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1、組織學(xué)與胚胎學(xué)第1章組織學(xué)緒論一 、研究內(nèi)容和意義組織學(xué): 是研究機體和的科學(xué)。研究內(nèi)容:細胞、組織、器官和系統(tǒng)幾部分, 又稱顯微解剖學(xué)。細胞(cellC)組織(tissue)器官(organ)系統(tǒng)(system)1. 細胞 C膜、C質(zhì)、C核 是人體結(jié)構(gòu)和功能的最小單位 光學(xué)顯微鏡(light microscopeLM)即可觀察到。細胞膜細胞核細胞質(zhì)卵細胞神經(jīng)C神經(jīng)元神經(jīng)節(jié)C、神經(jīng)膠質(zhì)C (1)透射電鏡(EM):觀察C內(nèi)部更細微的結(jié)構(gòu), 即超微結(jié)構(gòu)。(2) 掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。2. 組織: 結(jié)構(gòu)相同或相似的C群及 C外基質(zhì)構(gòu)成。 四大基本組織:上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織3.
2、器官: 不同的組織按一定的比例、數(shù)量及方式組合成器官。系統(tǒng): 若干功能相關(guān)的器官構(gòu)成系統(tǒng)。細胞組織器官系統(tǒng)組織學(xué)各論組織學(xué)總論 蘇木精-伊紅染色法蘇木精:堿性染料,使C核內(nèi)的染色質(zhì)及C質(zhì)內(nèi)的核糖體染成紫藍色。伊紅:酸性染料,C質(zhì)和C外基質(zhì)中的成分染成紅色。最常用的組織切片染色法HE染色嗜堿性:對于堿性染料親和力強的性質(zhì)??杀惶K木精染成紫藍色。 嗜酸性:對于酸性染料親和力強的性質(zhì)。可被伊紅染成紅色。中性: 對于兩種染料親和力都不強的性質(zhì), HE染色著色淡。組織結(jié)構(gòu)的嗜色性C超微結(jié)構(gòu)模式圖 電鏡: “兩暗夾一明”C膜: 單位膜細胞膜1. 光學(xué)顯微鏡(光鏡)的發(fā)明Light microscope (
3、LM)2. 細胞學(xué)說的提出和組織學(xué)的建立 3. 電子顯微鏡(電鏡)的發(fā)明和超微 結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn) Electron microscope(EM)4. 當(dāng)代組織學(xué)二. 組織學(xué)的發(fā)展簡史和當(dāng)代組織學(xué)1. 對組織學(xué)內(nèi)容的審視角度2. 注意形態(tài)與功能的統(tǒng)一3. 注意培養(yǎng)觀察與空間思維 的能力三.組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法(一) 光鏡技術(shù) 1. 石蠟切片術(shù) 取材和固定; 脫水和包埋; 切片和染色; 封片。 四.組織學(xué)技術(shù)簡介 其他切片技術(shù): 火棉膠包埋, 冰凍 切片,涂片,鋪片,磨片。其他染色法: 硝酸銀神經(jīng)細胞(黑)。 1. 透射電鏡 電子密度高: 當(dāng)電子束投射到密 度大吸附重金屬多的結(jié)構(gòu)時, 電 子被散射的多, 因
4、此, 射落到熒 光屏上的電子少而呈暗像, 電鏡 照片呈黑或深灰色, 稱為電子密 度高。反之稱為電子密度低。(二)電鏡技術(shù)2. 掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。組織化學(xué)術(shù): 為應(yīng)用化學(xué)、物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)或分子生物學(xué)原理和技術(shù), 與組織學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的技術(shù), 能在組織切片定性、定位、定量地顯示某種物質(zhì)的存在與否以及分布狀態(tài)。細胞化學(xué)術(shù):前述技術(shù)用于游離細胞樣品則稱為(cytochemistry)。(三)組織化學(xué)術(shù)1. 一般組織化學(xué)術(shù) 基本原理是在切片上添加某種試劑, 和組織 中待測反應(yīng)物發(fā)生反應(yīng), 其終產(chǎn)物或為有色 沉淀, 以用光鏡觀察, 或為重金屬沉淀以用電 鏡觀察。 (1) 糖類:
5、PAS反應(yīng), pariodic acid Schiff reaction (2) 脂類: 油紅、尼羅藍及蘇丹類染料 (3) 核酸: 福而根反應(yīng)DNA; 甲基綠- 派若寧反應(yīng)DNA綠色,RNA紅色。 (4) 酶類: 酶組織化學(xué)術(shù)。通過顯示酶的 催化活性以表示酶的存在。2. 免疫組織化學(xué)術(shù)immunohistochemistry:是根據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,檢 測組織中肽和蛋白質(zhì)的技術(shù)。肽和蛋白質(zhì)均具有抗原性, 當(dāng)把人或動物的某種蛋白質(zhì)作為抗原注入另一種動物, 其體內(nèi)則會產(chǎn)生針對該抗原的特異性抗體。將抗體從動物血清中提出后, 與標(biāo)記物相結(jié)合, 即成為標(biāo)記抗體。 用標(biāo)記抗體與組織切片孵育, 抗體 則與組織中相應(yīng)抗原特異性結(jié)合在 顯微鏡下通過觀察標(biāo)記物而獲知肽 或蛋白質(zhì)的分布部位。常用的標(biāo)記 物有熒光素, 辣根過氧化物酶、膠 體金。3. 原位雜交技術(shù)即核酸分子雜交組 織化學(xué)術(shù)。 其原理為用帶有標(biāo)記物的已知堿基序列的核酸探針,與細胞內(nèi)待測的核酸按堿基配對的原則進行特異性原位結(jié)合,即雜交。然后,通過對標(biāo)記
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