《分子流行病學(xué)》最新ppt

1、分子流行病學(xué)概述研究內(nèi)容研究方法應(yīng)用前景第一節(jié) 概述一、背景 （一）分子流行病學(xué)為何產(chǎn)生？ （二）分子流行病學(xué)怎樣產(chǎn)生？二、概念 發(fā)展歷程 分子流行病學(xué)是什么？三、與傳統(tǒng)流行病學(xué)的關(guān)系一、背景（一）為何產(chǎn)生？現(xiàn)代流行病學(xué)發(fā)展中遇到了難題（1）疾病防制 病原體多樣性 抗生素應(yīng)用（2）實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)從分子水平提出病因假設(shè)。 腫瘤（3）人群易感性 遺傳變異（4）疾病療效和預(yù)后（5）臨床問題機(jī)制探討一、背景（二）怎樣產(chǎn)生？分子生物學(xué)的發(fā)展1.理論的突破 DNA結(jié)構(gòu)、遺傳密碼子、轉(zhuǎn)錄等基因調(diào)控理論2.技術(shù)的創(chuàng)新 凝膠電泳、體外擴(kuò)增、測序、分子雜交、計算機(jī)應(yīng)用等 由傳統(tǒng)流行病學(xué)學(xué)科發(fā)展的強(qiáng)烈需求和分子生物學(xué)理論

2、和技術(shù)取得的巨大成就相結(jié)合，產(chǎn)生了分子流行病學(xué)。 二、發(fā)展歷程（一）概念演變國外：1972年 Kilbourne 提出“流感分子流行病學(xué)”。1993年 分子流行病學(xué)是在流行病學(xué)中應(yīng)用生物標(biāo)志或生物學(xué)測量。1996年 分子流行病學(xué)狹義上講是測量作為暴露和效應(yīng)的生物標(biāo)志信息大分子：DNA、RNA和蛋白質(zhì)。 二、發(fā)展歷程（二）血清流行病學(xué)人類基因組流行病學(xué)（human genome epidemiology, HuGE） 將流行病學(xué)與基因組學(xué)相結(jié)合，研究人群中基因組信息與疾病和健康狀態(tài)的關(guān)系。 基于核酸生物標(biāo)志的分子流行病學(xué)。二、 定義（一）（是什么？）研究人群中疾?。ń】禒顟B(tài)）相關(guān)生物標(biāo)志的分布及

3、其影響因素、醫(yī)學(xué)相關(guān)生物群體特征及其與人類疾?。ń】担┑年P(guān)系，制定防制疾病、促進(jìn)健康的策略與措施的科學(xué)。定義注釋流行病學(xué)分支學(xué)科研究對象研究內(nèi)容 D和H狀態(tài)相關(guān)生物標(biāo)志的分布規(guī)律生物標(biāo)志與D和H關(guān)系，以及其影響分布的因素 醫(yī)學(xué)相關(guān)生物的群體特征、與人類D和H的關(guān)系 制定和評價防治疾病、促進(jìn)健康的策略和措施特征：生物標(biāo)志和群體分布 三、與傳統(tǒng)流行病學(xué)關(guān)系健 康 者 “海平面” 圖 疾病的“冰山現(xiàn)象”亞臨床者患者 傳統(tǒng)流行病學(xué) 暴露 疾病 外暴露 內(nèi)暴露 有效暴露 臨床前期 臨床疾病 （早期效應(yīng)）（疾?。?易感性暴露標(biāo)志易感性標(biāo)志分子流行病學(xué)效應(yīng)標(biāo)志傳統(tǒng)流行病學(xué)與分子流行病學(xué)的關(guān)系 （第二節(jié) 研究

4、內(nèi)容一、生物學(xué)標(biāo)志（biological markers，biomarkers） 1.定義：生物學(xué)標(biāo)志是指從暴露到疾病各個連續(xù)過程中可測量的、能反映結(jié)構(gòu)和功能改變的各種細(xì)胞的、生物化學(xué)的、免疫的或分子的物質(zhì)。分子生物學(xué)標(biāo)志（molecular biomarkers）：能反映分子水平、基因水平的DNA損傷、變異和表達(dá)異常的蛋白分子的生物學(xué)標(biāo)志。2.種類按從暴露到疾病的連續(xù)事件，主要分為暴露標(biāo)志(exposure marker)效應(yīng)標(biāo)志(effective marker )易感性標(biāo)志(susceptibility marker)（1）暴露標(biāo)志外暴露標(biāo)志：宿主對環(huán)境因素的暴露標(biāo)志 。 生物性：有細(xì)菌

5、、病毒、寄生蟲。非生物性：空氣、水、土壤等理化因子。內(nèi)暴露標(biāo)志：暴露因素進(jìn)入機(jī)體之后的標(biāo)志，是外源性物質(zhì)進(jìn)入人體的可靠證據(jù)。在體內(nèi)可是化學(xué)性質(zhì)未改變的，如尿鉛；也可指其代謝產(chǎn)物，如煙草中尼古丁(nicotine)的代謝產(chǎn)物尿中的可丁寧(cotinine)。生物作用標(biāo)志(有效暴露)：暴露因素進(jìn)入機(jī)體后，經(jīng)過一系列轉(zhuǎn)運(yùn)、轉(zhuǎn)化而最終起生物活性作用的暴露標(biāo)志。 如暴露于苯并芘后，在淋巴細(xì)胞中能檢測到特異的DNA加成物,是比EEM與IEM更具說服力的劑量標(biāo)志。（2）效應(yīng)標(biāo)志指宿主暴露后產(chǎn)生功能性或結(jié)構(gòu)性變化（如突變基因、畸變?nèi)旧w等）的生物標(biāo)志。早期生物效應(yīng)標(biāo)志： 產(chǎn)生疾病前期的生物學(xué)標(biāo)志。例如，吸煙導(dǎo)

6、致腫瘤的抑癌基因p53序列上的一些特殊部位發(fā)生G到T的突變而使其失活。疾病標(biāo)志從暴露到發(fā)病的整個過程中最終的效應(yīng)標(biāo)志，是組織結(jié)構(gòu)或功能改變的結(jié)果。它往往代表疾病的亞臨床階段或者它本身就是疾病的表現(xiàn)。（3）易感性標(biāo)志指宿主對疾病發(fā)生、發(fā)展易感程度的生物標(biāo)志。易感性主要與宿主的遺傳特征，以及生長發(fā)育、營養(yǎng)、免疫、機(jī)體活動狀態(tài)等有關(guān)。不同疾病階段，也可以具有不同的易感性標(biāo)志。例如，在吸煙量相似的吸煙者群體中，作為效應(yīng)標(biāo)志的苯并芘-DNA加成物的水平，在不同個體可相差2-100倍，原因：宿主的遺傳易感性不同。二、研究內(nèi)容（應(yīng)用）（一） 疾病病因及其致病機(jī)制的的分子水平探討1. 生物性病原因子的檢測鑒定

7、 發(fā)現(xiàn)新的病原體查明已知病原體的基因結(jié)構(gòu)和進(jìn)行準(zhǔn)確分型例如，HCV就是通過分子生物學(xué)技術(shù)和流行病學(xué)人群研究而發(fā)現(xiàn)的。HCV不同基因型與HCV感染的地區(qū)分布、流行規(guī)律、預(yù)后、臨床表現(xiàn)及治療等均有一定關(guān)系。（二） 宿主易感性和高危人群篩查標(biāo)志的研究 1遺傳性疾病2傳染病3慢性非傳染?。ㄈ?疾病流行規(guī)律、傳播機(jī)制的深入探討研究最多的是傳染病。尤其是在傳染源的追索、傳播途徑的判斷和傳播機(jī)制的研究方面。（四）疾病防制研究1.傳染病預(yù)防 （1） 新型疫苗的研究 進(jìn)行DNA重組，構(gòu)建載體，通過細(xì)菌等大量表達(dá)目的蛋白質(zhì)作為疫苗。（2）預(yù)防接種效果評價（3）預(yù)防接種相關(guān)發(fā)病研究 2.非傳染病的預(yù)防 疾病的一、

8、二和三級預(yù)防的科學(xué)的基礎(chǔ)（五）疾病的早期診斷傳染病非傳染?。┡R床療效評估藥物的安全性 有效性 敏感性（七）疾病預(yù)后評定疾病預(yù)后相關(guān)生物標(biāo)志疾病預(yù)后的預(yù)測第三節(jié) 研究方法一、研究方法（一）先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)1.分子生物學(xué)技術(shù) 2.免疫學(xué)技術(shù) 3.組織細(xì)胞學(xué)技術(shù)（二）現(xiàn)場流行病學(xué)研究方法二、研究設(shè)計（怎么做？）（一）研究目的 （二）測量指標(biāo) （三）測量方法 （四）調(diào)查方法與樣本 （五）結(jié)果與分析（六）質(zhì)量控制 （七）注意事項(xiàng)（一）研究目的充分考慮創(chuàng)新性、實(shí)用性、可行性（二）測量指標(biāo)1.測量指標(biāo)(生物標(biāo)志)的選擇原則：（1）具有較好的特異性和穩(wěn)定性（2）檢測方法具有較高的靈敏度，特異度（3）檢測方

9、法快速、簡便，操作規(guī)范，便于與同類研究結(jié)果比較（4）標(biāo)本采集和儲存方便2.測量指標(biāo)的選擇（1）暴露指標(biāo) （2）效應(yīng)指標(biāo) （3）易感性指標(biāo) 實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)核酸技術(shù) 核酸電泳圖譜 核酸酶切電泳圖譜 核酸分子雜交 核酸體外擴(kuò)增 核酸序列分析 蛋白質(zhì)技術(shù) 凝膠電泳、蛋白轉(zhuǎn)印雜交、蛋白質(zhì)測序酶學(xué)技術(shù) 多位點(diǎn)酶電泳法 生物芯片技術(shù) 基因芯片 其他技術(shù) 免疫學(xué)技術(shù) 如 (ELISA)、熒光免疫試驗(yàn)(FIA) 等； 色譜技術(shù) 如高效液相色譜技術(shù)(HPLC)等（三）結(jié)果與分析設(shè)計中要預(yù)測研究結(jié)果，并根據(jù)選擇的測量指標(biāo)和測量方法確定資料分析方法 。傳統(tǒng)流行病學(xué)分析方法生物學(xué)技術(shù)相關(guān)的分析方法展望分子流行病學(xué)是一門

10、新興的邊緣學(xué)科，尚有很多不成熟的地方，但已顯示出了強(qiáng)大的生命力。隨著先進(jìn)的生物標(biāo)志檢測技術(shù)、計算機(jī)技術(shù)、信息技術(shù)和統(tǒng)計學(xué)方法等的不斷引入，分子e將會臨床科學(xué)研究提高到一個嶄新階段。 胎盤細(xì)胞凋亡與TLR3及HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系孕婦肘靜脈血胎盤石蠟切片新鮮胎盤組織免疫熒光雙標(biāo)記檢測新生兒股靜脈血實(shí)時RT-PCR 測定Caspas3 mRNA正常孕婦組HBV-DNA測定HBsAg、HBeAgc測定 病毒攜帶情況TLR3表達(dá)情況胎盤感染組非胎盤感染組Tunel檢測胎盤組織凋亡HBV-DNA測定HBsAg、HBeAgc測定 宮內(nèi)感染分組非宮內(nèi)感染組正常孕婦組宮內(nèi)感染組HBsAg表達(dá)情況胎盤感染與凋亡的關(guān)系TLR3與凋