植物激素 整理

1、植物激素的檢測方法生物測試生物測試法是最早采用的植物激素測定方法它是利用植物激素 的生理活性通過某些植物的組織和器官對植物激素產(chǎn)生的特異性反 應進行測定的。優(yōu)點：簡便易行也能反映植物激素的生理活性缺點：專一性較差且植物體內(nèi)含有生長素類似物T拮抗物等影響測定的結(jié)果 需在前處理中盡可能純化所要測定的組分 過程復 雜此外重復性差工作量大免疫檢測免疫學技術(shù)應用于植物激素的測定有力地促進了激素定量研究的 發(fā)展它的基本原理是利用抗原和抗體的特異性競爭結(jié)合。優(yōu)點：了檢測靈敏度可檢測出10-12 g的微量物質(zhì)相應其前處理也 得到了簡化又改善了測定的專一性。缺點：抗體的制備較復雜。物理化學方法物理化學方法分光譜

2、法和色譜法兩種1)分光譜法：主要有紫外吸收光漕紅外吸收光譜和熒光法 優(yōu)點：靈敏度高缺點：專一性差2)色譜法：利用物質(zhì)在不同介質(zhì)中的分配原理進行測定的，包括 紙上層析，薄層層析(TLC)，氣相色譜(GC)，高效液相色譜(HPLC)以 及氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）等，將分離和測定結(jié)合起來是色譜法的基本特點。（1）紙上層析和TLC：優(yōu)點：設備簡單易操作缺點：分離效率和靈敏度有限制（2）GC 和 HPLC：是在紙上層析和TLC的基礎上裝備了商品化的色譜柱和檢測器，保證了檢測方法的專一、靈敏和準確（3）GC 和 HPLC 方法：分析植物激素,靈敏度和選擇性高,重復性好，但對前處理要 求較高；又因保留時間的分

3、辨有一定限制，若達不到所需純度要 求可能會出現(xiàn)多種化合物的保留時間相同或接近而影響測定結(jié)果。 （4）在植物激素的理化檢測中儀器聯(lián)用是當代的發(fā)展趨勢：最常用的結(jié)合系統(tǒng)是氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GCMSD，技術(shù)，它是 目前最為可靠的激素檢測方法還可驗證其它測定方法的可靠性 而且還可鑒定未知物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，但需經(jīng)冗長的樣品純化程序設 備昂貴，使用和維護成本高。此外有氣液相色譜GLCD配以火焰 熱離子檢測器（FTDD快速靈敏地對植物細胞分裂素定量測定25, 也有薄層色譜與氣相色譜結(jié)合分析ABA。內(nèi)源植物激素：植物體內(nèi)產(chǎn)生的激素主要有：、生長素（auxin）、赤霉素（GA3）、細胞分裂素（CTK）、脫落酸（abs

4、cisic acid, ABA）、乙烯（ethyne，ETH）和油菜素甾醇、吲哚乙酸（IAA）玉米素（Z）、玉米素核苷（ZR）反玉米素（ZT）復合胺、褪黑 激素秋水仙素吲哚丁酸外源植物激素：人工合成加到植物中2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸），吲哚丙酸、蔡乙酸、4-碘苯氧乙酸乙稀利水楊酸（SA）茉莉酸b9（必久）矮壯素（ccc）:又叫三西，碌化碌代膽堿 青 鮮素（mh）奈乙酸吲哚丙酸（IPA）吲哚丁酸（IBA） 6-芐基腺嘌吟（BA）激動素（K）蔡乙酸（NAA）實驗儀器中文：LC-6A高效液相色譜儀日本島津制作所產(chǎn)品。，硅膠柱（250mmX5mm）日本島津制作所產(chǎn)品SPD-6AV紫外-可見光度

5、檢測器日本島津制作所產(chǎn)品C-R3A數(shù)據(jù)處理機日本島津制作所產(chǎn)品HPLCWaters公司產(chǎn)Alliance系列HPLC及Premier LCT MS/ MS質(zhì)譜聯(lián)用設備加拿大Waters公 司Xterra C18色 譜柱（100 mm x2.1 mm x3.5u m,加拿大 Waters公 司美國HP-5890II型氣相色譜儀，配備FID檢測器，HP-3395積分儀1100型高效液相色譜儀美國Aglent公司SLC-10A VP高效液相色譜儀日本島津公司英文：HPLC-UV analysis, an Agilent 1100 series HPLC-UV system (AgilentTechn

6、ologies, USA）Both methanol and ethanol（HPLC grade） Merck （Darmstadt, Germany）Acetic acid （analytical reagent grade） Fisher Scientific （Hanover Park, IL, USA）.實驗試劑中文：,a-蔡乙酸（NAA）,吲哚乙酸（IAA ）, 6-芐基嘌吟（BA）,K,GA（上海伯奧生物科技公司）ZT （上海麗珠東風生物技術(shù)有限公司IBA （英國產(chǎn)，上海化學試劑分裝站），IPA（Sigma公 司）褪黑激素、吲哚乙酸（山入）和復合胺（Sigma Chemica公司

7、甲醇和乙腈（HPLC級，加拿大VWR Scientific公司甲酸（分析純，Sigma公司IAA,GA3，Z （玉米素）和ABAFluka公司GA3 和 ABASigma 公司IAA,ABA,GA中國藥品生物制品檢定所甲醇、三氯甲烷和乙酸乙酯分析純赤霉素GA3、生長素、IAA和ABA (純度大于97%, Sigma公司)冰醋酸(AR，上?；瘜W試劑公司)玉米素核苷(zR)Sigma公司玉米素(z)中國科學院上海生物化學研究所玉米素、赤霉素、生長素、脫落酸Sigma,純度A99%腺素、激動素、6-芐氨基嘌吟、秋水仙素、吲柴3-丁酸(科密歐，純度A95%)色譜純甲醇德國MERCK公司分析純乙酸、甲醇

8、、乙酸乙酯、石油醚西安化學試劑廠英文：GA3, IAA, ABA (脫落酸)，JA, IBA, NAA, 2,4-D(2, 4-二氯苯酚代乙 酚)，1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) and sodium dodecyl sulphate (SDS)Sigma-Aldrich (St. Louis, MO,USA).Z, BA, GA, ABA and IBASigma-Aldrich (Steinheim, Germany)IAA,NAAand 2,4-D PhytoTechnologyLaboratories(Shawn

9、ee Mission, USA)植物激素的危害矮壯素：毒理學的研究表明:即使在低于日允許攝入量濃度水平 下，矮壯素對動物的繁殖能力仍有不良影響。美國國家職業(yè)安全和健 康研究所發(fā)布的化學物質(zhì)毒性數(shù)據(jù)庫已將矮壯素列為疑似內(nèi)分泌十 擾物質(zhì)。赤霉素：赤霉素可能干擾人體正常的內(nèi)分泌系統(tǒng)袁長期食用會 在人體中蓄積袁造成器官的慢性中毒袁并可能引起癌變袁嚴重危及 消費者的身心健康?？捎绊憴C體的內(nèi)分泌系統(tǒng)受試動物的甲狀腺、 卵巢、腎上腺等內(nèi)分泌腺重量明顯增加使得動物某些激素水平發(fā)生 改變，影響動物的生長發(fā)育 甚至發(fā)生癌變。乙烯利：具有一定的神經(jīng)毒性、致突變性和弱的激素樣作用。對 小鼠的免疫功能具有一定的抑制作用

10、能導致小鼠體細胞、生殖細胞遺 傳損傷，使小鼠骨髓細胞微核率和雄性生殖細胞畸形率提高干擾精 子正常生成和成熟過程導致小鼠體細胞染色體畸變和生殖細胞基 因突變。乙烯利對人類具有潛在的誘癌、致畸及其他多方面的危險。蔡乙酸：有一定抑制睪丸細胞增殖活性、誘發(fā)睪丸細胞凋亡的作 用。2, 4七：小鼠長期暴露在2, 4 - D的環(huán)境中會造成骨骼畸形,致 病率和死亡率增加;2, 4 - D具有急性神經(jīng)毒性,對皮膚和眼睛有刺 激作用,吸入或接觸后,其急性毒性作用主要表現(xiàn)為神經(jīng)性毒性； 慢性毒性作用表現(xiàn)為對血液、肝、腎的毒性及抑制某些酶的活力,抑 制某些蛋白質(zhì)的合成。NAA:屬于低毒農(nóng)藥，大白鼠急性口服1_。50為1 0005 900mg - kg- 1。對人的眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有刺激作用吸入后 可引起咳嗽、喘息、喉炎、氣短、頭痛、惡心、嘔吐通過食道