病毒感染的檢查方法與防治原則課件

1、病毒感染的檢查方法與防治原則第一節(jié) 病毒感染的檢查方法1、標(biāo)本采集與送檢：用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本：血清學(xué)診斷的標(biāo)本：采取急性期、防止病毒滅活雙份血清2病毒的形態(tài)學(xué)檢查 取含有病毒的組織細(xì)胞，經(jīng)染色后用光學(xué)顯微鏡觀察病毒包涵體及細(xì)胞病變。電鏡和免疫電鏡普通光學(xué)顯微鏡：包涵體3、常規(guī)分離培養(yǎng)與鑒定動(dòng)物接種雞胚接種組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng) 原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)正常細(xì)胞病變細(xì)胞4.檢查病毒抗原及抗體:常用的抗原抗體檢測(cè)法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA） 免疫熒光 / 固相放射免疫測(cè)定 /檢測(cè)特異性抗體的快速診斷：IgMELISA for HIV

2、 antibodyMicroplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity5.病毒核酸的檢測(cè)：(1)病毒核酸雜交技術(shù)是一種特異、快速、能定量分型、應(yīng)用面廣的診斷新技術(shù) 利用核苷酸可在體外一定條件下解離、重組的特性，將一條已知的單鏈DNA或RNA用同位素或非放射性核素標(biāo)記后作為探針，根據(jù)堿基配對(duì)原則，與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的單鏈DNA或RNA配對(duì)，形成核酸雜交體，然后通過標(biāo)記物來檢測(cè)待定的核酸。(2)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）： 它是一種快速體外擴(kuò)增特異性DNA片段的新技術(shù)。(使待測(cè)的DNA擴(kuò)增109倍，使標(biāo)本中極其微量的核

3、酸被檢出。) 該法是先將待檢標(biāo)本中核酸提取，加熱變性為單鏈作為模板,然后加入與模板基因有互補(bǔ)關(guān)系的引物、合成寡核苷酸所需的原料及DNA多聚酶等，在一定溫度條件下使其按模板序列合成新的互補(bǔ)鏈。經(jīng)過2530個(gè)循環(huán)后，就可使DNA片段擴(kuò)增109倍，大大提高了檢測(cè)率此法敏感性極高，但需注意因操作時(shí)污染而出現(xiàn)的假陽(yáng)性。 3.基因芯片技術(shù)（microarray chip）病毒的快速診斷光鏡-包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子生物學(xué)技術(shù)雜交PCR第二節(jié) 病毒感染的防治免疫預(yù)防人工主動(dòng)免疫滅活疫苗：乙腦疫苗狂犬疫苗流感滅活疫苗HAV，HBV疫苗等減毒活疫苗：脊髓灰質(zhì)炎疫苗麻疹疫苗腮腺炎疫苗風(fēng)疹疫苗HAV疫苗 亞

4、單位疫苗：基因工程疫苗合成肽疫苗人工被動(dòng)免疫常用制劑有：抗病毒免疫血清，現(xiàn)有抗麻疹、 抗狂犬病、抗乙型腦炎免疫血清等，這些免疫血清具有顯著的預(yù)防作用； 人免疫球蛋白制劑，包括人血清丙種球蛋白、胎盤球蛋白 特異性免疫球蛋白 病毒感染的治療1抗病毒的化學(xué)制劑 目前抗病毒化學(xué)藥物主要有核苷類藥物。（1）核苷類藥物：通過阻抑子代病毒基因的合成與表達(dá)，抑制病毒復(fù)制 .常用藥物有:用于DNA病毒感染:阿糖腺苷、碘尿苷、無(wú)環(huán)鳥苷、丙氧鳥苷，；用于HIV感染:疊氮胸苷（AZT）廣譜抗病毒:3-氮唑核苷，對(duì)多種RNA或DNA病毒有抑制作用。（2）病毒蛋白酶抑制劑：通過抑制病毒蛋白酶的活性，阻止病毒的復(fù)制.常用藥物有印地那韋、利多那韋等，對(duì)HIV有一定抑制作用。（3）其它抗病毒藥物：金剛烷胺或甲基金剛烷胺用于甲型流感的治療，甲酸磷霉素用于皰疹病毒感染的治療。2干擾素及干擾素誘生劑 : 干擾素具有廣譜抗病毒作用，主要用IFN-，副作