PCR生物安全和防污染措施

1、標本采集時生物安全標本采集時生物安全 嚴格按照生物安全和院感要求措施。嚴格按照生物安全和院感要求措施。 嚴格執(zhí)行消毒隔離制度和采集技術要求。嚴格執(zhí)行消毒隔離制度和采集技術要求。 注意利器和廢棄物的處理。注意利器和廢棄物的處理。三、標本運送三、標本運送o 實驗室布局應盡量滿足及時送檢和方便患者。實驗室布局應盡量滿足及時送檢和方便患者。o PCRPCR標本接收不宜放在標本制備區(qū)。標本接收不宜放在標本制備區(qū)。o 盡可能及時送檢：靶核酸是盡可能及時送檢：靶核酸是DNADNA，應在采血后，應在采血后8 8小時內送到實驗室，靶核酸是小時內送到實驗室，靶核酸是RNARNA，應在采，應在采血后血后4 4小時內

2、送檢并處理。時間較長，應加冰小時內送檢并處理。時間較長，應加冰運送和保存。運送和保存。o 加入適當?shù)姆€(wěn)定劑，如加入適當?shù)姆€(wěn)定劑，如GITC(GITC(異硫氰酸胍鹽）。異硫氰酸胍鹽）。標本運送的生物安全標本運送的生物安全o 注意生物安全，防止標本損失和生物污染。注意生物安全，防止標本損失和生物污染。o 使用合適容器轉運標本，帶蓋的透明轉運盒，使用合適容器轉運標本，帶蓋的透明轉運盒，有生物危害標識。有生物危害標識。標本運送的防污染標本運送的防污染o 在無菌條件下及時運送。在無菌條件下及時運送。o RNARNA檢測，應加冰運送。檢測，應加冰運送。o 專人驗收標本專人驗收標本o 實驗室在標本接收時應有

3、其狀態(tài)的詳細記錄實驗室在標本接收時應有其狀態(tài)的詳細記錄. .o 標本質量的驗收標本質量的驗收o 血清（漿）標本：肉眼可見的溶血、脂血血清（漿）標本：肉眼可見的溶血、脂血o 分泌物標本：泌尿生殖道分泌物，鏡檢觀察是分泌物標本：泌尿生殖道分泌物，鏡檢觀察是否有上皮細胞；痰標本中應有白細胞。否有上皮細胞；痰標本中應有白細胞。 實驗室生物安全v依據(jù)：依據(jù)：上海市一、二級病原微生物實驗室上海市一、二級病原微生物實驗室生物安全管理規(guī)范生物安全管理規(guī)范v原則：原則： 預防為主、分級管理、單位負責、預防為主、分級管理、單位負責、突出重點、保障安全突出重點、保障安全 實驗室生物安全v要求：應建立健全生物安全管理

4、制度，編寫生物安全手冊v實驗室范圍：BSL-1和BSL-2防護等級的病原微生物相關實驗活動的場所。v項目范圍：實驗室從事與衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄中所規(guī)定的病原微生物菌毒種、樣品有關的研究、教學、檢測、診斷等活動。 實驗室生物安全v管理要求：組織管理、備案 、人員管理、菌（毒）種管理、實驗室環(huán)境、設備與器材的消毒和廢棄物的處置、應急處置。v技術要求：生物危害評估、設施設備、個人防護、安全操作。v概括成三個部分：v實驗室生物安全管理v實驗室設施、設備、個人防護裝備、v良好的微生物操作技術v實驗室防護分為v一級屏障（primary burier）-實驗室設備和個人防護裝備v二級屏障（seco

5、nd burier）-實驗室設施實驗室生物安全實驗室生物安全管理要求管理要求 一、實驗室生物安全組織體系一、實驗室生物安全組織體系法人法人責任部門責任部門實驗室負責人實驗室負責人實驗室生物安全管理員實驗室生物安全管理員人人物物法定代表人職責（一）負責建立本單位生物安全管理體系，落實生物安全管理責任部門或責任人；（二）定期召開生物安全管理會議，對實驗室生物安全相關的重大事項作出決定；（三）批準和發(fā)布實驗室生物安全手冊、生物危害評估等重要文件。實驗室生物安全管理責任部門或責任人實驗室生物安全管理責任部門或責任人職責職責（一）負責組織制（修）訂和實施實驗室生物安全手冊、生物安全規(guī)章制度、操作規(guī)范和標

6、準操作規(guī)程；（二）負責組織對涉及的生物因子、使用動物、重組DNA以及基因修飾物質的研究方案進行審查和風險評估；（三）負責對本單位實驗室生物安全防護，微生物菌（毒）種和生物樣本保存和使用，實驗室安全操作，實驗室廢氣、廢水、廢棄物處置和消毒滅菌等規(guī)章制度實施情況進行監(jiān)督、檢查，并定期評估實施效果；實驗室生物安全管理責任部門或責任人實驗室生物安全管理責任部門或責任人職責職責（四）負責組織跟蹤國際國內實驗室生物安全管理最新動態(tài)；（五）負責定期調查、了解實驗室工作人員的健康狀況和健康監(jiān)護情況；（六）組織生物安全知識培訓并評估培訓效果。；實驗室負責人職責實驗室負責人職責（一）全面（一）全面負責負責實驗室生

7、物安全工作；實驗室生物安全工作；（二）決定并（二）決定并授權授權進入實驗室的工作人員；進入實驗室的工作人員；（三）（三）監(jiān)督監(jiān)督有關法規(guī)和標準操作規(guī)程的執(zhí)行，糾正違規(guī)有關法規(guī)和標準操作規(guī)程的執(zhí)行，糾正違規(guī)行為并有權作出停止實驗的行為并有權作出停止實驗的決定決定；（四）（四）任命任命實驗室生物安全管理員具體落實實驗室生物實驗室生物安全管理員具體落實實驗室生物安全管理工作；安全管理工作；（五）負責（五）負責制定制定和實施實驗室應急處置預案；和實施實驗室應急處置預案；（六）負責實驗室安全事故的（六）負責實驗室安全事故的現(xiàn)場處置現(xiàn)場處置和調查，并將調和調查，并將調查結果以及處理意見向設立單位生物安全管

8、理責任部門查結果以及處理意見向設立單位生物安全管理責任部門或責任人報告；或責任人報告；（七）負責對涉及感染性物質的研究計劃、方案以及操（七）負責對涉及感染性物質的研究計劃、方案以及操作程序等，實施前的生物安全作程序等，實施前的生物安全審查審查。生物安全管理員職責（一）負責實驗室生物安全（一）負責實驗室生物安全保障保障以及技術規(guī)章方以及技術規(guī)章方面的面的咨詢咨詢工作；工作；（二）就技術方法、程序和方案、生物因子、材（二）就技術方法、程序和方案、生物因子、材料和設備進行定期的料和設備進行定期的內部安全檢查內部安全檢查；（三）（三）糾正糾正違反生物安全操作規(guī)程的行為；違反生物安全操作規(guī)程的行為；（四

9、）在出現(xiàn)潛在感染性物質溢出或其他事故時，（四）在出現(xiàn)潛在感染性物質溢出或其他事故時，協(xié)助事故調查協(xié)助事故調查；（五）（五）檢查和監(jiān)督檢查和監(jiān)督實驗室實驗室廢棄物廢棄物的有效管理與安的有效管理與安全處置；全處置；（六）（六）檢查和監(jiān)督檢查和監(jiān)督實驗室各項實驗室各項消毒滅菌消毒滅菌措施的落措施的落實情況。實情況。（一）實驗室生物安全管理體系（二）生物因子生物危害評估（三）實驗室人員和項目準入制度（四）人員培訓考核制度（五）人員健康監(jiān)護制度（六）生物安全檢查制度（七）實驗室人員生物安全行為規(guī)范（八）實驗室內務管理制度（九）實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度（十）實驗室廢棄物管理制度（十

10、一）實驗室消毒隔離制度（十二）實驗室生物危險標識使用規(guī)定（十三）事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度（十四）實驗室應急處置預案（十五）實驗活動生物安全標準操作規(guī)程（十六）其他必要的管理性和技術性文件二、生物安全實驗室備案v一、二級病原微生物實驗室向所在一、二級病原微生物實驗室向所在區(qū)（縣）衛(wèi)生局衛(wèi)生監(jiān)督所備案。區(qū)（縣）衛(wèi)生局衛(wèi)生監(jiān)督所備案。v二級實驗室還應向所在區(qū)（縣）公二級實驗室還應向所在區(qū)（縣）公安機關備案。安機關備案。三、人員管理v實驗室應建立工作人員上崗考核制度，所有與實驗活動相關的人員都應經(jīng)過培訓并取得上崗資質。v培訓對象應包括實驗室管理人員、實驗室技術人員、樣本運輸人員、廢棄物處置

11、人員、儀器設備維修人員等。v培訓內容應包括實驗室生物安全的基本知識、基本技能、消防和應急處置預案、化學和放射安全、生物危險和傳染預防、應急救護等課程。三、人員管理三、人員管理v實驗室相關人員應每年接受生物安全培訓。培訓組織機構應采取有效方法對培訓的效果進行評估。實驗室設立單位應建立人員培訓檔案。v實驗室應定期對實驗人員開展與其從事實驗活動相關的健康體檢，建立人員健康檔案。v實驗室工作人員應在身體狀況良好的情況下進入實驗區(qū)工作，若出現(xiàn)疾病、過勞狀態(tài)或其他意外狀況，則不應進入實驗區(qū)或立即退出實驗區(qū)。四、菌（毒）種和生物樣品管理四、菌（毒）種和生物樣品管理v樣本采集：v樣本采集人員應掌握相關專業(yè)知識

12、和操作技能，并具有與采集病原微生物樣本危害等級相適應的生物安全防護裝備和防止擴散污染的措施。v樣本采集人員應對樣本的來源、采集時間、采集人員等做好記錄。四、菌（毒）種和生物樣品管理四、菌（毒）種和生物樣品管理v 樣本運送：樣本運送：v 高致病性（或疑似）的病原微生物菌（毒）種和生物高致病性（或疑似）的病原微生物菌（毒）種和生物樣本的運送應按樣本的運送應按可感染人類的高致病性病原微生物可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或生物樣本運輸管理規(guī)定菌（毒）種或生物樣本運輸管理規(guī)定執(zhí)行。執(zhí)行。v 非高致病性的病原微生物菌（毒）種和生物樣本的運非高致病性的病原微生物菌（毒）種和生物樣本的運送應由專人負

13、責，專車運送，運送人員應經(jīng)過培訓取送應由專人負責，專車運送，運送人員應經(jīng)過培訓取得相關資質，不得通過公共交通工具運送，運送過程得相關資質，不得通過公共交通工具運送，運送過程應采取相應的防護措施。運輸過程中發(fā)生意外狀況，應采取相應的防護措施。運輸過程中發(fā)生意外狀況，運送單位、運送人、接受機構應按國家有關規(guī)定，采運送單位、運送人、接受機構應按國家有關規(guī)定，采取必要的應急措施。取必要的應急措施。四、菌（毒）種和生物樣品管理四、菌（毒）種和生物樣品管理v樣本運送：樣本運送：v單位內部運送病原微生物菌（毒）種和生物樣單位內部運送病原微生物菌（毒）種和生物樣本的容器或包裝材料應滿足生物安全防護的要本的容器

14、或包裝材料應滿足生物安全防護的要求，應密封，防水、防破損、防外泄。求，應密封，防水、防破損、防外泄。v外送病原微生物菌（毒）種和生物樣本的容器外送病原微生物菌（毒）種和生物樣本的容器或包裝材料應滿足國際民航組織或包裝材料應滿足國際民航組織危險品航空危險品航空安全運輸技術細則安全運輸技術細則(Doc9284(Doc9284包裝說明包裝說明PI650)PI650)規(guī)定的規(guī)定的B B類包裝要求。類包裝要求。v最外層的容器或包裝材料上應按規(guī)定做好生物最外層的容器或包裝材料上應按規(guī)定做好生物安全警示標識。安全警示標識。 四、菌（毒）種和生物樣品管理四、菌（毒）種和生物樣品管理v 樣本保存：樣本保存：v

15、病原微生物實驗室菌（毒）種或樣本保藏部位為內部病原微生物實驗室菌（毒）種或樣本保藏部位為內部治安保衛(wèi)的重點，遵照國務院第治安保衛(wèi)的重點，遵照國務院第421421號令號令企業(yè)事業(yè)單企業(yè)事業(yè)單位內部治安保衛(wèi)條例位內部治安保衛(wèi)條例。v 實驗室應指定專人負責菌（毒）種和生物樣本的保藏，實驗室應指定專人負責菌（毒）種和生物樣本的保藏，雙人雙鎖，并建立所保藏的菌（毒）種和生物樣本名雙人雙鎖，并建立所保藏的菌（毒）種和生物樣本名錄清單。錄清單。v 保藏的菌（毒）種和生物樣本應設立專冊（卡），詳保藏的菌（毒）種和生物樣本應設立專冊（卡），詳細記錄名稱、編號、來源、鑒定的日期和結果、鑒定細記錄名稱、編號、來源、

16、鑒定的日期和結果、鑒定者、所用的培養(yǎng)基、保藏的方法、傳代次數(shù)等。者、所用的培養(yǎng)基、保藏的方法、傳代次數(shù)等。v 實驗室應建立菌（毒）種和生物樣本的銷毀制度，銷實驗室應建立菌（毒）種和生物樣本的銷毀制度，銷毀保存的菌（毒）種和生物樣本應經(jīng)實驗室負責人批毀保存的菌（毒）種和生物樣本應經(jīng)實驗室負責人批準，并在專冊（卡）上注銷并注明原因、時間、方法、準，并在專冊（卡）上注銷并注明原因、時間、方法、數(shù)量、經(jīng)辦人等。數(shù)量、經(jīng)辦人等。五、五、實驗室環(huán)境、設備與器材的消毒和廢棄物的處置實驗室環(huán)境、設備與器材的消毒和廢棄物的處置v 實驗室應根據(jù)相關標準的要求結合實驗工作的類型、實驗室應根據(jù)相關標準的要求結合實驗工

17、作的類型、操作生物因子的特性選擇適宜的消毒方法。應編寫包操作生物因子的特性選擇適宜的消毒方法。應編寫包括針對各種設施、設備、工作環(huán)境、污染狀態(tài)的消毒括針對各種設施、設備、工作環(huán)境、污染狀態(tài)的消毒程序的操作規(guī)程。應根據(jù)程序的操作規(guī)程。應根據(jù)醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準（GB15982-1995GB15982-1995）的規(guī)定采用有效手段監(jiān)測消毒效果，）的規(guī)定采用有效手段監(jiān)測消毒效果，并要作好書面記錄。并要作好書面記錄。v 實驗室空調系統(tǒng)應定期維護、清洗消毒，并有書面記實驗室空調系統(tǒng)應定期維護、清洗消毒，并有書面記錄，空調系統(tǒng)清洗消毒應委托有資質的機構承擔。錄，空調系統(tǒng)清洗消毒應委托有資質的機

18、構承擔。v 實驗室應根據(jù)國家規(guī)定的要求建立實驗器材和廢棄物實驗室應根據(jù)國家規(guī)定的要求建立實驗器材和廢棄物無害化處置工作程序。實驗器材和廢棄物處置應由專無害化處置工作程序。實驗器材和廢棄物處置應由專人負責。實驗室污水須經(jīng)無害化處理后排放。人負責。實驗室污水須經(jīng)無害化處理后排放。五、五、實驗室環(huán)境、設備與器材的消毒和廢棄物的處置實驗室環(huán)境、設備與器材的消毒和廢棄物的處置v 實驗用一次性個人防護用品和實驗器材、棄置的菌實驗用一次性個人防護用品和實驗器材、棄置的菌（毒）種、生物樣本、培養(yǎng)物和被污染的廢棄物應在（毒）種、生物樣本、培養(yǎng)物和被污染的廢棄物應在實驗室同一建筑內消毒滅菌，達到生物學安全后再按實

19、驗室同一建筑內消毒滅菌，達到生物學安全后再按感染性廢棄物收集處理。感染性廢棄物收集處理。v 實驗用非一次性個人防護用品和實驗器材，應放置在實驗用非一次性個人防護用品和實驗器材，應放置在有生物安全標記的防漏袋中送至指定地點消毒滅菌后有生物安全標記的防漏袋中送至指定地點消毒滅菌后方可清洗。運送過程中應防止有害生物因子的擴散。方可清洗。運送過程中應防止有害生物因子的擴散。經(jīng)生物無害化處理后的廢棄物包裝必須符合要求，并經(jīng)生物無害化處理后的廢棄物包裝必須符合要求，并有中文標簽，標簽內容包括產生部門、日期、類別等。有中文標簽，標簽內容包括產生部門、日期、類別等。v 實驗廢棄物最終處置必須交由經(jīng)市環(huán)保部門資

20、質認定實驗廢棄物最終處置必須交由經(jīng)市環(huán)保部門資質認定的醫(yī)療廢物處置單位集中處置。的醫(yī)療廢物處置單位集中處置。o 高度危險性物品高度危險性物品：這類物品是穿過皮膚或黏膜而進入無菌的這類物品是穿過皮膚或黏膜而進入無菌的組織或器官內部的器材，或與破損的組織、皮膚、黏膜密切組織或器官內部的器材，或與破損的組織、皮膚、黏膜密切接觸的器材和用品，例如，接觸的器材和用品，例如，手術器械和用品、穿刺針手術器械和用品、穿刺針o 中度危險性物品中度危險性物品：這類物品可能和破損皮膚或者黏膜相接觸這類物品可能和破損皮膚或者黏膜相接觸，而不進入無菌的組織內，例如，而不進入無菌的組織內，例如，各類生物樣品各類生物樣品o

21、 低度危險性物品低度危險性物品：雖有微生物污染，但在一般情況下無害，雖有微生物污染，但在一般情況下無害，只有當受到一定量的病原微生物污染時才造成危害的物品。只有當受到一定量的病原微生物污染時才造成危害的物品。這類物品和器材僅直接或間接地和健康無損的皮膚相接觸，這類物品和器材僅直接或間接地和健康無損的皮膚相接觸，包括包括生活衛(wèi)生用品生活衛(wèi)生用品和病人、醫(yī)護人員生活和工作環(huán)境中的物和病人、醫(yī)護人員生活和工作環(huán)境中的物品。例如，品。例如，毛巾、面盆、痰盂（杯）、地面、便器、餐具毛巾、面盆、痰盂（杯）、地面、便器、餐具o 在出入口與區(qū)域交叉處設置浸有2000mg /L有效氯消毒液的腳墊，不定時補充噴灑

22、消毒液，保持腳墊濕潤o 實驗室內所有物品應專用，并須經(jīng)嚴格消毒后方可帶出。o 進入實驗室應穿戴嚴密的個人防護用品，在實驗中注意自身防護，并防止操作過程中的交叉污染。o 應使用密封的離心杯進行樣品離心，以防濺出。o 實驗過程中應按規(guī)定將使用后的器材立即丟入消毒液內處理。o 實驗完畢，先消毒物體表面，再按規(guī)定程序脫下個人防護用品丟入相應的包裝袋內立即進行壓力蒸汽消毒，并開啟紫外線殺菌燈作空氣消毒。o 離開實驗室前，注意必須消毒雙手。o 實驗室物體表面與空氣消毒完畢，開窗通風。o 空氣消毒：每次實驗前后用紫外線燈照射消毒，每次不少于1小時，消毒完畢開窗通風。o 儀器等表面消毒：工作完畢，用含有效氯1

23、000mg/L的消毒液或75%的乙醇擦拭消毒，作用30分鐘以上o 個人防護用品消毒：實驗衣、口罩、手套、鞋套等用壓力蒸汽121消毒20-30分鐘，或浸泡在含有效氯1000mg/L的消毒液內30-60分鐘。護目鏡用75%的乙醇擦拭消毒，或浸泡在含有效氯1000mg/L的消毒液內30-60分鐘。o 手的消毒：含有效碘3000-5000 mg/L的消毒溶液或75%的乙醇溶液涂擦，作用1-3分鐘。o 地面和物體表面消毒：工作完畢，用含有效氯2000mg/L的消毒液噴灑（拖地）；工作臺等物體表面用上述消毒液擦拭消毒o 紙張的處理：采用傳真、電腦打印等方式傳出清潔的紙張，原始單據(jù)在必要時用80ml/m3福

24、爾馬林，在30-40條件下密閉熏蒸消毒6小時o 使用后的器材應分類消毒：將使用后的銳器直接放入防刺破、防滲漏的封閉專用銳器處置盒內，壓力蒸汽121作用30分鐘；其他部件在含有效氯2000mg/L的消毒液內浸泡1小時以上。處理時要避免皮膚損傷。o 廢棄物的處理：可燃物質盡量焚燒，也可噴灑含有效氯2000-10000 mg/L的消毒液，作用60分鐘以上。剩余標本最好焚毀或用壓力蒸汽121作用30分鐘。o 菌毒種的保藏與銷毀：按國家規(guī)定執(zhí)行菌毒種的保藏與銷毀：按國家規(guī)定執(zhí)行o 微生物的銷毀微生物的銷毀：培養(yǎng)物、鑒定反應試條及剩：培養(yǎng)物、鑒定反應試條及剩余樣品最好余樣品最好焚毀焚毀或用或用壓力蒸汽壓力

25、蒸汽121121作用作用3030分分鐘鐘，亦可在含，亦可在含有效氯有效氯2000mg/L2000mg/L的消毒的消毒液內浸液內浸泡泡1 1小時小時以上以上六、六、應急處置應急處置v實驗室應建立意外事件應急處置系統(tǒng)，制訂針對意外暴露和事故等狀況的應急預案。v實驗室的應急預案應每年培訓或演練，所有工作人員應熟練掌握應急處置操作程序等有關事項。六、應急預案v 對暴露病原微生物的檢測和生物危害評估。對暴露病原微生物的檢測和生物危害評估。v 明確高危險區(qū)域和地點。明確高危險區(qū)域和地點。v 明確可以暴露于危險或受感染的人員及其這些人員的明確可以暴露于危險或受感染的人員及其這些人員的轉移通道。轉移通道。v

26、列出能夠接受暴露或感染人員進行治療、隔離的單位列出能夠接受暴露或感染人員進行治療、隔離的單位和運送方案。和運送方案。v 列出事故處理需要的免疫血清、疫苗、藥品、特殊儀列出事故處理需要的免疫血清、疫苗、藥品、特殊儀器和其他物資的來源。器和其他物資的來源。v 列出應急狀態(tài)下所需的裝備和制劑的名錄及存放地點。列出應急狀態(tài)下所需的裝備和制劑的名錄及存放地點。v 明確事故處理的責任人員及其所承擔的職責。明確事故處理的責任人員及其所承擔的職責。v 其他必須明確規(guī)定的事項。其他必須明確規(guī)定的事項。實驗室生物安全實驗室生物安全技術要求技術要求一、一、生物危害評估生物危害評估v在建設實驗室或開展實驗活動之前，實

27、驗室設在建設實驗室或開展實驗活動之前，實驗室設立單位的生物安全責任部門或責任人應參照衛(wèi)立單位的生物安全責任部門或責任人應參照衛(wèi)生部生部名錄名錄組織各相關方面的專家對擬操作組織各相關方面的專家對擬操作的生物因子的危害程度、實驗活動的危險性、的生物因子的危害程度、實驗活動的危險性、氣溶膠傳播的可能性、預防治療的獲得性、防氣溶膠傳播的可能性、預防治療的獲得性、防護屏障的安全性、應急預案的有效性等因素進護屏障的安全性、應急預案的有效性等因素進行評估，確定相應的生物安全防護水平等級。行評估，確定相應的生物安全防護水平等級。v實驗室生物危害評估結果應由設立單位的法定實驗室生物危害評估結果應由設立單位的法定

28、代表人簽字認可，并歸檔保存。代表人簽字認可，并歸檔保存。v實驗室的生物安全防護水平實驗室的生物安全防護水平（Biosafety levelBiosafety level）分為）分為4 4種種(BSL 1-4)(BSL 1-4)v一級生物安全防護水平除需要洗手池外不需要特殊的一級和二級屏障，依靠標準的微生物操作即可獲得基本的防護水平。v一級生物安全防護水平實驗室適用于大學生、再教育培訓的和教學用的實驗室v枯草桿菌、格氏阿米巴原蟲和感染性犬肝炎病毒是符合這些標準的微生物的代表v 實驗室有門實驗室有門v 有水池用于洗手有水池用于洗手v 工作面易于清掃工作面易于清掃v 工作臺面不會滲水工作臺面不會滲水

29、v 設備堅固設備堅固v 窗戶配備紗窗窗戶配備紗窗v如果產生濺出物和氣溶膠的可能性很小的話，如果產生濺出物和氣溶膠的可能性很小的話，良好的微生物學技術能夠保證在開放式的操良好的微生物學技術能夠保證在開放式的操作臺面上安全地使用這些致病微生物作臺面上安全地使用這些致病微生物v否則應該在生物安全柜（否則應該在生物安全柜（BSCBSC）內操作。乙型）內操作。乙型肝炎病毒、沙門氏菌和弓形蟲是屬于這類防肝炎病毒、沙門氏菌和弓形蟲是屬于這類防護水平的微生物的代表護水平的微生物的代表v未知感染性樣本，包括人體血液、體液和組未知感染性樣本，包括人體血液、體液和組織等的檢測一般都可在這種級別實驗室內進織等的檢測一

30、般都可在這種級別實驗室內進行行v對工作人員的主要危害是與感染性材料的偶對工作人員的主要危害是與感染性材料的偶然的皮膚或粘膜暴露、針刺、吞食、動物叮然的皮膚或粘膜暴露、針刺、吞食、動物叮咬等咬等v必須強調對污染的針頭或利器的使用要非常謹慎。v對易于通過氣溶膠途徑傳播的微生物、具有增加工作人員暴露氣溶膠或高度飛濺物的程序v二級生物安全防護水平微生物操作必需在一級生物安全防護水平的基礎之上，增加生物安全柜、高壓滅菌器、安全離心機罩帽、防濺罩或面罩等。標準的BSL-2實驗室除了滿足BSL-1的要求以外，在門上增加了按國標（GB19489-2004）,還要v應用最多v最普遍v容易建容易通過v風險小，使用

31、方便v節(jié)約v訓練隊伍，可應急v 實驗室要用可以鎖的門v 需要時安裝生物安全柜和高壓消毒鍋v 足夠的照明v 洗眼水易于獲得v 所有進入實驗室的空氣不可再循環(huán)到非實驗室區(qū)域（BSL-3）v適用于涉及可以因通過吸入途徑接觸而導致嚴重的或者潛在的致命適用于涉及可以因通過吸入途徑接觸而導致嚴重的或者潛在的致命疾病的物質的工作疾病的物質的工作v與氣溶膠傳播病原體的接觸可能、嚴重傳染性的可能的致命因子與氣溶膠傳播病原體的接觸可能、嚴重傳染性的可能的致命因子v 微生物舉例：微生物舉例：炭疽桿菌炭疽桿菌土拉熱弗朗西斯菌土拉熱弗朗西斯菌布魯氏菌布魯氏菌SARSSARS（BSL-4）v 適用于涉及可以引起氣溶膠傳播

32、的實驗室感染物的高適用于涉及可以引起氣溶膠傳播的實驗室感染物的高個體危險和威脅生命的疾病的危險的和外來物質的工個體危險和威脅生命的疾病的危險的和外來物質的工作作v 與氣溶膠傳播或者通過未知傳播危險接觸病原體的可與氣溶膠傳播或者通過未知傳播危險接觸病原體的可能、有傳染可能的致命因子能、有傳染可能的致命因子v 微生物舉例：微生物舉例：扎伊爾埃博拉病毒扎伊爾埃博拉病毒裂谷熱裂谷熱實驗室設計和設施v根據(jù)工作性質的需要設計實驗室時，應特根據(jù)工作性質的需要設計實驗室時，應特別注意到那些已知能引起健康問題的情況別注意到那些已知能引起健康問題的情況, ,這些情況包括：這些情況包括： 氣溶膠的形成氣溶膠的形成

33、操作大容積和操作大容積和/ /或高濃度的微生物或高濃度的微生物 過分擁擠以及儀器過多過分擁擠以及儀器過多 老鼠和其它蚊蟲的出沒老鼠和其它蚊蟲的出沒 不經(jīng)授權的進入不經(jīng)授權的進入 使用特殊標本和試劑時的工作流程使用特殊標本和試劑時的工作流程v 無需特殊選址，可以設置在共用建筑物內。但應有防無需特殊選址，可以設置在共用建筑物內。但應有防止節(jié)肢動物和嚙齒動物進入的設計和設施，有開啟式止節(jié)肢動物和嚙齒動物進入的設計和設施，有開啟式窗戶的應設置紗窗。窗戶的應設置紗窗。v 布局應分實驗區(qū)和非實驗區(qū)，二者之間應有效分隔，布局應分實驗區(qū)和非實驗區(qū)，二者之間應有效分隔，在實驗區(qū)外應有實驗所需用品的儲存、個人物品

34、存放在實驗區(qū)外應有實驗所需用品的儲存、個人物品存放和工作人員休息的空間。實驗室的人流、物流也應符和工作人員休息的空間。實驗室的人流、物流也應符合從清潔到污染的要求。合從清潔到污染的要求。v 墻壁、天花板和地面應平整、不滲水、易清潔并耐化墻壁、天花板和地面應平整、不滲水、易清潔并耐化學品和消毒劑的腐蝕。學品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑。地面應防滑。v 實驗臺和櫥柜應牢固穩(wěn)定，實驗臺面能防水、耐腐蝕、實驗臺和櫥柜應牢固穩(wěn)定，實驗臺面能防水、耐腐蝕、耐熱、易消毒。耐熱、易消毒。一級病原微生物實驗室v 每個實驗室應在靠近出口處設洗手池，洗手龍頭應為自每個實驗室應在靠近出口處設洗手池，洗手龍頭應為自動感應

35、式、長手柄式或腳踏式，備有洗手皂液，必要時動感應式、長手柄式或腳踏式，備有洗手皂液，必要時配備快速消毒洗手液。配備快速消毒洗手液。v 室內儀器和物品的擺放合理，便于操作，并應遵循易消室內儀器和物品的擺放合理，便于操作，并應遵循易消毒的原則。毒的原則。v 室內應有空氣和物體表面消毒的設備和設施。室內應有空氣和物體表面消毒的設備和設施。有防塵條有防塵條件。件。v 室內使用的利器應盛放在固定的容器內。室內使用的利器應盛放在固定的容器內。v 室內照明應保證工作需要，并避免反光和強光。室內照明應保證工作需要，并避免反光和強光。v 在出口處應設掛衣裝置，專門放置實驗室工作服。在出口處應設掛衣裝置，專門放置

36、實驗室工作服。v 門口應有一級生物安全防護水平實驗室標識。門口應有一級生物安全防護水平實驗室標識。一級病原微生物實驗室v可設在共用建筑內，但應相對獨立，設可自動可設在共用建筑內，但應相對獨立，設可自動關閉的帶鎖的門。關閉的帶鎖的門。限制限制無關人員進入實驗室內，無關人員進入實驗室內，以避免實驗室污染或交叉感染。以避免實驗室污染或交叉感染。v實驗時門應呈關閉狀態(tài)，在實驗結束后實驗室實驗時門應呈關閉狀態(tài)，在實驗結束后實驗室應呈鎖閉狀態(tài)。實驗室的門或墻上應有可視窗。應呈鎖閉狀態(tài)。實驗室的門或墻上應有可視窗。v在室內應配備生物安全柜，生物安全柜的型號在室內應配備生物安全柜，生物安全柜的型號應根據(jù)實驗的

37、項目和對象確定。生物安全柜應應根據(jù)實驗的項目和對象確定。生物安全柜應放在氣流流動少，人員走動少，離出口處較遠放在氣流流動少，人員走動少，離出口處較遠的位置，周圍留有一定的空間。的位置，周圍留有一定的空間。v當對可能產生氣溶膠的感染性材料樣本的操作當對可能產生氣溶膠的感染性材料樣本的操作無法在生物安全柜內進行而必須采取外部操作無法在生物安全柜內進行而必須采取外部操作時，應加裝負壓罩。時，應加裝負壓罩。二級病原微生物實驗室v 在所在的區(qū)域內應配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查在所在的區(qū)域內應配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，作好記錄，確保消毒效果和使用安全。高壓和驗證，作好記錄，確保消毒效果和使用

38、安全。高壓蒸汽滅菌器的安全、計量鑒（檢）定和管理應符合國蒸汽滅菌器的安全、計量鑒（檢）定和管理應符合國家壓力容器管理的有關規(guī)定，使用人員應作好使用記家壓力容器管理的有關規(guī)定，使用人員應作好使用記錄。錄。v 在室內應設有洗眼裝置，必要時應設緊急噴淋。在室內應設有洗眼裝置，必要時應設緊急噴淋。實驗實驗室內要安裝紫外燈。室內要安裝紫外燈。v 應保障實驗室的通風和換氣，可采用自然通風，如采應保障實驗室的通風和換氣，可采用自然通風，如采用機械通風，應保證有不少于每小時用機械通風，應保證有不少于每小時3-43-4次的通風換氣次的通風換氣次數(shù)。次數(shù)。v 應有可靠的電力供應和應急照明。保證緊急情況下基應有可靠

39、的電力供應和應急照明。保證緊急情況下基本設備的用電需要。本設備的用電需要。v 在門口應有二級生物安全防護水平實驗室標識。在門口應有二級生物安全防護水平實驗室標識。v 有特殊要求的專用實驗室按其要求執(zhí)行。有特殊要求的專用實驗室按其要求執(zhí)行。二級病原微生物實驗室三、個人防護三、個人防護v實驗室使用的個人防護用品應符合國家相關標準和規(guī)定的要求。應在生物危害評估的基礎上，按防護級別的要求選擇適當?shù)膫€人防護用品。防護用品的選擇、使用和維護應有明確的規(guī)定。一級生物安全實驗室一級生物安全實驗室v 工作場所應配備有足夠的清潔專用工作服和乳膠手套，并有工作場所應配備有足夠的清潔專用工作服和乳膠手套，并有專柜存放

40、。污染的工作服和手套應放置在有適當標記的防漏專柜存放。污染的工作服和手套應放置在有適當標記的防漏袋中消毒。袋中消毒。v 實驗時應穿戴專用工作服和手套，手套應戴在工作服外面。實驗時應穿戴專用工作服和手套，手套應戴在工作服外面。穿戴工作服和手套時不得離開實驗室。工作完全結束離開實穿戴工作服和手套時不得離開實驗室。工作完全結束離開實驗室之前方可除去手套和工作服。使用過的工作服和手套不驗室之前方可除去手套和工作服。使用過的工作服和手套不得帶離實驗室，一次性手套和工作服不得清洗和再次使用。得帶離實驗室，一次性手套和工作服不得清洗和再次使用。當防護用品破損或污染物潑濺時應立即更換。當防護用品破損或污染物潑

41、濺時應立即更換。 v 嚴禁在實驗室內飲水、進食和吸煙，實驗室冰箱內不得存放嚴禁在實驗室內飲水、進食和吸煙，實驗室冰箱內不得存放食物或其它與實驗無關的物品。食物或其它與實驗無關的物品。v 應著不露趾防滑防水的工作鞋。應著不露趾防滑防水的工作鞋。二級生物安全實驗室二級生物安全實驗室v 進入工作場所操作時應穿專用防護服，戴防護帽和防護進入工作場所操作時應穿專用防護服，戴防護帽和防護口罩，必要時使用面部保護裝置?？谡?，必要時使用面部保護裝置。v 在從事有可能出現(xiàn)滲漏的實驗工作時，應穿戴防水鞋或在從事有可能出現(xiàn)滲漏的實驗工作時，應穿戴防水鞋或防水鞋套。防水鞋套。v 其他可能接觸感染性或潛在感染性材料相關

42、場所的個人其他可能接觸感染性或潛在感染性材料相關場所的個人防護應根據(jù)實際工作需要參照同等級的病原微生物實驗防護應根據(jù)實際工作需要參照同等級的病原微生物實驗室要求執(zhí)行。室要求執(zhí)行。四、安全操作v 實驗室應在危害評估的基礎上，對實驗活動過程和所有對實驗室應在危害評估的基礎上，對實驗活動過程和所有對安全性有較大影響的特定實驗活動制定標準操作規(guī)程。安全性有較大影響的特定實驗活動制定標準操作規(guī)程。v 實驗室應建立人員進出登記制度，禁止非工作人員進入實實驗室應建立人員進出登記制度，禁止非工作人員進入實驗室。特殊情況下，非工作人員進入實驗室的須經(jīng)實驗室驗室。特殊情況下，非工作人員進入實驗室的須經(jīng)實驗室負責人批準，由專人陪同，并做好登記。負責人批準，由專人陪同，并做好登記。v 實驗室應建立內務管理制度，個人物品不允許帶入實驗區(qū)。實驗室應建立內務管理制度，個人物品不允許帶入實驗區(qū)。v 對會產生氣溶膠或高濃度或大容量感染性材料的樣本進行對會產生氣溶膠或高濃度或大容量感染性材料的樣本進行高風險實驗操作時（包括離心、混勻、超生霧化和劇烈攪高風險實驗操作時（包括離心、混勻、超生霧化和劇烈攪拌等），實驗室應使用密封的離心機轉子、安全的離心杯拌等），實驗室應使用密封的離心機轉子、安全的離心杯或樣本儲存容器，并只允許在生物安全柜或負壓罩中開閉、或樣本儲存容器，并只允許在生物