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文檔簡介
1、創(chuàng)傷模型營養(yǎng)支持效果及機(jī)理探討研究思路切除法建立大鼠創(chuàng)傷模型用1%的戊巴比妥鈉按40 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,麻醉成功后,局部脫毛,常規(guī)消毒。在大鼠背部用活檢取樣器造直徑2.5 cm的2個(gè)圓形創(chuàng)面(左右對(duì)稱),皮膚全層切除,深及皮下,止血,然后以無菌紗布覆蓋傷口,形成機(jī)械損傷動(dòng)物模型。創(chuàng)傷模型的建立篩選最佳創(chuàng)傷模型燒傷燙傷切線壓瘡切除主要觀察指標(biāo)預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:與對(duì)照組相比,治療組在第3天和第8天,兩組的傷口愈合率具有顯著性差異。時(shí)間點(diǎn)選擇:通過該預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,我們選3天作為后續(xù)正式試驗(yàn)的X值(炎癥期增殖期),選擇8天作為后續(xù)正式試驗(yàn)的Y值(增殖期重構(gòu)期)。目的:尋找炎癥期、增殖期
2、、重構(gòu)期時(shí)間點(diǎn)不同時(shí)間點(diǎn)兩組大鼠傷口愈合率注:*表示p0.01,*表示p0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果全身營養(yǎng)指標(biāo)3 day8 day各組不同時(shí)間點(diǎn)的白蛋白(ALB)血漿蛋白檢測(cè)白蛋白結(jié)果:與模型對(duì)照組相比,第3天唯源肽組的ALB含量顯著升高3 day8 day血漿蛋白檢測(cè)前白蛋白實(shí)驗(yàn)結(jié)果全身營養(yǎng)指標(biāo)各組不同時(shí)間點(diǎn)的前白蛋白(PA)結(jié)果:與模型對(duì)照組相比,第3天唯源肽組的PA含量顯著升高;在第8天,唯源肽高劑量組升高PA的效果保持顯著差異3 day8 day各組不同時(shí)間點(diǎn)的總蛋白(TP)血漿蛋白檢測(cè)總蛋白實(shí)驗(yàn)結(jié)果全身營養(yǎng)指標(biāo)結(jié)果:與模型組相比,第3天唯源肽組(高劑量)的TP含量已經(jīng)顯著升高;在第8天,唯源肽
3、組升高TP的效果仍然有顯著差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)創(chuàng)面愈合率圖1 不同時(shí)間點(diǎn)各組大鼠傷口愈合率注:*表示p0.01,*表示p0.05圖2 不同時(shí)間點(diǎn)各組大鼠傷口愈合情況結(jié)果:與模型組相比,第3天唯源肽組(高劑量)傷口愈合率已經(jīng)顯著升高,后續(xù)6天、8天效果更佳顯著實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)3 day炎性因子檢測(cè)各組不同時(shí)間點(diǎn)的IL6含量檢測(cè) 注:*表示p0.01,*表示p0.05結(jié)果:與模型組相比,唯源肽組在第3天時(shí),促炎因子IL-6、IL-8顯著降低,加速度過炎癥期3 day8 day3 day實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)各組不同時(shí)間點(diǎn)的IL10含量檢測(cè) 注:*表示p0.01,*表示p0.05炎性因子檢測(cè)
4、結(jié)果:與模型組相比,唯源肽高劑量組在第3天時(shí),抗炎因子10顯著升高,加速度過炎癥期實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)血常規(guī)檢測(cè)各組不同時(shí)間點(diǎn)的中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞變化 注:*表示p0.01,*表示p0.053 day8 day3 day8 day中性粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞結(jié)果:與模型組相比,唯源肽高劑量組在第3天時(shí),炎性因子淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞顯著降低,加速度過炎癥期ControlModelWYT (low dose)WYT (high dose)實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)HE染色各組3day的HE染色圖片結(jié)果:第3天,模型組傷口處大量炎性細(xì)胞浸潤,少量成纖維細(xì)胞生成,未形成表皮;唯源肽組炎性細(xì)胞浸潤顯著減少,成纖維細(xì)胞大
5、量生成,血管少量生成,表皮組織開始逐漸產(chǎn)生。ControlModelWYT (low dose)WYT (high dose)各組8 day的HE染色圖片實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)HE染色結(jié)果:第8天,模型組傷口處大量炎性細(xì)胞浸潤緩解,表皮組織逐漸形成;唯源肽組炎性細(xì)胞浸潤基本消失,成纖維細(xì)胞大量生成,血管大量生成,表皮組織逐漸完整。ControlModelWYT (low dose)WYT (high dose)實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)Masson染色各組3 day的Masson染色圖片結(jié)果:第3天,模型組傷口處少量膠原纖維生成;唯源肽組膠原纖維生成活躍,排列更加有序緊密,且高劑量組效果更加顯著Con
6、trolModelWYT (low dose)WYT (high dose)實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)各組8 day的Masson染色圖片Masson染色結(jié)果:第8天,模型組傷口處膠原纖維生成增加;唯源肽組膠原纖維含量顯著增加,基本上由增殖期完全進(jìn)入重構(gòu)期3 day8 day實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)羥脯氨酸檢測(cè)各組不同時(shí)間點(diǎn)的羥脯氨酸含量檢測(cè) 注:*表示p0.01,*表示p0.05結(jié)果:與模型組相比,唯源組羥脯氨酸含量顯著增加,這與Masson染色膠原纖維含量結(jié)果一致,進(jìn)一步驗(yàn)證唯源肽有助于傷口處膠原沉積。3 day實(shí)驗(yàn)結(jié)果傷口愈合指標(biāo)PCR檢測(cè)各組皮膚樣本mRNA表達(dá)檢測(cè) 注:*表示p0.01;*表示p0.05結(jié)果:與模型組相比,唯源組IGF-1、FGF-2、VEGF的表達(dá)顯著升高,促進(jìn)成纖維細(xì)胞增增、血管生成,加速增殖期進(jìn)入重構(gòu)期進(jìn)程。小結(jié)結(jié)論一:唯源肽組加速度過炎癥期、更早進(jìn)入增殖期 第3天,唯源肽組與模型組相比,已經(jīng)開始顯著降低炎癥反應(yīng),表現(xiàn)為全身炎性因子下降,抗炎因子升高,傷口處炎性細(xì)胞減少、炎性浸潤緩解。高劑量組創(chuàng)口愈合率有顯著差異。結(jié)論二:唯源肽組可加速促進(jìn)增殖期愈合 第8天,唯源肽組與模型組相比,能夠更快促進(jìn)創(chuàng)傷愈合增殖期,
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