實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)本科免疫ppt課件

1、第四節(jié) 腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)Tumor marker, TM李士軍: lishijundl大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一臨床學(xué)院 實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)教研室1第一節(jié) 概 述我國(guó)惡性腫瘤的發(fā)病率為17310萬人，占總死亡人數(shù)的22，占死亡緣由的第二位。降低死亡率的最有效手段是早期的治療，因此早期的診斷極其重要。腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定在腫瘤的早期診斷過程中具有不可替代的作用。城鎮(zhèn)鄉(xiāng)村2morbiditythe 5-year survival rate 3癌癥的發(fā)生與開展過程起動(dòng)initiation促動(dòng)promotion轉(zhuǎn)化conversion進(jìn)展progression4腫瘤的早期診斷1ug1kg10-1

2、00g1g1mg10310121010 1011109106腫瘤大小生物物理學(xué)技術(shù)免疫學(xué)技術(shù)腫瘤細(xì)胞診斷價(jià)值埋伏期數(shù)月至數(shù)年早期發(fā)病期晚期5腫瘤標(biāo)志物的概念中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)腫瘤標(biāo)志物專家委員會(huì)，中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志 2004；276：393腫瘤標(biāo)志物TM是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)而合成分泌的或是由機(jī)體對(duì)腫瘤反響而異常產(chǎn)生和/或升高的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶同工酶、多胺及癌基因產(chǎn)物等。TM存在于病人的血液、體液、細(xì)胞或組織中。6ACS 定義Definition Tumor markers are substances produced ei

3、ther directly by tumor cells or by a tumor-cell-induced synthesis in non-tumorous cells. They can be found in large amounts in the blood or urine of some patients with cancer. Less often, they can also be found in large amounts in the blood or urine of people who do not have cancer. 7理想的腫瘤標(biāo)志物高靈敏度高特異

4、性腫瘤定位與病情嚴(yán)重程度、腫瘤大小分期有關(guān)監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)腫瘤的預(yù)后8腫瘤標(biāo)志物分類胚胎抗原和蛋白類：如B-J蛋白、AFP、CEA等糖蛋白類抗原：如CA19-9、CA72-4等酶類：如ACP、同工酶NSE等激素類：如hCG、降鈣素等癌基因及其蛋白類：ras癌基因、RB抑癌基因等 9腫瘤標(biāo)志物的運(yùn)用-高危人群的早期診斷 early detection of malignant tumors in the high-risk groups- 初步診斷中的運(yùn)用use in primary diagnosis- 預(yù)后判別prognostic utility- 療效監(jiān)測(cè)therapy monitori

5、ng- 腫瘤復(fù)發(fā)的早期發(fā)現(xiàn)early detection of tumor recurrence Tumor markers are not suited for screening asymptomatic individuals because they have a too low organ and tumor specificity as well as a too low predictive value positive of a test. 10腫瘤標(biāo)志物不適宜安康體檢！ 假陽性、假陰性影響：假設(shè)CEA對(duì)結(jié)腸癌診斷的敏感性是70%，特異性是95%。也就是說有30%的腫瘤患者將不

6、能被檢測(cè)出來。以一組10000人的檢測(cè)為例，假設(shè)這里有1%的人患有結(jié)腸癌，那其中的70人可以被篩查出來。然而，知CEA的特異性是95%，所以，這70個(gè)“真陽性的結(jié)果同時(shí)還伴有495個(gè)假陽性結(jié)果即9900人的5%。那么，絕大部分其實(shí)未患病的人就需求進(jìn)一步的檢查以排除疾病.11用于高危人群的的篩查 假設(shè)運(yùn)用TM對(duì)高危人群進(jìn)展篩查時(shí)應(yīng)遵照以下原那么：該TM對(duì)于早期腫瘤的發(fā)現(xiàn)有較高的靈敏度測(cè)定方法的靈敏度、特異性高和反復(fù)性好篩查費(fèi)用經(jīng)濟(jì)合理TM異常升高，但無病癥和體征，需進(jìn)展復(fù)查、隨訪。Early detection of malignant tumors in high-risk groups -

7、AFP in patients with liver cirrhosis-AFP and hCG if a germ cell tumor is suspected- PSA in men above the age of 50 years with a prostate adenoma12高危人群(1) 緣由不明的疼痛及體重減輕(2) 傷口長(zhǎng)期不愈(3) 疣或黑痣發(fā)生明顯變化(4) 繼續(xù)性消化不良、便血、血尿(5) 繼續(xù)性聲音嘶啞、干咳及吞咽困難(6) 月經(jīng)期異常大出血、月經(jīng)期外或絕經(jīng)后出血 (7) 耳、鼻分泌物帶血,視覺妨礙,聽力下降,常出現(xiàn) 耳鳴景象(8) 出現(xiàn)腫塊或可觸及的硬結(jié)、硬變

8、(9) 肝硬化患者(10) 疑有胚胎細(xì)胞腫瘤者 (11) 男性大于50 歲的前列腺腺瘤患者 (12) 疑有甲狀腺髓質(zhì)癌或家族中出現(xiàn)過這類癌癥的 患者檢測(cè)降鈣素13治療后TM下降到參考范圍，提示腫瘤治療有效。TM濃度雖有降低，但仍繼續(xù)在參考范圍以上，提示有腫瘤殘留和/或腫瘤轉(zhuǎn)移。TM濃度下降到參考范圍一段時(shí)間后，又重新升高，提示腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。14一、甲胎蛋白 Alpha-fetoprotein,AFP生物學(xué)特性：胎兒早期由肝臟和卵黃囊合成糖蛋白，出生后逐漸消逝，是診斷肝癌和胚胎細(xì)胞腫瘤的重要目的。臨床意義：1、診斷原發(fā)性肝細(xì)胞癌大多在肝硬化時(shí)開場(chǎng)升高，閾值300ug/L。2、肝炎、肝硬化升高很

9、少超越300ug/L ，高危人群最好每年進(jìn)展兩次AFP的檢測(cè)。以盡能夠早地發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞癌。3、 AFP與CEA的結(jié)合檢測(cè)可以很好地將原發(fā)性肝細(xì)胞癌與肝轉(zhuǎn)移癌區(qū)別開來。15Alpha-fetoprotein, AFP臨床意義：4、妊娠期間7-8月達(dá)頂峰,普通小于400ug/L AFP高于正常50疑心神經(jīng)管缺乏癥。5、生殖腺胚胎性腫瘤如：畸胎瘤AFP升高。妊娠（月）AFP(ng/ml)5586125722084209285102451617二、癌胚抗原carcinoembryonic antigen,CEA生物學(xué)特性：CEA是分子量為18萬的糖蛋白，CEA是在胚胎時(shí)期產(chǎn)生的,CEA主要存在于胎兒的胃

10、腸道、胰腺和肝臟，出生后降低。臨床意義：1、 CEA 主要見于結(jié)、直腸癌，乳腺、胃、肺、胰腺癌等含有腺體的組織器官當(dāng)中。2、CEA在結(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟及肺部疾病CEA輕度升高，普通很少超越10ng/ml。3、非吸煙者CEA的上限在5ng/ml。安康吸煙者參考值的上限在10ng/ml。18AFP、CEA結(jié)合檢測(cè)鑒別診斷Sensitivity (%)AFP15ng/mlCEA 3ng/mlCEA10ng/ml原發(fā)性肝癌轉(zhuǎn)移性肝癌19807065605020 三. CA153 (carbohydrate antigen 153)生物學(xué)特性：CA15-3是一種對(duì)乳腺癌具有高度敏感性的血清糖蛋白，分子

11、量為40萬道爾頓。臨床意義：1、乳腺癌時(shí)CA15-3升高，監(jiān)測(cè)乳腺癌的進(jìn)展和治療, 轉(zhuǎn)移性乳腺癌敏感性達(dá)6080。2、CA15-3升高還可見于幾種腫瘤的進(jìn)展期，如卵巢癌、宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌。21四. CA125生物學(xué)特性：分子量是20萬，存在于上皮性卵巢癌組織和血清中。臨床意義：1、 CA125曾經(jīng)成為卵巢癌監(jiān)測(cè)病程和治療反響的最重要的標(biāo)志物。2、在不同的婦科良性腫瘤和累及附件的炎癥中，有時(shí)可見CA125的明顯升高。3、宮頸癌、乳腺癌、胃腸道腫瘤、肺癌也可引起CA125一定程度的升高。22五. CA19-9 Carbohydrate antigen，CA19-9gastrointestinal

12、 cancer-associated antigen,GICA臨床意義:1、CA19-9作為胰腺癌的標(biāo)志物，其敏感性為70-85%。2、CA19-9程度升高還可見于其它良性疾患，如胰腺炎、胃腸道和肝炎。血清的程度普通在100u/ml左右，少數(shù)可超越500u/ml。 當(dāng)沒有炎癥或膽汁阻塞炎癥時(shí)，假設(shè)CA19-9的程度繼續(xù)升高，那么劇烈提示有惡性胰腺疾病的存在。2385403024 六. prostate specific antigen (PSA )生物學(xué)特性：PSA是分子量為3.4萬的蛋白酶。PSA雖然有器官特異性，但并不具備腫瘤特異性。中80為結(jié)合P和20的游離。臨床意義：1、診斷、監(jiān)測(cè)前列

13、腺癌的病程和對(duì)治療的反響。PSA還 適用于50歲以上男性的篩查。2、在某些前列腺肥大者和有前列腺炎癥的人血清中PSA 的程度有輕度升高4.0-10 ng/ml。3、當(dāng)tPSA在4-10ng/ml之間時(shí),fPSA/tPSA比值25%提示前列腺增生。4、采集標(biāo)本前進(jìn)展數(shù)字直腸鏡檢查，膀胱鏡、結(jié)腸鏡，皆或多或少的引起PSA程度明顯和繼續(xù)的升高 25七. Neuron specific enolase, NSE生物學(xué)特性：NSE是烯醇化酶同功酶亞基，存在于腦及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元、神經(jīng)細(xì)胞，分子量為8.7萬酸性蛋白酶。應(yīng)該清醒地留意到，NSE在紅細(xì)胞、漿細(xì)胞和血小板中的含量很高，溶血或放置時(shí)間過長(zhǎng)都會(huì)

14、引起NSE的升高。26臨床意義：1、NSE是可用于小細(xì)胞肺癌的鑒別診斷和治療監(jiān)測(cè)的腫瘤標(biāo)志物。2、NSE還是診斷神經(jīng)母細(xì)胞瘤的很有價(jià)值的目的。 對(duì)于非小細(xì)胞肺癌的診斷采用細(xì)胞角蛋白19CYFRA21-1),與NSE結(jié)合檢測(cè)提高敏感性。七. Neuron specific enolase, NSE2728 八. carbohydrate antigen 72-4,CA72-4生物學(xué)特性：分子量為40 萬糖蛋白，它還存在于不同的胎兒組織中。臨床意義：1、CA72-4是胃癌監(jiān)測(cè)首選的標(biāo)志物.明顯優(yōu)于CA199和CEA。2、CA72-4還在粘膜卵巢癌中出現(xiàn)，結(jié)腸癌、胰腺癌、非小細(xì)胞肺癌也可增高。29其

15、他腫瘤標(biāo)志物組織多肽抗原和組織多肽特異性抗原 TPA：乳腺癌、肺癌等前列腺酸性磷酸酶PAP：前列腺癌-L-巖藻糖苷酶AFU：原發(fā)性肝癌人絨毛膜促性腺激素hCG：葡萄胎細(xì)胞角蛋白19片段CYFRA21-1：非小細(xì)胞肺癌降鈣素CT：甲狀腺髓樣癌癌基因：ras基因，Rb基因 30腫瘤標(biāo)志物的結(jié)合檢測(cè)由于各標(biāo)志物在同一腫瘤同時(shí)出現(xiàn)，或者說同一標(biāo)志物在多種腫瘤皆會(huì)升高，因此提出了多種標(biāo)志物結(jié)合監(jiān)測(cè)的必要性。幾種常見腫瘤的常用結(jié)合檢測(cè)“譜31Primary marker, First supplement marker, Second supplement marker. Hcc=hepatocellul

16、ar cancer, ENT=ear-nose-throat (e.g. nasopharyngeal carcinoma)32+Magnetic beadSheep anti mouse IgGAnti-NSE antibodyNSEenzyme labeled anti-NSE antibodyThe principle of immunoassay Detection method33ACCESS 化學(xué)發(fā)光分析儀34CORBAS CORE 全自動(dòng)酶免分析儀35病例分析1男性，47歲，工人，因右上腹痛半年，加重伴食欲不振，上腹包塊1個(gè)月?；颊甙肽昵盁o明顯誘因出現(xiàn)右上腹鈍痛，為繼續(xù)性。1個(gè)月

17、來，腹痛加重，服止痛藥效果不好，并覺右上腹豐滿，似有包塊，腹部B超示肝臟占位。發(fā)病以來，無嘔吐、腹瀉，偶有發(fā)熱體溫最高37.8，大小便正常，體重下降約5kg。既往有乙型肝炎病史多年，無結(jié)核病史，無煙酒嗜好，無藥物過敏史，遺傳性疾病史。查體：T36.8，P 79次/分，R 19次/分，BP 114/70mmHg。發(fā)育正常，營(yíng)養(yǎng)可，協(xié)作，皮膚無黃染，未觸及淺表腫大淋巴結(jié)，鞏膜輕度黃染，結(jié)膜略慘白，無水腫，口唇慘白無發(fā)紺，頸無抵抗，甲狀腺不大，氣管居中，心肺-。腹軟，無腹壁靜脈曲張，右上腹豐滿，輕度壓痛，無肌緊張。肝臟腫大，肋下5cm，邊緣鈍、質(zhì)韌，有觸痛，Murphy征-，脾未觸及，腹叩鼓音，無挪動(dòng)性濁音，肝上界叩在第5肋間，肝區(qū)叩痛，聽診腸鳴可聞，8次/分，雙鎖骨上窩未觸及腫大淋巴結(jié)、肛門指診未發(fā)現(xiàn)異常。輔助檢查：Hb 88g/L，WBC 5.5109/L, ALT 84 IU/L, TBIL 30.0IU/L , DBIL 10.0 IU/L , ALP 188 IU/L , GGT 64 IU/L ， AFP 880ng/