措施外，還應(yīng)立即報告實(shí)驗(yàn)室安全負(fù)責(zé)人，組織對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。2.離心管破裂 在離心過程中離心管破裂時，應(yīng)馬上關(guān)閉電源，讓離心機(jī)停止工作，并靜止30min。然后緩慢打開離心機(jī)蓋，將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，則用1%的次氯酸鈉消毒液灌入離心杯腔體中消毒30min，然后棄去消毒液和離心管碎片，將離心杯清洗后擦干。3.污染物潑濺或溢出 發(fā)生污染物潑賤或溢出時，應(yīng)立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上1025倍稀釋

38、的84消毒液，作用至少30min，方可清理全部污染物，用消毒劑擦拭污染區(qū)域時。所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。若發(fā)生大范圍污染物擴(kuò)散事故時，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場。待其查清情況，確定消毒方案，組織對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行終末消毒。4.發(fā)生空氣污染發(fā)生空氣污染時，可采用低溫蒸汽甲醛氣體進(jìn)行消毒。甲醛有致癌作用，故不宜用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。5.針頭刺傷或血液標(biāo)本濺灑若發(fā)生針頭刺傷或血液標(biāo)本濺灑，人員、器具或環(huán)境受到污染及其他意外時，應(yīng)及時采取有效的消毒處理措施。被采血針頭刺傷應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗，盡可能擠出損傷處的血液，并用碘伏等有效消毒劑對傷口進(jìn)行消毒處理。皮膚

39、或黏膜污染對于皮膚受污染部位可用肥皂和大量流水沖洗，并用75%酒精或碘伏等有效消毒劑進(jìn)行消毒處理；對于黏膜受污染則用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。物品或環(huán)境污染耐煮沸的物品煮沸20min后清洗，對不能煮沸的物品可用1%漂白粉或0.5%過氧乙被等消毒劑浸泡2h后再用清水洗滌；地面、墻面等環(huán)境受到污染時可用3%漂白粉、2%過氧乙酸等消毒液噴霧進(jìn)行消毒或擦洗2次?；颊呙土铱人?、打噴嚏或樣本濺灑產(chǎn)生大量氣溶膠工作人員在采樣結(jié)束時，應(yīng)盡可能對手套、口罩、護(hù)目鏡等個人防護(hù)用品進(jìn)行噴灑消毒后再摘除，然后對手部及面部進(jìn)行徹底清洗。（二）其他緊急事件（事故）處理措施在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救

40、助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實(shí)驗(yàn)室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實(shí)驗(yàn)室的布局和設(shè)備。所有實(shí)驗(yàn)室人員須了解緊急撤離的行動計(jì)劃、撤離路線和集合地點(diǎn)。每年至少參加一次緊急撤離演習(xí)，包括急救設(shè)備的使用和采取相應(yīng)急救措施。（三）生物安全及其他緊急事件（事故）報告和記錄發(fā)生生物安全及其他緊急事件時，在緊急處理的同時必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會報告。對于生物安全事件必須進(jìn)行登記，記錄發(fā)生的時間、地點(diǎn)及詳細(xì)經(jīng)過、處理方法等。七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險管理（一）生物安全風(fēng)險評估依據(jù)風(fēng)險評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會、世界衛(wèi)生組織、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織等機(jī)構(gòu)

41、或行業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南、標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。（二）危險發(fā)生的概率評估（見表4-1）表4-1風(fēng)疹病毒危險發(fā)生的概率評估序號潛在危險因素危害程度發(fā)生概率固有風(fēng)險措施合理性殘留風(fēng)險風(fēng)險可控程度1采血過程中患者咳嗽或打噴嚏導(dǎo)致其飛沫入侵采血人員口、鼻或眼結(jié)合膜高度可能高度合理低風(fēng)險可控2樣本運(yùn)輸過程中容器意外側(cè)翻、破裂導(dǎo)致樣本泄漏中度可能中度合理低風(fēng)險可控3樣本接收、開啟及加樣等常規(guī)實(shí)驗(yàn)活動中產(chǎn)生氣溶膠中度較大可能中度合理低風(fēng)險可控4離心過程中樣本管破裂產(chǎn)生大量氣溶膠中度可能中度合理低風(fēng)險可控5檢測未經(jīng)滅活的樣本對儀器與環(huán)境造成污染中度較大可能中度合理低風(fēng)險可控6樣本、實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)施設(shè)備等被誤用中度較小可

42、能中度合理低風(fēng)險可控7陽性樣本被惡意使用中度較小可能中度合理低風(fēng)險可控8廢棄物處理不當(dāng)造成病原微生物的擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險可控9檢測人員及工勤人員破損的皮膚、黏膜接觸到血液樣本或被銳器刺傷等造成職業(yè)暴露中度可能中度合理低風(fēng)險可控10檢測人員個人防護(hù)不當(dāng)造成病原微生物的擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險可控11非檢測人員、進(jìn)修實(shí)習(xí)等外來人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的不當(dāng)操作造成病原微生物的擴(kuò)散中度可能中度合理低風(fēng)險可控12水、電、火災(zāi)或自然災(zāi)害造成病原微生物的擴(kuò)散中度較小可能中度合理低風(fēng)險不可控（三）風(fēng)險評估人員由中心主任組織檢驗(yàn)科、質(zhì)量管理科及其他熟悉風(fēng)疹病毒檢驗(yàn)相關(guān)風(fēng)險的專業(yè)人員進(jìn)行風(fēng)險評估并形成風(fēng)險評估報

43、告。形成的風(fēng)險評估報告經(jīng)中心生物安全委員會審核，請省市熟悉相關(guān)病原微生物特征、實(shí)驗(yàn)設(shè)施設(shè)備、操作規(guī)程及個體防護(hù)設(shè)備的不同領(lǐng)域的專家進(jìn)行評估和討論，不斷修訂完善。（四）風(fēng)險評估報告風(fēng)險評估報告應(yīng)是實(shí)驗(yàn)室采取風(fēng)險控制措施、建立安全管理體系和制訂安全操作規(guī)程的依據(jù)。在記錄風(fēng)險評估的過程中，風(fēng)險評估報告應(yīng)注明評估時間、編審人員和所依據(jù)的法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、研究報告、權(quán)威數(shù)據(jù)及數(shù)據(jù)等。定期進(jìn)行風(fēng)險評估或風(fēng)險評估報告復(fù)審，評估的周期應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)活動和風(fēng)險特征而確定。（五）需重新進(jìn)行風(fēng)險評估的情況二級生物安全實(shí)驗(yàn)室改造前（或新建造前）和正式啟用前。當(dāng)收集到的數(shù)據(jù)表明風(fēng)疹病毒的致病性或傳染方式發(fā)生變化時，應(yīng)對其背景數(shù)據(jù)

44、進(jìn)行及時變更，并對其實(shí)驗(yàn)操作的安全性進(jìn)行重新評估。開展新的實(shí)驗(yàn)活動（增加新的項(xiàng)目），應(yīng)對該項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)活動進(jìn)行再評估。生物安全實(shí)驗(yàn)室操作人員在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)活動中，發(fā)現(xiàn)有原評估報告中未涉及的隱患存在，或者在檢查過程中發(fā)現(xiàn)存在生物安全問題，應(yīng)進(jìn)行再評估。在實(shí)驗(yàn)活動中發(fā)生陽性標(biāo)本泄露或人員感染等意外事件或事故時，應(yīng)立即進(jìn)行再評估。當(dāng)評估過的實(shí)驗(yàn)活動（包括相關(guān)的設(shè)施、設(shè)備、人員、活動范圍、管理等）發(fā)生改變或者操作超出常規(guī)量，以及從事某些特殊活動時，應(yīng)該事先或重新進(jìn)行風(fēng)險評估。相關(guān)政策、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等發(fā)生變化時需要風(fēng)險再評估。（六）對風(fēng)險、需求、資源、可行性、適用性等的綜合評估中心已對生物安全二級實(shí)驗(yàn)室所涉及的

45、所有活動內(nèi)容進(jìn)行了全面的風(fēng)險評估，并根據(jù)風(fēng)險的內(nèi)容巳逐項(xiàng)制訂了可行的、適用的防控措施。評估報告不僅適用于實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備的常規(guī)運(yùn)行，而且適用于實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備進(jìn)行清潔、維護(hù)及關(guān)停期間。生物安全二級實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動中未涉及化學(xué)、物理、輻射等相關(guān)檢測和研究內(nèi)容，因此，不存在相應(yīng)的風(fēng)險。實(shí)驗(yàn)室所在的地理位置海拔較高，建筑材料可抗六級地震，能夠抵抗水災(zāi)、地震等災(zāi)害。八、評估結(jié)論（一）危害等級中華人民共和國傳染病防治法規(guī)定，風(fēng)疹屬丙類傳染病，原衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄、who實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊規(guī)定，風(fēng)疹病毒危害程度為第三類、危險度等級為級。（二）實(shí)驗(yàn)活動及生物安全防護(hù)水平原衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄

46、規(guī)定動物感染實(shí)驗(yàn)在absl-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，病毒培養(yǎng)、未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在bsl-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，滅活材料的操作、無感染性材料的操作在bsl-1實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。本實(shí)驗(yàn)室主要進(jìn)行風(fēng)疹病毒血清學(xué)檢測，從事未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料操作，實(shí)驗(yàn)活動均在二級生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，采取了二級生物安全防護(hù)水平。實(shí)驗(yàn)室配備的生物安全柜、高壓滅菌器等設(shè)備符合管理和檢測的要求，并嚴(yán)格按照規(guī)定的操作程序進(jìn)行操作。本實(shí)驗(yàn)室風(fēng)疹病毒血清學(xué)檢測所依據(jù)的方法為ws2972008風(fēng)疹診斷標(biāo)準(zhǔn)。該方法是原衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)，在項(xiàng)目開展時已經(jīng)過技術(shù)確認(rèn)，實(shí)驗(yàn)方法風(fēng)險很小。（三）人員健康及素質(zhì)實(shí)驗(yàn)人員及相關(guān)輔助人員在上崗前均經(jīng)過充分的生物安全、專

47、業(yè)知識及操作技能的培訓(xùn)，考核合格后持證上崗，新上崗人員和進(jìn)修人員經(jīng)過培訓(xùn)，并在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下從事檢測工作。（四）防治原則目前，接種風(fēng)疹減毒活疫苗是預(yù)防風(fēng)疹的有效措施，通常以麻疹風(fēng)疹腮腺炎三聯(lián)疫苗形式聯(lián)合使用，未接種的工作人員最好及時補(bǔ)種。臨床上，針對風(fēng)疹以對癥支持療法為主，無特效藥物。因呼吸道傳播為其主要傳播途徑，實(shí)驗(yàn)室工作人員在實(shí)驗(yàn)活動過程中，尤其是面對面給患者采集血液樣本時，應(yīng)加強(qiáng)個人防護(hù)，規(guī)范操作，避免與患者面對面談話，對所涉及的器械實(shí)施嚴(yán)格消毒；安全處置廢棄物；嚴(yán)格洗手和對手進(jìn)行消毒。（五）管理體系和應(yīng)急預(yù)案相關(guān)管理體系文件如生物安全柜操作規(guī)程mls-3750高壓滅菌器操作規(guī)程離心機(jī)操

48、作規(guī)程elx800型洗板機(jī)操作規(guī)程微生物實(shí)驗(yàn)室廢棄物及容器的處理操作規(guī)程樣品管理程序等經(jīng)過技術(shù)委員會的評審證明是有效和安全的。實(shí)驗(yàn)室對制訂的實(shí)驗(yàn)室意外事故和職業(yè)性疾病報告制度和病原微生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案，經(jīng)過培訓(xùn)和反復(fù)演練，能確保一旦發(fā)生意外感染事件時能有效應(yīng)時，把危害控制在最小范圍和最低限度。綜上所述，本實(shí)驗(yàn)室在人員素質(zhì)、設(shè)施設(shè)備、實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)方法、管理體系、廢棄物處置等方面均能滿足開展風(fēng)疹病毒血清學(xué)檢測相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動的安全管理要求，實(shí)驗(yàn)過程中的風(fēng)險是可控的，實(shí)驗(yàn)人員的健康與安全是有保障的，不會對周圍環(huán)境產(chǎn)生危害。瑞安疾控中心 病原微生物風(fēng)險評估報告文件編號： 版本/修訂號：a/0主題內(nèi)

49、容 麻疹病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告生效日期：20170701第 58 頁 共346 頁麻疹病毒實(shí)驗(yàn)活動風(fēng)險評估報告一、生物學(xué)特性（一）種類和病毒分型麻疹病毒（measlesvirus）是麻疹的病原體，分類上屬于副粘病毒科麻疹病毒屬。電鏡下麻疹病毒呈球狀或絲狀，直徑約120250nm，有包膜，核衣殼呈螺旋對稱，核心為單負(fù)鏈rna，不分節(jié)段，基因組全長約16kb，包括n、p、m、f、h、l6個基因，分別編碼6個結(jié)構(gòu)和功能蛋白。麻疹病毒的抗原性較穩(wěn)定，只有一個血清理，但近年來的研究證明，麻疹病毒抗原體也有小的變異。根據(jù)麻疹病毒核蛋白基因c末端高變區(qū)或全長血凝素基因特點(diǎn)，可以將野生型麻疹病毒分為ah8個

50、基因群，包括23個基因型。（二）來源早在東漢時期，我國張仲景在金匱要略中就有關(guān)于麻疹的描述，并認(rèn)為麻疹是一種傳染性很強(qiáng)的疾病。國外在公元10世紀(jì)，波斯醫(yī)生拉茲才開始描述該病，直到1675年才認(rèn)為麻疹是一種獨(dú)立的疾病。1864年，貝納肯定了麻疹是通過呼吸道播散的，是由人傳給人的疾病，潛伏期為14d，可獲終生免疫。1911年，哥特貝格等用急性期患者的血液及咽拭子感染了猴子，證實(shí)了麻疹病原是一種濾過性病毒。1930年，勃來茲應(yīng)用雞胚培養(yǎng)麻疹病毒獲得成功。1954年，恩多等用人胚腎及人羊膜細(xì)胞培養(yǎng)病毒取得成功，為深入研究麻疹奠定了實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。1963年，美國成功地應(yīng)用了經(jīng)雞胚羊膜腔適應(yīng)和雞胚單層細(xì)胞傳

51、代的減毒株制備了疫苗。我國也于1965年自行研制了減毒活疫苗并開始普種，從此，麻疹的發(fā)病率和死亡率大幅度降低。（三）傳染源人是麻疹病毒的唯一宿主，因此，病人是唯一的傳染源。急性期患者為最重要的傳染源，無癥狀帶病毒者和隱性感染者較少，傳染性也較低。在患者出疹前6d至出疹后3d內(nèi)均具有傳染性，前驅(qū)期傳染性最強(qiáng)，出疹后逐漸減低，疹消退時已無傳染性。傳染期患者口、鼻、咽、眼結(jié)合膜分泌物均含有病毒，恢復(fù)期不帶病毒。（四）傳播途徑主要經(jīng)呼吸道飛沫傳播。病人咳嗽、打噴嚏時，病毒隨排出的飛沫經(jīng)口、咽、鼻部或眼結(jié)合膜侵入易感者。密切接觸者亦可經(jīng)污染病毒的手傳播，通過第三者或衣物間接傳播較為少見。（五）易感性人群

52、普遍易感，易感者接觸患者后90%以上會發(fā)病，病后可獲持久免疫力。6個月內(nèi)的嬰兒因從母體獲得抗體，因此，很少患病，該病主要在6個月至5歲小兒間流行。目前，成人麻疹病例的報導(dǎo)越來越多，甚至在局部地區(qū)有小的流行。其主要原因?yàn)橛讜r接種過麻疹疫苗，以后未再復(fù)種，導(dǎo)致體內(nèi)抗體的水平降低而使其成為易感者。（六）潛伏期潛伏期為621d，平均為10d左右，接種過麻疹疫苗者可延長至34周。（七）劑量效應(yīng)關(guān)系目前，尚未見有麻疹病毒對人準(zhǔn)確感染劑量的報導(dǎo)，麻疹病毒的感染主要與暴露途徑和感染方式相關(guān)。（八）致病性因?yàn)閏d46是麻疹病毒受體，所以，具有cd46的大多數(shù)組織細(xì)胞均可為麻疹病毒感染的靶細(xì)胞。經(jīng)呼吸道進(jìn)入的病毒

53、首先與呼吸道上皮細(xì)胞受體結(jié)合并在其中增殖，再侵入淋巴結(jié)增殖，然后入血（在白細(xì)胞內(nèi)增殖良好），形成第一次病毒血癥。病毒到達(dá)全身淋巴組織后進(jìn)行大量增殖，再次入血，形成第二次病毒血癥。此時，開始發(fā)熱，以及由于病毒在結(jié)膜、鼻咽黏膜和呼吸道黏膜等處增殖而出現(xiàn)的上呼吸道卡他癥狀。病毒還可在真皮層內(nèi)增殖，口腔兩頰內(nèi)側(cè)黏膜出現(xiàn)中心灰白、周圍紅色的koplik斑。發(fā)病3d后，患者可出現(xiàn)米糠樣皮疹，皮疹形成的原因主要是局部產(chǎn)生超敏反應(yīng)。一般患兒皮疹出現(xiàn)24h后，體溫開始下降，呼吸道癥狀一周左右消退，皮疹變暗，有色素沉著。有些年幼體弱的患兒，易并發(fā)細(xì)菌性感染，如繼發(fā)性支氣管炎、中耳炎，尤其是易患細(xì)菌性肺炎，這是麻疹

54、患兒死亡的主要原因。麻疹病毒感染后，大約有0.1%的患者會發(fā)生腦脊髓炎，它是一種遲發(fā)型超敏反應(yīng)性疾病，常于病愈1周后發(fā)生，呈典型的脫髓鞘病理學(xué)改變及明顯的淋巴細(xì)胞浸潤，常留有永久性后遺癥，病死率為15%。免-疫缺陷兒童感染麻疹病毒，常無皮疹，但可發(fā)生嚴(yán)重致死性麻疹巨細(xì)胞肺炎。另外，約百萬分之一的麻疹兒童患者在其恢復(fù)后若干年，多在學(xué)齡期前出現(xiàn)亞急性硬化性全腦炎（subacutesclerosingpanencephalitis，sspe）。sspe屬急性感染的遲發(fā)并發(fā)癥，表現(xiàn)為漸進(jìn)性大腦衰退，一般12年內(nèi)死亡。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，患者血清及腦脊液中雖有高效價的igg或igm抗麻疹病毒抗體，但是用這些抗體很難分離出麻疹病毒?，F(xiàn)認(rèn)為，腦組織中的病毒為麻疹缺陷病毒，由于在腦細(xì)胞內(nèi)病毒m基因變異而缺乏合成麻疹病毒m蛋白的能力，從而影響病毒的裝配、出芽及釋放。因此，將sspe腦組織細(xì)胞與對麻疹病毒敏感細(xì)胞（如hela、ver0等）共同培養(yǎng)，可分離出麻疹病毒。（