重慶兒童醫(yī)院112例毛細支氣管炎病例分布特征分析

1、項目基金：教育部新世紀優(yōu)秀人才支持計劃（NCET-06-0775）通訊作者：羅健 重慶醫(yī)科大學兒童醫(yī)院 （023）63632386 郵箱:重慶兒童醫(yī)院112例毛細支氣管炎病例分布特征分析羅健，劉恩梅，鄧昱，魏金鳳，徐文飛，陳杰華，王莉佳，劉瑋，楊錫強，符州（重慶醫(yī)科大學兒童醫(yī)院呼吸中心，重慶 400014）【摘要】目的 本研究擬探討重慶地區(qū)住院毛細支氣管炎患兒鼻咽分泌物中HBoV和其他十種呼吸道病毒檢出率及其流行特征變化。方法 收集2006年至2008年的毛細支氣管炎發(fā)病高峰季節(jié)（11月至次年3月）住院毛細支氣管炎患兒的鼻咽分泌物，首先通過直接免疫熒光進行呼吸道常見7種病毒篩查，然后采用PCR

2、/RT-PCR的方法檢測HBoV和其余十種常見呼吸道病毒相應基因片段。結(jié)果 1、兩年患病兒童的年齡相比較，差異具有顯著性。臨床癥狀中，發(fā)熱、嘔吐、氣促的發(fā)生例數(shù)差異具有顯著性。其余情況差異均不顯著；2、重慶地區(qū)住院毛細支氣管炎患兒鼻咽分泌物中共檢出十種呼吸道病毒，112例患兒呼吸道標本中共檢出呼吸道病毒陽性84例（75%），其中單一病毒陽性45例（40.18%），兩種或兩種以上病毒合并陽性39例（34.82%），2006年-2007年和2007年-2008年毛細支氣管炎發(fā)病高峰季節(jié)毛細支氣管炎患兒病毒檢出情況不同；3、112例患兒中共檢出HBoV10例，均為合并感染。結(jié)論 1、毛細支氣管炎患兒

3、鼻咽分泌物呼吸道病毒感染陽性檢出率高，并且病毒種類復雜，多達十種，合并感染率高，而且每年的病毒檢出情況、合并感染情況、流行季節(jié)是有變化的，這種變化可能和不同年份患兒臨床特征不同有關(guān)；2、新近發(fā)現(xiàn)的住院毛細支氣管炎患兒鼻咽分泌中發(fā)現(xiàn)中HBoV感染，以合并感染為主，但其檢出陽性率明顯低于RSV和hMPV。關(guān)鍵詞：毛細支氣管炎，呼吸道病毒感染，人類博卡病毒，人類偏肺病毒，流行病學，臨床特點Virus epidemiology, clinical characteristics of bronchiolitis infants in Chongqing area Luo Jian, Liu Enmei

4、, Deng Yu ,Wei Jingfeng, Xu Wenfei, Chen Jiehua, Wang Lijia, Liu Wei, Yang Xiqing, Fu Zhou, Division of Respriatory Disorders，Childrens Hospital，Chongqing University of Medical and Science，Chongqing 400014【Abstract】0bjective The incidence of HBoV, hMPV and other 9 respiratory viruses in childhood br

5、onchiolitis in Chongqing area and clinical characteristics of such childhood bronchiolitis were observedMethods RSV，adenovirus(ADV)，influenza virus(Flu)A and B，parainfluenza virus(Para)1，2，3，associated with respiratory disorders from nasopharyngeal secretion in 112 infants with bronchiolitis were as

6、sayed with rapid immunofluorescence method At the same time，NP-1 and NS1 gene of HBoV, F gene of hMPV and genes of the other 8 viruses were also detected with PCR or RT-PCRResults 1. Clinical characteristics were different between patients with bronchiolitis in the two years. 2. The positive rate of

7、 the virus infection identified in the nasopharyngeal secretion from 112 infants with bronchiolitis was 75%, 45 cases were single virus detection and 39 cases were mixed virus detection. 3. Of them, 10 cases were HBoV positive and all were detected with other respiratory viruses. 4. Epidemic charact

8、eristic paterns between 2006-2007 and 2007-2008 were different from each other. Conclusions These data suggested that the positive detection of respiratory viruses in bronchiolitis children was high in chongqing area comparison with high co-infection rate. And the epidemic characteristic paterns bet

9、ween 2006-2007 and 2007-2008 were different from each other. RSV and hMPV was more important than HBoV as a primary pathogen associated with childhood bronchiolitis .【Key words】bronchiolitis, respiratory virus infection, human bocavirus, human metapneumovirus, clinic characteristic毛細支氣管炎是嬰幼兒期最常見的下呼吸

10、道感染，是引起一歲以下嬰兒住院的首要原因，其中的80%發(fā)病小于6個月，發(fā)病高峰季節(jié)在冬季。病毒感染是引起毛細支氣管炎的主要原因，其中呼吸道合胞病毒(human syncytial virus, RSV)，副流感病毒（parainfluenza virus, PIV）和鼻病毒(rhinovirus, RV)是常見的病因1-2。近年來，隨著檢測技術(shù)的進步，不斷有新的病原體被發(fā)現(xiàn)，人類偏肺病毒（human metapneumovirus, hHMV）和人類博卡病毒（human bocavirus，HBoV）在急性呼吸道感染的發(fā)現(xiàn)已引起人們廣泛重視，并認為與嬰幼兒急性喘息的發(fā)作存在相關(guān)性3-5。國內(nèi)外

11、的研究發(fā)現(xiàn)，呼吸道病毒感染引起的毛細支氣管炎和以后反復發(fā)作喘息、發(fā)展為哮喘具有相關(guān)性6-8。因此對于毛細支氣管炎患兒發(fā)病和病毒學監(jiān)測具有重要臨床意義。我們在2006年至2008年的毛細支氣管炎發(fā)病高峰季節(jié)（11月至次年3月）收集了112例住院毛細支氣管炎患兒的鼻咽分泌物，通過直接免疫熒光法篩查7種常見呼吸道病毒，PCRRT-PCR的方法檢測HBoV、人類偏肺病毒 （hMPV）和其他8種常見呼吸道病毒相應基因，探討重慶地區(qū)住院毛細支氣管炎患兒在2006年-2008年兩年間病毒流行病學和臨床特征變化。材料與方法一、標本收集 收集2006年11月2007年3月，2007年11月2008年3月在重慶兒

12、童醫(yī)院呼吸科住院的112例毛細支氣管炎患兒的鼻咽分泌物。在患兒人院的第1天收集標本，一式兩份，一份用于即刻檢查，一份置一80冰箱待檢。二、方法 采用直接熒光免疫和PCR方法檢測每一份標本，兩種方法任何一種方法陽性即認為是病毒感染陽性。1直接熒光免疫檢測呼吸道常見病毒：取23 ml患兒鼻咽分泌物，加生理鹽水l0 ml，用毛細吸管反復吹打洗滌，去除粘液，離心(2000-3000 rrain)10 rain，將沉淀點在兩張玻片上， 風干后用冷丙酮固定10 rain，首先用Deko(UK)病毒免疫熒光快速診斷試劑盒作病毒篩查，在熒光顯微鏡下呈綠色熒光的細胞為病毒感染的陽性細胞，確定有病毒感染的陽性標本

13、，分別作呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒A,B (Flu-A、Flu-B)、副流感病毒1，2，3（PIV1,PIV2,PIV3）以及腺病毒（ADV）染色確定病毒類型。2PCR/RT-PCR檢測10種呼吸道病毒基因：分別提取鼻咽分泌物的病毒DNA和RNA，RNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，用PCR的方法分別擴增10種病毒的不同基因，各病毒不同基因引物和產(chǎn)物情況見表1和圖1。表1 各病毒不同基因引物和產(chǎn)物情況病毒種類引物序列產(chǎn)物大?。╞p）參考文獻號RSVS,TGGGACACTCTTAATCATAs,TGATTCCAAGCTGAGGATAs, GTTGTAGGTGTGTTTC-32503419PIV3S

14、, CTCGAGGTTGTCAGGATATAGAS, CTTTGGGAGTTGAACACAGTT18910RVS, CGGACACCCAAAGTAGAS GCACTTCTGTTTCCCC38011HBoVS，GAGCTCTGTAAGTACTATTACAs，CTCTGTGTTGACTGAATACAGS，TATGGCCAAGGCAATCGTCCAAGAs，GCCGCGTGAACATGAGAAACAGA304291412hMPVS，GCAACAATTGAACTGATCTTCAGGAAACAs，GCAACATTGAACTGATCTTCAGGAA AC4503PIV1S, ATTTCTGGAGATGTC

15、CCGTAGGAGAACAS, CACATCCTTGAGTGATTAAGTTTGATG18013ADV (adenovirus)S, GCCGCAGTGGTCTTACATGCACATCAS, CAGCACGCCGCGGATGTCAAAGT30811HCoV (human coronovirus OC 43)S，TGCAAAGATGGGGAACTGTGGGAS, AGGAAGGTCTGCTCCTAATTCC45011Flu-A (influenza virus A)S, CAGAGACTTGAAGATGTCTTTGCAS, GCTCTGTCCATGTTATTTGGATC21211Flu-B (i

16、nfluenza virus B)S, GAAAAATTACACTGTTGGTTCGGTGAS, AGCGTTCCTAGTTTTACTTGCATTGA36511三、統(tǒng)計方法采用統(tǒng)計程序包SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料比較采用Fishers Exact Test, 計量資料比較采用秩和檢驗， P0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果住院毛細支氣管炎患兒基本情況 兩年共收集112例住院毛細支氣管炎患兒鼻咽抽吸物。年齡范圍為1月-30月，平均年齡為（5.856+0.4124）月，主要發(fā)病年齡在3月-8月。其中男孩72名，女孩40名。2006年11月-2007年3月和2007年11月-2008年3月住

17、院毛細支氣管炎患兒基本情況和主要臨床特征比較 2006年11月-2007年3月共收集標本53例，年齡范圍為1月-30月，平均年齡為（7.109+0.7429 ）月，其中男孩39名，女孩14名。2007年11月-2008年3月共收集標本59例，年齡范圍為1月-12月，平均年齡為（4.725+0.3454 ）月，其中男孩33名，女孩26名?；厩闆r及臨床特征比較見表2。其中，兩年患病兒童的年齡差異具有顯著性。臨床癥狀中，發(fā)熱、嘔吐、氣促的發(fā)生例數(shù)差異具有顯著性。其余情況差異均不顯著。表2 2006年11月-2007年3月和2007年11月-2008年3月住院毛細支氣管炎患兒基本情況和主要臨床特征比

18、較表項目2006年11月-2007年3月2007年11月-2008年3月P收集標本數(shù)5359/年齡#7.109+0.7429 4.725+0.34540.0034*性別 男39330.075 女1426特應質(zhì) 是34371 否1922主要臨床癥狀 咳嗽53591 鼻阻370.328 流涕970.590 發(fā)熱1470.049* 嘔吐400.047* 腹瀉15220.324 氣促1570.034* 呼吸困難620.146 發(fā)紺15200.547住院天數(shù)#7.522+0.45878.000+0.57000.5194WBC#8.928+0.46129.759+0.44390.1992備注：# 數(shù)據(jù)表示

19、為平均值+標準誤； * P0.05，兩數(shù)據(jù)相比較差異具有顯著性。住院毛細支氣管炎患兒呼吸道病毒病原學檢出情況 112例患兒呼吸道標本中共檢出呼吸道病毒陽性84例（75%），其中單一病毒陽性45例（40.18%），兩種或兩種以上病毒合并陽性39例（34.82%）。其中最常見的為RSV，其余依次為PIV3, RV, hMPV, HBoV, PIV1, ADV, Flu-A, CoV, Flu-B。2006年11月-2007年3月和2007年11月-2008年3月住院毛細支氣管炎患兒呼吸道病毒檢出情況比較 10種呼吸道病毒在不同年份檢出情況見圖1和表3。2006年11月-2007年3月共檢出病毒陽性

20、42例，其余陽性標本均在2007年3月和2007年11月-2008年3月檢出。從圖1可以看出，每種呼吸道病毒在兩年間的檢出情況均不同，即流行情況是不同的。其中，CoV，F(xiàn)lu-A，F(xiàn)lu-B在2006年11月-2007年3月無陽性檢出，陽性檢出均在2007年11月-2008年3月。RV在2007年11月-2008年3月的檢出顯著高于2006年11月-2007年3月。2006年11月-2007年3月的秋冬季和冬春季，病毒檢出陽性率無差異，各種病毒在秋冬季和冬春季的檢出沒有顯著差異。在2007年11月-2008年3月，冬春季病毒陽性檢出顯著高于秋冬季，其中，RSV和RV在冬春季的檢出明顯高于秋冬季

21、。圖1 2006-2007年和2007-2008年各種病毒檢出率比較表3 2006年11月-2007年3月和2007年11月-2008年3月住院毛細支氣管炎患兒呼吸道病毒檢出情況和流行特征比較病毒種類2006年11月-2007年3月2007年11月-2008年3月秋冬季（N=25）冬春季（N=28）秋冬季（N=24）冬春季（N=35）單一病毒12（48%）12（42.86%）6（25%）15（42.86%）兩種或兩種以上病毒8（32%）10（35.71%）4（16.67%）a17（48.57%）aRSV18（72%）16（57.14%）4（16.67%）b24（68.57%）bPIV36（24

22、%）9（32.14%）3（12.5%）5（14.29%）RV1（4%）5（17.86%）2（8.33%）c11（31.43%）chMPV4（16%）3（10.71%）2（8.33%）3（8.57%）HBoV1（4%）4（14.29%）2（8.33%）3（8.57%）PIV101（3.57%）1（4.17%）5（14.29%）ADV2（8%）1（3.57%）0 3（8.57%）CoV001（4.17%）2（5.71%）Flu-A0003（8.57%）Flu-B0001（2.86%）備注：秋冬季為11月-12月，冬春季為1月-3月。a b c 表示兩者相比較差異具有顯著性，P0.05。討論本研究以

23、毛細支氣管炎患病高峰季節(jié)的住院毛細支氣管炎患兒為研究對象，探討在不同年份毛細支氣管炎患兒基本情況和臨床特征差異，發(fā)現(xiàn)：在不同年份，患兒的患病高峰年齡，部分臨床癥狀的發(fā)生是顯著不同的。一般來說，毛細支氣管炎患兒最早出現(xiàn)上呼吸道感染的癥狀，包括鼻塞、流涕等，隨著病程進展出現(xiàn)喘息、咳嗽等癥狀，嚴重病例出現(xiàn)氣促、呼吸困難、發(fā)紺等癥狀。有一些文獻也描述了發(fā)熱、消化道癥狀等14。從我們的研究可以看出，雖然大多數(shù)患兒的基本情況和臨床特征是相似的，但這些因素仍然因為每年的具體情況不同而存在差異。導致這些差異的具體影響因素尚不清楚，其機制探討有助于臨床診治工作。本文首次報道了中國重慶地區(qū)住院毛細支氣管炎患兒在患

24、病高峰季節(jié)呼吸道病毒檢出情況，包括了HBoV在內(nèi)的十一種呼吸道病毒的流行情況，以及不同年份的流行病學特點。結(jié)果顯示，重慶地區(qū)住院毛細支氣管炎患兒鼻咽分泌物中檢出十種呼吸道病毒，陽性率 75%，其中單一病毒陽性45例（40.18%），兩種或兩種以上病毒合并陽性高達39例（34.82%）。其中RSV仍居于首位，其次是PIV3和RV。新近發(fā)現(xiàn)的病毒HBoV和hMPV也占一席之地，且檢出率僅次于最常見的三種病毒。除RSV之外的其余病毒均是以合并感染為主，且大多數(shù)都是與呼吸道合胞病毒的合并感染。早期對于毛細支氣管炎的病毒病原學研究多采用分離培養(yǎng)等靈敏度不高的方法，因此陽性檢出率、病毒種類和合并感染情況的

25、檢出不高。隨著分子生物學技術(shù)的發(fā)展，對于病毒病原學的研究進展迅速。陽性病例的檢出率、新的病毒種類的發(fā)現(xiàn)不斷得到提高。本研究結(jié)果和急性呼吸道感染，毛細支氣管炎病毒病原學的各種國內(nèi)外報道結(jié)果基本一致2-6,15-18，總的病毒檢出陽性率達75%，合并感染率高。原因可能是病毒檢測種類較全面，檢測手段靈敏，且標本采集季節(jié)正是多種呼吸道病毒感染高峰季節(jié)所致。本研究還比較了不同年份，住院毛細支氣管炎患兒病毒病原學差異。我們發(fā)現(xiàn)，大部分常見呼吸道病毒的陽性檢出率在不同年份沒有差異。但由于年份不同病毒種類存在差異，流行性特別顯著的流感病毒和相對不多見的冠狀病毒都只在2007年11月-2008年3月被發(fā)現(xiàn)。另外

26、，我們還發(fā)現(xiàn)，在2006年11月-2007年3月，各種病毒在這5個月的流行趨勢基本一致，沒有顯著性差異。但在2007年11月-2008年3月期間，合并病毒陽性的檢出，RSV和RV的檢出在冬春季更高。國內(nèi)外文獻對于毛細支氣管炎病毒學的流行情況都有比較一致的發(fā)現(xiàn)，如RSV和hMPV流行季節(jié)為前一年12月至次年2月；RV流行在春季多見19-21。但我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在毛細支氣管炎患兒患病高峰季節(jié)，每年的病毒檢出情況、合并感染情況、流行季節(jié)是有變化的，這可能也是本研究中不同年份患兒基本情況和臨床特征存在差異的原因之一。HBoV是2005年被發(fā)現(xiàn)的呼吸道病毒，世界各地的報道發(fā)現(xiàn)HBoV在呼吸道感染患兒

27、陽性檢出率為1.5 1834,22-29，混合感染率可達176 、333 、39I 、4316,17,24,26，檢測率的差異與地區(qū)、年份、季節(jié)和目標檢測人群不同有關(guān)。在我們的研究主體中，HBoV陽性檢出結(jié)果和國內(nèi)外的報道基本一致。近來有文獻報道27-28，HBoV 主要檢出于喘息性疾病的嬰幼兒，而且和急性喘息存在一定相關(guān)性29。本研究結(jié)果顯示HBoV檢出陽性率為8.93%（10/112），在本研究群體中排第五位，但HBoV陽性檢出均為合并感染。有研究報道710例呼吸道感染患兒中，HBoV檢出率達到13.9%，但單一陽性檢出率也只有4.93%，而且最常見的診斷為反復喘息30。故HBoV感染在本

28、地住院毛細支氣管炎患兒中的檢出率并不高，單獨檢出率更低，其作為原發(fā)病原在住院毛細支氣管炎患兒中的作用有待進一步研究。近年來研究發(fā)現(xiàn)，hMPV感染與毛細支氣管炎的發(fā)生密切相關(guān)，其流行情況、患兒臨床癥狀均與RSV相似。Freymouth等從337例急性呼吸道感染的住院患兒中分離出hMPV 陽性標本19例，其中16例臨床表現(xiàn)為毛細支氣管炎31。我們的研究結(jié)果顯示，hMPV共檢出12例，陽性檢出率僅次于RSV、PIV3和RV，大部分陽性檢出均為合并感染，主要與RSV合并感染。HBoV作為原發(fā)病原和毛細支氣管炎最常見的RSV，新發(fā)現(xiàn)病毒hMPV相比，其在毛細支氣管炎住院患兒中的檢出明顯較低。綜上所述，本

29、研究發(fā)現(xiàn)：1、毛細支氣管炎患兒在患病高峰季節(jié)呼吸道病毒感染檢出率高，合并感染率高，并且病毒種類復雜，多達十種；而且每年的病毒檢出情況、合并感染情況、流行季節(jié)是有變化的，因而也導致每年患兒的臨床癥狀存在差異；2、新近發(fā)現(xiàn)的HBoV在毛細支氣管炎住院患兒中有檢出，以合并感染為主。但其檢出陽性率和作為原發(fā)病原單一陽性檢出率低于RSV和hMPV。有研究顯示，呼吸道病毒的合并感染會加重毛細支氣管炎的病情30。也有研究發(fā)現(xiàn)感染不同呼吸道病毒的毛細支氣管炎患兒對系統(tǒng)糖皮質(zhì)技術(shù)治療的效果是不同的23。所以檢測毛細支氣管炎患兒病毒病原學情況對于臨床診斷、治療毛細支氣管炎有重要輔助作用。參考文獻：Behrman

30、RE，Kliegman RMBronchiolitisNelson Pediatrics Textbook16th edPhiledelphia：WBSaunders Co，200012851287Korppi M, Kotaniemi-Syrjanen A, Waris M, et al. Rhinovirus-associated wheezing in infancy: comparison with re- spiratory syncytial virus bronchiolitis. Pediatr Infect Dis J 2004; 23: 995999.Van den Hoo

31、gen BG，de Jong JC，Groen J，et a1A newly discovered human pneunurvirus isolated from young children with respiratory tract diseaseNat Med 2001; 7: 719724Allander T, Tammi M T, Eriksson M，et al. Cloning of a human parvovirus by molecular screening of respiratory tract samples. PNAS 2005; 36: 12891-1289

32、6 .Allander T, Jartti T, Gupta S,et al. Human bocavirus and acute wheezing in children. Clin Infect Dis, 2007; 44: 904-910.Sigurs N, Bjarnason R, Sigurbergsson F, et al. Respiratory syncytial virus bronchiolitis in infancy is an important risk factor for asthma and allergy at age 7. Am J Respir Crit

33、 Care Med 2000;161:15011507.Sigurs N, Gustafsson PM, Bjarnason R, et al. Severe respiratory syncytial virus bronchiolitis in infancy and asthma and allergy at age 13. Am J Respir Crit Care Med 2005;171:137141.Henderson J, Hilliard TN, Sherriff A, et al. Hospitalization for RSV bronchiolitis before 1

34、2 months of age and subsequent asthma, atopy and wheeze: a longitudinal birth cohort study. Pediatr Allergy Immunol 2005;16:386392.HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Collins PL%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbst

35、ractPlusCollins PL, HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Hill MG%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlusHill MG, HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Johnson PR%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem

36、2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlusJohnson PR. The two open reading frames of the 22K mRNA of human respiratory syncytial virus: sequence comparison of antigenic subgroups A and B and expression in vitro. HYPERLINK javascript:AL_get(this, jour, J Gen Viro

37、l.);J Gen Virol 1990; 71: 3015-20. Karron RA, Froehlich L, Belshe RB, et al. Rapid detection of parainfluenza virus type 3 RNA in respiratory specimens: use of reverse transcription-PCR-enzyme immunoassay. J Clin Microbiol 1994; 32: 484-8.HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Dakhama

38、A%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlusDakhama A, HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Hegele RG%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPl

39、usHegele RG, HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Laflamme G%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_DiscoveryPanel.Pubmed_RVAbstractPlusLaflamme G, et al. Common respiratory viruses in lower airways of patients with acute hypersensitivity pneumon

40、itis. HYPERLINK javascript:AL_get(this, jour, Am J Respir Crit Care Med.);Am J Respir Crit Care Med 1999; 159: 1316-22.Naghipour M, Cuevas LE, Bakhshinejad T, et al. Human bocavirus in Iranian children with acute respiratory infections. J Med Virol 2007; 79:539-43.Fan J, Henrickson KJ. Rapid diagnos

41、is of human parainfluenza virus type 1 infection by quantitative reverse transcription-PCREnzyme hybridization assay. J Clin Microbiol 1996; 34: 1914-7.Mallory MD, Shay DK, Garrett J, et al. Bronchiolitis management preferences and the infl uence of pulse oximetry and respiratory rate on the decisio

42、n to admit. Pediatrics 2003; 111: e4551.Freymouth F, Vabret A, Legrand L, et al. Presence of the new human metapneumovirus in French children with bronchiolitis. Pediatr Infect Dis J ,2003; 22:92-94.Ebihara T, Endo R, Kikuta H, et al. Human metapneumovirus infection in Japanese children. J Clin Micr

43、obiol 2004; 42: 126-32.Chiu, S S., Chan KH, Chu KW, et al. Human coronavirus NL63 infection and other coronavirus infections in children hospitalized with acute respiratory disease in Hong Kong, China. Clin. Infect. Dis. 2005,40:17211729.Jartti T, Lehtinen P, Vuorinen T, et al. Respiratory picornavi

44、ruses and respiratory syncytial virus as causative agents of acute expiratory wheezing in children.Emerg Infect Dis.2004;10:10951101.Korppi M, Kotaniemi-Syrjanen A, Waris M, et al. Rhinovirus-associated wheezing in infancy:comparison with respiratory syncytial virus bronchiolitis. Pediatr Infect Dis

45、 J 2004; 23: 99599.Bosis S, Esposito S, Niesters HG, et al. Impact of human metapneumovirus in childhood: Impact of human metapneumovirus in childhood: comparison with respiratory syncytial virus and infl uenza viruses. J Med Virol 2005; 75: 10104.Williams JV, Harris PA, Tollefson SJ, et al. Human m

46、etapneumovirus and lower respiratory tract disease in otherwise healthy infants and children. N Engl J Med 2004; 350: 44350Bastien N，Bran& K，Dust Ket a1Human Bocavims infection CanadaEmerg Infect Dis20o6。12：848-850Amold JC，Singll I，Specter SA，et a1Human bocavims：prevalence and clinical spectrum at a

47、 children s hospita1 Clin Infect Dis20o643：283-288Weissbrich B，Neske F，Schubert J，et a1Frequent detection of bocavims DNA in German children with respiratory tract infectionsBMC Infect Dis20o6。6：109一l15Choi EH，Lee HJ，Kim SJ，et a1111e association of newly identified respiratory vir1lses with lower re

48、spiratory tract infections in Korean children，2000-2005Clin Infect Dis，200643：585592Chung JY，Han TH，Kim CK，et a1Bocavims infection in hospitalized children，South KoreaEmerg Infect Dis，2006，12：12541256Manning A，Russell V。Eastick K，et a1Epidemiological profile and clinical associations of human bocavims and other human parvovimsesJ Infect Dis.2006，194：12831290 HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=Search&Term=%22Cheng%20WX%22%5BAuthor%5D&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubm