新藥藥理學(xué)-一般藥理學(xué)-課件(2)

1、一般藥理學(xué)一般藥理學(xué)概念內(nèi)容與要求常見的問題新藥評價領(lǐng)域的藥理學(xué)研究 主要藥效學(xué) 與新藥臨床適應(yīng)癥有關(guān)的期望出現(xiàn)的作用和作用模式的研究 次要藥效學(xué) 與臨床適應(yīng)癥無關(guān)的作用和作用模式的研究 安全藥理學(xué) 探討在治療或治療劑量以上范圍時，潛在的不期望出現(xiàn)的對生理機能的不良作用 一般藥理學(xué) 廣義的一般藥理學(xué)(general pharmacology) 指對主要藥效學(xué)作用以外進行的廣泛的藥理學(xué)研究 安全藥理學(xué)(safety pharmacology) 次要藥效學(xué)(secondary pharmacology) 我國國家食品藥品監(jiān)督管理局2005年發(fā)布的新版化學(xué)藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則和中藥、天然藥

2、物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則指出: “本文所指的一般藥理學(xué)，僅限于安全藥理學(xué)研究的內(nèi)容?！币话闼幚韺W(xué)發(fā)展史1968年，柏林藥理學(xué)會議，Irwin S教授作全面性檢測評價的重要報告系統(tǒng)性定量評價小鼠行為和生理狀態(tài)的程序奠定了一般藥理學(xué)發(fā)展的重要基礎(chǔ)發(fā)展史1991年，日本厚生勞動省發(fā)布規(guī)定，要求新藥必須進行一般藥理學(xué)研究日本健康和福利部同年頒布的一般藥理研究指南中指出： 一般藥理學(xué)的研究目的是發(fā)現(xiàn)沒有預(yù)測到的對器官功能的作用和尋找其他的藥理學(xué)作用發(fā)展史1993年，我國衛(wèi)生部頒布的新藥（西藥）臨床前研究指導(dǎo)原則匯編，首次出現(xiàn)新藥一般藥理研究的指導(dǎo)原則方法簡單，未提及藥物的次要新作用和不良反應(yīng)的觀察

3、安全藥理學(xué)研究概念最早出現(xiàn)于1994年Murphy DJ教授發(fā)表的安全藥理學(xué)中呼吸系統(tǒng)的研究方法和實驗設(shè)計，對新藥安全藥理學(xué)中呼吸系統(tǒng)研究方法具有重要貢獻(xiàn)和實際應(yīng)用的指導(dǎo)意義一般藥理學(xué) 1997年，ICH（人用藥品注冊技術(shù)規(guī)定國際協(xié)調(diào)會議）發(fā)布的非臨床安全性研究的時程對藥品臨床試驗的指導(dǎo)原則（M3指導(dǎo)原則）和生物技術(shù)藥物的臨床前安全性評價（S6指導(dǎo)原則） 首次把一般藥理學(xué)研究改為安全藥理學(xué)，使安全藥理學(xué)提高到一個新的階段 在安全藥理學(xué)概念被采用前，廣泛使用的是一般藥理學(xué)研究的概念 一般藥理學(xué)2001年的ICH會議，制訂了安全藥理學(xué)的指導(dǎo)原則，即：S7A Safety Pharmacology

4、Studies for Human Pharmaceuticals（人用藥品安全藥理學(xué)研究指南）安全藥理學(xué)得到了快速的發(fā)展發(fā)展史 2002年2月，ICH發(fā)布了“評價人用藥品潛在致心室復(fù)極化延遲作用（QT間期延長）的安全藥理學(xué)研究（S7B）”，使國際間對安全藥理學(xué)研究的技術(shù)趨于統(tǒng)一發(fā)展史 2005年5月，ICH發(fā)布了有關(guān)在藥物臨床研究中如何確定新藥的心臟安全性的規(guī)范化條例（E14），即：非抗心律不齊藥物的致QT/QTc間期延長和致心律失常的臨床評價發(fā)展史 為了與國際接軌，中國食品藥品監(jiān)督管理局重新制定了化學(xué)藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則和中藥、天然藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則， 將一般藥理學(xué)定

5、位于安全藥理學(xué)，納入了安全性評價的范圍一般藥理學(xué) International Conference on Harmonization of Requirements for Registration Pharmaceuticals for Human Use，即人用藥品注冊技術(shù)規(guī)定國際協(xié)調(diào)會議，簡稱ICH，由歐共體、日本、美國三方藥品管理當(dāng)局及三方制藥企業(yè)管理機構(gòu)，于1990年共同發(fā)起，對三方國家人用藥品注冊技術(shù)規(guī)定的現(xiàn)存差異進行協(xié)調(diào)的國際協(xié)調(diào)組織促進了制藥企業(yè)與藥監(jiān)局的對話和合作公布了GCP、GLP等多個ICH指導(dǎo)原則改進和規(guī)范了實驗技術(shù)方法不僅加強了成員國之間的合作關(guān)系，對非成員國產(chǎn)生了積

6、極的影響 一般藥理學(xué)概念內(nèi)容與要求常見的問題內(nèi)容與要求神經(jīng)系統(tǒng)1心血管系統(tǒng)2呼吸系統(tǒng)3追加和補充4核心組合實驗追加和補充的安全藥理學(xué)研究追加的安全藥理學(xué)研究：除了核心組合實驗外，反映受試物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的深入研究補充的安全藥理學(xué)研究：在核心組合實驗或重復(fù)劑量毒性實驗中未對泌尿/腎臟系統(tǒng)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸系統(tǒng)功能進行相關(guān)研究，但出于對安全性的關(guān)注，需要進行的研究一般藥理學(xué)的時間安排心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的安全藥理學(xué)必須在臨床研究前完成追加/補充的安全藥理學(xué)研究可在申報生產(chǎn)前完成藥物的安全性評價并不因藥物的上市而終止內(nèi)容與要求生物材料可選用：整體動物，離體器官及

7、組織、體外培養(yǎng)的細(xì)胞、細(xì)胞片斷、細(xì)胞器、受體、離子通道、酶等生物材料的選擇應(yīng)注意敏感性、重現(xiàn)性和可行性，以及與人的相關(guān)性等因素動物選擇應(yīng)與實驗方法匹配，同時注意品系、性別和年齡等因素體內(nèi)研究盡量采用清醒動物。如果使用麻醉動物，注意麻醉動物的選擇和麻醉深度的控制內(nèi)容與要求受試物盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究的一致，并附研制單位的檢驗報告 原料藥的檢測報告書 成品藥的檢測報告書內(nèi)容與要求樣本量實驗組的組數(shù)及每組動物數(shù)的設(shè)定，應(yīng)以能夠科學(xué)合理的解釋所獲得的實驗結(jié)果，恰當(dāng)?shù)姆庞秤猩飳W(xué)意義的作用，并符合統(tǒng)計學(xué)要求為原則內(nèi)容與要求劑量一般藥理學(xué)研究劑量設(shè)計的一般原則是：至少應(yīng)設(shè)三個劑量，低劑量組應(yīng)相當(dāng)于主要藥

8、效學(xué)的有效劑量，高劑量以不產(chǎn)生嚴(yán)重毒性反應(yīng)為限在安全藥理學(xué)的檢測指標(biāo)未產(chǎn)生不良反應(yīng)時，在限制劑量的情況下，可以采用單一劑量 內(nèi)容與要求對照一般可選用溶媒和/或輔料做對照。如為了說明受試物的特性與已知藥物的異同，也可選用陽性對照藥內(nèi)容與要求給藥途徑整體動物試驗，首先應(yīng)考慮與臨床擬用途徑一致。如果有多個臨床擬用途徑時，分別采用相應(yīng)的給藥途徑內(nèi)容與要求給藥次數(shù)一般采用單次給藥。但是若主要藥效學(xué)研究表明，該受試物在給藥一段時間后才能起效，或者重復(fù)給藥的非臨床研究和/或臨床研究結(jié)果出現(xiàn)令人關(guān)注的安全性問題時，應(yīng)根據(jù)具體情況合理設(shè)計給藥次數(shù) 內(nèi)容與要求觀察指標(biāo)神經(jīng)系統(tǒng)：直接觀察給藥后動物的一般行為表現(xiàn)，姿

9、勢，步態(tài)，有無流涎，肌顫及瞳孔變化。對用藥后動物的行為活動進行定性定量評價，以示有無興奮或抑制作用出現(xiàn)明顯的興奮或抑制現(xiàn)象時，應(yīng)根據(jù)不同藥物采用不同實驗方法測定其對小鼠或大鼠自發(fā)活動的影響對小鼠自主活動的影響選取KM小鼠50只，試驗前禁食16小時，隨機分組，每組10只，雌雄各半，口服給藥，各組均按0.1ml/10g體重灌胃給藥。給藥后60min，將動物放入鼠跳臺避暗自主活動儀活動箱中，適應(yīng)5min后，記錄5min小鼠自主活動計數(shù)，同時觀察給藥后動物的一般行為表現(xiàn)，有無豎毛、流涎、俯臥、扭體等異?，F(xiàn)象對小鼠戊巴比妥鈉睡眠時間的影響選取上述小鼠50只，雌雄兼用，試驗前禁食4小時，給予正常飲水，給藥

10、后60min，腹腔注射戊巴比妥鈉36mg/kg ，以翻正反射消失到翻正反射恢復(fù)時間計為睡眠時間，睡眠時間超過90分鐘者以90分鐘計，觀察對小鼠睡眠時間的影響內(nèi)容與要求觀察指標(biāo)心血管系統(tǒng)：測定記錄給藥前后動物的血壓、心電，觀察心電圖的QRS、ST、T波、心率及心律的變化在治療有效劑量出現(xiàn)明顯的血壓及心電圖改變，應(yīng)進行相應(yīng)整體或離體的分析性試驗（如血流動力學(xué)、離體心臟等），以確定心血管系統(tǒng)的變化對主要治療作用的影響小獵兔犬實驗研究中最標(biāo)準(zhǔn)的動物，被廣泛用于生物化學(xué)、病理學(xué)、病毒學(xué)、藥理學(xué)以及腫瘤學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的研究工作中，特別是制藥工業(yè)中的各種實驗，使用該犬最多近年來，上海、北京等地已引入Beagl

11、e種犬，且飼育繁殖成功比格犬血容量（%體重）5.68.3心率（次/分） 120(100130)心輸出量（升/分） 2.3血壓不麻醉（mmHg） 112（95136）56（4366）耗氧量（毫米3/克活體重） 580血壓戊巴比妥鈉麻醉(mmHg) 149（108189） 100（75122）呼吸頻率(次/分) 18(1137)潮氣量（毫升） 320(251432)通氣量（升/分）5.21(3.37.4)清醒動物生理信號遙測系統(tǒng) 植入式生理信號無線遙測系統(tǒng)用于長時間測量清醒無束縛的鼠兔貓狗猴魚等動物的心電、腦電、體溫和血壓等生理參數(shù)。使用此系統(tǒng)可以保證動物在籠內(nèi)自由活動，不需要麻醉或束縛，這樣測量

12、到的生理信號更能反映自然狀態(tài)下的動物生理狀況 可以用于以下生理參數(shù)測量:動脈壓，靜脈壓，左室壓，眼壓，膀胱壓，腎壓,心電圖,腦電圖,肌電圖,眼電圖及體溫清醒動物生理信號遙測系統(tǒng)清醒動物生理信號遙測系統(tǒng)系統(tǒng)由植入體( Implant)、接收器(Receiver)、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換器(DEM)和記錄分析計算機(Dataquest ART )構(gòu)成系統(tǒng)最多可同時連接400個接收器，完成大規(guī)模的試驗新技術(shù)的應(yīng)用干細(xì)胞技術(shù)獲得具有心室細(xì)胞特性的心肌細(xì)胞評價藥物對心臟離子通道、生物電活性及心肌收縮等的影響建立基于心臟離子通道活性、心室動作電位的數(shù)字模型采用計算機模擬心臟由基因表達(dá)為細(xì)胞，再生長為整體器官斑馬魚基因與

13、人類基因的相似度達(dá)到87% 胚胎是透明的，很容易觀察到藥物對其體內(nèi)器官的影響 雌性斑馬魚可產(chǎn)卵200枚，胚胎在24小時內(nèi)就可發(fā)育成形 斑馬魚斑馬魚模式生物的使用正逐漸拓展和深入到生命體的多種系統(tǒng) 應(yīng)用于小分子化合物的大規(guī)模新藥篩選 我國斑馬魚相關(guān)研究還比較落后國家斑馬魚模式動物南方中心和北方中心 內(nèi)容與要求觀察指標(biāo)呼吸系統(tǒng)：觀察給藥前后呼吸的頻率及幅度在治療有效劑量出現(xiàn)明顯的呼吸興奮或抑制時，應(yīng)進行相應(yīng)整體或離體的分析性試驗（如呼吸中樞抑制試驗、膈肌膈神經(jīng)試驗等），以確定藥物對呼吸系統(tǒng)的影響內(nèi)容與要求追加的安全藥理學(xué)研究追加的安全藥理學(xué)研究：根據(jù)藥物的藥理性質(zhì)和化學(xué)類型，估計可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)

14、。如果對已有的動物和臨床試驗結(jié)果產(chǎn)生懷疑，可能影響人的安全性，此時應(yīng)做進一步追加的安全藥理學(xué)研究，即對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)進行深入的研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)：觀察藥物對行為藥理、學(xué)習(xí)記憶、神經(jīng)生化、視覺、聽覺和/或電生理等的影響心血管系統(tǒng)：觀察藥物對心輸出量、心肌收縮作用、血管阻力等心血管功能的影響，并探討其作用機制呼吸系統(tǒng)：觀察藥物對氣道阻力、肺動脈壓力、血氣分析等的影響內(nèi)容與要求追加的安全藥理學(xué)研究補充的安全藥理學(xué)研究：是評價受試藥物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)以外的器官功能的影響，包括對泌尿系統(tǒng)、自主神經(jīng)系統(tǒng)、 胃腸道系統(tǒng)和其它器官組織的研究內(nèi)容與要求補充的安全藥理學(xué)研究泌

15、尿系統(tǒng)：觀察藥物對腎功能的影響，如對尿量、比重、滲透壓、pH 、電解質(zhì)平衡、蛋白質(zhì)、細(xì)胞和血生化（如尿素氮、肌酐、蛋白質(zhì)）等指標(biāo)的檢測自主神經(jīng)系統(tǒng)：觀察藥物對自主神經(jīng)系統(tǒng)的影響，如與自主神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)受體的結(jié)合，體內(nèi)或體外對激動劑或拮抗劑的功能反應(yīng)，對自主神經(jīng)的直接刺激作用和對心血管反應(yīng)、壓力反射和心率的影響胃腸系統(tǒng)：觀察藥物對胃腸系統(tǒng)的影響，如胃液分泌量和pH 、胃腸損傷、膽汁分泌、體內(nèi)轉(zhuǎn)運時間、體外回腸收縮等指標(biāo)的測定內(nèi)容與要求補充的安全藥理學(xué)研究可免做一般藥理學(xué)的藥物體內(nèi)血藥濃度低或其它組織器官分布很少的局部用藥只用于治療晚期癌癥病人的細(xì)胞毒類藥物，在首次用于臨床前可不做一般藥理學(xué)研究，但

16、不包括具有新的作用機制的此類藥物一般藥理學(xué)概念內(nèi)容與要求常見的問題一般藥理學(xué)研究常見問題分析（一）試驗項目不齊全、觀察指標(biāo)不全面中樞神經(jīng)系統(tǒng)：僅進行一般狀態(tài)的觀察；心血管系統(tǒng)：指標(biāo)不全，無法對心電圖的影響進行評價；呼吸系統(tǒng)：只觀察呼吸頻率而無呼吸節(jié)律我國一般藥理學(xué)研究中的問題（二）劑量設(shè)計不合理劑量設(shè)計過低劑量設(shè)計過少我國一般藥理學(xué)研究中的問題（三）試驗動物及動物數(shù)不合理采用大鼠和貓進行對心血管和呼吸系統(tǒng)的影響試驗動物數(shù)偏少我國一般藥理學(xué)研究中的問題（四）試驗方法不盡合理給藥途徑不合理觀察時間不合理我國一般藥理學(xué)研究中的問題（五）忽視與其他研究之間的關(guān)聯(lián)性一般藥理學(xué)是藥物安全性評價的一部分，它與其他研究如藥效、急