從譜圖看高效液相故障

1、從譜圖看高效液相的故障美國戴 安 公 司1無規(guī)律的基線噪音Time (min.)1、 漏液 ：檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。 2、流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成 ：檢查流動相 3、檢測器/記錄儀電子元件的問題 ：斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。 4、氣泡 （系統(tǒng)內(nèi)或檢測器內(nèi)）： a、用強極性溶液清洗系統(tǒng) b、清洗檢測器5、流通池污染（即使是極少的污染物也會產(chǎn)生噪音。） a、用甲醇等極性溶劑清洗流通池 b、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池 6、檢測器燈能量不足 a、更換燈 7、色譜柱填料流失或阻塞 a、更換色譜柱 8

2、、流動相混合不均勻或混合器工作不正常 a、維修或更換混合器，在流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置 2有規(guī)律的基線噪音Time (min.)1、在流動相、檢測器或泵中有空氣 a、流動相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。 2、漏液 a、見第三部分。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。 3、流動相混合不完全 a、用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑 4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱） a、減少差異或加上熱交換器 5、在同一條線上有其他電子設(shè)備 a、斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。 6、泵振動 3基線漂移可能的

3、原因：1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。） 2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。） a、使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進行脫氣，使用中使用氦氣。 3、流通池被污染或有氣體 a、用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸 4、流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成 a、檢查流動相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑 5、樣品中有強保留的物質(zhì)（高K值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。 4鬼 峰 鬼峰即使不

4、進樣也會出現(xiàn)的峰沒有進樣601530150371517問題1- 流動相臟問題2- 容器污染問題3- 柱子污染沒有進樣5雙峰或分叉峰柱 塌 陷正 常 峰 雙 峰柱中有死體積（柱頭塌陷或柱中有空腔） 過濾片部分堵塞只有一個雙峰組分的共洗脫可能原因：樣品與溶劑不匹配，溶劑與柱子不匹配6寬峰所有的峰都展寬柱效降低柱死體積大進樣量 / 質(zhì)量高粘度流動相 部分峰展寬前次進樣后流出的組分大分子量樣品蛋白或聚合物峰展寬樣品與流動相不匹配7拖尾峰拖尾峰對稱性 1.2原因：部分峰拖尾二次保留效應(yīng)殘留硅醇基的反應(yīng)小峰緊跟在大峰的后面流出柱頭有污染金屬所有峰拖尾額外的柱效應(yīng)柱壞/不適當(dāng)?shù)娜軇┎贿m當(dāng)?shù)臉悠妨?前伸峰正常峰伸舌峰前伸峰不對稱性 0.9可能的原因柱過載在大峰前，有小峰流出樣品溶劑不適當(dāng)柱死體積過濾片部分堵塞9負峰原因: 流動相吸收本底高 進樣過程中進了空氣 離子對分離中的系統(tǒng)峰 樣品組分的吸收(RI或UV)低于流動相10寬 峰柱外體積增加* 在進樣口到柱或柱到檢測器之間，使用細的短的連接管* 保證所有的管路接頭都使用正確* 用小體積檢測池* 減少進樣量或降低樣品濃度11保留時間不斷變化1、流速變化 a、重新設(shè)定流速 2、泵中有氣泡 a、從泵中除去氣泡 3、流動相選擇不恰當(dāng)