第三章消毒滅菌與實(shí)驗(yàn)室生物安全課件

1、第三章 消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全第一節(jié)消毒滅菌的常用術(shù)語滅菌: 殺死物體上所有微生物的方法。消毒：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法， 并不一定 能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生 物。 消毒劑-用于消毒的藥品。防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法。清潔：通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量 的過程。 無菌：無活菌存在。 無菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。第二節(jié)消毒滅菌的方法（一）熱力滅菌法 高溫對細(xì)菌有明顯的致死作用- 蛋白質(zhì)變性；核酸斷裂。 有干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類，在同一溫度下，前者比后者的效力大。 *濕熱中菌體蛋白較易凝固。 *濕熱的穿透力比干熱大。 *濕熱

2、的蒸汽有潛熱存在。物理消毒滅菌法干熱滅菌 干熱的殺菌作用是通過脫水、干燥 和大分子變性。 1.焚燒法：直接點(diǎn)燃或在焚燒爐內(nèi)焚燒。是一種徹底的滅 菌方法。 適用于廢棄物品或動(dòng)物尸體。 2.燒灼法：直接用火焰滅菌。 適用于接種環(huán)，試管口等的滅菌。 3.干烤法：將物品置干烤箱內(nèi)，加熱至160170 ，2h。 適用于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品。 4.紅外線：利用電磁波的熱效應(yīng)滅菌。110m波長的熱 效應(yīng)最強(qiáng)。適用于醫(yī)療器械的滅菌。濕熱滅菌 1.巴氏消毒法：用較低溫度殺滅液體中的病原 微生物或特 定的微生物，而仍保持物品中所需的不耐 熱成分不被破壞的消毒方法。 61.162.8 ，30min;

3、71.7 ,1530s 用于牛乳制品、酒類等的消毒。 2.煮沸法: 100 水浴，30min。食具、刀剪等消毒。 3.流動(dòng)蒸氣消毒法： 100 汽浴，30min。 4.間歇蒸汽滅菌法： 100 汽浴，30min/次。 5.高壓蒸汽滅菌法：121.3 汽浴（103.4kPa)，1520min。 培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等 耐高溫、耐濕物品的滅菌。 （二）輻射殺菌法 紫外線殺菌 波長200300nm的紫外線有殺菌作用， 其中以265266nm最強(qiáng)。 殺菌機(jī)制：形成T T,干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。 殺菌作用特點(diǎn)：穿透力弱，表面消毒。 適用范圍：手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室 的空氣消毒,或不耐熱物品

4、的表面消毒。電離輻射：高速電子、射線、 射線等。 殺菌機(jī)制：產(chǎn)生游離基，破壞DNA。 應(yīng)用范圍：一次性醫(yī)用塑料制品；食品。微波：波長為1mm到1m左右的電磁波，可穿透 玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，不能 穿透金屬表面。 檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無菌病室 的食品用具、藥杯及其它用品的消毒。（三）濾過除菌法 用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去，以達(dá)到無菌的目的。抽氣（四）干燥與低溫抑菌法 干燥可使菌體內(nèi)的水分逸出，使細(xì)菌生命 活動(dòng)停止。 低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，影響細(xì)菌 的生長。 冷凍真空干燥法一、化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制 促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固。 如酚類、醇類、重金屬鹽類、酸堿類、醛類等。

5、 干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝。 如氧化劑、重金屬鹽類。 損傷菌細(xì)胞膜，降低菌細(xì)胞的表面張力并增 加其通透性，胞外液體內(nèi)滲，致使細(xì)胞破裂。 如酚類表面活性劑、脂溶劑等?；瘜W(xué)消毒滅菌法二、消毒劑的主要種類 酚類石炭酸、來蘇、洗必泰等 醇類-乙醇（7075%）、異丙醇。 重金屬鹽類-硝酸銀、汞 氧化劑-過氧化氫、高錳酸鉀、過氧乙酸、 碘酒、漂白粉、次氯酸等。 表面活性劑-新潔爾滅、杜滅芬 烷化劑-甲醛、還氧乙烷、戊二醛等。 染料-龍膽紫 酸堿類-醋酸第三節(jié) 消毒滅菌的運(yùn)用（一）高危器械物品 用時(shí)需進(jìn)入無菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。 （二）中危器械物品 用時(shí)不進(jìn)入無菌組織但接觸黏膜的器械。采用消

6、毒即可。（三）低危器械物品 只接觸未損傷皮膚但不進(jìn)入無菌組織和不接觸黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械 一、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌 1.物理消毒法 紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用； 濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2 m的高效過濾裝置以除去細(xì)菌和帶菌塵埃。 2化學(xué)消毒法 包括化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸：過氧乙酸噴霧、熏蒸；過氧化氫噴霧；二氧化氯溶液噴灑；中草藥點(diǎn)燃煙熏。（三）手和皮膚的消毒 用肥皂和流動(dòng)水經(jīng)常并正確洗手。 病原微生物污染時(shí)應(yīng)用消毒劑消毒。 （四）黏膜的消毒 （五）病人排泄物與分泌物的消毒滅菌 （六）病人污染物品的消毒 （七）飲

7、水的消毒 （八）環(huán)境的消毒 第四節(jié) 影響消毒滅菌效果的因素一、消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間二、微生物的種類與數(shù)量三、溫度 四、酸堿度五、有機(jī)物第五節(jié) 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全 生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safety of biotechnology）的簡稱。 狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。 廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心是防擴(kuò)散和防感染。 關(guān)于病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實(shí)驗(yàn)室的分級

8、管理，實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任等。 一、病原微生物的分類根據(jù)傳染性、感染后對個(gè)體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類： 第一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的 微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消 滅的微生物。 第二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較 容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng) 物與動(dòng)物間傳播的微生物。 第三類是指能夠引起人或動(dòng)物疾病，但一般情況 下對人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳 播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重 疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微 生物。 第四類是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病 的微生物。 第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微

9、生物。 二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級級別處理對象一級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動(dòng)植物致病的致病因子。二級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子，對健康成人、動(dòng)植物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。三級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級 對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。 一、二級實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級、四級實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。 從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度 。 三、實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任 感染的控制包括定期檢查實(shí)