藥物分析學(xué)：藥物的含量測(cè)定

1、第六章 藥物的含量測(cè)定第一節(jié) 概述1、藥物的含量是藥物質(zhì)量的主要指標(biāo)含量測(cè)定（assay）理化方法測(cè)定 效價(jià)測(cè)定（assay of potency）生物學(xué)方法或酶學(xué)方法測(cè)定 2、化學(xué)原料藥的含量測(cè)定：強(qiáng)調(diào)測(cè)定結(jié)果的精密度 3、制劑的含量測(cè)定：偏重方法的選擇性4、藥典對(duì)藥物的含量限度的表示方法原料藥：以%表示（一般以干燥品或無(wú)水物計(jì)）凡未規(guī)定上限的，藥典凡例中規(guī)定，其含量上限不得超過101.0%按原料藥本身形式計(jì)算其含量由于藥物組成不定，需以另一種穩(wěn)定形式計(jì)算含量舉例地塞米松磷酸鈉 按干燥品計(jì)算，含C22H28FNaO8P應(yīng)為96.0%-102.0%硫酸慶大霉素 按無(wú)水物計(jì)算，每1mg的效價(jià)不得

2、少于590慶大霉素單位阿司匹林含C9H6O4不得少于99.5% 氫氧化鋁含氫氧化鋁按Al2O3計(jì)算，不得少于48.0%5、制劑的含量限度表示方法：按標(biāo)示量計(jì)算標(biāo)示量=規(guī)格量=處方量例：維生素B1注射液含維生素B1應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%105.0%直接用%含量規(guī)定范圍例：復(fù)方碘溶液 含 I 應(yīng)為4.50% 5.50% 含 KI 應(yīng)為9.5% 10.5%以重量規(guī)定含量范圍例：復(fù)方磺胺甲噁唑片磺胺甲噁唑 0.3600.440g /片 甲氧芐氨嘧啶72.088.0mg /片常用含量測(cè)定方法(2005年版ChP）第二節(jié) 容量分析法一、含量計(jì)算1、原料藥及以%表示的制劑（1）直接滴定法 樣品%=VFT/

3、W100%濃度校正因子 F=N實(shí)/N理滴定度T與1ml規(guī)定（理論）濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液所相當(dāng)?shù)谋粶y(cè)物的mg數(shù)T=（M被測(cè)物 /a ） mol/L標(biāo)準(zhǔn)液（理論）a為與1摩爾被測(cè)物相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液摩爾數(shù)。（2）剩余滴定法樣品%=（V空白 V樣 ) FT/ W100%方法：樣品 + 標(biāo)準(zhǔn)液1（過量定量）剩余的標(biāo)準(zhǔn)液1 + 標(biāo)準(zhǔn)液2回滴定 V2樣空白 + 標(biāo)準(zhǔn)液1（同樣量）剩余的標(biāo)準(zhǔn)液1 + 標(biāo)準(zhǔn)液2回滴定 V2空白2、相當(dāng)于標(biāo)示量%的計(jì)算公式（1）片劑：W為片粉重（2）針劑：W為注射液體積3、以重量/片計(jì)的計(jì)算公式例1 異煙肼含量測(cè)定稱取異煙肼約0.25g，置100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精

4、密量取25mL，加水50 mL與鹽酸20 mL，加甲基橙指示液1滴，用溴酸鉀滴定液(0.01667mol/L)緩緩滴定至粉紅色消失。已知：異煙肼取樣0.2545g ， 消耗溴酸鉀滴定液(F=1.005) 18.30mL，每1mL溴酸鉀滴定液（0.01667 mol/L）相當(dāng)于3.429mg異煙肼。例2 司可巴比妥鈉的含量測(cè)定：取本品約0.1g, 精密稱定（0.1022g)，置250ml碘量瓶中，加水10mL，振搖使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25 mL，再加鹽酸5 mL，立即密塞并振搖1分鐘，暗處?kù)o置15分鐘后，微開瓶塞，加碘化鉀試液10 mL，立即密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液

5、（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。已知：樣品消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）15.73 mL，空白試驗(yàn)消耗23.21 mL，每1mL溴滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于13.01mg的司可巴比妥鈉，硫代硫酸鈉滴定液F=1.038。例3 葡萄糖酸鈣片含量測(cè)定取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于葡萄糖酸鈣1g），置100ml量瓶中加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，加水75ml, 加氫氧化鈉試液15ml，用EDTA滴定液（0.05mol/L）滴定。每1mLEDTA滴定液（0.05mol/L

6、）相當(dāng)于22.42mg的C12H22CaO14H2O。已知：20片重12.0640g，取片粉1.2058g，消耗EDTA滴定液(0.0501 mol/L)11.22mL，規(guī)格0.5g/片二、酸堿滴定法滴定類型多為強(qiáng)酸強(qiáng)堿滴定弱堿弱酸藥物，以鹽酸、硫酸、氫氧化鈉為滴定劑溶劑根據(jù)藥物的酸堿性、溶解度、穩(wěn)定性等性質(zhì)，選用水、中性乙醇等為溶劑 應(yīng)用以水為溶劑：枸櫞酸以中性乙醇為溶劑：芳酸類、磺酰胺類藥物指示劑、滴定劑酚酞，氫氧化鈉滴定液三、非水溶液滴定法本法主要用于測(cè)定有機(jī)堿及其氫鹵酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽或有機(jī)酸鹽，以及有機(jī)酸堿金屬鹽類藥物的含量，也用于測(cè)定某些有機(jī)弱酸的含量藥典收載了兩種方法：第一法為

7、測(cè)定有機(jī)弱堿及其鹽類第二法為測(cè)定有機(jī)弱酸及其鹽類常用非水溶劑種類第一法（非水堿量法）精密稱取供試品適量約消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）8mL，加冰醋酸1030mL使溶解，加各藥品項(xiàng)下規(guī)定的指示液12滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定。終點(diǎn)顏色應(yīng)以電位滴定時(shí)的突躍點(diǎn)為準(zhǔn)，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正 1、影響因素：溫度、水分、溶劑的選擇、指示終點(diǎn)方法以及被測(cè)物酸根等（1）溫度影響滴定與標(biāo)定時(shí)的溫度差別：超過10，則應(yīng)重新標(biāo)定若未超過10，根據(jù)公式校正（2）水分影響反應(yīng)體系中不應(yīng)有水，因?yàn)樗仁琴|(zhì)子的受體，又是質(zhì)子的供體，可與弱酸弱堿發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)，影響終點(diǎn)判斷（3）溶劑選擇對(duì)于不同堿性的

8、雜環(huán)類藥物只有選擇合適的溶劑和指示終點(diǎn)方法才能獲得滿意的滴定結(jié)果冰醋酸中加入不同量甲酸也能增大突躍范圍 （4）常用指示劑（結(jié)晶紫）結(jié)晶紫為多元弱堿，在不同pH中顯示不同的顏色變化，滴定不同強(qiáng)度的堿性藥物時(shí)終點(diǎn)顏色不同滴定堿性較強(qiáng)的藥物時(shí)，終點(diǎn)以藍(lán)色或藍(lán)綠色為主滴定堿性較弱的藥物時(shí)，一般以綠色為終點(diǎn)滴定更弱的堿性藥物時(shí)，終點(diǎn)顏色為黃色在確定指示劑的終點(diǎn)顏色變化時(shí)應(yīng)以電位法為對(duì)照（5）各種酸根的影響冰醋酸溶液中各酸根的酸性強(qiáng)弱如下： 高氯酸氫溴酸硫酸鹽酸硫酸氫根硝酸磷酸、有機(jī)酸采取措施：HX加 HgAc2 HgX2 H2SO4生物堿的硫酸鹽通常為2分子生物堿與1分 子硫酸成鹽,可直接滴定至HSO-

9、4 （注意摩爾比）HNO3 可氧化指示劑，改用電位法磷酸、有機(jī)酸無(wú)需處理，直接滴定2、應(yīng)用胺類藥物：鹽酸利多卡因，重酒石酸去甲腎上腺素，鹽酸克侖特羅、硫酸沙丁胺醇等含氮雜環(huán)類藥物：氫溴酸東莨菪堿、硫酸奎寧、硝酸毛果蕓香堿、馬來(lái)酸氯苯那敏等；維生素類藥物：維生素B1第二法 （酸量法）滴定液甲醇鈉、甲醇鋰、氫氧化四丁基胺溶劑二甲基甲酰胺 注意滴定過程中應(yīng)防止溶劑和堿滴定液吸收大氣中的二氧化碳和水蒸氣，以及滴定液中溶劑的揮發(fā)應(yīng)用異維A酸、芐氟噻嗪、環(huán)吡酮等 四、其他方法銀量法、碘量法和溴量法（直接滴定、剩余滴定、置換滴定）、亞硝酸鈉法、絡(luò)合滴定法費(fèi)休氏水分測(cè)定法（Karl Fischer Titra

10、tion）1、本法為非水氧化還原滴定反應(yīng)，采用的滴定液稱費(fèi)休氏試液，由碘、二氧化硫、吡啶和無(wú)水甲醇組成。利用碘氧化二氧化硫時(shí)需要一定的水分參加反應(yīng)2、反應(yīng)可逆，用吡啶吸收生成的HI和SO3，形成氫碘酸吡啶和硫酸酐吡啶。但硫酸酐吡啶不穩(wěn)定，無(wú)水甲醇可使其轉(zhuǎn)變成穩(wěn)定的甲基硫酸氫吡啶 3、方法與計(jì)算測(cè)定方法：精密稱取供試品適量（約消耗費(fèi)休氏試液15ml），除另有規(guī)定外，溶劑為無(wú)水甲醇，用水分測(cè)定儀直接測(cè)定?；?qū)⒐┰嚻分酶稍锏木呷Ｆ恐校尤軇?5ml，在不斷振搖（或攪拌）下用費(fèi)休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色，或用永停滴定法指示終點(diǎn)，另作空白試驗(yàn)，按下式計(jì)算本法專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，適用于受熱易被

11、破壞的藥物的水分測(cè)定，如抗生素類藥物的水分測(cè)定4、注意事項(xiàng)：（1）每1ml新配的費(fèi)休氏試液約相當(dāng)于5mg的水，由于試液不穩(wěn)定，逐漸變質(zhì)，因此費(fèi)休氏試液需在臨用前1h內(nèi)標(biāo)定。一般F值應(yīng)在4.0mg/ml以上，當(dāng)F值降低到3.0mg/ml以下時(shí)，滴定終點(diǎn)不敏銳，不宜再用。（2）本法測(cè)定結(jié)果的精確度取決于多種因素，如試劑成分的相對(duì)濃度、溶解樣品的溶劑性質(zhì)、操作技術(shù)、空氣濕度等，尤其是測(cè)定系統(tǒng)中的水分。因此必須嚴(yán)格規(guī)范操作，所用儀器必須干燥，并能避免空氣中水分的侵入，操作宜在干燥處進(jìn)行，并注意避光，整個(gè)操作應(yīng)迅速，不應(yīng)在陰雨天或空氣濕度太大時(shí)進(jìn)行測(cè)定。第三節(jié) 光譜分析一、紫外分光光度法（一）儀器校正與

12、檢定 1、波長(zhǎng)校正：用汞燈中的較強(qiáng)譜線或儀器中氚燈的486.02nm、656.10nm譜線進(jìn)行校正2、吸收度的準(zhǔn)確度檢定：測(cè)定重鉻酸鉀的硫酸溶液在規(guī)定波長(zhǎng)處的吸收系數(shù)進(jìn)行檢定 3、雜散光的檢查：用碘化鈉，亞硝酸鈉溶液測(cè)定規(guī)定波長(zhǎng)處的透光率（二）對(duì)溶劑的要求以空氣為空白（空白光路中不置任何物質(zhì)）測(cè)定溶劑的吸光度（使用波長(zhǎng)附近應(yīng)符合規(guī)定）（三）測(cè)定法1、測(cè)定波長(zhǎng)核對(duì) （規(guī)定波長(zhǎng)2 nm內(nèi)），并以吸光度最大波長(zhǎng)為測(cè)定波長(zhǎng)2、吸收度讀數(shù)范圍（0.3-0.7） 3、同批溶劑為空白試驗(yàn)（校正比色皿和空白溶劑的吸收）4、測(cè)定方法：吸收系數(shù)法、對(duì)照品比較法、計(jì)算分光光度法、比色法（1）百分吸收系數(shù)法E值的大小

13、反映了藥物對(duì)某一波長(zhǎng)光的吸收能力，也反映了測(cè)定反應(yīng)的靈敏度。采用E法測(cè)定含量時(shí)，一般取三位有效數(shù)字表示，E值小于100的一般不宜采用例1：己酸孕酮稱取己酸孕酮0.0105g, 加無(wú)水乙醇溶解后，置10ml容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻。吸取1.00ml, 置100ml容量瓶中, 加無(wú)水乙醇稀釋至刻度, 置1cm吸收池內(nèi)進(jìn)行測(cè)定, 根據(jù)下列已知條件, 求出按干燥品計(jì)算的己酸孕酮百分含量。A=0.390，E1%1cm=393吸收系數(shù)（E1%cm）測(cè)定方法：精密稱取被測(cè)物對(duì)照品適量（雙份），加溶劑制成一定濃度的溶液使吸光度在0.60.8之間精密吸取適量，用同批溶劑將溶液稀釋一倍在規(guī)定波長(zhǎng)分別測(cè)定高低濃度

14、的溶液，計(jì)算吸收系數(shù)（E）值，要求：在五種不同型號(hào)的紫外儀上測(cè)定同一臺(tái)儀器測(cè)定二份間結(jié)果的偏差應(yīng)不超過1.0%各臺(tái)儀器測(cè)得的E值，RSD應(yīng)不超過1.5%取平均值為該藥物的吸收系數(shù)（注明測(cè)定時(shí)溫度）（2）對(duì)照品比較法雙波長(zhǎng)法，差示法，熒光法，均可應(yīng)用此公式，以A，熒光強(qiáng)度代替吸收度A例2：鹽酸嗎啡片與注射液本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸嗎啡10mg)置100ml量瓶中，加水溶解至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液15ml，置50ml量瓶中，加0.2mol/L氫氧化鈉25ml，用水稀釋至刻度，搖勻，UV法測(cè)定。另取嗎啡對(duì)照品適量，精密稱定，用0.2mol/L氫氧化鈉稀釋至每m

15、l中約含20ug的溶液，同法測(cè)定。計(jì)算，結(jié)果乘以1.317，即得C17H19NO3HCl3H2O的含量.(規(guī)格5mg)1.317=M3H2O/M=375.85/285.34方法的特點(diǎn)與影響因素：特點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速、靈敏（10-410-7 g/ml）、有一定專屬性和準(zhǔn)確度（相對(duì)誤差2%左右），應(yīng)用范圍廣（制劑含量、溶出度、含量均勻度測(cè)定），儀器價(jià)廉易普及影響因素：溶劑、溶液pH值（3）計(jì)算分光光度法雙波長(zhǎng)分光光度法（復(fù)方磺胺類藥物的測(cè)定）三點(diǎn)校正法（維生素A的）解線性方程組法等使用時(shí)應(yīng)注意，當(dāng)在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測(cè)定吸光度時(shí)，波長(zhǎng)的微小變化可對(duì)測(cè)定結(jié)果造成顯著影響（4）比色法在藥物分析

16、中應(yīng)用的比色法：酸性染料比色法（含氮堿性藥物如：硫酸阿托品片、氫溴酸東莨菪堿片的測(cè)定）四氮唑比色法、異煙肼比色法和Kober反應(yīng)法（甾體激素類藥物）蛋白質(zhì)的雙縮脲反應(yīng)（硫酸軟骨素的測(cè)定）總黃酮、總生物堿的測(cè)定（中藥制劑）二、熒光分光光度法（Fluorescence Spectrophotometry）熒光法測(cè)定的是物質(zhì)分子的發(fā)射光譜。在一定條件下，物質(zhì)的濃度與其熒光（也稱發(fā)射光）強(qiáng)度成正比關(guān)系，可用于定量分析 1、測(cè)定方法 對(duì)照品對(duì)照法熒光分析中，藥物的濃度與相應(yīng)的熒光讀數(shù)之間的線性范圍較窄，故(RxRxb)/(RrRrb)應(yīng)在0.52，如超出此范圍，應(yīng)調(diào)節(jié)溶液濃度后再測(cè)定 2、熒光分析法的特

17、點(diǎn)靈敏（檢測(cè)限可達(dá)10-1010-12g/ml）專屬（ex和em）適于低濃度溶液分析。濃度過大，熒光會(huì)發(fā)生“自熄滅”現(xiàn)象，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度與溶液濃度不成正比 干擾因素多，如溶劑種類與純度、溶液pH、溫度，共存物質(zhì)、溶液中的懸浮物、玻璃儀器的潔凈度等，因此必須做空白試驗(yàn)常用基準(zhǔn)溶液校正儀器，如：硫酸奎寧的稀硫酸溶液（藍(lán)色熒光）熒光素鈉水溶液（黃綠色熒光）羅丹明B水溶液（紅色熒光）三、原子吸收分光光度法（Atomic Absorption Spectrophotometry，AAS）1、原理由待測(cè)元素作為陰極的空心陰極燈發(fā)出的特征譜線，通過供試品經(jīng)原子化產(chǎn)生的原子蒸氣時(shí)，被蒸氣中待測(cè)元素的基態(tài)原子所吸

18、收，測(cè)定該特征譜線輻射光強(qiáng)度減弱的程度，求出供試品中待測(cè)元素的含量2、遵循一般分光光度法的吸收定律。用于呈原子狀態(tài)的金屬元素和部分非金屬元素的測(cè)定3、含量測(cè)定方法采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法和標(biāo)準(zhǔn)加入法（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線法制備含待測(cè)元素的對(duì)照品溶液至少3份，濃度依次遞增，并分別加入各品種項(xiàng)下制備供試品溶液的相應(yīng)試劑，同時(shí)以相應(yīng)試劑制備空白對(duì)照液依次測(cè)定空白對(duì)照液和各濃度對(duì)照品溶液的吸光度，記錄讀數(shù)（3次），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線制備供試品溶液，測(cè)定吸光度，取3次讀數(shù)的平均值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的濃度，計(jì)算元素的含量 （2）標(biāo)準(zhǔn)加入法取同體積按規(guī)定制備的供試品溶液4份，分別置4個(gè)同體積的量瓶中除1號(hào)量瓶外，其他量瓶分別精

19、密加入不同濃度的待測(cè)元素對(duì)照品溶液,分別用去離子水稀釋至刻度制成從零開始遞增的一系列溶液4、AAS法的局限性主要是工作曲線的線性范圍較窄，一般為1個(gè)數(shù)量級(jí)；每測(cè)一種元素需要更換1個(gè)燈，對(duì)于多種元素同時(shí)測(cè)定時(shí)非常不便第四節(jié) 色譜分析一、HPLC法根據(jù)固定相與流動(dòng)相的極性大小，分為： NP-HPLC以吸附機(jī)理為主 RP-HPLC以分配機(jī)理為主RP-HPLC法適合于中等極性或非極性的弱酸、弱堿和中性化合物的分離分析絕大部分藥物均可用RP-HPLC法進(jìn)行分析1、RP-HPLC（1）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS或C18、C8柱、氨基柱、氰基柱等（2）流動(dòng)相：甲醇-水（或緩沖鹽）、乙腈-水（或緩沖

20、鹽）、四氫呋喃-水（或緩沖鹽）（過濾脫氣） （用過緩沖鹽或酸堿流動(dòng)相后，色譜柱必須用低濃度甲醇液沖洗，以除去酸堿鹽，然后再用甲醇沖洗）洗脫力強(qiáng)弱依次為四氫呋喃乙腈甲醇水 （3）化學(xué)鍵合固定相適用pH2-8的流動(dòng)相；C18 鏈在水相環(huán)境中不易保持伸展?fàn)顟B(tài)，故流動(dòng)相中有機(jī)溶劑的比例應(yīng)不低于5%，否則C18鏈的隨機(jī)卷曲將導(dǎo)致組分保留值的變化，造成色譜系統(tǒng)不穩(wěn)定（4）色譜條件選擇調(diào)節(jié)流動(dòng)相中有機(jī)溶劑比例可調(diào)整被測(cè)物的保留時(shí)間，近似規(guī)則：流動(dòng)相中有機(jī)溶劑降低10%，溶質(zhì)的容量因子約增加3倍40%甲醇的強(qiáng)度33%乙腈23%四氫呋喃也可用三種、四種混合溶劑作為流動(dòng)相 2、NP-HPLCNP-HPLC硅膠柱流

21、動(dòng)相溶劑有：正己烷-異丙醇；正己烷-乙醇；正己烷-二氯甲烷等洗脫力強(qiáng)弱依次為乙醇異丙醇二氯甲烷正己烷正反相色譜相互轉(zhuǎn)換時(shí)，須用過渡溶劑依次沖洗如由反相正相時(shí)，依次用甲醇異丙醇正己烷沖洗而由正相反相時(shí)，則以反方向進(jìn)行沖洗 3、檢測(cè)器（1）選擇性檢測(cè)器紫外、二極管陣列（DAD）、熒光、電化學(xué)響應(yīng)值與待測(cè)液濃度有關(guān)，還與化合物結(jié)構(gòu)有關(guān)（2）通用型檢測(cè)器示差折光、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器對(duì)所有的化合物均有響應(yīng)更專屬、更靈敏的檢測(cè)器質(zhì)譜不同檢測(cè)器對(duì)流動(dòng)相的要求不同，如紫外檢測(cè)器應(yīng)考慮有機(jī)溶劑的截止使用波長(zhǎng)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器不允許使用含不揮發(fā)鹽組分的流動(dòng)相4、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（1）柱效： （2）分離度：

22、（3）拖尾因子： (T=0.951.05)（4）重復(fù)性：取對(duì)照溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)得峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差RSD應(yīng)小于2.0%系統(tǒng)的精密度：每次開機(jī)后，首先要做的日常工作，不能作為分析方法學(xué)研究中的精密度試驗(yàn)5、色譜參數(shù)測(cè)量為滿足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求，可以改變一些條件，如色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、牌號(hào)、載體粒度、流動(dòng)相流速、組成比例、柱溫等，但不能改變固定相種類， 流動(dòng)相組成和檢測(cè)器類型6、測(cè)定方法與應(yīng)用定量方法內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法HPLC法是藥物制劑、多組分樣品分析的首選方法，是各國(guó)藥典收載的方法中應(yīng)用最廣的方法在原料藥的含量測(cè)定中，HPLC法主要用于多組分抗生素或生化藥品，或因所含雜質(zhì)的干擾測(cè)定，而常規(guī)方法又

23、難以分離或分離手段繁雜的化學(xué)品種。如：慶大霉素的組分測(cè)定，-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類等抗生素的含量測(cè)定甾體激素類藥物的含量測(cè)定 例：醋酸氫化可的松的含量測(cè)定取對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇定量稀釋成每1mL中約含0.35mg的溶液。精密量取該溶液和內(nèi)標(biāo)溶液（0.30mg/mL炔諾酮甲醇溶液）各5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取10L注入液相色譜儀。另取本品適量，同法測(cè)定，按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。已知：對(duì)照品取樣36.2mg，樣品取樣35.5mg，測(cè)得對(duì)照液中醋酸氫化可的松和內(nèi)標(biāo)的峰面積分別為5467824和6125843，樣品液中兩者的峰面積分別為5221345和6122845，求本品含量？二、GC法1、色譜柱分為填充柱和毛細(xì)管柱2、載氣有氮?dú)狻⒑夂蜌錃庥筛呒兌葰怏w發(fā)生器或高壓鋼瓶提供，經(jīng)過適當(dāng)減壓、除濕和純