藥物分析學(xué)：總論-第二章-藥品質(zhì)量控制與藥物分析方法驗(yàn)證

1、第二章 藥品質(zhì)量控制與藥物分析方法驗(yàn)證藥物分析學(xué) 總論目 錄第一節(jié) 藥典1第一節(jié) 藥物分析誤差控制與數(shù)據(jù)處理2第三節(jié) 藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證3第四節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的常用術(shù)語4第一節(jié) 藥 典第二章 藥品質(zhì)量控制與藥物分析方法驗(yàn)證學(xué)習(xí)要求掌握藥典的性質(zhì)，中國藥典的結(jié)構(gòu)與內(nèi)容；中國藥典的沿革及主要外國藥典的概況1.中國藥典的沿革及主要外國藥典的概況2.ICH的協(xié)調(diào)內(nèi)容熟悉了解第一節(jié) 藥 典藥典是國家監(jiān)督管理藥品質(zhì)量的法定技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)，它和其他法令一樣具有法定的約束力。藥典是藥品的生產(chǎn)、營銷、行政和技術(shù)監(jiān)督管理部門共同遵循的法定技術(shù)依據(jù)美國藥典United State Pharmacopeia，US

2、P英國藥典British Pharmacopoeia，BP國際藥典The International Pharmacopoeia，Ph. Int歐洲藥典European Pharmacopoeia，EP日本藥局方Japanese Pharmacopoeia，JPPharmacopeia藥典第一節(jié) 藥 典第一節(jié) 藥 典一、 藥典 記載藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的法典 國家監(jiān)督、管理藥品質(zhì)量法定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn) 具有法律的約束力 二、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): 國家對藥品質(zhì)量及檢驗(yàn)方法所作的技術(shù)規(guī)定。 藥品生產(chǎn)、經(jīng)營、使用、檢驗(yàn)和監(jiān)督管理部門共同遵循的法定依據(jù)。二、中國藥典的進(jìn)展中國藥典Chinese Pharmacopoeia

3、Ch.P1953、1963、1977、1985、1990、1995、 2000 、 2005、2010年版 共九版從1963年版起分為一部、二部從1985年版起每五年出版一次從2005年版起分為一部、二部、三部收載品種有較大幅度增加；現(xiàn)代分析技術(shù)得到進(jìn)一步擴(kuò)大應(yīng)用；藥品的安全保障得到進(jìn)一步加強(qiáng)；對藥品質(zhì)量可控性、有效性的技術(shù)保障得到進(jìn)一步提升；藥品標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容更趨科學(xué)、規(guī)范、合理；鼓勵(lì)技術(shù)創(chuàng)新、積極參與國際協(xié)調(diào)。2010年版中國藥典中國藥典配套出版了藥品紅外光譜集、臨床用藥須知、中藥材顯微鑒別彩色圖鑒及中藥材薄層色譜彩色圖集。2010年版中國藥典三、中國藥典 (Chinese pharmacopo

4、eia)中藥材、中藥成方制劑（一部）化學(xué)和生化藥品、抗生素、放射性藥品、藥用輔料（二部）生化藥品（三部）中國藥典藥典內(nèi)容凡 例正 文索 引解釋、使用藥典基本原則規(guī)定正文、附錄共性問題藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中文索引英文索引生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)附 錄通用檢測方法指導(dǎo)原則制劑通則凡例分類項(xiàng)目 名稱 ： 中國藥品通用名稱 國際非專利藥品(International Nonproprietary Names for Pharmaceutical Substances，INN) 有機(jī)化學(xué)命名原則，母體的選定應(yīng)與CA 一致。 化學(xué)結(jié)構(gòu)式按世界衛(wèi)生組織推薦 “藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)式 書寫指南”書寫。 試驗(yàn)中供試品與試藥

5、等“稱重”或“量取”的量，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示, 精確度根據(jù)數(shù)值的有效數(shù)位來確定 。 精密稱定: 稱取重量準(zhǔn)確至所取重量千分之一 稱定: 稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的百分之一 取用量為“約”: 所取量不得超過規(guī)定量10%精 確 度藥典規(guī)定取樣量的準(zhǔn)確度和試驗(yàn)精密度正文編排和內(nèi)容 正文收載藥品或制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),按中文藥品名稱筆畫順序編排，單方制劑排在原料藥后面；生物制品集中排列。 每一品種項(xiàng)含： 品名（包括中文名，漢語拼音名與英文名） 有機(jī)藥物的結(jié)構(gòu)式；分子式與分子量； 來源或有機(jī)藥物的化學(xué)名稱；含量或效價(jià)規(guī)定； 處方；制法；性狀；鑒別；檢查； 含量或效價(jià)測定；類別；規(guī)格；貯藏； 制劑 標(biāo)準(zhǔn)針對藥品質(zhì)

6、量控制的真?zhèn)?、純度和品質(zhì)優(yōu)良度 附 錄 內(nèi) 容（計(jì)19類）制 劑 通 則生物制品通則通用檢測方法指導(dǎo)原則一、美國藥典第五節(jié) 主要國外藥典簡介美國藥典（The United States Pharmacopoeia， USP ）和美國國家處方集（The National Formulary，NF）合并出版，縮寫為USP-NF。自2002年起每年修訂出版1次，并同時(shí)發(fā)行光盤版。 最新版為USP36-NF31版（2013年5月1日實(shí)施）。美國國家藥典委員會(huì)官方網(wǎng)站：USP-NF中的法定內(nèi)容為：凡例（General Notices)；正文（Individual monographs) ；附錄方法（Ge

7、neral Tests and Assays Chapters）。一、美國藥典包含關(guān)于藥物、劑型、原料藥、輔料、醫(yī)療器械和食物補(bǔ)充劑的標(biāo)準(zhǔn)。 USP標(biāo)準(zhǔn)正文包括：（1）有效成分或制劑的藥品名稱及其化學(xué)結(jié)構(gòu)特征；（2）成分及含量限度要求；（3）包裝、貯藏和標(biāo)簽等要求；（4）USP標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；（5）質(zhì)量指標(biāo)和限度規(guī)定等內(nèi)容。一、美國藥典美國藥典配套出版物（1）色譜試劑（2）藥劑師藥典：提供配方相關(guān)的簡明標(biāo)準(zhǔn)和法定信息；（3）美國藥品通用名稱和國際藥品名稱字典（4）美國藥典產(chǎn)品目錄一、美國藥典二、英國藥典英國藥典（British Pharmacopoeia ，BP ）收載英國藥物原料、制劑和其他醫(yī)藥產(chǎn)

8、品的法定標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)行版為BP（2013）,BP2013版共6卷。英國藥典官方網(wǎng)站：.uk/三、歐洲藥典歐洲藥典（European Pharmacopoeia ，Ph.Eur.或EP ）由歐洲藥品質(zhì)量管理局（EDQM)起草和出版，在歐盟范圍內(nèi)具有法律效力的標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)行版為EP 第7版，已于2011年1月生效。歐洲藥典官方網(wǎng)站：http:/www.edqm.eu/三、歐洲藥典第1卷收載：凡例、附錄方法、制劑通則、知道原則等。除人用藥和獸用疫苗、免疫制劑、放射性藥物、天然藥物等生物制品外，EP不收載制劑標(biāo)準(zhǔn)。第2卷收載：藥品標(biāo)準(zhǔn)。主要收載原料藥物標(biāo)準(zhǔn)。四、日本藥局方日本藥局方（Japanese Phar

9、macopoeia,JP）由日本藥典委員會(huì)編制，日本厚生勞動(dòng)省頒布實(shí)施。現(xiàn)行版為第十五改正版（JP15),自2006年4月1日起實(shí)施。五、國際藥典國際藥典（International Pharmacopoeia,Ph.Int.）由世界衛(wèi)生組織（WHO)國家藥典和藥物制劑專家咨詢組編撰，收載藥物原料、藥用輔料、藥物制劑、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)，以及它們的分析檢驗(yàn)方法等內(nèi)容，由世界衛(wèi)生大會(huì)批準(zhǔn)出版現(xiàn)行版為第4版。三、藥品質(zhì)量控制為了有效地實(shí)施藥品質(zhì)量的全面管理，許多國家都制定了科學(xué)的管理規(guī)范和條例。全面控制藥品質(zhì)量的基礎(chǔ)是良好的管理規(guī)范，我國已先后制定了一系列對藥品質(zhì)量控制起指導(dǎo)作用的法令性文件。世界醫(yī)藥

10、發(fā)達(dá)國家建立了國際協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)，即“人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)”（International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use，ICH）。1. 中國的法令性文件（5P）藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（Good Laboratory Practice，GLP）。藥物臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范（Good Clinical Practice，GCP）。藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（Good Manufacture Practice，GMP）。藥品

11、經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范（Good Supply Practice，GSP）中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（Good Agriculture Practice，GAP）藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（GLP）非臨床研究指為了評價(jià)藥品安全性，在實(shí)驗(yàn)條件下，用實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行的各種毒性試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)指用于毒性試驗(yàn)的動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞等GLP指藥品非臨床安全性評價(jià)研究機(jī)構(gòu)的組織管理體系、人員、實(shí)驗(yàn)設(shè)施、儀器設(shè)備、操作規(guī)程、研究工作的實(shí)施與管理而制定的法規(guī)性文件藥品臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范（GCP）臨床試驗(yàn)指任何在人體（病人或健康受試者）進(jìn)行藥物的系統(tǒng)研究，包括藥物的作用、不良反應(yīng)、藥物的吸收、分布、代謝和排泄，目的是確定

12、實(shí)驗(yàn)藥物的療效與安全性。GCP是臨床試驗(yàn)全過程的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，包括方案設(shè)計(jì)、組織、實(shí)施、監(jiān)查、稽查、記錄、分析總結(jié)和報(bào)告選擇臨床試驗(yàn)方法必須符合科學(xué)和倫理要求藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）GMP是藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理的基本準(zhǔn)則。GMP要求企業(yè)應(yīng)建立藥品質(zhì)量管理體系，該體系包括影響藥品質(zhì)量的所有因素，對藥品生產(chǎn)全過程進(jìn)行實(shí)行監(jiān)督管理。重視事先控制，減少藥品生產(chǎn)過程中的污染和交叉污染，力求消除生產(chǎn)不合格產(chǎn)品的隱患。藥品經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范（GSP）GSP要求藥品經(jīng)營企業(yè)應(yīng)在藥品的購進(jìn)、儲(chǔ)運(yùn)和銷售等環(huán)節(jié)實(shí)行質(zhì)量管理，建立包括組織結(jié)構(gòu)、職責(zé)制度、過程管理和設(shè)施設(shè)備等方面的質(zhì)量體系，并使之有效運(yùn)行。GSP是藥品經(jīng)營

13、質(zhì)量管理的基本準(zhǔn)則。中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（試行）（GAP）是為規(guī)范中藥材生產(chǎn)，保證中藥材質(zhì)量，促進(jìn)中藥標(biāo)準(zhǔn)化、現(xiàn)代化而制定的。GAP是中藥材生產(chǎn)和質(zhì)量管理的基本準(zhǔn)則，適用于中藥材生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)中藥材的全過程。GAP對中藥材生產(chǎn)的產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境、種質(zhì)和繁殖材料、栽培與養(yǎng)殖管理、采收與初加工、包裝運(yùn)輸與貯藏、人員和設(shè)備等提出了明確的質(zhì)量管理要求。質(zhì)量設(shè)計(jì)Quality by Design過程控制Quality by Process終端檢驗(yàn)Quality byTest保證用藥安全實(shí)行藥品認(rèn)證制度2. 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程與質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP），在藥品的研究、生產(chǎn)、供應(yīng)等各個(gè)環(huán)節(jié)的每項(xiàng)具體操作均應(yīng)建立

14、相應(yīng)的SOP。質(zhì)量控制（QC），在實(shí)施各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作SOP的同時(shí)，實(shí)驗(yàn)操作過程的QC已成為實(shí)驗(yàn)室科學(xué)管理的重要內(nèi)容，也是實(shí)驗(yàn)室提供準(zhǔn)確可靠數(shù)據(jù)的重要保證。圖1-2-1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部QC示意圖（二）人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)由歐盟、美國和日本三方的藥品注冊管理當(dāng)局和制藥企業(yè)協(xié)會(huì)在1990年發(fā)起了“人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)”（ICH)。ICH的目的是通過協(xié)調(diào)一致，使三方在藥品注冊技術(shù)要求上取得共識；為藥品研發(fā)、審批和上市制定統(tǒng)一的國際性技術(shù)指導(dǎo)原則；更好地利用資源、避免重復(fù)、減少浪費(fèi)，加快新藥在世界范圍內(nèi)的開發(fā)使用。 3. 人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）目的：由歐盟、美國和日本三方

15、藥品管理當(dāng)局及三方制藥企業(yè)管理機(jī)構(gòu)發(fā)起并建立了ICH。內(nèi)容：ICH專家工作組協(xié)調(diào)的專題共分四個(gè)類別：質(zhì)量（Quality，包括穩(wěn)定性、驗(yàn)證、雜質(zhì)、規(guī)格等），以“Q”表示，現(xiàn)已制定25個(gè)文件；安全性（Safety，包括藥理、毒理、藥物動(dòng)力學(xué)等試驗(yàn)），以“S”表示，現(xiàn)已制定15個(gè)文件；有效性（Efficacy，包括臨床試驗(yàn)中的設(shè)計(jì)、研究報(bào)告、GCP等），以“E”表示，現(xiàn)已制定22個(gè)文件；綜合學(xué)科（Multidisciplinary，包括術(shù)語、管理、通訊等），以“M”表示，現(xiàn)已制定8個(gè)文件。課外閱讀閱讀中國藥典（2010年版）凡例上網(wǎng)查閱美國藥典、英國藥典“雙氯芬酸鈉”并和中國藥典該品種比較第二節(jié)

16、誤差控制與數(shù)據(jù)處理第二章 藥品質(zhì)量控制與藥物分析方法驗(yàn)證學(xué)習(xí)要求掌握誤差產(chǎn)生的原因與減免方法有效數(shù)字的修約規(guī)則誤差及偏差的表示與計(jì)算方法，不確定度的概念，可疑數(shù)據(jù)的取舍方法熟悉第二節(jié) 誤差控制與數(shù)據(jù)處理一、誤差與誤差控制分析誤差（analytical error），簡稱誤差：測量值（observation），與被測定藥物的真實(shí)值（簡稱為真值）之間的的偏離（bias）。誤差是測量值與真值之差，反映分析結(jié)果與真值的接近程度，是衡量一個(gè)分析方法的準(zhǔn)確度（accuracy）的指標(biāo)。1. 誤差系統(tǒng)誤差系統(tǒng)誤差（systematic error）、可定誤差（determinate error），有固定的方

17、向（正或負(fù)）和大?。幌到y(tǒng)誤差是由確定的因素引起的，可通過對分析系統(tǒng)進(jìn)行校正加以消除。系統(tǒng)誤差分為方法誤差、試劑誤差、儀器誤差及操作誤差。偶然誤差（accidental error）、不可定誤差（indeterminate error）、隨機(jī)誤差（random error），由分析條件或環(huán)境條件的改變等偶然的因素引起的。偶然誤差的產(chǎn)生具有偶然性，其方向或大小均不固定。偶然誤差符合統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律：正負(fù)誤差出現(xiàn)的概率大致相等，往往能部分甚至完全抵消；該類誤差不能通過校正的方法加以消除，但可通過多次平行測定，以平均值作為分析結(jié)果來減小該類誤差；也可根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律估算其大小，并在結(jié)果中予以正確表述。偶然誤差

18、1. 誤差絕對誤差絕對誤差（absolute error），即誤差，是指測量值與真值之差。因?yàn)闇y量值與真值的單位相同，所以絕對誤差的單位與測量值和真值的相同；絕對誤差具有方向性，可以是正值，也可以是負(fù)值 = x - 相對誤差（relative error）是指絕對誤差與真值的比值，即誤差率。因?yàn)榻^對誤差的單位與真值的單位相同，所以相對誤差沒有單位。相對誤差2. 偏差偏差（deviation，d）是指一組測量值中各測量值與該組測量值的平均值之差。它反映一組測量值之間彼此符合的程度（或離散程度），是衡量分析方法的精密度（precision）的指標(biāo)。偏差越大，精密度越低。平均偏差（mean devi

19、ation） 相對平均偏差（relative mean deviation） 標(biāo)準(zhǔn)偏差（standard deviation） 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD） 3. 誤差的控制的方法1選用合適的分析方法2. 減少測量過程的誤差3. 驗(yàn)證并消除系統(tǒng)誤差（回收試驗(yàn)、校準(zhǔn)儀器、對照試驗(yàn)）4.平行試驗(yàn)二、不確定度測量不確定度（measurement uncertainty）、不確定度（uncertainty），是表征合理地賦予被測量值的分散性，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。如標(biāo)準(zhǔn)測量不確定度的標(biāo)準(zhǔn)偏差，或是說明了包含概率的區(qū)間半寬度。測量不確定度一般包括很多分

20、量。一些分量是由測量序列結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)分布得出的，可表示為標(biāo)準(zhǔn)偏差。另一些分量是由根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和其他信息確定的概率分布得出的，也可以用標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。國際：1993年，國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（International Organization for Standardization，ISO）發(fā)布了“測量不確定度表述指南”（Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement），即GUM，中國：JJF l059-1999測量不確定度評定與表示，并于2011年發(fā)布了修訂版本JJF 1059.1-2011不確定度與誤差不確定度不確定度是以一個(gè)區(qū)間的形式表示，如

21、果是為一個(gè)分析過程和所規(guī)定樣品類型做評估時(shí)，可適用于其所描述的所有測量值。一般不能用不確定度數(shù)值來修正測量結(jié)果。誤差是被測量的單個(gè)結(jié)果和真值之差，是一個(gè)單個(gè)數(shù)值。原則上已知誤差的數(shù)值可以用來修正結(jié)果，但實(shí)際上誤差是一個(gè)理想的概念，不可能被確切地知道。誤差不確定度確定的步驟第一步：分析不確定度來源和建立測量模型；第二步：評定標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量；第三步：計(jì)算合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度；第四步：確定擴(kuò)展不確定度。三、測量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理(一) 平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差：樣本均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（ ）與測量次數(shù)的平方根成反比，n次測量所獲得的平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差是每一次測量值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（ ）的 。 在實(shí)際分析工作中，一般平行測定23

22、次即可；而在進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)，要求測定56次。三、測量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理(二) 平均值的置信區(qū)間：三、測量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理(三) 可疑數(shù)據(jù)的取舍：在一組測量值中有時(shí)會(huì)出現(xiàn)個(gè)別過高或過低的測量值，稱為可疑數(shù)據(jù)，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上稱為逸出值（outliers，也稱異常值或離群值）。 對于可疑數(shù)據(jù)可采用以下做法： 重復(fù)相應(yīng)部分的實(shí)驗(yàn)操作，以求得替代的數(shù)據(jù)； 用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法評估可疑數(shù)據(jù)的來源，并決定取舍； 舍棄可疑值，或在舍棄可疑值后以相鄰數(shù)據(jù)替代。四、有效數(shù)字的修約(一) 有效數(shù)字：用于表示測量值的一組數(shù)字（其前面無其他數(shù)字的0除外）稱為有效數(shù)字，它是由數(shù)位準(zhǔn)確數(shù)字和最后一位欠準(zhǔn)數(shù)字構(gòu)成。四、有效數(shù)字的修約(一)

23、數(shù)字的修約規(guī)則：1四舍六入五留雙（或尾留雙）2不允許連續(xù)修約3中間數(shù)字可多保留一位有效數(shù)字4表示不確定度的數(shù)字修約結(jié)果應(yīng)使不確定度增加第三節(jié) 藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證第二章 藥品質(zhì)量控制與藥物分析方法驗(yàn)證學(xué)習(xí)要求掌握分析方法驗(yàn)證生物樣品定量分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求熟悉第三節(jié) 藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證(一) 分析方案驗(yàn)證的目的：為了保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠，必須采用特征參數(shù)（characteristics）對分析方法的科學(xué)性、準(zhǔn)確性和可行性進(jìn)行驗(yàn)證（validation）。證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求(二) 驗(yàn)證的指導(dǎo)原則：EMEA、FDA、CFDA。(三）驗(yàn)證的分析項(xiàng)目鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)定量檢

24、查或限度檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測定，制劑中其他成分(如防腐劑等，中藥中如殘留物、添加劑等）的測定。藥品溶出度、釋放度等檢査中，其溶出量等的測試方法等第三節(jié) 藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證(四) 驗(yàn)證指標(biāo)：準(zhǔn)確度精密度專屬性檢測限定量限線性范圍耐用性。第三節(jié) 藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證表1-2-3 分析方法的典型驗(yàn)證參數(shù)Tab.1-2-3 Typical validation characteristics for analytical procedures 項(xiàng)目內(nèi)容鑒別雜質(zhì)測定含量測定及溶出量測定校正因子定量限度準(zhǔn)確度-+-+精密度重復(fù)性-+-+中間精密度-+-+專屬性+檢測限-+-定量限-

25、+-+線性-+-+范圍-+-+耐用性+注：已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需驗(yàn)證中間精密度；如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補(bǔ)充；視具體情況予以驗(yàn)證。一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中分析方法驗(yàn)證參數(shù)1.專屬性（specificity）定義：在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測定出被測物的特性意義：分析復(fù)雜樣品混合物時(shí)衡量其是否受到干擾程度的一種方法。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢査和含量測定方法。1.專屬性（specificity）鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。1. 專屬性（specificity）含量測定和雜質(zhì)測定1、雜質(zhì)可獲得的情況：含量測定：試樣中可加入雜質(zhì)或輔料，考察

26、測定結(jié)果是否收到干擾，并可與未加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果。雜質(zhì)測定：試樣中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)之間能否得到分離。1. 專屬性（specificity）含量測定和雜質(zhì)測定1、雜質(zhì)不可獲得的情況：可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測定，與另一個(gè)經(jīng)驗(yàn)證了的方法或藥典方法比較結(jié)果；用強(qiáng)光照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物及其降解途徑。2. 準(zhǔn)確度定義：指用該方法測定的結(jié)果與真實(shí)值（true value）或參考值（reference value）接近的程度（closeness of agreement），一般用回收率（recovery，%）表示?？捎靡阎?/p>

27、純度的對照品或供試品進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較R = 測得量加入量100%原料藥的含量測定2. 準(zhǔn)確度可在處方量輔料存在下，用含已知量被測物的各組分混合物進(jìn)行測定。如不能得到制劑輔料的全部組分，可向?qū)嶋H制劑中加入已知量的被測物進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測定結(jié)果進(jìn)行比較。R = 測得量加入量100%制劑的含量測定2. 準(zhǔn)確度（1）回收試驗(yàn)法 空白B+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M。R = 測得量加入量100%考察輔料對回收率是否有影響。制劑的含量測定2. 準(zhǔn)確度（2）加樣回收試驗(yàn) 已準(zhǔn)確測定藥物含量P的真實(shí)樣品+已知

28、量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M。R = 測得量-本底量加入量100%2. 準(zhǔn)確度3、數(shù)據(jù)要求 規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價(jià)，如設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測定。一般要求分別配制濃度為80%、100%和120%的供試品溶液各3份。RSD2%（1）原料藥、制劑 UV、 HPLC：R= 98102% 容量法：R = 99.7100.3% （2）中藥及其制劑95105%90110%RSD5%RSD3%定義：指在規(guī)定的測試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差d、標(biāo)準(zhǔn)偏差s或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD表示。3. 精密度表示方

29、法： 偏差（d）： 標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD): 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD):驗(yàn)證內(nèi)容（1）重復(fù)性：在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性（repeatability）；3. 精密度（1）重復(fù)性：測定法：在規(guī)定范圍內(nèi)，分別取同一供試品（相當(dāng)于100%濃度水平），依法操作，用至少測定6次的結(jié)果進(jìn)行評價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度（相當(dāng)于80、100、120%濃度水平），每個(gè)濃度分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測定，用9個(gè)測定結(jié)果進(jìn)行評價(jià)。3. 精密度（2） 中間精密度在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室， 不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果之間的精密度，稱為中間精密度（intermediate precision）3

30、. 精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對精密度的影響，應(yīng)進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。（3）重現(xiàn)性在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測定結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性（reproducibility）。法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如，建立藥典分析方法時(shí)，通過協(xié)同檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用的樣品本身的質(zhì)量均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。3. 精密度4. 檢測限定義：檢測限（limit of detection，LOD或detection limit，DL）系指在實(shí)際樣品基質(zhì)中，試樣中被測物能被檢測出的最低量。意義：LOD 是一種限度

31、檢驗(yàn)的效能指標(biāo),它反映方法與儀器的靈敏度和噪音大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白值的高低，即是否具備足夠的靈敏度。4. 檢測限方法：1. 直觀法在實(shí)際樣品基質(zhì)中，用已知濃度的被測物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。2. 信噪比法用于能顯示基線噪聲的分析方法，即在實(shí)際樣品基質(zhì)中，將已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，獲得能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。3. 基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法DL=3.3/S （：響應(yīng)值的偏差；S：標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率） 可以通過一系列方法測得，如：（1）測定空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差；（2）標(biāo)準(zhǔn)曲

32、線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或是截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差來代替5. 定量限（1imit of quantitation，LOQ） 定義：定量限（limit of quantitation，LOQ或quantitation limit，QL）系指在實(shí)際樣品基質(zhì)中，試樣中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。LOQ體現(xiàn)分析方法是否具備靈敏的定量檢測能力。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時(shí)，應(yīng)確定LOQ。 5. 定量限（1imit of quantitation，LOQ） 方法：1. 直觀法在實(shí)際樣品基質(zhì)中，用已知濃度的被測物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。2. 信噪比法用于能顯示基線噪聲

33、的分析方法，即在實(shí)際樣品基質(zhì)中，將已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，獲得能被可靠地定量的最低濃度或量。一般以信噪比為10:1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限。3. 基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法QL=10/S （：響應(yīng)值的偏差；S：標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率） 可以通過一系列方法測得，如：（1）測定空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差；（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或是截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差來代替。 6. 線性與范圍線性（linearity）系指在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈比例關(guān)系的程度。范圍（range）系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析

34、方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。定義：定義：指測定條件稍有變動(dòng)時(shí)，結(jié)果不受 影響的承受程度。7. 耐用性意義：為常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)，是衡量實(shí)驗(yàn) 室和工作人員之間在正常情況下實(shí) 驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。典型的變動(dòng)因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)、時(shí)間等。HPLC法中典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成和pH，不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱，柱溫，流速等。GC法變動(dòng)因素有：色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進(jìn)樣口和檢測器溫度等。7. 耐用性二、生物樣品中藥物定量分析方法驗(yàn)證1完全驗(yàn)證 完全驗(yàn)證（Full Validation）適用于首次建立和付諸實(shí)施的生物樣品分析方法。如果需要

35、采用現(xiàn)有方法對代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析，那么對改進(jìn)后的測定方法進(jìn)行完全驗(yàn)證也是非常重要的。（一）分析方法的驗(yàn)證類型2部分驗(yàn)證部分驗(yàn)證（Partial Validation）是對已通過驗(yàn)證的生物樣品分析方法的修改部分進(jìn)行驗(yàn)證，其驗(yàn)證的范圍應(yīng)根據(jù)修改的內(nèi)容確定。典型的分析方法的修改包括但不僅限于以下范圍：(1) 同一個(gè)生物樣品分析方法在實(shí)驗(yàn)室之間和分析人員之間的轉(zhuǎn)移；(2) 獲取生物樣本時(shí)抗凝劑的改變；(3) 同種屬內(nèi)生物樣品種類的改變（如：人血漿與人尿液）；(4) 生物樣品處理方法的改變；(5) 相同生物樣品但種屬的改變（如：大鼠血漿與小鼠血漿）；(6) 有關(guān)濃度范圍的改變；(7) 儀器系統(tǒng)和/或軟

36、件系統(tǒng)的改變；(8) 在特定的代謝產(chǎn)物存在下待測物選擇性的證明。（一）分析方法的驗(yàn)證類型3交叉驗(yàn)證交叉驗(yàn)證（Cross-Validation) 是指采用兩種或兩種以上方法用于相同研究或不同研究的測定數(shù)據(jù)時(shí)，對驗(yàn)證參數(shù)進(jìn)行的比較驗(yàn)證。例如：將一種已通過驗(yàn)證的原始分析方法作為參考，對修改后的分析方法進(jìn)行比較驗(yàn)證。（一）分析方法的驗(yàn)證類型對照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備；生物樣品分析方法的研究和測定方法的建立；將已通過驗(yàn)證的分析方法應(yīng)用于常規(guī)生物樣品的分析。（二）分析方法的研究與驗(yàn)證過程專屬性或選擇性；基質(zhì)效應(yīng)；精密度、準(zhǔn)確度和提取回收率；標(biāo)準(zhǔn)曲線和靈敏度；生物樣品中待測組分的穩(wěn)定性考察。其中，方法的靈敏度指標(biāo)分為定性檢測指標(biāo)，即檢測下限（lower limit of detection, LLOD）和定量測定指標(biāo)，即定量下限（lower limit of quantitation, LLOQ）。同時(shí)引入分析方法線性范圍的最高濃度作為定量上限（upper limit of quantitation, ULOQ）（二）分析方法的驗(yàn)證內(nèi)容效