正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化超聲破壁提取麥冬皂苷D的工藝研究

1、正交方案法優(yōu)化超聲破壁提取麥冬皂苷D的工藝研究趙燕燕張向飛王麗娟王翠玲蘇芳【摘要】目的通過(guò)不雅察麥冬細(xì)胞超聲破壁時(shí)間和使用紫外分光光度法檢測(cè)超聲提取麥冬皂苷D含量?jī)煞N觀察指標(biāo)來(lái)比力挑選麥冬皂苷D的提取條件，優(yōu)化超聲提取工藝。要領(lǐng)接納正交方案法，別離以麥冬細(xì)胞破壁時(shí)間和接納紫外分光光度法測(cè)定麥冬細(xì)胞破壁后皂苷D的含量為觀察指標(biāo)，觀察乙醇濃度、溫度、麥冬粒度和先期浸泡時(shí)間等因素對(duì)超聲提取工藝的影響。通過(guò)顯微鏡不雅察，確定細(xì)胞破壁狀態(tài)；通過(guò)對(duì)兩種觀察指標(biāo)的實(shí)行結(jié)果舉行比力，優(yōu)化提取方案。結(jié)果使用紫外分光光度法測(cè)定麥冬皂苷D含量和通過(guò)不雅察麥冬細(xì)胞破壁所挑選的麥冬皂苷D最正確提取工藝的結(jié)果是同等的。在

2、觀察因素中，麥冬皂苷提取工藝影響程度為：粒度乙醇濃度先期浸泡時(shí)間溫度，超聲提取最正確條件為：溫度45，80目粒度，95%乙醇，先期浸泡12h。結(jié)論通過(guò)超聲要領(lǐng)對(duì)中草藥有用身分舉行提取，其提取率與細(xì)胞破壁有關(guān)，使用正交實(shí)行闡發(fā)紫外分光光度法檢測(cè)麥冬皂苷D含量和觀察麥冬細(xì)胞破裂的結(jié)果是同等的，可通過(guò)不雅察麥冬細(xì)胞破壁結(jié)果來(lái)優(yōu)化提取工藝，簡(jiǎn)化操縱?！娟P(guān)鍵詞】超聲；細(xì)胞破壁；麥冬皂苷D；正交方案法；工藝挑選麥冬phipgnjapniusThunb.Ker-Ga11為百合科沿階草屬植物，是常用滋陰中藥，其味甘微苦，性微寒，歸心、肺、胃經(jīng)，具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺、益胃生津、清心除煩的成果，傳統(tǒng)中醫(yī)重要將其用于肺、胃

3、、心陰不敷的病癥。中草藥中很多有用身分為細(xì)胞內(nèi)身分，提取時(shí)必要破裂細(xì)胞壁，而現(xiàn)有的化學(xué)和機(jī)器要領(lǐng)破裂細(xì)胞很難起到抱負(fù)的破裂結(jié)果2，影響提取率。超聲提取包羅機(jī)器破壞、熱學(xué)及空化作用3，4，由于3個(gè)方面的綜互助用，加快了細(xì)胞的破裂，進(jìn)步了有用身分的提出率。接納超聲要領(lǐng)提取中草藥中有用身分的文獻(xiàn)已有很多511，但通過(guò)超聲要領(lǐng)觀察細(xì)胞壁破裂環(huán)境與提取服從的干系尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)行接納正交方案法，別離以麥冬細(xì)胞破壁時(shí)間和接納紫外分光光度法測(cè)定麥冬細(xì)胞破壁后皂苷D的含量為觀察指標(biāo)，觀察了乙醇濃度、溫度、麥冬粒度和先期浸泡時(shí)間等因素對(duì)超聲提取工藝的影響，通過(guò)顯微鏡不雅察確定細(xì)胞壁破裂狀態(tài)；通過(guò)對(duì)兩種觀察指

4、標(biāo)實(shí)行結(jié)果的比力，優(yōu)化提取方案。1儀器與質(zhì)料UV2550SHIADZU紫外分光光度計(jì)日本島津；KQ5200E型超聲波洗濯儀昆山市超聲儀器；lypusX40細(xì)胞生物顯微鏡日本lypus；RT-5型中藥破壞機(jī)浙江縉云縣超力機(jī)器廠；BS224S型電子闡發(fā)天平北京塞多利斯天平。麥冬，購(gòu)自河北安國(guó)中藥市場(chǎng)，產(chǎn)于四川，經(jīng)斷定本品為百合科沿階草屬植物麥冬的干草塊莖；麥冬皂苷D尺度品含量98%，天津一方科技；高氯酸闡發(fā)純，天津東方化工場(chǎng)。2要領(lǐng)與結(jié)果2.1正交實(shí)行方案及各因素程度設(shè)定拔取溶液溫度A、麥冬粒度B、乙醇濃度和浸泡時(shí)間D為重要觀察因素，各因素的程度設(shè)定見(jiàn)表1。正交實(shí)行接納L934正交表12，見(jiàn)表2。

5、表1超聲破裂提取麥冬皂苷D實(shí)行程度略2.5超聲破壁提取麥冬皂苷D正交實(shí)行結(jié)果將麥冬藥材破壞，過(guò)篩，得到80，40，20目麥冬粉末。別離稱取麥冬粉末適量，用100l溶劑浸泡一按時(shí)間，在必然溫度下舉行超聲破裂，每隔5in取樣，顯微鏡不雅察，確定細(xì)胞破壁時(shí)間。將提取液抽濾，濾渣用少量蒸餾水沖冼，然后將濾液移入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)至干；向瓶中參加5l的高氯酸，密塞，60水浴加熱15in，冰水停頓反響，以高氯酸作空缺比較，接納紫外分光光度法檢測(cè)。別離接納極差法和方差闡發(fā)法對(duì)正交實(shí)行的兩個(gè)結(jié)果別離舉行闡發(fā)，確定各因素對(duì)實(shí)行結(jié)果的影響程度見(jiàn)表23。方差闡發(fā)結(jié)果表白，通過(guò)紫外分光光度法檢測(cè)麥冬皂苷D含量和使用不雅

6、察麥冬細(xì)胞破壁時(shí)間來(lái)挑選麥冬皂苷D最正確提取工藝結(jié)果是同等的。影響提取率的主次因素為BDA，即粒度乙醇濃度先期浸泡時(shí)間溫度；最正確超聲提取工藝為A2B12D2，即45條件下，80目粒度，95%乙醇，先期浸泡12h。表2超聲破壁提取麥冬皂苷D正交實(shí)行方案直不雅闡發(fā)結(jié)果略圖1超聲前麥冬細(xì)胞圖4010略圖2超聲后麥冬細(xì)胞圖4010略表3超聲破壁提取麥冬皂苷D正交實(shí)行方差闡發(fā)結(jié)果略本結(jié)果運(yùn)用正交實(shí)行助手軟件盤(pán)算，表現(xiàn)有明顯性P0.053討論3.1破壞粒度對(duì)細(xì)胞超聲破壁的影響實(shí)行結(jié)果表白，破壞粒度為2060目時(shí)，超聲2h后細(xì)胞外表無(wú)明顯變革；在80目時(shí)，經(jīng)超聲0.5h麥冬細(xì)胞壁破裂，破壞粒度與細(xì)胞超聲破

7、壁成正比，與正交實(shí)行闡發(fā)結(jié)果是同等的。3.2超聲溫度和先期浸泡時(shí)間對(duì)細(xì)胞破壁的影響在麥冬皂苷D超聲提取歷程中，溫度因素和先期浸泡時(shí)間影響不明顯。在現(xiàn)實(shí)提取操縱中，一樣平常接納較低的溫度，以淘汰有用身分的落解，同時(shí)可以省去先期浸泡步伐，簡(jiǎn)化操縱步調(diào)。通過(guò)超聲要領(lǐng)對(duì)中草藥有用身分舉行提取，其提取率與細(xì)胞破壁有關(guān)，使用正交實(shí)行闡發(fā)紫外分光光度法檢測(cè)麥冬皂苷D含量和不雅察麥冬細(xì)胞破裂狀態(tài)的結(jié)果是同等的，因此，可使用觀察麥冬細(xì)胞破壁結(jié)果來(lái)優(yōu)化提取工藝，簡(jiǎn)化操縱，低落本錢(qián)，縮減事情量?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】目的通過(guò)不雅察麥冬細(xì)胞超聲破壁時(shí)間和使用紫外分光光度法檢測(cè)超聲提取麥冬皂苷D含量?jī)煞N觀察指標(biāo)來(lái)比力挑選麥冬皂苷D的提取條件，優(yōu)化超聲提取工藝。要領(lǐng)接納正交方案法，別離以麥冬細(xì)胞破壁時(shí)間和接納紫外分光光度法測(cè)定麥冬細(xì)胞破壁后皂苷D的含量為觀察指標(biāo)，觀察乙醇濃度、溫度、麥冬粒度和先期浸泡時(shí)間等因素對(duì)超聲提取工藝的影響。通過(guò)顯微鏡不雅察，確定細(xì)胞破壁狀態(tài)；通過(guò)對(duì)兩種觀察指標(biāo)的實(shí)行結(jié)果舉行比力，優(yōu)化提取方案。結(jié)果使用紫外分光光度法測(cè)定麥冬皂苷D含量和通過(guò)不雅察麥冬細(xì)胞破壁所挑選的麥冬皂苷D最正確提取工藝的結(jié)果是同等的。在觀察因素中，麥冬皂苷提取工藝影響程度為：粒度乙醇濃度先期浸泡時(shí)間溫度，超聲提取最正確條件為：溫度4