大腸癌中VHL mRNAFIH

1、大腸癌中VHL mRNA，F(xiàn)IH楊曉軍,高鵬,車連合,黃海云【關(guān)鍵詞】結(jié)直腸腫瘤；低氧誘導(dǎo)因子1；VHL基因；缺氧誘導(dǎo)因子按捺因子1EffetfVHLRNAandFIH1RNAexpressinsinlretalarinanHIF1prtEinlevel【Abstrat】AI:TdetetRNAexpressinsfVHLandFIH1inlretalaner,andexplretheireffetnHIF1prteinlevel.ETHDS:SeiquantitativeRTPRassayasusedtdetettheexpressinsfVHLRNA,FIH1RNAin42patients

2、ithlretalaner;ExpressinfHIF1prteinaseasuredbySPiunhistheistry;Spearanrankrrelatinasusedtanalyzetherrelatinbeteenthe.RESULTS:RNAlevelsfVHLandFIH1inlretalanereresignifiantlylerthanthseinadjaenttissuet=-10.14,P=0.00；t=-15.26,P=0.00；BthexpressinsdereasedasDukesstageinreased,andtheexpressinsinDukesA+Bsta

3、geeresignifiantlyhigherthanthseinDukes+Dstaget=2.84,P=0.01；t=-5.13,P=0.00；Theirexpressinshadnrelatinshipithturlatinandgender.In42asesflretalaner,psitiveratefHIF1prteinas69.1%(29/42),theexpressininDukes+Dstage(80.0%,24/30)assignifiantlyhigherthanthatinDukesA+Bstage(41.7%,5/12),(t=5.89,P=0.02);itasneg

4、ativeinadjaenttissue;SpearanrankrrelatindisplayedthattheexpressinsfVHLRNAandFIH1RNAerenegativelyrrelatediththeHIF1prteinlevel(rs=-0.97,P=0.01;rs=-0.66,P=0.01).NLUSIN:TheverexpressinfHIF1ayplayaniprtantrleinthedevelpentandatastasisflretalaner；ThedereasefVHLRNAandFIH1RNAexpressinsislselyrrelatediththe

5、inreasefHIF1prteinlevelinlretalaner.【Keyrds】lretalneplass;HIF1;VHL;FIH1【關(guān)鍵詞】結(jié)直腸腫瘤；低氧誘導(dǎo)因子1；VHL基因；缺氧誘導(dǎo)因子按捺因子1低氧誘導(dǎo)因子1hypxiainduiblefatr1，HIF1在低氧狀態(tài)下通過對(duì)靶基因的轉(zhuǎn)錄激活，調(diào)控著血管產(chǎn)生、紅細(xì)胞天生以及糖酵解等歷程1.希佩爾林道病(vnHippelLindau,VHL)希佩爾林道病腫瘤按捺卵白(prteinvnHippelLindau,pVHL)在依靠于氧的條件下作用于HIF1的亞單元，促使其產(chǎn)生泛素化和卵白酶體的落解2.低氧誘導(dǎo)因子1按捺因子(fatri

6、nhibitingHIF1,FIH1)能連合HIF1并按捺其轉(zhuǎn)錄激活成效3.我們接納RTPR法檢測了大腸癌構(gòu)造和相應(yīng)癌旁正常構(gòu)造中VHLRNA,FIH1RNA的表達(dá)程度，同時(shí)接納免疫組化要領(lǐng)檢測HIF1卵白的表達(dá)，并進(jìn)一步闡發(fā)探究它們之間的相干性.1質(zhì)料和要領(lǐng)11質(zhì)料甘肅省人民病院肛腸科202210/202204手術(shù)切除并經(jīng)病理證明的奇怪大腸腺癌標(biāo)本42(男27，女15)例，年事3176中位56)歲.此中結(jié)腸癌7例，直腸癌35例.DukesA期5例，B期7例，期18例，D期12例(有7例產(chǎn)生轉(zhuǎn)移),術(shù)前未做化放療.同時(shí)距腫瘤邊沿510以上切取正常構(gòu)造作為自身比較.標(biāo)本離體后5in內(nèi)即投入液氮罐

7、并轉(zhuǎn)至-80冰箱凍存.RNA提取試劑,飽和酚,100bpDNAladder購自上海生工;逆轉(zhuǎn)錄酶LV(RNaseH)，Taq酶，AgarseGel，LVRtaseDNAsynthesisKit(deD6130)，RNA酶按捺劑，瓊脂糖Agarse均購自負(fù)連寶生物公司;兔抗人HIF1多克隆抗體購自武漢博士德公司;生物素鏈霉素抗生物素卵白檢測體系(SP)試劑盒均購自福州邁新公司;按照從NBI的Nuletide數(shù)據(jù)庫中所查到VHL和FIH1RNA序列，經(jīng)盤算機(jī)幫助方案引物，內(nèi)參比較選用磷酸甘油醛脫氫酶(Gapdh).引物均由上海生工合成，利用濃度均50l/L(表1).12要領(lǐng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰:數(shù)據(jù)接納

8、SPSS13.0軟件舉行統(tǒng)計(jì)學(xué)闡發(fā)，計(jì)量資料以xs表現(xiàn)，組間比力接納t查驗(yàn).計(jì)數(shù)資料兩組率的比力接納四格表的校正卡方查驗(yàn)，RTPR效果和免疫組化效果的相干性接納Spearan品級(jí)相干闡發(fā)，按=0.05的水準(zhǔn)斷定是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.2效果21RTPRVHLRNA在大腸癌構(gòu)造中的表達(dá)程度為0.510.08，癌旁正常構(gòu)造中的表達(dá)程度為0.630.11，配對(duì)t查驗(yàn)效果表現(xiàn)差異有明顯性t=-10.14,P=0.00；FIH1RNA在大腸癌構(gòu)造中的表達(dá)程度為0.520.05，癌旁正常構(gòu)造中的表達(dá)程度為0.600.14，配對(duì)t查驗(yàn)效果表現(xiàn)差異有明顯性t=-15.26,P=0.00.VHLRNA，F(xiàn)IH1RN

9、A表達(dá)程度與發(fā)病部位，性別，Dukes分期以及有無轉(zhuǎn)移等臨床病理資料之間有關(guān)(圖1,2,表2).表2大腸癌構(gòu)造VHLRNA與FIH1RNA的表達(dá)與臨床病理的干系22免疫組化染色癌旁正常構(gòu)造HIF1免疫組化染色均為陰性圖3；癌構(gòu)造中29例69.1%HIF1陽性(圖4)，此中(+)16例，()10例，()3例.HIF1表達(dá)與Dukes分期顯著相干，DukesA+B期和Dukes+D期的陽性率別離為41.7%(5/12),80.0%(24/30),兩者差異具有明顯性(P0.05).無轉(zhuǎn)移者HIF1陽性率為65.7%(23/35),有轉(zhuǎn)移者陽性率為85.7%(6/7),兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.23VHL

10、RNA，F(xiàn)IH1RNA表達(dá)與HIF1卵白程度的干系我們接納非參數(shù)查驗(yàn)的Spearan品級(jí)相干闡發(fā)，效果表現(xiàn)，大腸癌構(gòu)造中HIF1表達(dá)程度與VHLRNA和FIH1RNA的表達(dá)程度呈明顯負(fù)相干(rs=-0.97,P0.01；rs=-0.66,P0.01).圖3癌旁正常構(gòu)造HIF1的表達(dá)SP4003討論Spearan品級(jí)相干闡發(fā)表現(xiàn)，HIF1表達(dá)程度與VHLRNA，F(xiàn)IH1RNA的表達(dá)程度明顯負(fù)相干，這表白大腸癌構(gòu)造中抑癌基因VHL以及FIH1的程度落落與HIF1卵白程度的升高之間存在嚴(yán)密相干.HIF1的過表達(dá)在大腸癌的產(chǎn)生生長，浸潤轉(zhuǎn)移歷程中起著緊張作用，HIF1高表達(dá)的癌構(gòu)造具有較強(qiáng)的浸潤和轉(zhuǎn)移

11、本領(lǐng).提示HIF1的表達(dá)可反響結(jié)直腸癌的生物學(xué)舉動(dòng)，可以作為斷定結(jié)直腸癌浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的有代價(jià)指標(biāo).別的，低氧順應(yīng)性反響在腫瘤產(chǎn)生生長中起著緊張作用，而HIF1是此歷程中的樞紐環(huán)節(jié)，利用反義核酸按捺HIF1的轉(zhuǎn)錄活性已經(jīng)成為治療腫瘤的一個(gè)緊張切入點(diǎn)9-11，隨著對(duì)VHL和FIH1作為HIF1負(fù)性調(diào)治子成效的漸漸闡發(fā)12，進(jìn)一步探究連合應(yīng)用VHL基因治療和FIH1的擬似物，以低落HIF1的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄活性，按捺癌細(xì)胞的低氧順應(yīng)反響，在防治大腸癌的產(chǎn)生生長，浸潤轉(zhuǎn)移方面將會(huì)有更遼闊的遠(yuǎn)景.【參考文獻(xiàn)】1BelzeryVE,VanEirEG.Hypxiainduiblefatr1:Anveltarg

12、etfranertherapyJ.AntianerDrugs,2022,16(9):901-909.2KuaiT,Kitadai,Y,TanakaS,etal.utatinfthevnHippelLindau(VHL)geneinhuanlretalarina:Assiatinithytplasiauulatinfhypxiainduiblefatr(HIF)1J.anerRes,2022,95(2):145-153.3neillLA,HeitsnKS,laridgeTD,etal.Hypxiainduiblefatrasparaginylhydrxylase(FIH1)atalyseshyd

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