正交實驗法優(yōu)選護肝康片中水飛薊素純化工藝

1、正交實行法優(yōu)選護肝康片中水飛薊素純化工藝張良許沛虎張雪瓊允許高媛張雙碩【摘要】目的優(yōu)選護肝康片中水飛薊總黃酮最正確純化工藝。要領(lǐng)在觀察純化要領(lǐng)的條件下,接納正交實行法，以提取物中總黃酮量和水飛薊賓的量為觀察指標,觀察影響水飛薊素純化因素。結(jié)果水飛薊總黃酮最正確純化工藝為接納8%濃縮液，3倍量體積醋酸乙酯萃取2次，10in/次。結(jié)論優(yōu)選的水飛薊總黃酮純化工藝不變可行?！娟P(guān)鍵詞】正交實行水飛薊素純化工藝Abstrat:bjetiveTptiizethepurifiatinpressfttalflavnidsfrSilybuarianu.ethdsnthepreisefthebestpurifiat

2、inethd,rthgnaltestasusedfrstudyingtheeffetfsilyarinpurifiatiniththententsfttalflavnidsandsilybinasindex.ResultsTheptialnditinsereasflls：3tiesauntfethylaetate,8%nentratedslutin,extrating2ties,10inuterseahtie.nlusinTheptiupurifiatintehnlgyfttalflavnidsfrSilybuarianuisstableandfeasible.Keyrds:rthgnalte

3、st;Silybu;Purifiatintehnlgy護肝康片由單方藥材水飛薊構(gòu)成,具有護肝保肝改進肝成果、低落血脂的成果,可用于各型肝炎的治療。水飛薊為菊科植物水飛薊Silybuarianu(L.)Gaertn的果實。水飛薊素(silyarin)是自然黃酮木脂素類化合物,為水飛薊的果實經(jīng)提取精制而得的混淆物。其重要身分為水飛薊賓、異水飛薊賓等。水飛薊素作為抗肝損傷藥物具有不變細胞膜、改進肝成果的作用1，2。本實行對水飛薊中黃酮類物質(zhì)的純化要領(lǐng)舉行了研究，優(yōu)化水飛薊純化工藝，為水飛薊中總黃酮提取純化提供科學(xué)根據(jù)。1儀器與試藥1.1儀器UV1101型紫外分光光度儀上海天美科學(xué)儀器，安捷倫1100

4、高效液相色譜儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠，超聲洗濯器天津賽恩斯科學(xué)儀器。1.2藥材與試劑水飛薊賓比較品(中國藥品生物成品檢定所，批號：0856-200203),水飛薊藥材購自武漢紅十字藥業(yè)。闡發(fā)純甲醇、石油醚、醋酸乙酯，色譜甲醇。2要領(lǐng)與結(jié)果3,42.2水飛薊總黃酮的測定2.3水飛薊賓的測定2.4提取樣品的制備稱取水飛薊藥材300g，破壞，脫脂枯燥，用10倍量90%的乙醇提取3次，1h/次，分次過濾，歸并濾液，濾液減壓濃縮至無醇味，加水定容至1000l，搖勻。2.5純化要領(lǐng)比力別離接納萃取法和大孔樹脂法純化得提取物。萃取法：取100l濃縮液，用100l醋酸乙酯萃取兩次，歸并萃取液濃縮至干，

5、得提取物。大孔樹脂法：取100l濃縮液，上D101-1樹脂柱，水洗除雜，然后用70%乙醇洗脫2倍柱體積，歸并洗脫液濃縮至干，得提取物。紫外測定總黃酮含量和高效液相色譜法測定水飛薊賓含量。結(jié)果見表1。由以上結(jié)果可知，接納萃取純化要領(lǐng)得到的提取物總黃酮量和水飛薊賓的量均比大孔樹脂純化高，因此接納萃取法對水飛薊素舉行純化。表1純化要領(lǐng)比力結(jié)果略2.6萃取條件優(yōu)選根據(jù)影響萃取的重要因素，選擇藥液濃度A、萃取體積比B、萃取時間、萃取次數(shù)D作為觀察因素，每個因素取3個程度見表2。取水飛薊濃縮液50l，方案L9(34)正交實行，以總黃酮的量和水飛薊賓的量為觀察指標，正交實行表方案見表3。對結(jié)果舉行統(tǒng)計學(xué)處置

6、懲罰，方差處置懲罰結(jié)果見表45。表2工藝優(yōu)化的因素程度略表3L9(34)正交實行結(jié)果略表4總黃酮丈量結(jié)果方差闡發(fā)略由表4總黃酮丈量結(jié)果和方差闡發(fā)可知，各因素對純化結(jié)果的影響程度依次為D萃取次數(shù)B(體積比)A溶液濃度萃取時間，D萃取次數(shù)因素影響差異有明顯性，水總黃酮丈量結(jié)果直不雅闡發(fā)表白優(yōu)化工藝應(yīng)為A3B21D2。表5水飛薊賓丈量結(jié)果方差闡發(fā)略由表5水飛薊賓丈量結(jié)果方差闡發(fā)可知，各因素對純化結(jié)果的影響程度依次為D萃取次數(shù)B(體積比)萃取時間A溶液濃度，D萃取次數(shù)因素影響差異有明顯性，飛薊賓丈量結(jié)果直不雅闡發(fā)表白優(yōu)化工藝應(yīng)為A2B23D2。綜合總黃酮和水飛薊賓丈量結(jié)果方差闡發(fā)結(jié)果，萃取次數(shù)和萃取容

7、積用量對純化結(jié)果有較大的影響，結(jié)合產(chǎn)業(yè)現(xiàn)實終極確定純化工藝為：A3B21D2，即接納8%濃縮液，3倍量體積的醋酸乙酯萃取2次，10in/次。2.7驗證明行為了觀察所選擇最正確工藝的不變性,故對實在驗條件舉行驗證,并對其舉行放大實行，取水飛薊藥材300g破壞，脫脂枯燥，用10倍量90%的乙醇提取3次,1h/次，分次過濾，歸并濾液，濾液減壓濃縮至無醇味，加水定容至1000l，搖勻。取濃縮液250l3份，根據(jù)最正確工藝條件A3B21D2平行3次實行。結(jié)果見表6。表6純化驗證明行略由以上結(jié)果可知水飛薊總黃酮的量和水飛薊賓的量不變且含量均較高，優(yōu)選的工藝條件不變可行。3討論實行曾接納固-液萃取和液-液萃

8、取兩種要領(lǐng)對水飛薊提取物和提取液純化，液-液萃取法操縱更為輕便并且萃取結(jié)果更好，相對固-液萃取更為淘汰工序節(jié)省能源，同時液-液萃取法消費本領(lǐng)大、便于一連和寧靜操縱、易于實現(xiàn)主動操縱等特點，使之更切合產(chǎn)業(yè)消費。接納液-液萃取純化后，萃取液濃縮至干，由于水飛薊含有大量油脂性身分，枯燥的干膏中仍有部門油脂存在，因此接納石油醚對枯燥提取物舉行脫脂，接納3倍量石油醚浸漬提取物靜置留宿，過濾，枯燥得提取物。經(jīng)石油醚處置懲罰的提取物丈量總黃酮含量更為正確。根據(jù)最正確的提取工藝舉行驗證放大實行，驗證工藝的不變性和可行性，結(jié)果表白該工藝純化水飛薊總黃酮,含量較高，易于操縱，不變性好，適于產(chǎn)業(yè)化消費?！緟⒖嘉墨I】1閆玉峰，于健.水飛薊的化學(xué)身分及藥理研究希望J.中國藥事，2000，145：3