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文檔簡介
1、3.2. 4絲素蛋白及絲素纖維3. 2. 4. 1蠶絲及絲素蛋白概述絲,通常是指由昆蟲或蜘蛛所產(chǎn)生的纖維,也稱“天然絲”。自然界中大約有30000 種蜘蛛及113000種昆蟲綱鱗翅目,大部分物種以及昆蟲綱的其他幾個物種可以吐絲。但 時至今日,人們僅僅研究了少數(shù)幾種蜘蛛、蠶類(包括桑蠶和柞蠶)和某些螨幼蟲所吐 出的絲類纖維和絲素蛋白,其中研究最多的是桑蠶絲(bombyx moil silk)和金絲蜘蛛絡 新婦(nephila clavipes)的拖牽絲(dragline)和捕獲絲(capture thread)o然而,直到現(xiàn)在 人們還沒有成功地開發(fā)蜘蛛絲,主要因為蜘蛛同類相食的本能致使人們不能對
2、其進行 高密度飼養(yǎng)。桑蠶是人類最早馴化的飼養(yǎng)的昆蟲,蠶絲也是人類利用最早、目前產(chǎn)量 最大的天然纖維之一,其蛋白質(zhì)是迄今為止利用最早、研究最廣泛的天然纖維蛋白。中國是蠶絲的故鄉(xiāng),發(fā)現(xiàn)并使用蠶絲已近有5000年的歷史。蠶絲是一種具有優(yōu) 良特性的天然蛋白質(zhì)纖維,它因具有獨特的光澤、懸垂性、手感等而成為一種“高雅”的 紡織纖維,素有“纖維皇后”的美譽。蠶絲中的絲素蛋白是一種天然蛋白質(zhì),且具有良 好的生物相容性,在生物醫(yī)學領域,除已用于外科手術縫線、食品添加劑和化妝品外, 由于它獨特的力學性能,使得蠶絲在臨床上有著廣泛的應用。(1)蠶絲及絲素蛋白的化學組成。蠶絲蛋白是由絲素蛋白(s ilk fibroi
3、n )和絲膠蛋 白(sericin)兩部分組成,疏水性的絲膠包覆在絲素蛋白的外部,約占重量的25%,而親 水性的絲素蛋白是蠶絲中的主要組成部分,約占重量的70%,蠶絲中還有5%左右的 雜質(zhì)。在絲素蛋白中含有18種氨基酸,以甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸為主。絲素中含有 的氨基酸種類具體可參見表33。表33絲素蛋白氨基酸組成II每lOOg蛋白質(zhì)中的氨基酸克數(shù)(g) I TOC o 1-5 h z I 名稱 II HYPERLINK l bookmark11 o Current Document II11II 柞蠶絲素 I 桑蠶絲素 III11II 柞蠶絲素 I 桑蠶絲素 III 1亮氨酸(1eu)+-I
4、10. 40F- I 10. 681I 1II異亮氨酸(ne)1 I0. 381 I0. 871 II+-F-1由于蠶絲種類不同,柞蠶絲和桑蠶絲的絲素蛋白中氨基酸含量具有明顯的差別, 所用的儀器和測定方法不同,不同季節(jié)、不同產(chǎn)地蠶絲蛋白的氨基酸也會稍有差異。 從表33中可以看出,柞蠶絲素蛋白組成中,甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸的含量占氨基酸 總量的82%以上,桑蠶絲素蛋白中以上三種氨基酸含量占氨基酸總量的85%以上。除了碳、氫和氮元素外,絲素蛋白還含有多種其他元素,如鉀、鈣、硅、鍶、磷、鐵、 銅等,這些元素與絲素蛋白的性能及蠶吐絲的機理等有直接關系。絲素蛋白的相對分子質(zhì)量。絲素蛋白屬于纖維蛋白質(zhì),由
5、于其分子結構和分 子問作用力極其復雜,人們采用不同的方法對絲素蛋白分子的相對分子質(zhì)量進行了多 次測定,但是結果相差較大,而且早期對絲素蛋白分子鏈是由單一分子鏈組成還是由 多個亞單元組成的復合體的問題也存在分歧。隨著基因技術和測試技術的發(fā)展,近年 比較統(tǒng)一的結論是,絲素蛋白由三個亞單元組成的復合蛋白質(zhì):包括重鍍H鏈)蛋白 亞單元,H鏈主要由甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸等組成,是由5263個氨基酸殘基所組成 的長鏈狀分子,平均分子量為3. 5X105;輕鏈(L鏈)亞單元,由262個氨基酸殘基所組 成,平均分子量為2. 5X104;重鏈和輕鏈之間通過二硫鍵相連的蛋白,平均分子量為2. 5 X 104,與L
6、鏈大小相近,但氨基酸組成則完全不同,并且不與H鏈共價結合,只是 通過其他非共價鍵結合方式作為絲素蛋白的微量成分存在。絲素蛋白的結構。絲素蛋白主要由甘氨酸,丙氨酸和絲氨酸等氨基酸組成。組成重鏈的12個結構域形成了蠶絲纖維的結晶區(qū)。但是由于這些結晶區(qū)被無重復單 元的主序列打散,所以纖維中只有少數(shù)有序的結構域。纖維中的結晶結構域由甘氨 酸一x氨基酸的重復單元組成,x代表丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸和纈氨酸。在蠶絲纖維 中,一個結晶結構域平均由381個氨基酸殘基組成。每個結構域又包含多個六縮氨酸 組成的次結構域。這些六縮氨酸包括GAGAGS,GAGAGY,GAGAGA或GAGYGA(G是 甘氨酸,A是丙氨酸
7、,S是絲氨酸,Y是酪氨酸)這些次級結構域以四縮氨酸結尾,比 如GAAS或GAGS。絲素重鏈里較少結晶形成的區(qū)域,也被稱為連接區(qū),長度在4244 個氨基酸殘基之間所有的連接區(qū)都有一個完全相同的25個氨基酸殘基(非重復序 列),這些氨基酸殘基由結晶區(qū)所沒有的帶電荷的氨基酸組成。主序列是形成具有天 然共嵌段共聚物類似結構的疏水蛋白的主要原因。絲素蛋白結晶形態(tài)主要包括I型絲素和II型絲素:I型絲素分子鏈是按d 一螺旋 和盧一平行折疊構象交替堆積而成;II型絲素呈反平行盧一折疊層狀結構。在溫度和 溶劑影響下,I型絲素易向I型絲素轉變。存在于蠶絲素溶液一空氣界面上的一種新 的絲素結晶形態(tài),稱之為III型絲
8、素,其肽鏈的立體構象為JB 一折疊螺旋。I型絲素的結 構是水溶態(tài),通過加熱或者物理紡織可以輕易轉變成I型絲素結構。當I型絲素暴露 在甲醇或氯化鉀溶液中的時候,在體外液態(tài)環(huán)境里可以觀察到I型絲素的結構轉變?yōu)?盧一折疊結構。1IB 一折疊結構是由一側為甘氨酸的氫和另一側為丙氨酸的疏水性的甲 基形成的非對稱結構,口一折疊排列導致氫和甲基相互作用在晶區(qū)形成內(nèi)折疊;強有力 的氫鍵和范德華力產(chǎn)生的結構是熱力學穩(wěn)定的。氨基酸的分子內(nèi)和分子間氫鍵垂直 于分子鏈和纖維。I型絲素不溶于水,同時還不溶于多種溶劑,包括弱酸和堿性溶液 以及一些離子液體。3.2. 4.2絲素蛋白在生物材料方面的應用絲素蛋白是很早就為人類
9、所重視的天然生物高分子,但自古以來,它的主要應用 是在紡織業(yè)上。絲素蛋白是從蠶絲中提取的天然高分子纖維蛋白,從蠶絲中提取的絲 素蛋白具有獨特的分子結構,優(yōu)異的力學性能、良好的吸濕和保濕性能以及抗微生物 性能,同時可以方便地做成粒狀、纖維狀及膜狀等形態(tài),具有良好的生物相容性、無毒、 無污染、可生物降解,為絲素蛋白在生物材料方面的開發(fā)利用提供了依據(jù)。絲素蛋白作為固定化酶載體的應用。在研究液狀蠶絲素蛋白纖維化機理的 過程中,人們發(fā)現(xiàn),絲素蛋白的二次結構將會隨著一定的物理或化學作用,如拉伸、剪 切、加熱、甲醇浸泡等,發(fā)生不可逆轉的轉化,即水溶性的絲素蛋白可通過物理或化學 過程變成非水溶性的,這就為酶在
10、絲素蛋白中的固定提供了可能。此類酶的固定化類 似于凝膠包埋法,但其具有明顯的優(yōu)點:絲素蛋白變性的程度可以控制,因而減少了酶 的滲漏和擠出,提高了固定酶的效率。另外,在固定化的過程中,只涉及極少的化學試 劑并且不產(chǎn)生自由基,能較好地避免在普通凝膠包埋中所存在的化學試劑和自由基對 酶產(chǎn)生的失活作用,大大增加了活性酶的利用效率。酶的固定化是指通過物理或化學方法將酶固定在某種載體上,使其成為仍具有催 化活性的酶或酶的衍生物的過程,從而大大提高酶的使用效率。制備絲素固定化酶主 要有包埋法和交聯(lián)法。采用包埋法將葡萄糖氧化酶固定于絲素膜上,并以甲醇和戊二 醛處理的絲素膜作為對照,結果表明:80%的甲醇處理的
11、絲素膜比用戊二醛處理的絲 素膜有更強的酶活性,且酶的活性可保持98%以上,酶的熱穩(wěn)定性和pH值穩(wěn)定性都 比自由狀時增加。絲素膜的紅外圖譜顯示,固定葡萄糖氧化酶(GOD)后,絲素膜的結 構發(fā)生變化,甲醇處理前的絲素膜結構含有80%的無規(guī)卷曲和20%反向平行的口一折 疊結構,這兩種結構分別在絲素膜內(nèi)部和外表面,根據(jù)核磁共振、傅立葉紅外光譜等測 得絲素膜為不均勻的結構,此結構可防止酶的溶出,這種結構使得絲素膜可保持酶活 性一個月以上,在40C時,酶性質(zhì)穩(wěn)定,而且由于葡萄糖在絲素膜內(nèi)具有更高的擴散 性,使酶也具有更高的活性恢復率。還有用絲素固定過氧化物(POD)和脂肪酶、果膠 酶、青霉素酰化酶等制成酶
12、固定化膜,這些酶固定化膜除具備各種高水平酶活性外,其 保存時間較長,在酶不失活的情況下可保存兩年以上,使酶膜難保存的缺點得以克服。 由于采用絲素作為酶固定化材料,獲得了更高的靈敏度和響應速度,這些對酶電極是 十分重要的。絲素蛋白在藥物釋放上的應用。藥物緩釋技術是當前藥劑學研究的熱點之 一,其目的在于尋求提供理想血液藥物濃度的途徑,提高藥物的安全性和有效性。目 前采用的控釋基材大多用合成高分子材料,但其有許多弊端,而以絲素蛋白高分子材 料作基材的控釋體系具有明顯的性能優(yōu)勢和應用優(yōu)勢,它們包括:絲素蛋白具有良好的力學性能和理化性質(zhì),如良好的柔韌性和抗拉伸強度、透 氣透濕性、緩釋性等。天然生物材料作
13、為主要原料應用于醫(yī)藥行業(yè)的程序上有更多的便利條件。原料豐富、成本低廉。絲素蛋白為可生物降解材料,不造成環(huán)境污染。獨特的氨基酸組成,可以通過某些氨基酸的氨基或側鏈的化學修飾改變蛋白的 表面性能。絲素蛋白在可控條件下可以順利實現(xiàn)水溶性與非水溶性的雙向轉化,這是絲素 材料獨有的優(yōu)越性能。絲素蛋白材料能夠便利地為人體吸收,對人體無任何毒副作用?;诮z素蛋白作為緩釋材料主要有以下幾個緩釋系統(tǒng):微球/微囊藥物緩釋系統(tǒng)。目前,基于絲素蛋白作為緩釋微球/微囊的材料主要集中 于利用絲素蛋白與其他天然高分子材料復合制成緩釋微球/微囊。比較常用的有絲素蛋白一殼聚糖微球/微囊,絲素蛋白一海藻酸鹽微球/微囊等。復凝聚法
14、是制備復 合微球/微囊最常用的方法。復凝聚法制備的微囊藥物包封率明顯好于單凝聚法。同 時復凝聚法包藥微囊的緩釋效果也優(yōu)于單凝聚法。原因是復凝聚法制備的微囊是雙 層膜微囊,囊膜增厚,藥物擴散距離增大;另外由于雙層膜層問的存在,具有釋藥緩沖 室功能;夕h層絲素膜可使內(nèi)層殼聚糖膜的孑L隙部分堵塞從而使釋藥減慢。絲素微球/ 微囊的理化性能及藥物緩釋的行為主要與制備工藝有關。溶液的濃度、乳化條件、交 聯(lián)劑用量、溶液的pH值等條件對微囊的性能均有較大的影響。另外,微囊的形成及粒 度大小的均勻性與乳化條件(乳化劑用量、乳化溫度、攪拌速度)等密切相關。水凝膠藥物緩釋系統(tǒng)。在水凝膠藥物釋放系統(tǒng)中,藥物通常以包埋
15、或吸附的方 式固定在凝膠中。當環(huán)境(如溫度、pH值或離子強度等)改變時,由于溶脹作用,凝膠 表面的孔洞變大,凝膠內(nèi)外水分擴散途經(jīng)打開,藥物被釋放。絲素蛋白的膠凝化過程 是諸如疏水性相互作用、氫鍵、靜電相互作用和微晶體的形成等多種因素綜合作用的 結果。作為一種天然蛋白質(zhì)溶膠,絲素溶液在一定條件下會發(fā)生凝膠化,在這一過程 中,絲素蛋白分子由無規(guī)卷曲轉化成盧一折疊構象。隨著p一折疊構象比例的增大,結 晶度增加,絲素蛋白溶液成為穩(wěn)定的凝膠。溫度、pH值也是凝膠形成及其結構和性能 的重要影響因素。相同濃度的絲素溶液在不同的溫度條件下,凝膠化的時間、凝膠孔 的尺寸以及力學性能均有所差異。當pH值接近于絲素
16、蛋白的等電點時,絲素溶液凝 膠化過程加快。載藥膜緩釋系統(tǒng)。絲素蛋白膜是一種天然的具有兩性荷電性能的聚氨基酸膜。 由于其本身具有特殊的多孔網(wǎng)狀結構,因而具有優(yōu)良的吸附及緩釋功能。載藥膜有單 層藥物絲素膜、復層藥物絲素膜、涂層藥物絲素膜。復層藥物絲素膜比單層絲素膜在 釋放液中的初始釋放濃度大,總釋放時間延長。由于復合藥膜中藥物擴散途徑較長, 外層的絲素膜對藥物的擴散有一定的阻擋作用進而延長釋藥時間,因而更符合藥物緩 釋的要求。涂層藥物絲素膜經(jīng)涂層后,藥物固定效果顯著增強,“暴釋”現(xiàn)象有了明顯 改善,藥物釋放趨緩。因而,涂層是提高絲素膜緩釋效果的好方法。改變絲素膜外部 pH值,可以調(diào)控離子化藥物在絲
17、素膜上的透過速度。當絲素膜電荷與藥物離子電荷 不同時,藥物的滲透速度變慢;當絲素膜的電荷與藥物電荷相同時,藥物的透過速度 加快。絲素蛋白在抗凝血物質(zhì)上的應用。動物內(nèi)臟中肝磷脂具有較強的抗凝血活性,它是一種硫化多糖,其分子中的磺酸基對抗凝血活性起重要作用。而絲素中含有 許多由6種氨基酸殘基交替排列的結構(GlyAlaGlyAlaGlySer 一),當用濃 硫酸處理絲素水溶液時,在規(guī)定時間內(nèi)恒溫下攪拌,使之發(fā)生反應,經(jīng)NaOH中和反應 并透析脫鹽,冷凍干燥后獲得硫酸化絲素粉末。然后用傅立葉紅外光譜(FrIR )和 核磁共振(1HNMR)檢測硫酸處理的絲素導人磺酸基的情況,結果表明絲素分子中 的酪氨
18、酸或絲氨酸的羥基被硫酸酯化,形成的硫酸酯基在11001400cm。處有強烈吸 收峰,說明絲素中被導人磺酸基。硫酸處理絲素與無處理絲素相比,顯示出抗凝血活 性。且使用氯化硫酸來代替濃硫酸,得到的抗血液凝固活性高約100倍,使活性提高 到肝細胞的20%左右。由于這種物質(zhì)可低價制造,不僅可作為防止血液凝固的試用 藥,也可利用其來提高人工血液的抗凝固機能。絲素具有抗凝血性能,可以此開發(fā)人 造血管和抗血栓藥物。采用低溫等離子體技術,可以在材料表面引入特定的官能團以 賦予材料優(yōu)良的表面性能。采用二氧化硫等離子體處理在絲素蛋白膜引入磺酸基團, 或絲素蛋白膜用氨氣等離子體處理后,利用1,3 一丙磺酸內(nèi)酯與氨基
19、的反應在材料表 面接枝磺酸基團。采用x光電子能譜和全反射紅外光譜分析材料的表面性質(zhì),結果表 明兩種處理方法均能在絲素蛋白膜表面有效地接枝磺酸基團,而且材料的抗凝血性能 有顯著提高。經(jīng)過等離子體處理并和交聯(lián)劑反應后抗體可以有效地接枝到絲素蛋白 膜上去,并且接枝上去的抗體經(jīng)多次沖洗后仍然保持相當?shù)臄?shù)量,這表明抗體以共價 鍵的形式牢固地接枝上去。一般說來,這樣制成的硫酸化蠶絲使血液在2h內(nèi)也不會 凝固,并且成本大大降低。從而使人造血管的制造與應用具有廣闊的前景。如將絲素 溶液干燥成膜時,把具有抗血凝固性能的藥品加人其中,就有可能制造人造血管。蠶 絲還被制成微粒作為血管栓塞的栓塞劑在臨床上廣泛應用。絲
20、素蛋白在組織工程支架上的應用。皮膚組織工程。因絲素蛋白具有良好的柔韌性、透水性、透氣性、與創(chuàng)面的黏附 性以及與人體很好的相容性,可用作人工皮膚。人的皮膚由表皮層和真皮層構成,表 皮層在外層,真皮層在內(nèi)層,當真皮層被破壞后,皮膚不會再生,這時需要進行皮膚移 植,除了患者本人自己的皮膚,移植來的皮膚一般極難生長愈合,因此,現(xiàn)在人工皮膚 的開發(fā)研究也僅能用來治療真皮尚存的情況。目前研制的絲素創(chuàng)面保護膜,具有良好 的柔韌性、透水性、透氣性、與創(chuàng)面的黏附性以及與人體的生物相容性,可將藥物從膜 中先快后慢地釋放出來,具有抑菌殺菌作用和創(chuàng)面覆蓋材料保護創(chuàng)面的作用。靜電紡 絲素蛋白納米纖維膜仿生天然細胞外基質(zhì)
21、具有高的孔隙率和高的表面積,研究結果表 明,靜電紡絲素蛋白納米纖維對細胞的黏附、增殖、分化和遷移會產(chǎn)生重要的影響。以 甲酸為溶劑靜電紡制備的絲素蛋白納米纖維膜能促進人體角質(zhì)細胞和成纖維細胞增殖、分化,用于傷口敷料和皮膚再生。肌腱與韌帶組織工程。韌帶由束狀致密結締組織構成,能介導正常的關節(jié)運動 及維持關節(jié)穩(wěn)定。由于蠶絲的強度和彈性系數(shù)與生物的肌腱有近似的數(shù)值,又具有良 好的生物親和性、彈性及韌性,且用丙烯酸處理蠶絲,使其分子結構發(fā)生改變后能很容 易地吸收鈣。因此,絲素蛋白可望用于開發(fā)人工肌腱與人工韌帶。一種方法是直接將 蠶絲纖維用于人工十字韌帶(anterior cruciate ligamen
22、ts, ACL)的制作:將30根單絲組 成1根復絲,每6根復絲成1根線,再3根線成1股,6股成一束,然后直接用作ACL基 質(zhì)。經(jīng)掃描電子顯微鏡(SEM)、DNA定量以及膠含量等測試顯示,這樣做成的支架能 支持成人骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)的生長和擴散、分化。蠶絲纖維具有良好的力學性 質(zhì)、生物相容性以及緩慢的降解性,是制作人工韌帶的良好支架材料。絲蛋白纖維上 引入磷酸基團時,能夠吸收鈣離子,從而可用于制造人工肌腱。因為其能夠吸附在羥 基磷灰石(骨頭的主要成分)上形成很強的結晶,鈣的凝集量比未處理的絲素蛋白有大 幅度的增加,而且這些經(jīng)過修飾的絲纖維有良好的拉伸性能。另一種方法是采用交替 浸泡法使
23、得磷灰石沉淀到絲纖維上,從而得到這種很有潛力的生物材料。軟骨和骨組織工程。由于軟骨、骨組織形態(tài)、結構的多樣性,長期以來軟骨、骨 缺損的修復都是再生醫(yī)學的難點之一。近年來大量的研究報道了應用絲素蛋白支架 修復多樣的軟骨、骨缺損。絲素蛋白水凝膠、靜電紡納米纖維膜、多孔三維支架等都可 以引導軟骨、骨缺損的修復。采用靜電紡的方法制備的納米纖維膜能促進老鼠前成骨 細胞(MC3T3 一 E1)黏附、增殖、分化,培養(yǎng)14d后,細胞和絲素膜完全成一個整體,并且 絲素膜植入到有顱蓋骨缺陷的新西蘭白兔的體內(nèi),絲素膜能誘導骨鈣素的產(chǎn)生,促進 骨組織修復和再生。將人骨髓基質(zhì)干細胞種植于絲素蛋白做成的三維多孑L絲素蛋白
24、 支架植人鼠頭蓋骨創(chuàng)傷模型,說明絲素蛋白可用于骨重建和再生,表現(xiàn)出機械穩(wěn)定性和持久性。并且通過用不同孑L隙直徑的絲素蛋白支架培養(yǎng)人骨髓基質(zhì)干細胞,分別比 較112224斗m和400500斗m兩種孔隙直徑的絲素蛋白支架材料,發(fā)現(xiàn)可通過支 架幾何學形狀控制骨組織工程構建。如果在絲素蛋白中導人帶電化合物,可加速其與 鈣、磷酸根的凝集,進一步將帶有負電荷的羥基磷灰石結晶中的基團緊密凝聚,其鈣凝 集量比未處理的絲素蛋白有顯著增加,用這種方法在絲素表面形成結晶物,經(jīng)x射線 透射驗證含有人骨的主要成分,證明絲素蛋白具有骨結合性和附著性。神經(jīng)組織工程。周圍神經(jīng)損傷是臨床常見疾患,致殘率非常高,給病人、家庭和
25、社會帶來巨大的經(jīng)濟損失和精神負擔。因此,如何促進神經(jīng)的再生、恢復靶器官的功 能一直是人們關注的熱點。利用生物材料構建的神經(jīng)再生支架,不僅可以為神經(jīng)細胞 獲取營養(yǎng)、生長和代謝提供了一個有利的空間,還具有減輕縫合口的張力,引導神經(jīng)纖 維的生長,提高神經(jīng)束對合的精確度,防止瘢痕組織侵入再生的神經(jīng)纖維等優(yōu)點。南 通大學顧曉松課題組將絲素蛋白纖維與老鼠背根神經(jīng)節(jié)及老鼠坐骨神經(jīng)中提取的雪 旺細胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)絲素蛋白與它們有很好的生物相容性,在細胞表型和功能方面無 顯著的細胞毒性,可支持大鼠背根神經(jīng)細胞生長。同時,絲素蛋白基神經(jīng)導管用于老 鼠體內(nèi)橋接10mm長的坐骨神經(jīng)缺損,種植6個月后的周圍神經(jīng)修復的結果
26、表明,絲 素蛋白支架能促進周圍神經(jīng)的再生并接近自體神經(jīng)移植的結果。同時絲素蛋白可負 載神經(jīng)生長因子,從含有神經(jīng)生長因子(NGF)的水溶液中,采用冷凍干燥的方法制備 負載NGF的神經(jīng)導管,NGF的釋放可以至少3周以上,緩釋液能促進PCI2的增殖和 分化,保持生長因子的生物活性。.血管組織工程。因絲素蛋白具有良好的生物相容性和一定的抗凝血性能,常用 于研究血管組織工程支架。將絲素涂覆在聚酯纖維的表面,然后將這種材料注入活犬 的大腿靜脈中進行活體試驗,結果對血栓的形成有抑制作用。用絲素蛋白纖維制備的 三層小口徑血管橋接到老鼠的腹部動脈,發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞遷移到支架上, 隨著時間的增加,逐步形成了組織。為了提高絲素蛋白管狀支架的力學性能,通過靜 電紡絲法構建了 PLA /絲素明膠復合管狀支架,絲素明膠層由直徑為(14336)nm的 不規(guī)則取向的納米纖維組成,纖維之間有大量孔隙存在,孔隙的平均直徑為161 55) nm; PLA層由(1 337427)nm的微米級纖維組成,纖維排列取向較好,平均孑L徑達 (1223374)nm,整個復合管狀支架的孔隙率達(822)%,具有較高的強度和較好的柔 軟性,其斷裂強度
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