分子遺傳學(xué)復(fù)習(xí)題

1、2014分子遺傳學(xué)復(fù)習(xí)（名詞解釋+問答題）一、名詞解釋結(jié)1、結(jié)構(gòu)基因（Structural gene）：可被轉(zhuǎn)錄形成mRNA，并進而翻譯成多肽鏈，構(gòu)成各種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，催化各種生化反應(yīng)的酶和激素等。2、調(diào)節(jié)基因（Regulatory gene）：指某些可調(diào)節(jié)控制結(jié)構(gòu)基因表達的基因，合成阻遏蛋白和轉(zhuǎn)錄激活因子。其突變可影響一個或多個結(jié)構(gòu)基因的功能，或?qū)е乱粋€或多個蛋白質(zhì)（或酶）量的改變。3、基因組(genome)：基因組（應(yīng)該）是整套染色體所包含的DNA分子以及DNA分子所攜帶的全部遺傳指令?；騿伪扼w細胞核、細胞器或病毒粒子所含的全部DNA或RNA。4、C值悖理(C-value paradox)：

2、生物基因組的大小同生物在進化上所處的地位及復(fù)雜性之間無嚴格的對應(yīng)關(guān)系，這種現(xiàn)象稱為C值悖理(Cvalue paradox)。N值悖理（N-value paradox）：物種的基因數(shù)目與生物進化程度或生物復(fù)雜性的不對應(yīng)性，這被稱之為N（number of genes）值悖理(N value paradox)或G（number of genes）值悖理。5、基因家族(gene family)：由同一個祖先基因經(jīng)過重復(fù)(duplication)與變異進化而形成結(jié)構(gòu)與功能相似的一組基因，組成了一個基因家族。 6、孤獨基因（orphon）：成簇的多基因家族的偶爾分散的成員稱為孤獨基因（orphon) 。

3、7、假基因(pseudogene): 多基因家族經(jīng)常包含結(jié)構(gòu)保守的基因，它們是通過積累突變產(chǎn)生，來滿足不同的功能需要。在一些例子中，突變使基因功能完全喪失，這樣的無功能的基因拷貝稱為假基因，經(jīng)常用希臘字母表示8、衛(wèi)星DNA（Satellite DNA）：是高等真核生物基因組重復(fù)程度最高的成分，由非常短的串聯(lián)多次重復(fù)DNA序列組成。小衛(wèi)星DNA(Minisatellite DNA) ：一般位于端粒處，由幾百個核苷酸對的單元重復(fù)組成。微衛(wèi)星DNA (Microsatellite DNA)：由220個左右的核苷酸對的單元重復(fù)成百上千次組成。 隱蔽衛(wèi)星DNA(cryptic satellite DNA

4、)：用密度梯度離心分不出一條衛(wèi)星帶，但仍然存在于DNA主帶中的高度重復(fù)序列 9、DNA指紋(DNA fingerprints)：小衛(wèi)星DNA是高度多態(tài)性的，不同個體，各自不同。但其中有一段序列則在所有個體中都一樣，稱為“核心序列”，如果把核心序列串聯(lián)起來作為探針，與不同個體的DNA進行分子雜交，就會呈現(xiàn)出各自特有的雜交圖譜，它們和人的手紋一樣，具有專一性和特征性，因個體而異，因而稱為“DNA指紋”。10、超基因(super gene) ：是指真核生物基因組中緊密連鎖的若干個基因座，它們作用于同一性狀或一系列相關(guān)性狀。超基因家族（supergene family）：是DNA序列相似，但功能不一定

5、相關(guān)的若干個單拷貝基因或若干組基因家族的總稱。11、單核苷酸多態(tài)性 (single nucleotide polymorphism，SNP)：主要是指基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA順序多態(tài)性。它是人類可遺傳變異中最常見的一種，占所有已知多態(tài)性的90以上。12、遺傳標記（Genetic marker）：可示蹤染色體、染色體片段、基因等傳遞軌跡的一種遺傳特性。 13、重疊群(Contig) ：相互間存在重疊順序的一組克隆，根據(jù)重疊順序的相對位置將各個克隆首尾連接，構(gòu)成連續(xù)順序圖。14、位點（site）：在經(jīng)典的定義中對于“位點”的概念是基因即遺傳位點。而目前基因組研究中通常染色體位點

6、不僅是指基因，還包括客觀物組成的染色體上的位點。在物理圖譜中，位點是指一系列的客觀物：包括探針位點、限制性內(nèi)切酶酶切位點、克隆位點、基因位點、中間粒及端粒位點等。15、單體型（haplotype）：位于染色體上某一區(qū)域的一組相關(guān)聯(lián)的SNP等位位點被稱作單體型（haplotype）16、錯義突變 （missense mutation)：在基因中由于堿基對的替換，使mRNA分子中編碼某一氨基酸的密碼子變成編碼另一氨基酸的密碼子。17、無義突變 （nonsense mutation)：由于某一堿基的替換，使原來編碼某一氨基酸的密碼子突變成為終止密碼子UAA、UGA、UAG中的一種，致使肽鍵的合成提前

7、終止，肽鍵縮短，成為沒有活性的多肽片段。18、中性突變 （neutral mutation) ：在基因中有一對堿基對發(fā)生替換，引起mRNA中密碼子的改變，但多肽鏈中相應(yīng)位點發(fā)生的氨基酸的取代并不影響蛋白質(zhì)的功能。19、沉默突變（silent mutation, or 同義突變 synonymous mutation）：密碼子雖然改變，然而所編碼的氨基酸還是原來的氨基酸，那么這一密碼子稱為同義密碼子，這樣的突變?yōu)橥x突變或沉默突變。它對該蛋白質(zhì)的功能沒有影響.20、移碼突變（frame shift mutation ）：由于基因中增加或減少12個堿基（改變的堿基數(shù)不得是3或3的倍數(shù)）使該位點后面

8、的RNA序列發(fā)生移碼，產(chǎn)生無功能的蛋白質(zhì)。 21、回復(fù)突變（reverse mutation）：根據(jù)突變表型和野生型相比較將點突變分成兩類，其中一類是回復(fù)突變，其突變方向是從突變型向野生型。22、動態(tài)突變（dynamic mutation）：是在基因的編碼區(qū)、3或5UTR、啟動子區(qū)、內(nèi)含子區(qū)出現(xiàn)三核苷酸重復(fù)，及其他長短不等的小衛(wèi)星、微衛(wèi)星序列的重復(fù)拷貝數(shù)，在減數(shù)分裂或體細胞的有絲分裂過程中發(fā)生擴增而造成遺傳物質(zhì)的不穩(wěn)定狀態(tài)。 23、表觀遺傳變異（epigenetic variation）：是指在基因的DNA序列不發(fā)生改變的情況下，在基因表達時發(fā)生的可遺傳變化，造成基因產(chǎn)物的改變，最終導(dǎo)致表型的

9、改變。24、通用啟動子(generic promoter)：是指RNA聚合酶II可起始轉(zhuǎn)錄的最短的啟動子序列，它可以在任何細胞內(nèi)表達而無組織特異性。25、啟動子（Promoter）：是DNA分子上可以與RNA聚合酶特異結(jié)合，活化RNA聚合酶，而使轉(zhuǎn)錄開始的一段DNA序列。原核生物的啟動子一般處在結(jié)構(gòu)基因的上游，啟動子本身一般不轉(zhuǎn)錄。26、轉(zhuǎn)錄單元（Transcription unit）：是一段DNA順序，從啟動子開始至終止子或終止基因（Terminator）結(jié)束。27、順式作用元件（cis-acting element）：是指對基因表達有調(diào)節(jié)活性的DNA序列，其活性影響與其自身同處在一個DNA

10、分子上的基因；同時，這種序列通常不編碼蛋白質(zhì)，多位于基因傍側(cè)或內(nèi)含子中。 28、反式作用（trans-acting）：游離基因產(chǎn)物擴散至目標場所的過程。因此反式作用因子的編碼基因與其識別或結(jié)合的靶核苷酸序列一般不在同一個DNA分子上。 順式作用：任一不轉(zhuǎn)變?yōu)槿魏纹渌问降腄NA序列，它只在原位發(fā)揮DNA序列的作用，它僅影響與其在物理上相連的DNA，有時順式調(diào)節(jié)序列最終發(fā)揮作用的分子不是DNA，而是RNA。 29、絕緣子（insulator）：可以阻止鄰近位置激活或失活效應(yīng)的順序現(xiàn)在稱之為絕緣子（insulator）。一段長約數(shù)百堿基對，能夠妨礙真核基因調(diào)節(jié)蛋白對遠距離的基因施加影響的DNA序列

11、 30、沉默子（silencer）：是在所有分析或一種特定的分析中抑制基因表達的遠距離調(diào)控區(qū)。31、應(yīng)答元件（response element）：引起一個基因與一個因子起應(yīng)答反應(yīng)的元件或位于基因上游能被轉(zhuǎn)錄因子識別和結(jié)合，從而調(diào)控基因?qū)Ｒ恍员磉_的DNA序列。31、順式剪接（cis-splicing）：內(nèi)含子的剪接一般都是發(fā)生在同一個基因內(nèi)，切除內(nèi)含子，相鄰的外顯子彼此連接，稱為順式剪接。 32、蛋白質(zhì)組（proteome）：由一個細胞的基因組所表達的全部相應(yīng)的蛋白質(zhì)；或某種細胞或組織的基因組中表達的所有蛋白質(zhì)。33、蛋白質(zhì)組學(xué)（proteomics）：研究細胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)（蛋白質(zhì)組）的組成、結(jié)

12、構(gòu)與功能的學(xué)科。34、切口平移法（nick translation）：切口平移包括DNase I和E.coli polI全酶（Korberg 酶）對雙鏈DNA的同時作用。低濃度的DNaseI被用在每條DNA鏈中產(chǎn)生少量“切口”（nick）,再用大腸桿菌DNA聚合酶I的53外切酶活力在切口處將舊鏈從5端逐步切除，然后又在此酶53聚合酶活性催化下，以互補的DNA單鏈為模板同步地加新的dNTP到每個切口的相對游離的羥基末端。若在反應(yīng)液中加有一種或多種同位素標記的核苷酸，則標記的核苷酸摻入到新合成的鏈中。因DNaseI隨機的切割，DNA的雙鏈都有切口，因此雙鏈都被標記。35、隨機引物標記法（rando

13、m primer labeling）：隨機引物是含有各種排列序列的寡核苷酸片段的混合物，因此它可與任意核酸序列雜交，起到聚合酶引物的作用。隨機引物通常是人工合成的六個脫氧核苷酸序列，其序列是根據(jù)基因組DNA六核苷酸排列的多種可能性設(shè)計的。待標記的DNA探針變性后與隨機引物雜交，在大腸桿菌DNA聚合酶I大片段（Klenow fragment）作用下，以寡核苷酸為引物，合成與探針互補的DNA鏈，反 應(yīng)液中 含 有 32P標記的核苷酸，即形成放射性同位素標記的DNA探針。36、核酸分子雜交（uncleic acid hybridization）：是指具有一定同源序列的兩條核酸單鏈在一定條件

14、下按堿基互補配對原則退火形成異質(zhì)雙鏈的過程，此過程類似于核酸的復(fù)性過程。  37、Southern Blotting (印跡法)：特指DNA印跡雜交基本流程：組織或細胞基因組DNA限制性內(nèi)切酶消化瓊脂糖凝膠電泳印跡轉(zhuǎn)移至濾膜預(yù)雜交加入探針雜交洗膜放射自顯影  38、染色體原位雜交（chromosome hybridization in situ）：染色體原位雜交：將細胞中的染色體制備在玻片上經(jīng)核酸分子雜交，分析染色體上的核酸序列，基因位置等。39、基因組比較原位雜交（Comparative genome in sifu hybridization）/比較基因組雜交（Comp

15、arative genome hybridization,CGH）：將一個物種的基因組總DNA作為探針，與另一物種的染色體進行原位雜交，來檢測兩基因組同源性。不同種的比較基因組雜交在物種系統(tǒng)進化和親緣關(guān)系研究上有重要作用，它可以直觀地看出兩基因組間的相似程度。40、染色體描繪技術(shù)（Chromosome Painting）：是在分子原位雜交基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種熒光顯示技術(shù)，一個物種的每條染色體DNA通過流式細胞分離儀或其它方法進行分離，作為探針與另一物種的染色體進行原位抑制雜交，并通過熒光來檢測每條染色體DNA在另一物種染色體組中的同源片段，每個同源片段都被稱為一個保守同線群或同祖染色體。染色體

16、描繪技術(shù)能鮮明直觀地反映染色體片段的位置演變，由其獲得的結(jié)果能比以往其它研究手段更全面更深刻地闡明物種間基因組進化的特征和規(guī)律 。41、核酸原位雜交（nucleic acid hybridization in situ）：標記探針與細胞或組織切片中的核酸進行雜交的方法稱為核酸原位雜交。41、cDNA文庫: 將真核細胞內(nèi)全部mRNA轉(zhuǎn)錄成cDNA并將雙鏈cDNA(ds cDNA)和載體連接，由此得到的cDNA克隆群體稱為cDNA文庫。42、cDNA末端的快速擴增(rapid amplification of cDNA ends， RACE) ：是指以mRNA為模板，反轉(zhuǎn)錄合成

17、cDNA的第一條鏈，然后用PCR技術(shù)擴增出從某個特定位點到3端或到5端之間的未知核苷酸序列43、splicesome：剪切體，剪接裝置中的snRNAs和大量的附加蛋白，常稱為剪接因子，它們以核糖核蛋白（RNP）的形式存在，多種snRNPs共同組成剪切體。 5種snRNAs+proteinsThe snRNPssplicesome剪接體。進行hnRNA剪接時形成的多組分復(fù)合物, 主要是有小分子的核RNA和蛋白質(zhì)組成。在剪接過程中有5種snRNAs (small nuclear RNAs)參加，它們是U1、U2、U5、U4、和U6。5種 snRNA

18、s+proteinsThe snRNPs splicesome 44、small nuclear RNAs，snRNAs：在高等生物中都含有很多不連接的小分子RNA片段，限制在核內(nèi)的稱為小分子核內(nèi)RNA 45、small cytoplasmic RNAs，scRNA ：在高等生物中都含有很多不連接的小分子RNA片段，限制在細胞質(zhì)的稱為小分子胞質(zhì)內(nèi)RNA。446、internal guide sequenece,IGS ：前導(dǎo)序列RNA, 內(nèi)含子中可與外顯子配對的序列稱為內(nèi)部引導(dǎo)區(qū)。47、trans-splicing:反式剪切，不同基因的外顯子剪接后相互連接，此稱為反式剪接。

19、 48、spliced leader RNA，SL RNA：剪接前導(dǎo)RNA ，反式剪接是以兩種不同來源的RNA前體分子作為底物。反式剪接的5端外顯子稱為剪切前導(dǎo)RNA。49、Protein splicing:蛋白質(zhì)剪切，Protein splicing(蛋白質(zhì)剪接)is the autocatalytic process by which an intein is removed from a protein and the exteinson either side become connected by a standard peptide bond. 有些蛋白質(zhì)像RNA一樣，具有內(nèi)含肽和

20、外顯肽，從前體蛋白去除內(nèi)含肽，連接兩邊外顯肽，轉(zhuǎn)變成具有生物學(xué)功能的成熟蛋白質(zhì)的過程即蛋白質(zhì)剪切。50、Extein and Intein：外顯肽和內(nèi)含肽，在前體蛋白質(zhì)中，位于多肽鏈序列中間，的剪切過程中被切除的序列稱為內(nèi)含肽，是一種翻譯后加工的產(chǎn)物，而保留，并最后相互連接起來的序列成為外顯肽。內(nèi)蛋白子的基因不是單獨的開放閱讀框（ORF），它是插入在外蛋白子的基因中，和內(nèi)含子的區(qū)別在于它可以和外蛋白子的基因一道表達，而不是mRNA階段被切除，它在產(chǎn)生前體蛋白以后再從前體中被切除掉，余下的外蛋白子連接在一起成為成熟的蛋白。51、intein homing：內(nèi)蛋白子歸巢，內(nèi)蛋白子的基因除了上下代的

21、垂直傳遞以外，還可以通過基因的轉(zhuǎn)變而進行水平傳遞，被稱為內(nèi)蛋白子歸巢。 52、enhancer：增強子，是真核細胞中通過啟動子來增強轉(zhuǎn)錄的一種遠端性控制元件。增強的是同它連鎖的基因的轉(zhuǎn)錄頻率。53、insulator ： 絕緣子 ，A insulatoris a sequence that prevents an activating or inactivating effect passing from one side to the other. 可以阻止鄰近位置激活或失活效應(yīng)的順序現(xiàn)在稱之為絕緣子（insulator）。 54、specific transcription factor：

22、特異性轉(zhuǎn)錄因子或序列特異性轉(zhuǎn)錄因子，使聚合酶特異地應(yīng)答各種外界的刺激，更加高效而且協(xié)調(diào)地進行轉(zhuǎn)錄。因為，這類轉(zhuǎn)錄因子對轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的組裝及轉(zhuǎn)錄速率施加影響，并決定某一基因是否表達，所以又可稱其為轉(zhuǎn)錄激活因子。55、enhancosome ：增強體，由激活因子結(jié)合排列成的核蛋白結(jié)構(gòu)稱為增強體 56、RNA interference, RNAi：是指正常生物體內(nèi)一些小的雙鏈RNA可以抑制特定基因表達的一種現(xiàn)象57、post-transcriptional gene silencing，PTGS，轉(zhuǎn)錄后基因沉默，當(dāng)向細胞中導(dǎo)入與內(nèi)源性mRNA編碼區(qū)同源的小的雙鏈RNA (double strand

23、ed RNA，dsRNA)時，可以通過促使該mRNA降解來高效、特異的阻斷體內(nèi)特定基因的表達，從而導(dǎo)致基因表達沉默的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象發(fā)生在轉(zhuǎn)錄后水平，稱為轉(zhuǎn)錄后基因沉默。58、RNA-induced silencing complex ，RISC：iRNA在細胞內(nèi)RNA解旋酶的作用下解鏈成正義鏈和反義鏈，繼之由反義siRNA再與體內(nèi)一些酶(包括內(nèi)切酶、外切酶、解旋酶等) 結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物，即為RISC。59、Small interfering RNAs ，siRNAs ：參與轉(zhuǎn)錄后基因沉默的小雙鏈RNA稱為siRNAs。60、replicon ：復(fù)制子，基因組中能獨立進行復(fù)制的單位

24、，一個復(fù)制子中只有一個復(fù)制起點。The replicon is a unit of the genome in which DNA is replicated. 61、DNA replicase：DNA復(fù)制酶：能以一條模板鏈合成一條新的DNA鏈的酶叫做DNA聚合酶，其中實際進行DNA復(fù)制的酶稱為DNA replicase。62、replisome ：復(fù)制體，replisome is the multiprotein structure that assembles at the bacterial replicating&#

25、160;fork to undertake synthesis  of DNA. It contains DNA polymerase and other enzymes. 63、antisense RNA：反義RNA，指與mRNA互補的RNA分子，也包括與其它RNA互補的RNA分子。由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA，所以反義RNA與mRNA特異性的互補結(jié)合，從而抑制該mRNA的加工與翻譯，是原核細胞中基因表達的調(diào)控的一種方式。64、rolling circle replication：

26、滾環(huán)復(fù)制，滾環(huán)復(fù)制又叫復(fù)制。先在一條親代鏈（鏈）上切一缺口，然后以另一環(huán)狀負鏈為模板，在正鏈切口上的3OH上延伸，新合成的鏈和正鏈連在一道；3端不斷延環(huán)狀模板合成，5端脫離負環(huán)，隨著復(fù)制，游離的5端越來越長，和環(huán)狀模板完全分開。 65、anchored PCR：錨式PCR，它是通過在離開已知的小量序列信息一定距離處加上一個確定的序列，這個序列一般為寡核苷酸，然后根據(jù)附加核苷酸的序列設(shè)計與之互補的序列作為 PCR 擴增的一個引物，另一個引物來自已知小量序列的核苷酸信息，在兩個引物存在下進行 PCR 擴增。由于其中一個引物是與人工接上的附加核苷酸序列互補，故稱為錨式 PCR。 66、asymmet

27、ric PCR：不對稱PCR, 在擴增循環(huán)中引入不同引物濃度，一般用二種不同濃度的引物，50100：1比例的引物濃度，在最初1015個循環(huán)中主要產(chǎn)物還是雙鏈DNA，但當(dāng)?shù)蜐舛纫锉幌谋M后，高濃度引物介導(dǎo)的PCR反應(yīng)就會產(chǎn)生大量單鏈DNA 。單鏈DNA可用作雜交探針或DNA測序。 67、iverse PCR: 反向PCR,可擴增引物外側(cè)的DNA片段，對已知DNA片段兩側(cè)的未知序列進行擴增和研究。68、multiplex PCR: 多重PCR,是在同一反應(yīng)中采用多對引物同時擴增幾個不同的DNA片段，如果基因某一區(qū)段缺失，則相應(yīng)的電泳圖譜上此區(qū)段PCR擴增產(chǎn)物長度減少或消失，從而發(fā)現(xiàn)基因異常。69

28、、reverse transcription PCR, RT-PCR: 反轉(zhuǎn)錄PCR，先將mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，然后再以cDNA為模板，用PCR方法加以擴增。常規(guī)PCR可擴增位于二個引物之間的DNA片段，但不能擴增引物外側(cè)的DNA序列，反向PCR則可擴增引物外側(cè)的DNA片段，對已知DNA片段兩側(cè)的未知序列進行擴增和研究。70、fluorescent PCR ：熒光PCR, 用不同的熒光染料（如紅色的羅丹明、綠色的熒光素）標記不同的引物的5端，同時擴增多個DNA區(qū)段，反應(yīng)完畢后，凝膠過濾除去多余的引物進行電泳。用紫外線照射擴增產(chǎn)物，就能顯示某一種或幾種熒光染料顏色的組合，如果某一DNA區(qū)帶缺

29、失，則會缺乏相應(yīng)的顏色，據(jù)此可以很快診斷是否某種基因缺失，或是發(fā)現(xiàn)某些感染的病毒等。71、表觀遺傳學(xué)（epigenetics）：是針對不涉及到DNA序列變化而表現(xiàn)為DNA甲基化譜、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)狀態(tài)和基因表達譜在細胞代間傳遞的遺傳現(xiàn)象的一門學(xué)科。72、組蛋白密碼（ histon code）：組蛋白中被修飾氨基酸的種類、位置和修飾類型被稱為組蛋白密碼。73、QRTPRC：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方

30、法。 74、The Encyclopedia of DNA Elements Project ：“DNA元件百科全書計劃”， 簡稱ENCODE計劃。其目的是解碼基因組的藍圖，鑒定人類基因組中包括基因、啟動子、增強子、抑制子/沉默子、內(nèi)含子、復(fù)制原點等已知的和還不知功能的多個物種的保守序列等在內(nèi)的所有功能元件。75、核小體定位（Nucleosome positioning）：由于核小體與 DNA 的動態(tài)相互作用，大多數(shù)核小體的位置是不固定的。但是在有些情況下，某些核小體被限定在基因組的固定位置上 ，或者 DNA 序列僅以一種特定的構(gòu)型組裝成核小體，則 DNA 上的每個位點將一直位于核小體上的特定

31、位置 ，我們稱這種組裝類型為核小體定位。76、Copy choice（模板選擇性重組）：適用于RNA病毒，在這種重組中，聚合酶以一個模板轉(zhuǎn)換到另一個模板來合成RNA，結(jié)果新合成的分子將含有兩個不同親本的遺傳信息。內(nèi)含子歸巢也屬于此種類型。 77、transletion replication (跨損傷復(fù)制): 跨損傷DNA復(fù)制也被稱為“跨缺刻復(fù)制”或備份復(fù)制，是指當(dāng)細胞處于較強烈而持久的SOS應(yīng)答（SOS Response)生理條件下，一些受SOS機制控制的可誘導(dǎo)性DNA聚合酶得到表達，包括大腸桿菌細胞中的DNA聚合酶IV（DinB)和DNA聚合酶V（UmuC)，以及真核生物細胞內(nèi)的Rev32

32、等被歸類為Y族的DNA聚合酶。二、問答題1、DNA分子標記有哪些種類？各自的用途是什么？RAPD RFLP AFLP SSR ISSR:簡單序列重復(fù)區(qū)間擴增多態(tài)性 SNP STS CAPS RFLP標記 (restriction fragment length polymorphism)：DNA某一位點上的變異有可能引起該位點特異性的限制性內(nèi)切酶識別位點的改變，包括原有位點的消失或出現(xiàn)新的酶切位點，致使酶切片段長度隨之發(fā)生變化。這種變化引起的多態(tài)現(xiàn)象即為限制性片段長度多態(tài)性（RFLP)。對RFLP的檢測主要是用Southern雜交的方法進行，即利用限制酶酶解及凝膠電泳分離不同生物體的DNA分子

33、，然后用經(jīng)標記的特異DNA探針與之雜交，通過發(fā)射自顯影或非同位素顯色技術(shù)來揭示DNA的多態(tài)性。RAPD（random amplified polymorphic DNA）標記：隨機擴增多態(tài)性DNA，用隨機短引物（人工合成的六核苷酸）進行DNA的PCR擴增。所擴增的DNA區(qū)段是事先未知的，具有隨機性和任意性，因此隨機引物PCR標記技術(shù)可用于對任何未知基因組的研究。 ISSR (Inter-simple sequence repeats)標記:簡單序列重復(fù)區(qū)間擴增多態(tài)性。利用基因組中常出現(xiàn)的SSR本身設(shè)計引物，無需預(yù)先克隆和測序SSR（simple sequence repeats)標記:簡單重復(fù)

34、序列多態(tài)性。又稱微衛(wèi)星DNA多態(tài)性，即由二核苷酸，三核苷酸或四核苷酸串聯(lián)重復(fù)的拷貝數(shù)目不等而出現(xiàn)的多態(tài)現(xiàn)象2、有哪些不同的重組類型？同源重組，位點特異性重組，轉(zhuǎn)座，不正常重組，人工重組3、轉(zhuǎn)座子的類別有哪些？其轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的遺傳學(xué)效應(yīng)有哪些？原核：IS,類轉(zhuǎn)座因子，復(fù)合轉(zhuǎn)座子，TnA轉(zhuǎn)座子家族真核：轉(zhuǎn)座子，反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子1.IS轉(zhuǎn)座后，在寄主DNA上產(chǎn)生同向重復(fù)。IS因子插入細菌染色體上可以產(chǎn)生各種效應(yīng)，這取決于其插入的方向，IS因子雖然不含有其它編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，但是它們可以含有轉(zhuǎn)錄終止子（transcriptionalterminator) 或啟動子（promoter）從分子遺傳學(xué)角度解釋極

35、性效應(yīng)：（1）IS中可能有終止子信號，它的插入會造成mRNA的轉(zhuǎn)錄的終止（2）含有無義密碼子，造成翻譯的終止由此影響到后續(xù)基因的翻譯4、DNA的修復(fù)系統(tǒng)有哪些？直接修復(fù)，切除修復(fù)，錯配修復(fù)，重組修復(fù)，差錯傾向修復(fù)/sos修復(fù)，忍耐系統(tǒng)一、直接（回復(fù)）修復(fù)：主要指光修復(fù)在可見光的激活下，光修復(fù)酶結(jié)合于胸腺嘧啶二聚體處，并催化解聚為單體的過程。不同的生物體利用不同的類似酶。（1）在E.coli中 Gene phr 編碼 photolyase(光裂合酶)（2）烷基轉(zhuǎn)移酶（alkyltransferase）也是一種和直接修復(fù)損傷有關(guān)的酶，它們可以切除掉NG和EMS加在G的O6位上的烷基。例如存在于人和

36、酵母細胞中的O6-甲基鳥嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶，通過從O6-甲基鳥嘌呤上把甲基直接轉(zhuǎn)移到酶的半光氨酸殘基上來直接回復(fù)DNA損傷。該反應(yīng)過程中修復(fù)酶失活。（3）DNA單鏈斷裂中有一部分是通過簡單的重接而修復(fù)的，只需要DNA連接酶參與，因此也屬于直接回復(fù)。二、切除修復(fù)系統(tǒng)由一個具識別功能的酶識別DNA分子中損傷的或改變的堿基，隨后伴隨包括損傷的堿基 內(nèi)的切除過程，再合成新的DNA片段以代替切除的部分。在一個細胞內(nèi)有多種剪切修復(fù)系統(tǒng)：有些識別所有的DNA損傷，有些只作用于特定類型的堿基損傷（1）一般切除修復(fù)（核苷酸切除修復(fù)）切除修復(fù)是一種多步驟的酶促反應(yīng)過程：1).內(nèi)切酶在損傷位點的兩側(cè)同時切割2).外切酶

37、除去兩個切口之間的核苷酸3).DNA合成4).連接酶連接接口 （2）堿基切除修復(fù)（base excise repair）堿基切除修復(fù)是DNA維持穩(wěn)定的重要修復(fù)方式1).AP核酸內(nèi)切酶修復(fù)途徑2）糖基酶修復(fù)途徑三、錯配修復(fù)主要用于對應(yīng)的DNA鏈上不互補的堿基，錯配是由于在DNA復(fù)制中新生鏈上的堿基與互補鏈上的堿基不互補產(chǎn)生的。通常錯配系統(tǒng)傾向于修復(fù)新生鏈上的堿基。在E.coli復(fù)制中發(fā)生錯配時，錯配的核苷酸只是其堿基不能與母鏈配對，核苷酸本身的結(jié)構(gòu)是正常的，因此對正確母鏈和錯配子鏈的區(qū)分至關(guān)重要：五、SOS修復(fù)系統(tǒng)SOS修復(fù)是DNA分子受到重大損傷時，誘導(dǎo)產(chǎn)生的應(yīng)急性修復(fù)反應(yīng)，這種修復(fù)是為了保命

38、也就管不了修補的片段是否正確，故也稱為：差錯傾向修復(fù)（error prone repair）.表現(xiàn)特點（1）細胞內(nèi)原有的修復(fù)酶（切除修復(fù)、重組修復(fù)）合成量增加（2）誘導(dǎo)產(chǎn)生的修復(fù)酶（SOS聚合酶）來修復(fù)損傷部位5、有哪些種類的特異性轉(zhuǎn)錄因子(specific transcription factor)？特異性轉(zhuǎn)錄因子也稱轉(zhuǎn)錄激活因子，它們可對轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的組裝及轉(zhuǎn)錄速率施加影響，決定某一基因是否表達。包括類固醇受體、鋅指結(jié)構(gòu)、螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋、螺旋-環(huán)-螺旋、亮氨酸拉鏈6、RNA選擇性剪接以哪些方式進行？有哪些生物學(xué)意義？選擇性剪接以多種方式進行：(1)利用不同的外顯子由于不同細胞類型有著不

39、同修飾的反式因子，導(dǎo)致利用不同的外顯子。例如動物細胞的原肌球蛋白(atropomyosin)基因有13個外顯子(圖313。) (2)兩個相互排斥的外顯子的剪接有兩類外顯子對，每對之中只有一個成員能剪接到成熟的mRNA中，看來像是相互排斥似的。如圖313b，降鈣素(calcitonin)和降鈣素基因相關(guān)肽(calcitoningenerelatedpeptide，CGRP)分別利用相鄰的兩個外顯子，得到的兩種產(chǎn)物分別為甲狀腺和神經(jīng)元細胞中所特有。(3)半個起始位點，多個加poly(A)位點一些真核病毒轉(zhuǎn)錄物存在多至5個這樣的位點(Tsurshital988)。對于一個有兩個加poly(A)位點的

40、轉(zhuǎn)錄物，大多數(shù)細胞類型通過利用內(nèi)側(cè)的位點產(chǎn)生分泌型的蛋白，一些分化的細胞類型犀其產(chǎn)物是膜蛋白的轉(zhuǎn)錄物，則利用外側(cè)的位點產(chǎn)生具有膜錨序列的膜結(jié)合蛋白。還是用降鈣素和CGRP的例子(圖313b)，前者利用內(nèi)側(cè)的加poly(A)位點，后者則利用外側(cè)的?？赡艽嬖谀撤N細胞類型特異的反式激活因子提高外側(cè)位點的利用效率。(4)多個5剪接位點競爭同一3剪接位點有一些基因含有多個5剪接位點，它們的選擇依賴于5剪接位點的強度(高度適配者強)、與3剪接位點的接近程度、空間限制等因素之間的平衡。在大多數(shù)細胞類型中將選擇上游的5剪接位點，而使處于下游的5剪接位點無效，主要是因為后者與分叉點的距離一般太近而不利于建立剪接

41、體之故(Noble l988)。也有的分別利用不同的5剪接位點，得到不同的產(chǎn)物(圖313c)。(5)內(nèi)含子保留和框式外顯子有的情況下，一個內(nèi)含子不被剪接而保留下來，如果維持可讀框架，便是一個多肽片段的插入；如果移格，便會產(chǎn)生功能不同的產(chǎn)物或者關(guān)掉基因的表達。(6)非剪接位點的序列參與調(diào)節(jié)一些真核生物的病毒RNA其初級轉(zhuǎn)錄物即使有正確的功能剪接位點，有時也會有一部分甚至大部分不發(fā)生剪接(ArrigoandBeemon1988)。這是由于其內(nèi)含子中存在一種負調(diào)節(jié)元件使剪接無效，也有的基因在外顯子中存在一些促進和抑制剪接的序列。7、什么叫增強體？并簡述基本轉(zhuǎn)錄 機構(gòu)與增強體理論目前的觀點是，增強子與

42、激活因子參與染色質(zhì)重建的序列特異性蛋白質(zhì)的相結(jié)合，使增強子和核心啟動子之間的DNA成環(huán)并結(jié)合在調(diào)控性啟動子和核心啟動子的蛋白質(zhì)（即其他激活因子和基本轉(zhuǎn)錄機構(gòu)）發(fā)生相互作用。最近的研究表明，激活因子對增強子和調(diào)控性啟動子的協(xié)同性結(jié)合引發(fā)“增強體”核蛋白結(jié)構(gòu)的形成。增強體顯示了基因活化所需的兩個層次的特異性。在一個層次上，前后序列依賴性激活因子激活因子相互作用，促進增強體在裸DNA或染色質(zhì)上的協(xié)同性裝配。在另一個層次上，增強體具有一個與PolII基本轉(zhuǎn)錄機構(gòu)靶表面互補的特異性激活表面，并借助該表面將基本轉(zhuǎn)錄機構(gòu)集結(jié)到啟動子上，以產(chǎn)生協(xié)同性轉(zhuǎn)錄。增強體中激活因子對DNA的協(xié)同性結(jié)合，通常(但并非總是

43、)取決于激活因子識別位點的精細排列和激活因子的正確組合。激活因子識別位點的精細排列和激活因子的正確組合，能產(chǎn)生一個對特定增強子專一性的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)DNA相互作用體系。一旦增強子和啟動子變?yōu)榭山Y(jié)合狀態(tài)，一組激活因子便與之結(jié)合，而且激活因子的激活通常是協(xié)同性的。一種蛋白質(zhì)的結(jié)合力較弱，但多種激活因子之間的相互作用可以增強它們各自對調(diào)控區(qū)的親和力。由激活因子結(jié)合排列成的核蛋白結(jié)構(gòu)稱為增強體?；巨D(zhuǎn)錄機構(gòu)由PolII和GTF以及被稱為中介體的共激活因子復(fù)合體組成。增強體與基本轉(zhuǎn)錄機構(gòu)和核心啟動子構(gòu)成一個蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)-DNA作用的復(fù)雜體系，控制轉(zhuǎn)錄起始的頻率。8、絕緣子與增強子的關(guān)系如

44、何？如何解釋絕緣子的作用機制？增強子是真核細胞中通過啟動子來增強轉(zhuǎn)錄的一種遠端性控制元件。增強的是同它連鎖的基因的轉(zhuǎn)錄頻率。增強子可位于基因的5端、3端或者基因的內(nèi)含子中。轉(zhuǎn)錄頻率增加10200倍。絕緣子是長約幾百個核苷酸對，通常位于啟動子與正調(diào)控元件（增強子）或負調(diào)控因子（為異染色質(zhì)）之間的一種調(diào)控序列。其明顯特征是能夠絕緣或保護啟動子免受上游增強子的影響。絕緣子本身對基因的表達既沒有正效應(yīng)，也沒有負效應(yīng)，其作用只是不讓其他調(diào)控元件對基因的活化效應(yīng)或失活效應(yīng)發(fā)生作用。絕緣子的作用具有方向性目前已有兩種模型用來解釋絕緣子阻隔增強子的工作機制， 即立體模型（stericmodel）和軌道模型（t

45、racking model）10.9)。前者認為絕緣子將增強子與啟動子分隔在兩個彼此獨立的結(jié)構(gòu)域中，使其不能相互接觸。后者認為某些轉(zhuǎn)錄激活信號必須沿DNA順序從增強子傳遞到啟動子，絕緣子在信號傳導(dǎo)的途中將其截持，從而阻止增強子的活性。A）立體模型，到達啟動子絕緣子（I）將增強子（E）與啟動子（P）分隔在兩個不能互作的空間；B）軌道模型，與增強子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子需沿DNA向下游滑動才能位置激活轉(zhuǎn)錄裝置。由于絕緣子的阻礙，增強子的活性受到抑制。9、什么叫轉(zhuǎn)錄激活？它在DNA復(fù)制中有什么重要作用？復(fù)制的起始也需RNA聚合酶的參與，由其進行的轉(zhuǎn)錄在oriC起點附近終止并產(chǎn)生一段RNA，這段RNA可能作為

46、引物，提供引發(fā)DNA聚合酶III反應(yīng)的3OH.可能在大多數(shù)DNA復(fù)制中，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物并不用作引物，其主要作用是分開兩條DNA鏈，暴露出某些特定序列以便引發(fā)酶和有關(guān)蛋白在此序列上裝配成引發(fā)體進而合成RNA。這種通過轉(zhuǎn)錄步驟導(dǎo)致起始處DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生變化、局部解鏈，以利引發(fā)酶的結(jié)合，合成RNA引物，這種作用稱為轉(zhuǎn)錄激活10、簡述DNA復(fù)制的基本規(guī)則（Basic rules of replication）1、DNA復(fù)制是半保留的（Semiconservative）2、復(fù)制起始（Initiation）出現(xiàn)在稱為原點（Origin）的特定序列上3、復(fù)制的控制一般是在復(fù)制的起點處4、復(fù)制叉（Fork）的移動是單

47、向或雙向5、鏈的延伸方向是53方向6、大多數(shù)情況下DNA復(fù)制是半不連續(xù)的（Semidiscountinuous）7、在存在模板的條件下，DNA聚合酶以短的RNA片段作為引物開始合成DNA的短片段8、存在各種DNA鏈的合成起始機制，除了RNA引發(fā)，另外的一些裝置，包括DNA鏈與一個末端蛋白共價結(jié)合，以及缺口的共價延伸，或者親本鏈已被環(huán)出的末端9、終止也是在復(fù)制過程中的某個固定點10、復(fù)制的機制取決于基因組結(jié)構(gòu)和構(gòu)象來保持產(chǎn)生完整的染色體11、即使在一單個細胞中也可進行多種復(fù)制機制的操作11、說明PCR反應(yīng)的基本原理并列舉幾種特殊的PCR方法它是一種模擬天然DNA復(fù)制過程，在有DNA模板、DNA聚

48、合酶（Taq酶）、RNA引物和四種dNTP的情況下，通過高溫變性（9095，12min）,低溫退火（2537，12min）,中溫延伸（6075，90 sec-5min）,這樣反復(fù)循環(huán)的過程中，在體外擴增特異性DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。1） 錨式PCR （anchored PCR）它是通過在離開已知的小量序列信息一定距離處加上一個確定的序列，這個序列一般為寡核苷酸，然后根據(jù)附加核苷酸的序列設(shè)計與之互補的序列作為PCR擴增的一個引物，另一個引物來自已知小量序列的核苷酸信息，在兩個引物存在下進行PCR擴增（見圖）。由于其中一個引物是與人工接上的附加核苷酸序列互補，故稱為錨式PCR.2） 不對稱PC

49、R（asymmetric PCR）目的：擴增產(chǎn)生特異長度的單鏈DNA在擴增循環(huán)中引入不同引物濃度，一般用二種不同濃度的引物，50100：1比例的引物濃度，在最初1015個循環(huán)中主要產(chǎn)物還是雙鏈DNA，但當(dāng)?shù)蜐舛纫锉幌谋M后，高濃度引物介導(dǎo)的PCR反應(yīng)就會產(chǎn)生大量單鏈DNA 。單鏈DNA可用作雜交探針或DNA測序。3） 反向PCR （Inverse PCR）常規(guī) PCR可擴增位于二個引物之間的DNA片段，但不能擴增引物外側(cè)的DNA序列，反向PCR則可擴增引物外側(cè)的DNA片段，對已知DNA片段兩側(cè)的未知序列進行擴增和研究。4） 多重PCR（multiplex PCR）多重PCR是在同一反應(yīng)中采用

50、多對引物同時擴增幾個不同的DNA片段，如果基因某一區(qū)段缺失，則相應(yīng)的電泳圖譜上此區(qū)段PCR擴增產(chǎn)物長度減少或消失，從而發(fā)現(xiàn)基因異常。多重PCR具有靈敏快速特點，特別適用檢測單拷貝基因缺失、重排、插入等異常改變，其結(jié)果與Southern blotting一樣可靠，但多重PCR會檢測小片段缺失5） 著色互補PCR（color complementation PCR）或稱熒光PCR(fluorescent PCR)在多重PCR試驗中，一次試驗還不容易區(qū)分長短相近的多種基因成分。熒光PCR可用于解決這一問題。原理：用不同的熒光染料（如紅色的羅丹明、綠色的熒光素）標記不同的引物的5端，同時擴增多個DNA

51、區(qū)段，反應(yīng)完畢后，凝膠過濾除去多余的引物進行電泳。用紫外線照射擴增產(chǎn)物，就能顯示某一種或幾種熒光染料顏色的組合，如果某一DNA區(qū)帶缺失，則會缺乏相應(yīng)的顏色，據(jù)此可以很快診斷是否某種基因缺失，或是發(fā)現(xiàn)某些感染的病毒等。6）反轉(zhuǎn)錄PCR （reverse transcription PCR, RT-PCR）先將mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，然后再以cDNA為模板，用PCR方法加以擴增。應(yīng)用：分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物克隆cDNA及合成cDNA探針，改造cDNA序列等7）重組PCR在分子生物學(xué)研究中常常需要將兩個不同的基因融合在一起，通過PCR反應(yīng)可以比較容易地實現(xiàn)這一目的。原理：巧妙地設(shè)計和利用寡核苷酸引物，

52、共進行二次PCR反應(yīng)。在初級的二個PCR反應(yīng)中，每對引物中的一個引物3端與待重組的基因互補，5端與另一個待重組基因互補。分別進行PCR，所得二種PCR產(chǎn)物有部分重疊序列，混合二種PCR產(chǎn)物進行次級PCR，.12、蛋白質(zhì)組與基因組的特點比較基因序列不能反映蛋白質(zhì)的功能，蛋白質(zhì)遠比核酸復(fù)雜。與DNA修飾不同，蛋白質(zhì)的修飾有磷酸化、糖基化、乙?；?、疏基化等。在形成成熟的mRNA的過程中，一個基因由于拼接方式的不同能編碼多個不同的蛋白。蛋白在細胞的定位可以改變。蛋白對環(huán)境的改變也會產(chǎn)生反應(yīng)。mRNA水平常常不反映蛋白質(zhì)表達的水平，而且即使存在一個開放閱讀框也不保證只代表一個蛋白。一個蛋白可能涉及一個以

53、上的過程，而且相似的功能可能由不同的蛋白來執(zhí)行。蛋白質(zhì)組是一個動態(tài)的概念，同一細胞，處在不同的發(fā)育階段，細胞中的蛋白質(zhì)也會發(fā)生相應(yīng)的變化，從而導(dǎo)致不同的蛋白質(zhì)組。13、核酸分子探針有哪些種類？試説明各類的特點。（1）基因組DNA探針：克隆化的各種基因片段是最常用的核酸探針，因真核基因組存在高度重復(fù)序列，探針應(yīng)盡可能選用基因的編碼序列（外顯子），避免使用內(nèi)含子及其它非編碼序列，否則探針可能因高度重復(fù)序列的存在引起非特異性雜交而導(dǎo)致假陽性結(jié)果。（2）cDNA探針：與mRNA互補的DNA鏈稱cDNA，cDNA中不存在內(nèi)含子及其它高度重復(fù)序列，故特異性高，是一種較理想的核酸探針。（3）RNA探針：RN

54、A探針有以下優(yōu)點：RNA:RNA、RNA:DNA雜交體較DNA:DNA雜交體的穩(wěn)定性高，雜交反應(yīng)可在更嚴格的條件下進行，特異性高RNA單鏈不存在雙鏈DNA探針的互補雙鏈的復(fù)性，雜交效率高RNA無高度重復(fù)序列，非特異雜交少雜交后可用RNase消化未雜交的RNA探針，可降低雜交本底（4）寡核苷酸探針：人工合成的寡核苷酸片段作探針優(yōu)點：可以根據(jù)需要合成相應(yīng)的序列，避免基因組DNA探針中高度重復(fù)序列所帶來的影響多數(shù)長為1530bp，即使有一個堿基不配對也會影響雜交鏈的Tm值，嚴格控制反應(yīng)條件，可檢測出基因點突變探針復(fù)雜性降低，雜交反應(yīng)時間較短。18、非放射性標記物的優(yōu)點是什么？有哪幾類非放射性標記物？

55、合成非放射性核酸探針的方法有哪幾種？優(yōu)點：安全、對環(huán)境和人體無害、其標記物可反復(fù)使用，不存在半衰期問題，其標記的DNA探針保存在50的甘油中，在20可保存半年之久。主要有四類半抗原（hapten）：如生物素（biotin）、地高辛（digoxigenin或DIG、學(xué)名：異羥基毛地黃毒苷簡稱地高辛或地戈辛是一種類固醇半抗原，自然界存在于毛地黃植物），可利用這些半抗原的抗體進行檢測。配體(ligand)：生物素是抗生物素蛋白卵白素和鏈霉菌類抗生物素蛋白的配體，可用親和法檢測熒光素（fluorescein）:如羅丹明（rhodamine,一種熒光染料）等可被紫外線激發(fā)出熒光，用于檢測化學(xué)發(fā)光材料：有

56、些標記物與另一類物質(zhì)反應(yīng)而產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象，能直接對x光片曝光非放射性標記方法：1、異羥基毛地黃苷配基標記DNA探針（地高辛配基系統(tǒng)）1988年Heiles等發(fā)展用異羥基毛地黃苷配基標記DNA探針的方法，使非放射性標記的方法在靈敏度和特異性方面得到了很大提高。2.DNA探針的生物素（biotin）標記3.直接與核酸發(fā)生活性反應(yīng)、連接到核酸探針上的非放射性標記物4、熒光素標記核酸探針14、mRNA前體加工中加尾和加帽的生物學(xué)功能有哪些？mRNA 5'加帽的功能主要表現(xiàn)在4個方面：1）保護mRNA5端不被降解，細胞內(nèi)存在許多RNA酶，它們可攻擊游離的RNA分子。RNA酶的降解從5'

57、端起始，當(dāng)在mRNA的5'端加上m7GpppG帽子后，帶有3個連接磷酸的5'帽可阻止RNase切割。2）為核糖體識別mRNA提供信號，提高翻譯效率，真核生物mRNA必須通過5'帽結(jié)合蛋白才能接觸核糖體，起始翻譯。缺少加帽的mRNA由于不能被5'帽結(jié)合蛋白識別，其翻譯效率比加帽的mRNA低二十倍。3）作為進出細胞核的識別標記。凡由PolII轉(zhuǎn)錄的RNA均在5'端加帽，包括snRNA，這是，這是RNA分子進出細胞核的識別標記。大多數(shù)snRNA轉(zhuǎn)錄后在細胞核中接收5'端單甲基m7G加帽，然后轉(zhuǎn)移到細胞質(zhì)與snRNP蛋白結(jié)合。在細胞質(zhì)中nRNA5'帽需再修飾成為三甲基帶帽結(jié)構(gòu)m2，2，7G，隨后重新返回細胞核參與mRNA的剪接加工。U6 snRNA由PolIII轉(zhuǎn)錄，在其5'端保留的三磷酸基團無帽子結(jié)構(gòu)，因而不能輸出細胞核。某些突變型中被輸送到細胞質(zhì)中的snRNA由于不能合成三甲基帶帽結(jié)構(gòu)，不能返回細胞核。4）提高mRNA的剪接效率。5'帽結(jié)合蛋白涉及第一個內(nèi)含子剪接復(fù)合物的形成，直接影響mRNA的剪接效率poly（A）的功能增加mRNA的穩(wěn)定性，將攜帶或缺少poly（A）的球蛋白mRNA注入到蛙卵中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在6小時后缺少poly（A）的球蛋白mRNA不再進行