動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體(2)

1、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 (2)第一張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交第二張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月問題：什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過程的哪一步？它們的過程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？ （一）動(dòng)物細(xì)胞融合第三張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月1、什么是抗體？單克隆抗體的制備回顧2、抗體的分布？抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。第四張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第五張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月抗

2、體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法該法制備抗體的特點(diǎn)： 產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。第六張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第七張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念什么是克??？“克隆”從英文“clone”音譯而來，是指從一個(gè)共同祖先，通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子，細(xì)胞或個(gè)體。第八張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)?zāi)康?制備單克隆

3、抗體.實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)過程：1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)第九張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的制備 請(qǐng)用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？ 第十張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十一張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高、產(chǎn)量大容易標(biāo)化生產(chǎn) 克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。 原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖第十二張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速第十三張，PPT共二十八頁，

4、創(chuàng)作于2022年6月運(yùn)載藥物 (“生物導(dǎo)彈” 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)治療疾病第十四張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖酶解法去壁小鼠免疫處理、細(xì)胞分散物理法化學(xué)法物理、化學(xué)、生物法原生質(zhì)體的制備融合親本細(xì)胞的準(zhǔn)備原生質(zhì)體的融合與篩選動(dòng)物細(xì)胞融合與兩次篩選雜種細(xì)胞的形成與培養(yǎng)產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)雜種植株的鑒定單克隆抗體的分離提純單抗有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 獲得具優(yōu)良性狀的雜種植株第十五張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月1、單克隆抗體制備過程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HA

5、T）中無法生長(zhǎng)；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在HAT培養(yǎng)基上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，經(jīng)過數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存活并能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是 （ ）A骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 B脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞C骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 D脾細(xì)胞第十六張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月2研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（ ）A利用單克隆抗體特異性地對(duì)抗癌細(xì)胞B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合3科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融

6、合的是 （ ）A經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞第十七張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月5.實(shí)際操作中如何經(jīng)過兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞？ 第十八張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月有限稀釋法稀釋多次稀釋將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測(cè)抗體。常用的方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫熒光測(cè)定。第十九張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體與多克隆抗體第二十張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月提示1：對(duì)一種效應(yīng)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？問題：如何大量生產(chǎn)

7、單克隆抗體？單克隆抗體的制備第二十一張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體 篩選21.注射抗原的目的是什么？第二十二張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體 篩選22.誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些？第二十三張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體 篩選23.若細(xì)胞兩兩融合后，有幾種融合情況？第二十四張，PP

8、T共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月4.單克隆抗體制備過程步驟第二十五張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月效應(yīng)B細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基 篩選1多種雜交瘤細(xì)胞符合要求的雜交瘤細(xì)胞抗原-抗體雜交法 篩選2克隆化體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既可以產(chǎn)生特異性抗體，又可以大量增殖第二十六張，PPT共二十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單: 單個(gè)細(xì)胞 克隆: 無性繁殖單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體什么是克?。?/p>