2014年化學(xué)工程與食品科學(xué)學(xué)院畢業(yè)論文(設(shè)計)答辯模板

1、畢業(yè)論文PPT格式建議如下：一、研究目的二、技術(shù)路線三、研究材料四、研究方法五、研究結(jié)果六、主要結(jié)論七、創(chuàng)新點及今后努力方向八、致謝12022/6/30香樟籽乙醇提取物成分及其抑菌活性研究Chemical composition and Antibacterial activity of the Ethanol extracts of Cinnamomum camphora seed系所：生物科學(xué)系專業(yè)：生物科學(xué)學(xué)號：05124006 作者姓名：楊 順指導(dǎo)老師：余海忠22022/6/30一、研究目的隨著社會的開展和我國綜合國力的提高,人們對生活質(zhì)量的要求日益提高,對生態(tài)農(nóng)業(yè)、綠色食品、持續(xù)農(nóng)業(yè)

2、、生物多樣性保護(hù)及環(huán)境保護(hù)的呼聲越來越高。為了與我國可持續(xù)開展策略相適應(yīng),研制開發(fā)的新農(nóng)藥必須具有平安性高、殘留低、無公害、生物活性高、選擇性高、使用費用低等特性。植物性農(nóng)藥由于其原材料取自于天然植物, 自然界有其順暢的降解途徑, 具有無殘留、無公害、不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點, 可廣泛用于農(nóng)作物病蟲害防治。32022/6/30 香樟樹系樟樹屬的常綠喬木植物,是我國亞熱帶綠闊葉林的主要樹種之一,具有驅(qū)蟲、防腐耐蛀的功能,樟樹籽可提取色素、香料或樟油等物質(zhì)制成植物農(nóng)藥，樟樹籽為可再生資源, 其應(yīng)用前景廣闊。我國很早就將樟樹籽作為藥物用于治病,并認(rèn)為樟樹籽有驅(qū)風(fēng)散寒、行氣止痛之成效，主要含有癸酸(C10

3、)的樟樹籽脂肪油已被試制成碳酸甘油脂,用于治療脂肪代謝紊亂病癥,并能降血脂及膽固醇。42022/6/30 那么，這種對人體起作用的香樟籽,它的乙醇提取物對綠色木霉，酵母菌，黑曲霉，木質(zhì)層孔菌，枯草芽孢桿菌等微生物會不會有抑制作用呢？其作用方式又如何？因此，本研究擬就,香樟籽乙醇提取物成分和抑菌活性展開探討。在實驗中以香樟籽提取物為抑菌劑，對上述微生物生長及孢子萌發(fā)的影響進(jìn)行試驗，以研究其抑菌作用。52022/6/30香樟樹籽62022/6/30二、技術(shù)路線72022/6/30三、實驗材料1、供試植物 香樟籽Cinnamomum camphora seeds采自湖北襄樊學(xué)院校內(nèi)。2、供試微生物

4、真菌：綠色木霉Trichoderma viride 啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae 黑曲霉Aspergillus niger 木質(zhì)層孔菌Fomes ligneus 細(xì)菌：枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis 以上五個菌株由襄樊學(xué)院化學(xué)工程與食品科學(xué)院廖雪義老師提供，實驗室置冰箱中待用。82022/6/301、香樟籽的粗提方法本實驗利用醇浸法提取，具體步驟如下：1將采摘的紫色香樟籽盛在白瓷盤，置于鼓風(fēng)枯燥箱中烘烤50，使其枯燥。然后用微型植物粉碎機(jī)粉碎或用研缽研碎，得到粉末。2將上述粉末分裝到250ml磨口三角瓶中0.25倍體積，然后加無水乙醇浸泡，間隔24h

5、收集初提液，并在原瓶中加新的無水乙醇浸泡，收集所有初提液，并抽濾得過濾液。3用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮上述過濾液,得膏狀物。四、實驗方法92022/6/302、氣相色譜及質(zhì)譜條件 香樟籽無水乙醇提取物組分的測定在襄樊市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所進(jìn)行，所用儀器為氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。氣相色譜條件：DB-5ms彈性石英毛細(xì)管色譜柱(0.25 mm30m，0.25m)。升溫程序：初始溫度600C保持10min，以10Cmin-1至800C，保持15min，以20Cmin-1至2000C，以200Cmin-1至2200C，保持5 min。載氣為氦氣，流速0.8 mlmin-1；進(jìn)樣口溫度2200C。質(zhì)譜條件：離子源為

6、EI，電離電壓70eV，離子源溫度2000C，溶劑延遲時間，7 min，質(zhì)譜掃描范圍m/z 40400；掃描周期0.5 S 。102022/6/303、生長速率測定法 1從試管中挑取原種接種與液體培養(yǎng)基中，在250C，光照條件下?lián)u床培養(yǎng)。培養(yǎng)時間，不同的菌培養(yǎng)時間不同，以錐形瓶中有渾濁為宜細(xì)小顆粒懸浮。 2固體培養(yǎng)基融化后倒平板，待培養(yǎng)基凝固后吸取1ml菌液涂布，然后在250C，光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。倒平板時，倒一半即可，搖均形成一薄層，以利于打菌餅。 3取45ml土豆濾液于100ml錐形瓶中，參加0.9g瓊脂粉。同樣做15瓶；取75ml土豆濾液于100ml錐形瓶中，參加1.5g瓊脂粉。同樣做3瓶

7、。然后于1210C滅菌30min。112022/6/30 4PDA固體培養(yǎng)基加熱融化后，在恒溫水浴鍋中降溫至500C左右。用10ml量筒也可用移液槍量取5ml香樟籽無水乙醇提取液，倒入裝有45ml PDA培養(yǎng)基的錐形瓶中；用10ml量筒量取8.33ml對照液，倒入裝有75ml PDA培養(yǎng)基的錐形瓶中，即比例為9：1。倒平板時，倒一半即可，搖均形成一薄層，以利于能平均倒3份平板。注：倒平板時，應(yīng)在無菌環(huán)境中操作，但實驗在酒精燈旁進(jìn)行時，由于對照液如乙醇易揮發(fā)燃燒，靠的太近會燒著。 5在酒精燈旁進(jìn)行，打孔器沾酒精后燒著滅菌，待降溫至室溫后再打菌餅。 6接種環(huán)滅菌后挑取菌塊于倒平板的培養(yǎng)皿中，每皿2

8、塊，菌餅反向置于培養(yǎng)基上，光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)。各菌培養(yǎng)條件見表1。122022/6/307觀測時應(yīng)在同一地方，同一人，同一把米尺測量，以盡量減少誤差。 72h后觀測；8重復(fù)以上步驟，對五種供試菌種分別定時進(jìn)行測定。 9生長抑制率的計算方法：132022/6/304、孢子萌發(fā)法 本實驗采用懸浮液測定法，具體步驟如下： 1取17ml土豆濾液于100ml錐形瓶中，每種香樟籽無水乙醇提取液做6瓶，然后于1210C滅菌30min。 2用無菌生理鹽水沖洗長滿孢子的培養(yǎng)基，將孢子沖進(jìn)錐形瓶中，用紗布濾去雜質(zhì)。在每個裝有液體培養(yǎng)基的錐形瓶中參加1ml孢子懸浮液，其中5瓶再參加2ml香樟籽無水乙醇提取液，另1瓶加對

9、照液2ml，到達(dá)9：1比例，然后在搖床中培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度比表1中的最高溫度高10C孢子培養(yǎng)比病原菌溫度高有利于萌發(fā)。 3孢子萌發(fā)(以孢子芽管長度大于孢子短半徑者為萌發(fā))后，用無菌水稀釋到適當(dāng)濃度 (以1010 低倍鏡下, 每個視野3040個孢子為宜) 7，加到血細(xì)胞計數(shù)板上，在10*10倍顯微鏡下觀測。 4孢子抑制率的計算方法：142022/6/301、香樟籽無水乙醇提取物組分 在前述色譜條件下分析，經(jīng)計算機(jī)檢索(質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫 N IST147,N IST27)及人工解析質(zhì)譜并與標(biāo)準(zhǔn)圖核對，用峰面積歸一化法定量測出它們的相對含量，結(jié)果見表2。五、實驗結(jié)果152022/6/30162022/6/30

10、2、香樟籽無水乙醇提取物對供試菌菌絲生長的抑制活性 由表3可知，在5種供試菌中，香樟籽無水乙醇提取液在濃度為0.016 g/ml時對黑曲霉的抑制率最高，為49.42%，對木質(zhì)層孔菌的抑制率最小為7.14%；在濃度為0.008 g/ml時對黑曲霉的抑制率最高，為4.65%，對啤酒酵母，木質(zhì)層孔菌，枯草桿菌的抑制率最小，都為0；且對5種供試菌的抑制作用都隨提取液濃度的升高而增強(qiáng)。172022/6/30培養(yǎng)72h后的黑曲霉藥液濃度0.008g/ml182022/6/30菌餅接入到含不同濃度藥液的培養(yǎng)基中培養(yǎng)192022/6/303、香樟籽無水乙醇提取物對供試菌孢子萌發(fā)的抑制活性由表4可知，在5種供試

11、菌孢子中，香樟籽無水乙醇提取液在濃度為0.016g/ml時對黑曲霉孢子的抑制率最高，為60.00%，對木質(zhì)層孔菌孢子的抑制率最小為12.00%；在濃度為0.008 g/ml時，對綠色木霉孢子的抑制率最高，為12.50%，對啤酒酵母孢子的抑制率最小，為0；且對5種供試菌孢子的抑制作用都隨提取液濃度的升高而增強(qiáng)。202022/6/30六、主要結(jié)論采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析香樟籽無水乙醇提取物的主要組分為：癸酸(18.44%)、月桂酸(14.87%)、肉豆蔻酸(10.88%)、2-莰酮(10.46%)、a-松油醇(8.69%)、黃樟油素(8.51%)、辛酸(7.90%)、-蒎烯(3.57%)、檸檬烯

12、(2.52%)、莰烯(2.48%) 等37種化合物。(2)以提取物對供試菌菌絲生長的抑制率為考察指標(biāo)，在5種供試菌中，香樟籽無水乙醇提取液在濃度為0.016 g/ml時對黑曲霉的抑制率最高，為49.42%，對木質(zhì)層孔菌的抑制率最小為7.14%；在濃度為 0.008 g/ml 時對黑曲霉的抑制率最高，為4.65%，對啤酒酵母，木質(zhì)層孔菌，枯草桿菌的抑制率最小，都為0；且對5種供試菌的抑制作用都隨提取液濃度的升高而增強(qiáng)。(3)以孢子萌發(fā)抑制率為考察指標(biāo)，在5種供試菌孢子中，香樟籽無水乙醇提取液在濃度為0.016g/ml時對黑曲霉孢子的抑制率最高，為60.00%，對木質(zhì)層孔菌孢子的抑制率最小為12.

13、00%；在濃度為0.008 g/ml時，對綠色木霉孢子的抑制率最高，為12.50%，對啤酒酵母孢子的抑制率最小，為0；且對5種供試菌孢子的抑制作用都隨提取液濃度的升高而增強(qiáng)。212022/6/30七、創(chuàng)新之處1香樟樹具有速生性、欣賞性、長壽性等特性,故種植極為普遍.自然落下香樟籽,數(shù)量很大，已經(jīng)成為城市環(huán)境整治的一大負(fù)擔(dān)。本實驗的研究目的是科學(xué)地利用這些“廢物，對城市環(huán)境的保護(hù)和經(jīng)濟(jì)開展將會有重要的意義。2目前，香樟籽極少數(shù)被采集入藥，對其研究主要集中在油脂產(chǎn)品的開發(fā)上，但對其活性物質(zhì)參與農(nóng)業(yè)用藥劑這方面的研究為數(shù)不多，鮮見報道。因此，本實驗擬通過對香樟籽活性物質(zhì)對供試真菌和細(xì)菌控制展開深入研

14、究，以期發(fā)現(xiàn)一種新型天然抗菌劑，為保護(hù)環(huán)境、維護(hù)生態(tài)平衡、恢復(fù)和改善人類生存環(huán)境提供技術(shù)支持和保障。需改進(jìn)的地方1醇浸法對香樟籽活性成分的提取有較高的產(chǎn)量,但處理過程比較麻煩、復(fù)雜,且所需溶劑數(shù)量較多，故需要對此提取方式進(jìn)行優(yōu)化。另外，也可以采用水蒸汽蒸餾法進(jìn)行提取，方法簡便。2本實驗只局限于小試范圍,建議在中試時對提取的加工工藝、設(shè)備技術(shù)等方面作進(jìn)一步的研究。3應(yīng)該多項選擇幾種代表性的細(xì)菌做抑制實驗，使研究結(jié)果更準(zhǔn)確。同時需要測定最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度MBC，為最正確用藥量提供一定依據(jù)。222022/6/30八、致 謝 本文是在余海忠老師悉心指導(dǎo)下完的，從論文選題、實驗設(shè)計到實驗材料的采集、實驗的實施、論文的撰寫，導(dǎo)師都傾注大量的心血，導(dǎo)師學(xué)術(shù)上嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度，對實驗操作的嚴(yán)格要求以及