項目名稱：基于毛細管電泳技術篩查中藥擴血管活性成分的研

1、項目名稱：基于毛細管電泳技術篩查中藥擴血管活性成分的研究和應用推薦單位（專家）：陜西省教育廳項目簡介：項目立項背景：近年來，人們廣泛應用生物模型及藥物作用靶標進行藥物篩選的研究工作，已經建立的藥物篩選模型主要有整體動物模型、受體模型、細胞模型、基因芯片技術和色譜技術等。這些方法各具優(yōu)勢，也存在各自的不足，其共同缺陷是樣品須經過純化處理、篩選周期長等。雖然親和色譜等方法也可獲得藥物-靶標之間的結合常數(shù)，但存在受體固定相制備成本較大的缺陷，而毛細管電泳（CE）微量操作的特征恰好解決了這一問題；且不需要進行樣品純化、分析速度快、可在生理環(huán)境或接近生理環(huán)境下運行，可獲得較為真實的生物分子間相互作用信息

2、。有望發(fā)展成為一種非常有潛力、高效、準確的藥物篩選新手段。然而，CE在藥物與生物分子相互作用研究中還面臨一些問題：從研究對象上講，對生物酶及運輸?shù)鞍祝ㄑ灏椎鞍祝┑难芯枯^為廣泛，但對藥物在人體內的主要作用靶點即受體的研究還有待深入；從CE本身來講，研究藥物-受體相互作用時存在受體經非定向固定化反應鍵合到毛細管內壁后可能喪失活性等不足之處。為了克服受體等功能蛋白非定向固定化產生的弊端，其定向固定化已成為發(fā)展方向，研究結果表明，生物大分子的定向固定化可以顯著提高其穩(wěn)定性和生物活性。但是，該方法尚未應用到毛細管電泳藥物篩選研究中?？茖W價值：本項目通過2-AR分子胞外結構域N-末端含有的2個糖基（此區(qū)

3、域與配體結合的特異性無關且遠離跨膜區(qū)），將其定向鍵合在毛細管內壁，建立了受體在毛細管內壁的定向鍵合新方法；并建立了定向固定化受體鍵合量的定量測定新方法；表征了定向和非定向固定化受體的生物活性；以與受體有特異性及非特異性作用的藥物為例，闡明了受體定向鍵合在藥物篩選中的先進性、選擇性、重復性和可靠性；建立了歸一化容量因子、結合常數(shù)等多參數(shù)方法評價受體對藥物選擇性作用；以具有明確抗心血管疾病功效但藥效物質尚待深入研究的赤芍為例，對其擴血管活性成分進行篩選，得出了各提取物與2-AR作用活性強弱順序，發(fā)現(xiàn)B18-19-與2-AR之間存在較強作用力，并結合在線質譜聯(lián)用技術進行結構鑒定。建立以G-蛋白偶聯(lián)受

4、體毛細管電泳為核心的擴血管活性成分篩選新方法，可為藥物活性成分的毛細管電泳高通量篩選研究提供思路，對于合理解釋藥物的作用機理及開發(fā)新型抗心血管疾病藥物具有重要意義；可加快抗心血管疾病藥物的研發(fā)步伐，降低心血管疾病死亡病例。同行引用及評價情況： 在此基礎上，發(fā)表相關論文40余篇，其中SCI檢索13篇，EI 3篇，專著1部；培養(yǎng)青年教師3人，1人博士在讀，培養(yǎng)本科生50余名；所發(fā)論文被Analytical Chemistry、Talanta、Journal of Chromatography A等權威期刊引用，其中浙江大學Wang Yi教授在molecule期刊指出該項目所建方法是從天然產物中篩選

5、活性組分的一種非常有潛力的方法；意大利Sassart大學Zinellu教授在權威期刊Journal of Chromatography A中指出本項目所建方法為研究相互作用的有效方法，其他論文也被多次引用，證明了該項目研究成果的先進性。主要完成人情況表：姓名劉春葉技術職稱教授排名第一工作單位西安醫(yī)學院完成單位西安醫(yī)學院曾獲科技獎勵情況2015年3月作為第一完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學?？茖W技術獎二等獎（項目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價及篩選研究）。本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）建立了毛細管內壁2-AR鍵合量的定量分析方法；采用親和毛細管電色譜法，以歸一化容量因子、

6、結合常數(shù)、結合位點數(shù)等為參數(shù)，對藥物及赤芍提取物與受體的相互作用進行測定，從而對活性進行評價。姓名張劍技術職稱講師排名第二工作單位西安醫(yī)學院完成單位西安醫(yī)學院曾獲科技獎勵情況2015年3月作為第二完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學?？茖W技術獎二等獎（項目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價及篩選研究）。本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）承擔受體非定向鍵合條件的優(yōu)化，包括反應物濃度、反應溫度、微波功率、微波時間等對受體鍵合量的影響；根據(jù)靶點2-AR受體已知陽性藥物為參考，嘗試合成系列待篩選化合物。姓名苗延青技術職稱副教授排名第三工作單位西安醫(yī)學院完成單位西安醫(yī)學院曾獲科技獎勵情況20

7、15年3月作為第三完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學?？茖W技術獎二等獎（項目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價及篩選研究）。本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）承擔受體定向鍵合條件的優(yōu)化，包括反應物濃度、反應溫度、微波功率、微波時間等對受體鍵合量的影響；根據(jù)靶點2-AR受體已知陽性藥物為參考，嘗試合成系列待篩選化合物；承擔了鍵合毛細管的紅外表征、掃描電鏡等定性表征，并對所得結果進行分析。姓名衛(wèi)引茂技術職稱教授排名第四工作單位西北大學完成單位西北大學曾獲科技獎勵情況2015年3月作為第四完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學?？茖W技術獎二等獎（項目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評

8、價及篩選研究）。本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）從家兔體內獲取受體2-AR受體并進行純化，指導受體在毛細管內壁的定向鍵合。姓名張雪嬌技術職稱副教授排名第五工作單位西安醫(yī)學院完成單位西安醫(yī)學院曾獲科技獎勵情況2015年3月作為第三完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學?？茖W技術獎二等獎（項目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價及篩選研究）。本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）承擔受體定向鍵合條件的優(yōu)化，包括反應物濃度、反應溫度、微波功率、微波時間等對受體鍵合量的影響；根據(jù)靶點2-AR受體已知陽性藥物為參考，嘗試合成系列待篩選化合物；承擔了鍵合毛細管的紅外表征、掃描電鏡等定性表征，并

9、對所得結果進行分析。姓名楊黎燕技術職稱教授排名第六工作單位西安醫(yī)學院完成單位西安醫(yī)學院曾獲科技獎勵情況本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）以索氏提取法對赤芍中活性成分進行分離提?。焕肂ox-Behnken 中心組合試驗設計和響應面分析法，對提取條件進行優(yōu)化；對藥物與受體相互作用進行研究。姓名張寒技術職稱副教授排名第七工作單位西安醫(yī)學院完成單位西安醫(yī)學院曾獲科技獎勵情況2015年3月作為第七完成人獲得陜西省教育廳頒發(fā)的陜西高等學?？茖W技術獎二等獎（項目名稱：心血管類藥物的提取分離、活性評價及篩選研究）。本人對本項目主要學術貢獻：（限300字）確定以赤芍提取物為心腦血管藥物篩選目標，并參與赤

10、芍、丹參的微波輔助提取方法的優(yōu)化與評價。代表性論文專著目錄1.不超過10篇代表性論文、專著序號論文、專著名稱/刊名/作者影響因子年卷頁碼年(卷):頁碼發(fā)表年月通訊作者/第一作者(中文名)SCI他引次數(shù)他引總次數(shù)是否國內完成1毛細管電泳在藥物分析中的應用，西北工業(yè)大學出版社，劉春葉20132013.09劉春葉2A Microfluidic Paper-Based Device to Assess Acetylcholinesterase Activity. . Electrophoresis. Liu CY, Gomez F.A.2.742017, 38, 1002-10062017.04劉春葉

11、22否3Research on drug-receptor interactions and prediction of drug activity via oriented immobilized receptor capillary electrophoresis. Electrophoresis. Liu C.Y., Zhang X.J., Jing H., Miao Y.Q., Zhao L.Z., Han Y., Cui C.X.2.742015, 36(19): 2433-24412015.09劉春葉22是4Modified CaO Catalyzed Heterogeneous

12、Synthesis of 3,5-diphenyl-4,5-dihydroisoxazole. J. J. Chem. Soc. Pak. Miao Y.Q., Zhang X.Q., Liu C.Y.0.332015, 37(4): 739-7452015.04苗延青00是5Determination of Polymer Molecular weight and gyration radius of DNA by Capillary Electrophoresis. Analytical Letters . Liu C.Y., Wei Y.M., Yang L.Y., Yang L.Y.,

13、 Chen W.1.152013, 46(5): 776-7892014劉春葉00是6nteraction between Isoprenaline Hydrochloride and BSA in Capillary Zone Electrophoresis and Affinity Capillary Electrophoresis. J. Pharmazie. Liu C.Y., Wei Y.M., Miao Y.Q., Miao Y.Q., Zhang Y.Y.1.002012, 67: 839-8432012劉春葉55是7Effects of frying and microwave

14、 heating on decomposition of benzoyl peroxide in flour. Cereal Chemistry. Liu C.Y., Zhang J., Bei Q., Miao Y.Q., Yang L.Y.1.422011, 88(4): 352-3552011劉春葉11是8Tris(3-hydroxyimino-1-methylindolin-2-one) monohydrate. Acta Crystallographica Section E. Miao YQ, Zhang XQ, Liu CY, You Jing.0.402011, E67, o12912011苗延青33是9Poly(5-3,5-dinitrobenzoato)rubidium. J