第3章-藥物的雜質(zhì)檢查

1、第三章第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查基本要求基本要求 一、掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計(jì)一、掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計(jì)算。算。 二、熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。二、熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。 三、了解熱分析在藥物分析中的應(yīng)用。三、了解熱分析在藥物分析中的應(yīng)用。一、藥物的純度要求一、藥物的純度要求1 1藥物純度的藥物純度的概念概念：藥物的純度是指藥物的純潔程度。：藥物的純度是指藥物的純潔程度。2. 2. 藥物純度的藥物純度的要求要求是不斷提高：是不斷提高： 例如：度冷丁例如：度冷丁19481948年收入年收入BPBP，19701970年經(jīng)年經(jīng)GCGC分離鑒定出兩種分離鑒定出兩

2、種 無(wú)效異構(gòu)體（無(wú)效異構(gòu)體（）和（）和（），有時(shí)高達(dá)），有時(shí)高達(dá)20%20%30%30%。 再如：再如：ASAASA中除了中除了SASA外，還存在乙酰水酸酐、乙酰水楊酰外，還存在乙酰水酸酐、乙酰水楊酰, ,水水 楊酸等楊酸等SASA的衍生物，具有致敏作用。的衍生物，具有致敏作用。 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 3 3藥物純度的藥物純度的評(píng)價(jià)評(píng)價(jià)：應(yīng)把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定應(yīng)把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)藥物的純度。等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)藥物的純度。二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi)二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi) 了解藥物中的雜質(zhì)的來(lái)源和種類(lèi)，可制定出檢查的項(xiàng)了

3、解藥物中的雜質(zhì)的來(lái)源和種類(lèi)，可制定出檢查的項(xiàng)目和方法目和方法雜質(zhì)雜質(zhì)的的概念概念: :藥物中存在的無(wú)治療作用，影響藥物的藥物中存在的無(wú)治療作用，影響藥物的療效和穩(wěn)定性，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，稱(chēng)為藥療效和穩(wěn)定性，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，稱(chēng)為藥物的雜質(zhì)。物的雜質(zhì)。 （一）雜質(zhì)的來(lái)源（一）雜質(zhì)的來(lái)源 有兩個(gè)方面：一是在生產(chǎn)過(guò)程中引入；二是在貯藏過(guò)有兩個(gè)方面：一是在生產(chǎn)過(guò)程中引入；二是在貯藏過(guò)程中引入。程中引入。 1. 1. 生產(chǎn)過(guò)程生產(chǎn)過(guò)程中引入的雜質(zhì)中引入的雜質(zhì) 主要指藥物在合成過(guò)程中，未反應(yīng)的原料、中間體主要指藥物在合成過(guò)程中，未反應(yīng)的原料、中間體和副產(chǎn)物和副產(chǎn)物例如例如：藥用：藥用NaC

4、lNaCl的的BrBr- -、I I- -、SOSO4 42-2-、K K+ +、CaCa2+2+、MgMg2+2+、FeFe3+3+ ASA ASA中的中的SASA；地西泮中的去甲安定；嗎啡中的罌粟堿地西泮中的去甲安定；嗎啡中的罌粟堿再如再如制劑中生成的雜質(zhì)：制劑中生成的雜質(zhì)：ASAASA片、栓劑中片、栓劑中SASA的檢查；鹽酸普魯?shù)臋z查；鹽酸普魯 卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸和二乙氨卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸和二乙氨 基乙醇的檢查?；掖嫉臋z查。 生產(chǎn)過(guò)程中生產(chǎn)過(guò)程中殘留有機(jī)溶劑、酸性或堿性雜質(zhì)的檢查。殘留有機(jī)溶劑、酸性或堿性雜質(zhì)的檢查。 藥物中無(wú)效、低效藥物中無(wú)效、低效異構(gòu)體異構(gòu)體或或晶型晶型

5、的檢查的檢查 例如：無(wú)味氯霉素存在例如：無(wú)味氯霉素存在A A、B B晶型，其中晶型，其中B B為有效，為有效，A A為低效。為低效。 苯甲咪唑有苯甲咪唑有A A，B B，C C三種晶型；三種晶型；20%20%；40%40%60%60%；90% 90% 2.2.貯藏過(guò)程貯藏過(guò)程引入的雜質(zhì)引入的雜質(zhì) 主要指外界條件的變化或微生物的作用可能發(fā)生的水解、氧主要指外界條件的變化或微生物的作用可能發(fā)生的水解、氧化、化、 異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)化、聚合等變化，而產(chǎn)生的有關(guān)雜質(zhì)。異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)化、聚合等變化，而產(chǎn)生的有關(guān)雜質(zhì)。 如：如：ASAASA水解生成水解生成SASA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸；和醋酸；

6、阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸； 麻醉乙醚氧化為醛和有毒的過(guò)氧化物。麻醉乙醚氧化為醛和有毒的過(guò)氧化物。（二）雜質(zhì)的種類(lèi)與分類(lèi)（二）雜質(zhì)的種類(lèi)與分類(lèi) 按雜質(zhì)的按雜質(zhì)的來(lái)源來(lái)源分為分為一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)和和特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)；按；按性質(zhì)性質(zhì)可分可分為為信號(hào)雜質(zhì)信號(hào)雜質(zhì)和和有害雜質(zhì)有害雜質(zhì)。一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)是指在個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引是指在個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。入的雜質(zhì)。（二）雜質(zhì)的種類(lèi)與分類(lèi)（二）雜質(zhì)的種類(lèi)與分類(lèi) 信號(hào)雜

7、質(zhì)信號(hào)雜質(zhì)一一 般無(wú)害，但其含量的多少可以反映出藥般無(wú)害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平，氯化物、硫酸鹽等就屬于信號(hào)雜質(zhì)。物的純度水平，氯化物、硫酸鹽等就屬于信號(hào)雜質(zhì)。 有害雜質(zhì)有害雜質(zhì)，如重金屬、砷鹽、氰化物等，對(duì)人體有，如重金屬、砷鹽、氰化物等，對(duì)人體有害，在藥品標(biāo)準(zhǔn)中必須嚴(yán)格控制。害，在藥品標(biāo)準(zhǔn)中必須嚴(yán)格控制。 三、雜質(zhì)的限量檢查三、雜質(zhì)的限量檢查 1 1雜質(zhì)限量的雜質(zhì)限量的概念概念 藥物中所含雜質(zhì)的藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。通常，叫做雜質(zhì)限量。通常 用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（ppmppm）來(lái)表示。來(lái)表示。2、雜質(zhì)檢查的要求、雜質(zhì)檢

8、查的要求 由于雜質(zhì)不可能完全除盡，也沒(méi)有必要除盡。所由于雜質(zhì)不可能完全除盡，也沒(méi)有必要除盡。所以在不影響療效和不發(fā)生毒性的原則下，既保證以在不影響療效和不發(fā)生毒性的原則下，既保證藥物質(zhì)量，又便于制造、貯藏和制劑生產(chǎn)，對(duì)于藥物質(zhì)量，又便于制造、貯藏和制劑生產(chǎn)，對(duì)于藥物中可能存在的雜質(zhì)，允許有一定限量，這一藥物中可能存在的雜質(zhì)，允許有一定限量，這一允許量被稱(chēng)為雜質(zhì)的限量。通常不要求測(cè)定其準(zhǔn)允許量被稱(chēng)為雜質(zhì)的限量。通常不要求測(cè)定其準(zhǔn)確含量。確含量。藥典藥典中規(guī)定的雜質(zhì)檢查均為限量中規(guī)定的雜質(zhì)檢查均為限量（或限度）檢查（或限度）檢查（Limit test）。）。三種檢查方法三種檢查方法比較法比較法靈敏

9、度法靈敏度法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法3 雜質(zhì)檢查方法雜質(zhì)檢查方法(限量檢查法限量檢查法)操作操作: :平行試驗(yàn)平行試驗(yàn)比較兩比較兩比色管的顏色或濁比色管的顏色或濁度度, ,判斷雜質(zhì)限量是判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定。否符合規(guī)定。管管2（對(duì)照管）（對(duì)照管）管管1（樣品管）（樣品管） 取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)取限度量的待檢雜質(zhì)對(duì)照品配成的對(duì)照溶液照溶液,與一定量供試品配成的供試品容液在與一定量供試品配成的供試品容液在相同條件下處理相同條件下處理, 比較反應(yīng)結(jié)果比較反應(yīng)結(jié)果, 判斷供試判斷供試液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定。液中所含雜質(zhì)限度是否符合規(guī)定。標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法 在供試品溶液中加入試劑在供

10、試品溶液中加入試劑, ,在試驗(yàn)在試驗(yàn)條件下反應(yīng)條件下反應(yīng), ,不得出現(xiàn)正反應(yīng)，不得出現(xiàn)正反應(yīng)， 既以既以檢測(cè)條件下反應(yīng)靈敏度控制雜質(zhì)限量檢測(cè)條件下反應(yīng)靈敏度控制雜質(zhì)限量。不得發(fā)生渾濁、蒸餾水TSAgNOHNOml5033 如：蒸餾水中氯化物的檢查如：蒸餾水中氯化物的檢查 5滴滴 1mL0.2mg/50mL 4g/mL靈敏度法靈敏度法 取一定量供試品取一定量供試品,在規(guī)定條件在規(guī)定條件下測(cè)定待檢雜質(zhì)吸光度下測(cè)定待檢雜質(zhì)吸光度, 與規(guī)定限量與規(guī)定限量比較比較, 判斷供試品中雜質(zhì)限量。判斷供試品中雜質(zhì)限量。比較法比較法 例：腎上腺素中腎上腺酮的檢例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查查 比比較較法法供試品液供

11、試品液(2.0mg/ml)鹽酸溶液鹽酸溶液樣品樣品 (0.05mol/L)A A310nm310nm規(guī)定：規(guī)定：A A310nm310nm0.050.05%100供試品量允許雜質(zhì)存在的最大量雜質(zhì)限量%100SCVL寫(xiě)成：寫(xiě)成：限量計(jì)算公式限量計(jì)算公式 2 2雜質(zhì)限量的雜質(zhì)限量的計(jì)算計(jì)算 雜質(zhì)限量的雜質(zhì)限量的計(jì)算公式計(jì)算公式： 雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量 = = 雜質(zhì)的最大允許量供試品的量雜質(zhì)的最大允許量供試品的量100%100% = = 標(biāo)準(zhǔn)液濃度體積供試品的量標(biāo)準(zhǔn)液濃度體積供試品的量100%100% L L（% %） = C = CV/SV/S100%100% 例例1 1對(duì)乙?；又械穆然锏臋z查：對(duì)

12、乙?；又械穆然锏臋z查： 已知：已知：S = 2.0gS = 2.0g25/10025/100；C = 10g/mlC = 10g/ml； V = 5.0ml V = 5.0ml 求：求： L = L = ？ 解：解： L = CL = CV/SV/S100%100% = 10 = 105.0/2.05.0/2.010106 625/10025/100100% = 0.01%100% = 0.01% 例例2 2葡萄糖中重金屬的檢查：葡萄糖中重金屬的檢查： 已知：已知：S = 4.0gS = 4.0g；C = 10g/mlC = 10g/ml；L = 5L = 51010-6-6 求：求： V

13、 = V = ？ 解：解：V = LV = LS / C = 5S / C = 51010-6-64.0/104.0/101010-6-6 = 2.0(ml) = 2.0(ml) 例例3 3葡萄糖中砷鹽的檢查：葡萄糖中砷鹽的檢查： 已知：已知：V = 2.0mlV = 2.0ml；C = 1g/mlC = 1g/ml；L = 0.0004%L = 0.0004% 求：求： S = S = ？ 解：解： S = CS = CV / L = 1V / L = 11010-6-62.0/42.0/41010-6-6 = 0.5( g ) = 0.5( g ) 例例4 4磷酸可待因中嗎啡的檢查：磷酸可

14、待因中嗎啡的檢查： 已知：已知：V = 5.0mlV = 5.0ml；C = 0.02 mg/mlC = 0.02 mg/ml；S = 0.1gS = 0.1g 求：求： L = L = ？ 解：解： L = CL = CV / S = 5.0V / S = 5.00.02/0.10.02/0.11000 1000 100%100% = 0.1% = 0.1% 注意點(diǎn)注意點(diǎn) 單位一致單位一致 稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù) 表示方法（表示方法（% %，mmpmmp）第二節(jié)第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法 一、氯化物的檢查一、氯化物的檢查 1 1原理原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中與硝酸銀試液作用

15、，：是利用氯化物在硝酸性溶液中與硝酸銀試液作用， 生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶生成氯化銀的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶 液在相同條件下生成的氯化銀混濁液比較，以判斷液在相同條件下生成的氯化銀混濁液比較，以判斷 供試品中氯化物是否超過(guò)限量。供試品中氯化物是否超過(guò)限量。 Cl Cl- - + Ag + Ag+ + AgCl AgCl 2 2條件：條件： ClCl- - 0.05mg 0.05mg0.08mg/50ml, 0.08mg/50ml, 即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn) 氯化鈉溶液氯化鈉溶液5 5mlml8ml8ml。 酸度酸度 稀硝酸稀硝酸1010ml/50mlml/50ml

16、。 溫度溫度 30 304040 3 3干擾的排除干擾的排除 （1 1）供試品液混濁）供試品液混濁：可用含：可用含硝酸硝酸的蒸餾水洗凈濾紙中氯化物的蒸餾水洗凈濾紙中氯化物 后過(guò)濾來(lái)消除混濁對(duì)氯化物檢查的干擾。后過(guò)濾來(lái)消除混濁對(duì)氯化物檢查的干擾。 （2 2）供試品有色：）供試品有色： 可采用可采用內(nèi)消色法內(nèi)消色法，按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法處理。，按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法處理。供試品供試品+ AgNO3放置放置1010minmin澄清溶液澄清溶液+ +標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)NaClNaCl+ +水水對(duì)照溶液對(duì)照溶液供試品供試品+ AgNO3+ +水水供試品溶液供試品溶液暗處放置暗處放置5 5minmin后比后比

17、較較。二、硫酸鹽檢查法二、硫酸鹽檢查法 1 1原理原理 利用利用SOSO4 42-2-在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用，在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用， 生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液生成硫酸鋇的白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 在相同條件下生成的硫酸鋇渾濁液比較，以判斷供試在相同條件下生成的硫酸鋇渾濁液比較，以判斷供試 品中硫酸鹽是否超過(guò)限量品中硫酸鹽是否超過(guò)限量。 2 2條件條件： SOSO4 42-2- 0.1mg 0.1mg0.5mg/50ml, 0.5mg/50ml, 即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn) 硫酸鉀溶液硫酸鉀溶液1 15 5mlml。 酸酸 度度 稀鹽酸稀鹽酸2

18、 2ml/50mlml/50ml。 3 3干擾的排除干擾的排除 供試品有色：可采用內(nèi)消色法。供試品有色：可采用內(nèi)消色法。 三、鐵鹽檢查法三、鐵鹽檢查法 （一）硫氰酸鹽法（一）硫氰酸鹽法 1 1原理原理 FeFe3+3+ + 6SCN + 6SCN- - Fe(SCN) Fe(SCN)6-6- 3-3- 紅色紅色 2 2條件條件： FeFe3+3+ 0.01mg 0.01mg0.05mg/50ml, 0.05mg/50ml, 即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鐵即相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鐵 溶液溶液1 15 5mlml。 酸酸 度度 稀鹽酸稀鹽酸4 4ml/50mlml/50ml。 HCl 3 3干擾的排除干擾的排除 （1 1）

19、當(dāng)有當(dāng)有FeFe2+2+存在時(shí)，加氧化劑過(guò)硫酸銨氧化存在時(shí)，加氧化劑過(guò)硫酸銨氧化FeFe2+2+成成FeFe3+3+。 （2 2）當(dāng)供試液管與對(duì)照溶液管色調(diào)不一致，或所呈硫氰酸鐵的當(dāng)供試液管與對(duì)照溶液管色調(diào)不一致，或所呈硫氰酸鐵的 顏色較淺不便比較時(shí)，可分別移入分液漏斗中，加正丁醇顏色較淺不便比較時(shí)，可分別移入分液漏斗中，加正丁醇 或異戊醇提取，分別取提取液比色。或異戊醇提取，分別取提取液比色。 (二）巰基醋酸法二）巰基醋酸法 1. 原理原理 巰基醋酸還原巰基醋酸還原Fe3+為為Fe2+，在氨堿性試液中與在氨堿性試液中與Fe 2 + 作用生成紅色配位離子。作用生成紅色配位離子。 2Fe3+ +

20、 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + H+ Fe(SCH2COOH)2 Fe(SCH2COOH)2 2- + 2H2O 2OH- 2. 2. 說(shuō)明說(shuō)明 在加巰基醋酸溶液前，在加巰基醋酸溶液前，先加先加枸櫞酸溶液，使其與枸櫞酸溶液，使其與鐵離形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵離形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉淀。（此法靈敏度比較高，但試劑較貴）鐵沉淀。（此法靈敏度比較高，但試劑較貴）四、重金屬檢查法四、重金屬檢查法 重金屬是指在實(shí)驗(yàn)室條件下與重金屬是指在實(shí)

21、驗(yàn)室條件下與S S2-2-作用顯色的金屬雜作用顯色的金屬雜 質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品 生產(chǎn)過(guò)程中遇到生產(chǎn)過(guò)程中遇到鉛鉛的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中 毒，故檢查時(shí)以鉛作為代表。毒，故檢查時(shí)以鉛作為代表。 中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（20002000年版）重金屬的檢查法一共收載了年版）重金屬的檢查法一共收載了四種方法四種方法 第一法第一法為硫代乙酰胺法；為硫代乙酰胺法； 第二法第二法是將供試品在是將供試品在500600在熾灼破壞后，在熾灼破壞后，再按第一法檢查；再按第一法檢查；第三法第三法是檢查能溶

22、入堿溶液，而不溶于酸溶液的藥是檢查能溶入堿溶液，而不溶于酸溶液的藥物，在堿性條件下用物，在堿性條件下用硫化鈉硫化鈉作顯色劑；作顯色劑；第四法第四法為微孔濾膜法，比較供試溶液和對(duì)照溶液鉛為微孔濾膜法，比較供試溶液和對(duì)照溶液鉛斑的顏色，來(lái)判斷供試品種的重金屬是否超過(guò)限量。斑的顏色，來(lái)判斷供試品種的重金屬是否超過(guò)限量。 1 1原理原理 CHCH3 3CSNHCSNH2 2 + H + H2 2O CHO CH3 3CONHCONH2 2 + H + H2 2S S 合格合格 H H2 2S + PbS + Pb2+2+ PbS + 2H PbS + 2H+ + 2 2條件：條件： PbPb2+2+

23、1010g g2020g/27ml,g/27ml,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1 12 2mlml。 酸酸 度度 pH 3.0pH 3.03.5. 3.5. pH3.5 第一法第一法為硫代乙酰胺法；為硫代乙酰胺法； 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度 硫代乙酰胺試液硫代乙酰胺試液 溶液的溶液的pH 供試品溶液有顏色時(shí)的處理供試品溶液有顏色時(shí)的處理 干擾物的排除方法干擾物的排除方法討論討論 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度適宜目視比色的濃度范圍適宜目視比色的濃度范圍 Pb2+標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液10 g/ml 12ml 硫代乙酰胺試液硫代乙酰胺試液 H2S試液：惡臭和毒性試液：惡臭和毒性；不穩(wěn)定；易不穩(wěn)定

24、；易被空氣氧化而析出硫；濃度難以控制。被空氣氧化而析出硫；濃度難以控制。 改用硫代乙酰胺為顯色劑改用硫代乙酰胺為顯色劑（95版藥典）版藥典）硫代乙酰胺在實(shí)驗(yàn)條件下水解產(chǎn)生硫代乙酰胺在實(shí)驗(yàn)條件下水解產(chǎn)生H2S,與重金屬離子反應(yīng)。與重金屬離子反應(yīng)。pH在在3.03.5時(shí)時(shí), 呈色較完全呈色較完全酸度增大酸度增大, 呈色變淺甚至不呈色呈色變淺甚至不呈色 溶液的溶液的pH對(duì)于金屬離子與硫化對(duì)于金屬離子與硫化氫呈色影響較大氫呈色影響較大. 溶液的溶液的pH 供試品溶液有顏色時(shí)的處理供試品溶液有顏色時(shí)的處理a.外消色法外消色法 b.內(nèi)消色法內(nèi)消色法a. 外消色法外消色法指示劑調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié) b. 內(nèi)消色法

25、內(nèi)消色法 與氯化物檢查時(shí)的處理方法類(lèi)似與氯化物檢查時(shí)的處理方法類(lèi)似 作樣品管硫代乙酰胺第二份作對(duì)照管溶液標(biāo)準(zhǔn)濾液硫代乙酰胺第一份，分成二等份兩倍量的供試品除去 Pb pH3.5PbS過(guò)濾 干擾物的排除方法干擾物的排除方法干擾：弱酸性溶液中干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化氧化H2S析出析出S,產(chǎn)生混濁影響檢查產(chǎn)生混濁影響檢查.a.供試品中微量高價(jià)供試品中微量高價(jià)Fe3+存在存在如：如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查.排除：排除：加入加入抗壞血酸抗壞血酸或或鹽酸羥胺鹽酸羥胺使使Fe3+還原為還原為Fe2+.b.供試品為鐵鹽（大量的供試品為鐵鹽（大量的Fe3+） Fe3+在在HC

26、l溶液中能形成配位化合物溶液中能形成配位化合物用用乙醚提取乙醚提取 Fe3+HCl HFeCl62-（黃色）（黃色）水層加氨試液調(diào)至堿性水層加氨試液調(diào)至堿性,殘存的殘存的Fe3+可可用用KCN掩蔽掩蔽, 按第三法檢查按第三法檢查. 如：枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查c.藥物本身能生成不溶性硫化物藥物本身能生成不溶性硫化物加入掩蔽劑消除干擾加入掩蔽劑消除干擾加掩蔽劑加掩蔽劑KCN,使使銻銻、鋅鋅形成穩(wěn)定形成穩(wěn)定的的配合物配合物后后, 用第三法檢查用第三法檢查.如：葡萄酸銻鈉中重金屬的檢查如：葡萄酸銻鈉中重金屬的檢查1.原理原理 供試品先熾灼破壞后供試品先熾灼破壞后,使有機(jī)結(jié)合使有機(jī)

27、結(jié)合的重金屬游離的重金屬游離, 再按再按第一法第一法檢查檢查.第二法第二法 灼燒后檢查灼燒后檢查適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇的有機(jī)藥物于水、稀酸、乙醇的有機(jī)藥物. 2. 操作操作 緩緩熾灼緩緩熾灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品供試品 炭化炭化 加熱加熱 HNO3 500-600H2SO4 除盡除盡 放冷放冷 完全灰化完全灰化 蒸干蒸干HCl 2ml 水水15ml 中性中性 按第一法檢查按第一法檢查 蒸干蒸干 氨試液氨試液注意：注意：做空白試驗(yàn)做空白試驗(yàn) a. HNO3處理后處理后,必須蒸干除盡必須蒸干除盡NO.3. 討論討論b. 熾灼溫

28、度嚴(yán)格控制：熾灼溫度嚴(yán)格控制：500-600 c. 含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí)含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí) 改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃 (瑪瑙瑪瑙) 蒸蒸 發(fā)皿發(fā)皿.如：鹽酸氟奮乃靜中重金屬檢查如：鹽酸氟奮乃靜中重金屬檢查 1. 原理原理在在堿性堿性介質(zhì)中介質(zhì)中,以以Na2S為為顯色劑顯色劑, 使使Pb2+與與S2-作用生成作用生成PbS 的的混懸液混懸液, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較處理所呈顏色比較, 不得更深不得更深第三法第三法 硫化鈉法硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶解于適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查堿性溶液的

29、藥物中重金屬的檢查 如：磺胺類(lèi)與巴比妥類(lèi)藥物如：磺胺類(lèi)與巴比妥類(lèi)藥物2. 方法方法 取供試品適量取供試品適量,加加NaOH試液試液5ml和水和水 20ml使溶解后使溶解后,置納氏比色管中置納氏比色管中,加加Na2S試液試液5滴滴, 搖勻搖勻, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較3. 討論討論 Na2S 對(duì)玻璃有腐蝕性對(duì)玻璃有腐蝕性,久久置產(chǎn)生絮狀物置產(chǎn)生絮狀物,應(yīng)臨用新配應(yīng)臨用新配第四法第四法 微孔濾膜法微孔濾膜法 當(dāng)重金屬含量低當(dāng)重金屬含量低(2-5 g) 時(shí)時(shí), 在比色在比色管中難于目視觀察管中難于目視觀察,采用本法采用本法 1. 原原 理理同

30、第一法同第一法 使重金屬生成的硫使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜化物富集于微孔濾膜上上(鉛斑鉛斑)提高檢查的提高檢查的靈敏度靈敏度 五、砷鹽檢查法五、砷鹽檢查法 中國(guó)藥典采用中國(guó)藥典采用古蔡法古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀和二乙基二硫代氨基甲酸銀法（法（Ag-DDCAg-DDC）檢查藥物中的微量的砷鹽。檢查藥物中的微量的砷鹽。 （一）古蔡法一）古蔡法Gutzeit)Gutzeit) (BP也采用此法）也采用此法） 1. 原理原理 As3+ + 3Zn + 3H+ 3Zn+ +AsH3 AsO33- + 3Zn + 9H+ 3Zn+ + 3H2O + AsH3 AsO43- + 4Zn + 1

31、1H+ 4Zn+ + 4H2O + AsH3 AsH3 + 3HgBr2 3HBr + As(HgBr)3 (棕色棕色) 2As(HgBr)3 + AsH3 3 AsH(HgBr)2 (黃色黃色) As(HgBr)3 + AsH3 3HBr + As2Hg3 (棕黑色棕黑色) 2. 裝置與試劑作用裝置與試劑作用 (1) (1) 驗(yàn)砷儀驗(yàn)砷儀 砷化氫發(fā)生瓶砷化氫發(fā)生瓶; ;中空磨口塞中空磨口塞; ;導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管 (2) (2) 試劑的作用試劑的作用 合格合格 KI-SnClKI-SnCl2 2的作用：交替還原作用；首先將的作用：交替還原作用；首先將AsO43-還還 原成原成AsO33-，生成的碘

32、再被還原成碘離子。生成的碘再被還原成碘離子。檢查方法：檢查方法：A A為為100ml100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶B B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞 C C為導(dǎo)氣管為導(dǎo)氣管D D為具孔的有機(jī)玻璃旋塞為具孔的有機(jī)玻璃旋塞 E E為中央具有圓孔的有機(jī)玻璃旋塞蓋為中央具有圓孔的有機(jī)玻璃旋塞蓋古蔡法裝置古蔡法裝置裝入裝入醋酸鉛棉花醋酸鉛棉花頂端平面上放一片頂端平面上放一片溴化汞試紙溴化汞試紙 蓋上旋塞蓋上旋塞E E并旋緊并旋緊 樣品溶液、鹽酸、樣品溶液、鹽酸、SnClSnCl2 2、KIKI AsO43- + 2I- +2H+ AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn

33、2+ + 2H+ AsO33- + Sn4+ H2O I2 + Sn2+ 2I- + Sn4+ 4I- + Zn2+ ZnI42- ZnZn粒粒與與氯化亞錫氯化亞錫作用，在其面上形成作用，在其面上形成Zn-SnZn-Sn齊，起齊，起 去極化作用。去極化作用。 Pb(AC)Pb(AC)2 2棉棉的作用是消除供試品可能含有的少量的硫的作用是消除供試品可能含有的少量的硫 化物?；?。 S S2-2- + 2H + 2H+ + H H2 2S S H H2 2S + HgBrS + HgBr2 2 2HBr + HgS 2HBr + HgS （汞斑）汞斑） H H2 2S + Pb(AC)S + Pb

34、(AC)2 2 PbS + 2HAC PbS + 2HAC 3. 干擾的排除干擾的排除 （1）供試品為）供試品為S2-,SO32-, S2O32-等等: 因在酸中生成因在酸中生成H2S,SO2,與與 HgBr2 HgBr2作用生成作用生成HgSHgS或或HgHg，干擾砷斑檢查。用硝酸氧化成硫干擾砷斑檢查。用硝酸氧化成硫 酸鹽可消除。酸鹽可消除。 （2）供試品為）供試品為Fe3+ 能消耗能消耗KI，SnCl2 應(yīng)測(cè)定條件，先可加足應(yīng)測(cè)定條件，先可加足 量量KI。（二）（二）Ag-DDCAg-DDC法法( (二乙基二硫代氨基甲酸銀，二乙基二硫代氨基甲酸銀，USPUSP采用此法采用此法) ) 1.1

35、.原理原理：是利用砷化氫與：是利用砷化氫與Ag-DDCAg-DDC吡啶溶液吡啶溶液作用，使作用，使Ag-DDCAg-DDC中的中的 銀還原為紅色膠態(tài)銀，以銀還原為紅色膠態(tài)銀，以Ag-DDCAg-DDC溶液為空白，于溶液為空白，于510510nmnm 的波長(zhǎng)處，測(cè)定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大的波長(zhǎng)處，測(cè)定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大 于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。 2. 2.試劑的作用試劑的作用：同古蔡法。：同古蔡法。六、溶液顏色檢查法六、溶液顏色檢查法 溶液顏色檢查法是控制藥物中有色雜質(zhì)量的方法。中國(guó)藥典溶液顏色檢查法是控制藥物中有色雜質(zhì)量的方法。中國(guó)藥典 （20002

36、000年版）收載有三種方法：年版）收載有三種方法： K K2 2CrCr2 2O O7 7 黃、綠黃、綠 1. 1. 標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法 標(biāo)準(zhǔn)比色液標(biāo)準(zhǔn)比色液 CoClCoCl2 2 橙黃橙黃, ,橙紅橙紅 2. 2. 分光光度法分光光度法 CuSOCuSO4 4 棕紅棕紅 3. 3. 色差計(jì)法色差計(jì)法 通過(guò)測(cè)定供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液或水之間的色差值通過(guò)測(cè)定供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液或水之間的色差值七、易炭化物檢查法七、易炭化物檢查法 檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微 量量有機(jī)雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì)。這類(lèi)雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采用與標(biāo)準(zhǔn)。這

37、類(lèi)雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采用與標(biāo)準(zhǔn) 比色液比色的方法進(jìn)行檢查。比色液比色的方法進(jìn)行檢查。(標(biāo)準(zhǔn)比色液為標(biāo)準(zhǔn)比色液為CoCl2, K2Cr2O7, CuSO4) 檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)。常采用與濁檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)。常采用與濁 度標(biāo)度標(biāo)準(zhǔn)液比濁的方法進(jìn)行檢查。濁準(zhǔn)液比濁的方法進(jìn)行檢查。濁 度標(biāo)準(zhǔn)液制備原理：度標(biāo)準(zhǔn)液制備原理： (CH2)6N4 + 6H2O 6HCHO + 4NH3 HCHO + H2N-NH2 H2C=N-NH2 + H2O 甲醛腙白色混濁甲醛腙白色混濁 不同級(jí)號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液不同級(jí)號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液 級(jí) 號(hào) 0.5 1 2 3 4濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（ml） 2.5 5.0 10.0

38、 30.0 50.0水 （ml） 97.5 95.0 90.0 70.0 50.0八、溶液澄清度檢查法八、溶液澄清度檢查法九、熾灼殘?jiān)鼨z查法九、熾灼殘?jiān)鼨z查法(residue on ignition) BP稱(chēng)稱(chēng)硫酸灰分硫酸灰分（sulphated ash) 是檢查有機(jī)藥物中混入的各種無(wú)機(jī)雜質(zhì)。常采用是檢查有機(jī)藥物中混入的各種無(wú)機(jī)雜質(zhì)。常采用 重量方法進(jìn)行檢查。重量方法進(jìn)行檢查。 殘?jiān)佰釄逯貧堅(jiān)佰釄逯?坩堝重坩堝重 殘?jiān)鼩堅(jiān)? = % = 100%100% 供試品重供試品重十、干燥失重檢查法十、干燥失重檢查法 主要檢查藥物中的主要檢查藥物中的水分水分及其他及其他揮發(fā)性的物質(zhì)揮發(fā)性的物質(zhì)。常采

39、用重量方法進(jìn)行檢查。常用的方法有四種：常采用重量方法進(jìn)行檢查。常用的方法有四種：（一）常壓恒溫干燥法（一）常壓恒溫干燥法 （二）干燥劑干燥法（二）干燥劑干燥法 （三）（三） 減壓干燥法減壓干燥法 熱重分析法熱重分析法（四）（四） 熱分析法（熱分析法（thermo analysis) ) 差示熱分析差示熱分析 差示掃描量熱法差示掃描量熱法 1. 1.熱重分析法（熱重分析法（thermogravimetric analysis, TGA) 在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系，研究物質(zhì)在在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系，研究物質(zhì)在 加熱同時(shí)失重的情況下，所發(fā)生的質(zhì)的變化，常用于藥物穩(wěn)定

40、加熱同時(shí)失重的情況下，所發(fā)生的質(zhì)的變化，常用于藥物穩(wěn)定 性的研究；貴重和易氧化藥物的干燥失重測(cè)定。性的研究；貴重和易氧化藥物的干燥失重測(cè)定。 2. 2.差示熱分析（差示熱分析（differentialtherml analysis , DTA) ) 是在程序升溫下，測(cè)量被測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫差與溫是在程序升溫下，測(cè)量被測(cè)物質(zhì)和參比物之間的溫差與溫 度關(guān)系的一種技術(shù)。參比物是一種惰性物質(zhì)，在加熱過(guò)程中度關(guān)系的一種技術(shù)。參比物是一種惰性物質(zhì)，在加熱過(guò)程中 不發(fā)生相變和化學(xué)變化。因此溫差不發(fā)生相變和化學(xué)變化。因此溫差( (T)T)只與被測(cè)物質(zhì)的量質(zhì)只與被測(cè)物質(zhì)的量質(zhì) 變化有關(guān)。變化有關(guān)。T=0 T

41、=0 被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng)被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng); ;T= - T= - 為為 吸熱峰吸熱峰; ;T = + T = + 為放熱峰為放熱峰. . 測(cè)藥的溶點(diǎn)測(cè)藥的溶點(diǎn) DTADTA在藥物分析中應(yīng)用在藥物分析中應(yīng)用 尖峰為物理變化尖峰為物理變化 藥物定性分析藥物定性分析 寬峰為化學(xué)變化寬峰為化學(xué)變化 估測(cè)藥物的純度估測(cè)藥物的純度 3 3. .差示掃描量熱法差示掃描量熱法( (differential scanning calorimetry, DSC) 是在程序升溫下，測(cè)量維持樣品和參比物的溫度相同，系統(tǒng)是在程序升溫下，測(cè)量維持樣品和參比物的溫度相同，系統(tǒng) 所需供給樣品隨溫差變化的能量

42、的一種技術(shù)。所需供給樣品隨溫差變化的能量的一種技術(shù)。DSCDSC與與DTADTA的的不同之不同之 處處是記錄方式不同，是記錄系統(tǒng)供給的能量，吸熱供給能量；放是記錄方式不同，是記錄系統(tǒng)供給的能量，吸熱供給能量；放 熱減少供給的能量。在藥物分析中應(yīng)用與熱減少供給的能量。在藥物分析中應(yīng)用與DTADTA相同。相同。DSC-TGDSC-TG常聯(lián)合常聯(lián)合 用。用。十一、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法十一、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法ChP(1995) 主要檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的有害的有機(jī)溶劑主要檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的有害的有機(jī)溶劑(如苯、氯如苯、氯 仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、環(huán)氧乙烷、二氧六環(huán)等）仿、二氯甲烷、吡啶

43、、甲苯、環(huán)氧乙烷、二氧六環(huán)等）。常采用常采用 氣相色譜法方法進(jìn)行檢查。常用的方法有二種：氣相色譜法方法進(jìn)行檢查。常用的方法有二種： 直接進(jìn)樣法和直接進(jìn)樣法和 頂空進(jìn)樣法（適用于揮發(fā)性大的樣品測(cè)定）。頂空進(jìn)樣法（適用于揮發(fā)性大的樣品測(cè)定）。 色譜色譜系統(tǒng)性系統(tǒng)性試驗(yàn)的試驗(yàn)的要求要求： (1) (1) N N1000;(2) 1000;(2) 用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，要求用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，要求R R1.5; (3)1.5; (3)外標(biāo)法測(cè)外標(biāo)法測(cè) 定時(shí)，待測(cè)物的峰面積的定時(shí)，待測(cè)物的峰面積的RSDRSD10%10%。殘留有機(jī)溶劑測(cè)定的方法和限量殘留有機(jī)溶劑測(cè)定的方法和限量有機(jī)溶劑 柱溫（） 內(nèi)標(biāo) 物 測(cè)定方

44、法 限量（%） 二氧六環(huán) 170 吡啶 1 法 0.038吡啶 170 二氧六環(huán) 1 法 0.02苯 170 甲苯 1 法或2 法 0.0002甲苯 170 苯 1法或2 法 0.089氯方 140 二氯甲烷 1 法或2 法 0.006二氯甲烷 140 1法或2 法 0.06環(huán)氧乙烷 80 2 法 0.001第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查方法特殊雜質(zhì)的檢查方法 一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異一、利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異 （一）臭味及揮發(fā)性質(zhì)的差異（一）臭味及揮發(fā)性質(zhì)的差異 例如：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品例如：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品2.02.0g,g,直火加熱無(wú)直火加熱

45、無(wú) 辛味。濃過(guò)氧化氫中不揮發(fā)性雜質(zhì)檢查：辛味。濃過(guò)氧化氫中不揮發(fā)性雜質(zhì)檢查：1010mlml水浴蒸水浴蒸 干殘?jiān)蓺堅(jiān)?515mgmg （二）顏色差異二）顏色差異 例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品2.02.0g g， 加加NaOHNaOH試液試液1010mlml，加水加水2525mlml，與黃色與黃色3 3號(hào)比色液比，號(hào)比色液比， 不得更深不得更深。 （三）溶解行為的差異（三）溶解行為的差異 例如：吡哌酸中堿中不溶物吡哌酸甲酯（例如：吡哌酸中堿中不溶物吡哌酸甲酯（I I）和（和（IIII）檢查檢查 （四）旋光性質(zhì)的差異（四）旋光性質(zhì)的

46、差異 例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液(50(50mg/ml)mg/ml)- - 0.4 0.4 （五）對(duì)光吸收性質(zhì)的差異（五）對(duì)光吸收性質(zhì)的差異 1. 1. 紫外分光光度法：紫外分光光度法： 例如例如: : 地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查 再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：可利用供試液的吸收度再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：可利用供試液的吸收度 比來(lái)控制雜質(zhì)比來(lái)控制雜質(zhì); ;純品苯丙醇純品苯丙醇A A247nm247nm/A/A258nm258nm= 0.59; = 0.59; 99.5% 99.5% 時(shí)時(shí)A A247nm247nm/A

47、/A258nm258nm= 0.79;= 0.79; 因此規(guī)定供試品因此規(guī)定供試品A A247nm247nm/A/A258nm258nm 0.79; 0.79; 即所含苯丙酮即所含苯丙酮 0.5%. 0.5%. 2. 2. 原子吸收分光光度法：原子吸收分光光度法： 是通過(guò)測(cè)定藥物中所含待測(cè)元素原子是通過(guò)測(cè)定藥物中所含待測(cè)元素原子蒸氣蒸氣，吸收發(fā)自，吸收發(fā)自光源的該元素特定波長(zhǎng)的程度，以求出藥物中待測(cè)元素的光源的該元素特定波長(zhǎng)的程度，以求出藥物中待測(cè)元素的 含量。含量。 限量檢查時(shí)：對(duì)照品液限量檢查時(shí)：對(duì)照品液 = = 供試品供試品 + + 限量限量- - a a 供試品液供試品液 = - =

48、- b b 符合規(guī)定符合規(guī)定時(shí)時(shí) b b (a-b); b (a-b); b (a-b)(a-b)不合格不合格。 3 3、紅外分光光度法：、紅外分光光度法： 主要用于藥物中無(wú)效或低效主要用于藥物中無(wú)效或低效晶型檢查晶型檢查，如甲苯咪唑，如甲苯咪唑中中 A A晶型檢查晶型檢查 4.4.熒光分析法熒光分析法 3,4- 3,4-二去氫利血平二去氫利血平 利血平中氧化產(chǎn)物檢查：利血平利血平中氧化產(chǎn)物檢查：利血平( (無(wú)熒光無(wú)熒光) () (I)(I)(黃綠色熒光黃綠色熒光) ) 3,4,5,6- 3,4,5,6-四去氫利血平四去氫利血平 ( (II)(II)(藍(lán)色熒光藍(lán)色熒光) ) ( (六六) )吸

49、附或分配性的差異吸附或分配性的差異 1. 1.薄層色譜法薄層色譜法( (TLC) TLC) (1) (1)雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)對(duì)照品法 例如例如: :鹽酸左旋咪唑中檢查鹽酸左旋咪唑中檢查 硅膠硅膠G G 2,3- 2,3-二氫二氫-6-6-苯基咪唑苯基咪唑2,1-2,1-bb噻唑鹽噻唑鹽 苯苯: :甲醇甲醇: :冰冰HACHAC 樣品樣品 對(duì)照品對(duì)照品。 (2)(2)高低濃度對(duì)比品法高低濃度對(duì)比品法 例如例如: :鹽酸異丙嗪中有關(guān)物質(zhì)的檢查鹽酸異丙嗪中有關(guān)物質(zhì)的檢查 硅膠硅膠G G 有有多個(gè)雜質(zhì)多個(gè)雜質(zhì)而且而且結(jié)構(gòu)不清結(jié)構(gòu)不清 樣品樣品1010mg/ml;mg/ml;對(duì)照品對(duì)照品(1)0.15mg

50、/ml (1)0.15mg/ml 己烷己烷: :丙酮丙酮: :乙胺乙胺 (2)0.05 (2)0.05mg/mlmg/ml 樣品液樣品液 對(duì)對(duì)(1) (2)(1) (2) 供試液雜質(zhì)斑點(diǎn)供試液雜質(zhì)斑點(diǎn)不多于不多于3 3個(gè)個(gè); ;雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照(2)(2)的主斑點(diǎn)比的主斑點(diǎn)比 較較, ,不得更深不得更深; ;如有一點(diǎn)超過(guò)如有一點(diǎn)超過(guò), ,應(yīng)不深于對(duì)照液應(yīng)不深于對(duì)照液(2)(2)的主斑點(diǎn)的主斑點(diǎn). . . . . . . 2. 2.紙層析法紙層析法( (PC)PC) 常用于常用于極性大極性大的藥物的分離、分析，如地高辛中的的藥物的分離、分析，如地高辛中的有關(guān)雜質(zhì)的檢查。有關(guān)雜質(zhì)的檢查

51、。 3. 3.高效液相色譜法高效液相色譜法( (HPLC)HPLC) （1 1）峰面積歸一化法峰面積歸一化法：L% = AL% = Ai i /(A/(Ai i + A + A主主）100% 100% 例如：利巴韋林中有關(guān)雜質(zhì)的檢查：例如：利巴韋林中有關(guān)雜質(zhì)的檢查： 對(duì)照品液對(duì)照品液(5(5g/ml)g/ml)進(jìn)樣進(jìn)樣1010l,l,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)滿(mǎn)調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)滿(mǎn) 量程的量程的20%20%25%25% 樣品液樣品液(0.4(0.4mg/ml)mg/ml)進(jìn)樣進(jìn)樣1010l, l, 雜質(zhì)雜質(zhì)AAi i(A(Ai i+A+A主主） 的的1.0%1.0% （2 2）不加校正因子主成分對(duì)照法

52、不加校正因子主成分對(duì)照法 對(duì)照品液為供試品的稀釋液進(jìn)樣測(cè)得對(duì)照品液為供試品的稀釋液進(jìn)樣測(cè)得A A主主 供試品液進(jìn)樣測(cè)得供試品液進(jìn)樣測(cè)得AAi i 其其A Ai i A A主主即為合格即為合格. . 例如例如: :甲硝唑中甲硝唑中2-2-甲基甲基-5-5-硝基咪唑硝基咪唑: : 對(duì)照品液對(duì)照品液(0.01(0.01mg/ml)mg/ml)進(jìn)樣進(jìn)樣2020l,l,調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)10%10%30%30% 樣品液樣品液(0.14(0.14mg/ml)mg/ml)進(jìn)樣進(jìn)樣2020l,l,雜質(zhì)雜質(zhì)AAi iA A主主的的1.0%.1.0%. （3 3）內(nèi)標(biāo)法加校正因子內(nèi)標(biāo)法加校正因子

53、測(cè)定供試品中雜質(zhì)的含量測(cè)定供試品中雜質(zhì)的含量 對(duì)照品對(duì)照品+ +內(nèi)標(biāo)內(nèi)標(biāo) 進(jìn)樣求校正因子（進(jìn)樣求校正因子（f)=(Af)=(As s/C/Cs s)/(A)/(AR R/C/CR R) ) 供試品供試品+ +內(nèi)標(biāo)內(nèi)標(biāo) 進(jìn)樣求進(jìn)樣求A AX X.A.AS S, ,則雜質(zhì)濃度則雜質(zhì)濃度C CX X = f = f A AX X/(A/(AS S/C/CS S) ) 4.4.氣相色譜法氣相色譜法( (GC)GC) 主要用于藥物中主要用于藥物中揮發(fā)性的雜質(zhì)揮發(fā)性的雜質(zhì)檢查，其檢查方檢查，其檢查方 法與法與HPLCHPLC法相同。法相同。二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性上的差異二、利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性上的差

54、異（一）酸堿性的差異（一）酸堿性的差異 1.1.規(guī)定消耗滴定液體積規(guī)定消耗滴定液體積 例如己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸檢查：例如己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸檢查：( (NaOH 0.02mol/L)NaOH 0.02mol/L) 取本品取本品0.200.20g + g + 中性乙醇中性乙醇 + + 溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán) 微藍(lán)色微藍(lán)色0.50ml0.50ml 2. 2.pHpH法法 例如乙琥胺中例如乙琥胺中2-2-甲基甲基-2-2-乙基丁二酸檢查：乙基丁二酸檢查：0.010.01g/ml pH3.0g/ml pH3.04.5.4.5. 3. 3.指示劑法指示劑法 例如苯巴比妥中苯基丙二酰

55、脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅 色。色。（二）氧化還原性的差異（二）氧化還原性的差異 例如：例如：NaCl中中I-和和Br-檢查檢查EOCl/2Cl- =+1.3595V EOBr/2Br- =+1.065V EOI/2I- =+0.5345V ,因此因此+NaNO2+H2SO4+淀粉顯藍(lán)色淀粉顯藍(lán)色 再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性 綠色化綠色化 合物。因此合物。因此ChP規(guī)定：本品規(guī)定：本品50mg +4mlH2O+1dI2 + 5ml乙醚乙醚 乙醚

56、層不得顯紅色；水層不得顯綠色。乙醚層不得顯紅色；水層不得顯綠色。（三）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀（三）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀 例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者+Pb(Ac)2 白色白色 ChP規(guī)定：本品規(guī)定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2 不得發(fā)生混濁，即為合格。不得發(fā)生混濁，即為合格。（四（四）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色 例一、鹽酸普萘洛爾中游離例一、鹽酸普萘洛爾中游離-萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽 發(fā)生重氮化發(fā)生重氮化- -偶合反應(yīng)，生成偶氮染料。偶合反

57、應(yīng)，生成偶氮染料。 ChP規(guī)定：供試品規(guī)定：供試品20mg+乙醇與乙醇與10%NaOH液各液各2ml+重氮苯重氮苯 磺酸磺酸試液試液1 1ml,ml,放置放置3 3minmin；如顯色，與如顯色，與0.30.3ml -ml -萘萘 酚對(duì)照液（酚對(duì)照液（2020g/ml)g/ml)比較不得更深。比較不得更深。 （五）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體（五）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體 ChP附錄中收載氰化物的兩種檢查方法：附錄中收載氰化物的兩種檢查方法：第一法第一法：改進(jìn)普魯士藍(lán)法：改進(jìn)普魯士藍(lán)法 原理：原理：CN- + 酒石酸酒石酸 HCN Fe(CN)64- Fe4Fe(CN)6第二法第二法：氣體擴(kuò)散

58、：氣體擴(kuò)散-三硝基苯酚鋰法三硝基苯酚鋰法 原理：原理：HCN擴(kuò)散進(jìn)入三硝基苯酚鋰試液，生成異紅紫酸鹽，在擴(kuò)散進(jìn)入三硝基苯酚鋰試液，生成異紅紫酸鹽，在 500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。Fe2+Fe3+ （六）藥物經(jīng)有機(jī)破壞后檢查雜質(zhì)（六）藥物經(jīng)有機(jī)破壞后檢查雜質(zhì) 某些環(huán)狀有機(jī)藥物在生產(chǎn)中可能引入磷、硫、鹵素及硒等雜某些環(huán)狀有機(jī)藥物在生產(chǎn)中可能引入磷、硫、鹵素及硒等雜 質(zhì)，質(zhì)， 這些雜質(zhì)與有機(jī)分子中的碳原子以共價(jià)鍵結(jié)合，需進(jìn)行有機(jī)這些雜質(zhì)與有機(jī)分子中的碳原子以共價(jià)鍵結(jié)合，需進(jìn)行有機(jī) 破壞后檢查，各國(guó)藥典所采用的方法為破壞后檢查，各國(guó)藥典所采用的方法為氧瓶燃燒法氧瓶燃燒法。1、硒檢查法

59、硒檢查法：有機(jī)破壞轉(zhuǎn)化為：有機(jī)破壞轉(zhuǎn)化為SeO3 + H2O H2SeO4 H2SeO4 + 2NH2OH H2SeO3 + 3H2O H2SeO3 + 二氨基萘二氨基萘 4，5-苯并本硒二唑（苯并本硒二唑（378nm有吸收）有吸收） 2 2、氟檢查法氟檢查法 有機(jī)氟藥物有機(jī)氟藥物 F F- - + + 茜素氟藍(lán)茜素氟藍(lán)+ + 硝酸亞鈰硝酸亞鈰 紫色配位化合物（紫色配位化合物（610610nmnm） OpH4.31 1藥物中雜質(zhì)的限量是指藥物中雜質(zhì)的限量是指A.A.雜質(zhì)是否存在雜質(zhì)是否存在 B.B.雜質(zhì)的合適含量雜質(zhì)的合適含量 C.C.雜質(zhì)的最低量雜質(zhì)的最低量 D.D.雜質(zhì)檢查量雜質(zhì)檢查量 E.E.雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)的最大允許量2 2中國(guó)藥典中收載的砷鹽檢查方法為中國(guó)藥典中收載的砷鹽檢查方法為A.A.摩爾法摩爾法 B.B.碘量法碘量法 C.C.白田道夫法白田道夫法 D.Ag-DDC E.D.Ag-DDC E.契列夫法契列夫法練習(xí)與思考練習(xí)與思考3. 在用古蔡法檢查砷鹽時(shí)，導(dǎo)氣管中塞入醋