基因工程原理和技術(shù)課件課件

1、關(guān)于基因工程的原理和技術(shù)課件第一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 基因工程的原理和技術(shù)基因工程（將人胰島素基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌）胰島素基因人體細(xì)胞大腸桿菌隨細(xì)菌的增殖，胰島素基因也同時(shí)復(fù)制胰島素獲取胰島素基因的表達(dá)產(chǎn)物胰島素質(zhì)粒大腸桿菌形成重組DNA分子 導(dǎo)入受體細(xì)胞目的基因檢測與鑒定獲取目的基因第二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)（一）獲得目的基因（二）形成重組DNA分子（三）將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞（四）目的基因的檢測和表達(dá)基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)第三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月問

2、題：獲取目的基因的方法有哪些？ 思考1：如果我們對(duì)目的基因的堿基序列完全未知，比如:如果我們對(duì)抗蟲基因的堿基序列完全不知道，怎樣從蘇云金芽孢桿菌體內(nèi)獲取目的基因（抗蟲基因）？ 如何操作？ 第四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月大片段DNA打成許多小片段小片段DNA目的基因載入運(yùn)載體細(xì)菌重組DNA分子重組DNA分子例如：從蘇云金芽孢桿菌中提取抗蟲蛋白的基因如果運(yùn)氣不好，在打成小片段時(shí)，有可能把抗蟲基因打斷基因組文庫第五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月如何從基因文庫中獲取目的基因?大片段DNA打成許多小片段小片段DNA目的基因載入運(yùn)載體細(xì)菌重組DNA分子重組DNA分子基因組文庫對(duì)

3、基因組文庫的所有細(xì)菌進(jìn)行逐一篩查找出有抗蟲蛋白的菌落該菌落所攜帶的基因片段就含有目的基因例如：從蘇云金芽孢桿菌中提取抗蟲蛋白的基因容易嗎？第六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月構(gòu)建基因組文庫，獲取目的基因第七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因生物材料DNA提取限制酶DNA片段形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建基因組文庫1.從基因文庫中獲取第八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：從基因組文庫中獲取人的胰島素基因，導(dǎo)入大腸桿菌能否成功表達(dá)？為什么？第九張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：能否根據(jù)mRNA合

4、成沒有內(nèi)含子的胰島素基因？第十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月單鏈RNA（mRNA)逆轉(zhuǎn)錄酶雜交雙鏈核酸酶H單鏈DNADNA聚合酶雙鏈DNA逆（反）轉(zhuǎn)錄法合成目的基因： cDNA文庫的構(gòu)建RNA鏈DNA鏈水解RNA第十一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因生物材料DNA提取限制酶DNA片段形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建基因組文庫mRNA逆(反）轉(zhuǎn)錄目的基因(cDNA)形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建cDNA文庫1.從基因文庫中獲取提取第十二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第十三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2

5、022年6月思考：基因文庫如同國家圖書館，而cDNA文庫則像某單位的圖書館，二者除了大小不同之外，還有哪些區(qū)別？ 小大無 有無 有部分基因全部基因思考： 如果想知道一種生物在個(gè)體發(fā)育的不同階段表達(dá)的基因有什么不同，需要構(gòu)建哪一種基因文庫？第十四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月問題：獲取目的基因的方法有哪些？ 思考1：如果我們對(duì)目的基因的堿基序列完全未知，怎樣辦？如何操作？思考2：如果我們已知目的基因的堿基序列，可以怎樣操作？ 第十五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因生物材料DNA提取限制酶DNA片段導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建基因組文

6、庫mRNA反轉(zhuǎn)錄目的基因(cDNA)導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建cDNA文庫目的基因的核苷酸序列是已知 化學(xué)合成法目的基因1.從基因文庫中獲取2.化學(xué)合成法提取形成重組DNA分子形成重組DNA分子第十六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月問題：獲取目的基因的方法有哪些？ 思考1：如果我們對(duì)目的基因的堿基序列完全未知，怎樣辦？如何操作？思考2：如果我們已知目的基因的堿基序列，可以怎樣操作？思考3： 如果我們已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，又可以怎樣操作？ 第十七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：能否根據(jù)氨基酸的序列獲得人胰島素基因的堿基序列？第十八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)

7、合成法第十九張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因生物材料DNA提取限制酶DNA片段形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建基因組文庫mRNA反轉(zhuǎn)錄目的基因(cDNA)形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建cDNA文庫目的基因的核苷酸序列是已知 化學(xué)合成法目的基因1.從基因文庫中獲取2.化學(xué)合成法提取或可推測的第二十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月問題：獲取目的基因的方法有哪些？ 思考1：如果我們對(duì)目的基因的堿基序列完全未知，怎樣辦？如何操作？思考2：如果我們已知目的基因的堿基序列，可以怎樣操作？思考3： 如果我們已知蛋白質(zhì)的氨基酸序

8、列，又可以怎樣操作？思考4：如果我們知道目的基因兩端的部分堿基序列，還可以怎樣操作？第二十一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR技術(shù)）變性：雙鏈DNA解鏈成為單鏈DNA復(fù)性（退火）：部分引物與模板的單鏈DNA的特定互補(bǔ)部位相配對(duì)和結(jié)合延伸：以目的基因?yàn)槟０?，合成互補(bǔ)的新DNA鏈第二十二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月雙鏈DNA1.變性升溫至95單鏈DNA2.復(fù)性降溫至60引物與母鏈結(jié)合3.延伸升溫至72DNA聚合酶解旋PCR技術(shù)與原理Taq DNA聚合酶有耐高溫的特點(diǎn)第二十三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，需要什么前

9、提和條件？過程如何？原理是什么？聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))擴(kuò)增原理：目的：前提：條件：DNA復(fù)制獲得大量的目的基因有一段已知目的基因（兩端）的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。模板DNA（目的基因）耐高溫DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)四種脫氧核苷酸兩種DNA引物第二十四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因生物材料DNA提取限制酶DNA片段形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建基因組文庫mRNA反轉(zhuǎn)錄目的基因(cDNA)形成重組DNA分子導(dǎo)入受體菌群體構(gòu)建cDNA文庫目的基因的核苷酸序列是已知 化學(xué)合成法3.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的

10、基因1.從基因文庫中獲取2.化學(xué)合成法提取獲取大量目的基因或可推測的第二十五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第一個(gè)循環(huán)第二個(gè)循環(huán)第三個(gè)循環(huán)最快第幾輪能得到目的基因？第二十六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA分子目的基因解旋酶高溫（加熱至95）RNA引物DNA引物解旋酶、DNA聚合酶等TaqDNA聚合酶第二十七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 人工基因合成法DNA合成儀PCR擴(kuò)增儀第二十八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因問題：怎樣將目的基因與質(zhì)粒進(jìn)行重組？第二十九張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年

11、6月質(zhì)粒目的基因限制酶DNA連接酶重組DNA第三十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月同一種限制酶切割質(zhì)粒外源基因重組DNA分子（重組質(zhì)粒）DNA連接酶第三十一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月問題2：形成的重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，除了能夠穩(wěn)定存在外，并且可以遺傳給下一代。同時(shí)，使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)和發(fā)揮作用，需要對(duì)重組質(zhì)粒作怎樣的修飾？據(jù)圖回答：一個(gè)表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有哪些基本元件？第三十四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(二)形成重組DNA分

12、子（構(gòu)建基因表達(dá)載體)基因表達(dá)載體的組成啟動(dòng)子目的基因終止子復(fù)制起點(diǎn)標(biāo)記基因一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因通常用同一種限制酶切割目的基因和載體(質(zhì)粒)，形成相同的粘性末端，再用DNA連接酶將二者連接,形成重組DNA分子（基因表達(dá)載體）。第三十五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月用BamH對(duì)胰島素基因和質(zhì)粒切割，加入DNA連接酶，得到的都是重組質(zhì)粒嗎？第三十六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月含目的基因的DNA片段載體BamHBamH DNA連接酶重組體載體自連目的基因 自連第三十七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月 雙酶切連接：思考：如何 避免質(zhì)粒

13、和目的基因的自身環(huán)化？1、避免載體和目的基因的自身環(huán)化、載體和目的基因間反向連接2、提高重組DNA分子的重組率第三十八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(二)形成重組DNA分子（構(gòu)建基因表達(dá)載體)一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因常用的受體細(xì)胞： 有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。第三十九張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月重組質(zhì)粒大腸桿菌的擬核目的基因氨芐青霉素抗性基因（標(biāo)記基因）將細(xì)菌用CaCl2處理，使細(xì)胞處于感受態(tài)，可促進(jìn)細(xì)胞吸收DNA分子如果是導(dǎo)入微生物（如細(xì)菌）第四十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于202

14、2年6月 感受態(tài)：細(xì)胞處于容易吸收外源性DNA的狀態(tài)。 處于感受態(tài)的細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞.CaCl20重組載體感受態(tài)細(xì)胞42如果是導(dǎo)入微生物（如細(xì)菌）第四十一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1. 轉(zhuǎn)基因微生物重組DNA分子(基因表達(dá)載體)CaCl2處理感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞(工程菌) 目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制增大細(xì)胞壁通透性(二)形成重組DNA分子（構(gòu)建基因表達(dá)載體)一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因吸收DNA分子重組 DNA進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞第四十二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月如果是導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞顯微注射儀受精卵思考：培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，

15、受體細(xì)胞能否采用動(dòng)物體細(xì)胞？試說明理由。一般可以采用動(dòng)物的什么細(xì)胞？用口徑為1m的DNA注射器，將大量的目的基因片段注入到受精卵的核內(nèi)，然后把經(jīng)過注射的受精卵移植到另一只雌性動(dòng)物的子宮內(nèi)，使受精卵發(fā)育為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。第四十三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1. 轉(zhuǎn)基因微生物重組DNA分子(基因表達(dá)載體)CaCl2處理感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞(工程菌) 目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制增大細(xì)胞壁透性2. 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物重組DNA分子顯微注射受精卵或早期胚胎細(xì)胞(整合到染色體DNA上)轉(zhuǎn)基因動(dòng) 物動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植(二)形成重組DNA分子（構(gòu)建基因表達(dá)載體)一.基因工程的基本操

16、作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因吸收DNA分子重組 DNA進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞或病毒侵染第四十四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：1、如果是導(dǎo)入植物細(xì)胞，最好以什么細(xì)胞為受體細(xì)胞？一般采用的運(yùn)載體又是什么？2、比如：培育抗蟲棉，怎樣操作才能成功導(dǎo)入？第四十五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒T-DNA：(可轉(zhuǎn)移的DNA） 可轉(zhuǎn)移（也可以將目的基因轉(zhuǎn)移）至受體細(xì)胞中，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。第四十六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法第四十七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月3. 轉(zhuǎn)基因植物重組DNA分子農(nóng)桿菌植物體

17、細(xì)胞(整合到細(xì)胞染色體DNA上)侵染植物組織培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法第四十八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力，將包裹在金屬顆粒（有鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在0.64um）表面的表達(dá)載體DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。 這是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本太高?；驑尩谒氖艔?，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月花粉管卵細(xì)胞花粉管通道法受精后 花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管還未愈合前，剪去柱頭，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。第五十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2

18、022年6月3. 轉(zhuǎn)基因植物重組DNA分子農(nóng)桿菌植物體細(xì)胞(整合到細(xì)胞染色體DNA上)侵染植物組織培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物基因槍或花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法第五十一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(三)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(二)形成重組DNA分子（構(gòu)建基因表達(dá)載體)一.基因工程的基本操作步驟（技術(shù)）(一)獲得目的基因(四)目的基因的檢測與鑒定問題1：根據(jù)中心法則，目的基因怎樣表達(dá)？成功表達(dá)的標(biāo)志是什么？第五十二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月按照基因表達(dá)順序逐步檢測，逐步過關(guān)檢測轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)是否已含有目的基因檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測目的基因是否已翻譯出了蛋白質(zhì)檢測個(gè)體是

19、否具有目的基因所對(duì)應(yīng)表現(xiàn)型如何檢測 ？第五十三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：通常為什么要選用含有兩個(gè)標(biāo)記基因的運(yùn)載體？第五十四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月沒有質(zhì)粒含目的基因的質(zhì)粒正常質(zhì)粒第五十五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月沒有質(zhì)粒含目的基因的質(zhì)粒正常質(zhì)粒第五十六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA分子雜交法檢測目的基因第五十七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA分子雜交法制作方法：化學(xué)合成或PCR法合成特點(diǎn)：1.被放射性同位素標(biāo)記2.目的基因片段3.單鏈DNA原理：堿基互補(bǔ)配對(duì)，檢測未知DNA分子用途：目的基因檢測,DNA指

20、紋,親緣關(guān)系測定,基因診斷。DNA分子探針法第五十八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)是否已含有目的基因同理： 核酸分子雜交技術(shù)按照基因表達(dá)順序逐步檢測，逐步過關(guān)思考：受體細(xì)胞攝入目的基因后就說明目的基因完成了表達(dá)嗎？檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA第五十九張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)是否已含有目的基因檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測目的基因是否已翻譯出了蛋白質(zhì)利用抗原-抗體的特異性結(jié)合按照基因表達(dá)順序逐步檢測，逐步過關(guān)問題：如何運(yùn)用抗原抗體特異性結(jié)合的原理檢測目的基因是否翻譯出了蛋白質(zhì)？第六十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于202

21、2年6月檢測目的基因是否已翻譯出了蛋白質(zhì)利用抗原-抗體的特異性結(jié)合將目的基因表達(dá)出的蛋白質(zhì)作為抗原制備抗體第六十一張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)是否已含有目的基因檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測目的基因是否已翻譯出了蛋白質(zhì)檢測個(gè)體是否具有目的基因所對(duì)應(yīng)表現(xiàn)型按照基因表達(dá)順序逐步檢測，逐步過關(guān)問題：除了上述分子檢測外，你能否在個(gè)體生物學(xué)水平上進(jìn)行檢測？例如，如何檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲棉具有抗蟲特性？ 第六十二張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)基因抗蟲植物用棉花葉片飼喂棉鈴蟲，如蟲吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲吃后中毒死亡，則

22、說明攝入了抗蟲基因并得到表達(dá)。第六十三張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月(四)目的基因的檢測與鑒定1.目的基因是否導(dǎo)入：(1)標(biāo)記基因檢測法。(2)DNA分子雜交法(DNA探針檢測法)2.目的基因是否表達(dá)：(3)是否出現(xiàn)目的基因所控制的性狀:(2)是否翻譯合成了蛋白質(zhì)： 抗原抗體雜交檢測法核酸分子雜交法（1）是否轉(zhuǎn)錄出了信使RNA：觀察法第六十四張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月第六十五張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月基因工程的基本操作程序基因文庫獲取目的基因基因組文庫cDNA文庫化學(xué)合成法PCR擴(kuò)增法運(yùn)載體（細(xì)菌質(zhì)粒）酶切、連接，構(gòu)建重組DNA（基因表達(dá)載體）受體細(xì)

23、胞導(dǎo)入篩選動(dòng)物受精卵植物體細(xì)胞細(xì)菌細(xì)胞組織培養(yǎng)發(fā)酵工程胚胎移植表達(dá)產(chǎn)物轉(zhuǎn)基因動(dòng)物轉(zhuǎn)基因植物目的基因的表達(dá)與鑒定總結(jié)：第六十六張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月二.基因工程的原理1.整體原理：人工的基因重組2.各步驟原理：（1）基因能轉(zhuǎn)移：基因是獨(dú)立的遺傳單位（2）不同生物的基因能拼接：不同生物的DNA有著相同的雙螺旋結(jié)構(gòu)和堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，限制酶和連接酶的作用。（3）同一基因在不同生物的細(xì)胞中合成相同的蛋白質(zhì)：復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯過程相同，密碼子具有通用性3.優(yōu)點(diǎn)：定向改變生物的遺傳特性第六十七張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月例1 科學(xué)工作者分離得到了某真核生物的基因A，將其解離

24、成兩條具有互補(bǔ)關(guān)系的單鏈，其中的一條與基因A的信使RNA進(jìn)行配對(duì)，雜交后可以觀察到如圖所示的結(jié)構(gòu)對(duì)此結(jié)果的合理解釋是（）A1、3、5、7為DNA/RNA的雜交體，2、4、6為單鏈DNA部分B1、3、5、7為DNA/RNA的雜交體，2、4、6為單鏈RNA部分C1、3、5、7為雙鏈DNA部分，2、4、6為DNA/RNA的雜交體D1、3、5、7為單鏈RNA部分，2、4、6為DNA/RNA的雜交體A第六十八張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月例2.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，質(zhì)粒上有標(biāo)記基因（如圖所示），通過標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)

25、基上的生長情況也不同。右圖表示外源基因插入位置（插入點(diǎn)有a、b、c），請(qǐng)據(jù)下表細(xì)菌生長情況，推測三種重組細(xì)菌與外源基因插入點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的一組是 A是c、是a 、是 b B 是c和b、是b、是cC是c和b、是c、是b D 是a、是b、是cbacAbca第六十九張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月例3.培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程. 抗蟲基因含kan質(zhì)粒重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌A構(gòu)建C誘導(dǎo)選擇導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因抗蟲植株再生植株愈傷組織離體棉花葉片組織侵染B培養(yǎng)選擇分化D檢

26、測（1）A過程需要的酶有 _ 。（2）B過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備 的兩個(gè)條件是_ 。（3）C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入_。限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因卡那霉素第七十張，PPT共七十七頁，創(chuàng)作于2022年6月4.如果利用DNA分子雜交原理對(duì)再生植株進(jìn)行檢測，D過程應(yīng)該用_作為探針。 5.科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與_雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1：1。若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為_。若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株群體中