機能實驗學教學課件：第5次課 缺氧與耐缺氧

1、節(jié)次：機能實驗學2 第5次課內容：缺氧與耐缺氧學時：4h課程信息缺氧與耐缺氧3實驗目的復制各種缺氧的動物模型，掌握缺氧的分類、特點；觀察缺氧時機體循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的變化；了解中樞神經(jīng)系統(tǒng)機能狀態(tài)和環(huán)境溫度對缺氧耐受性的影響4攜攝運用實驗原理定義：當組織、細胞得不到充足的氧，或不能充分利用氧，組織、細胞的代謝、功能和形態(tài)結構發(fā)生異常變化的病理過程稱為缺氧。5實驗原理6乏氧性缺氧：PO2降低血液性缺氧：Hb質/量改變（貧血，CO中毒，亞硝酸鹽中毒）循環(huán)性缺氧：血量減少（組織缺血/淤血）組織性缺氧： 氧利用障礙（氰化鉀，疊氮鈉中毒）實驗原理實驗材料動物：小白鼠，雌雄不拘，體重18g-22g。藥品與

2、試劑：1%苯甲酸鈉咖啡因注射液、0.1%復方冬眠靈注射液（每1ml含冬眠靈和非那根各1mg） 、苦味酸、甲酸、濃硫酸、5%氫氧化鈉、5%亞硝酸鈉、1%美蘭、0.05%疊氮鈉。 8實驗方法一、乏氧性缺氧小鼠1：0.1ml/10g劑量腹腔注射冬眠靈，放入一缺氧瓶（瓶中事先加入2粒鈉石灰），10分鐘后蓋緊瓶塞，放入0-4冷水，開始計時。 小鼠2：0.1ml/10g劑量腹腔注射咖啡因，放入一缺氧瓶，5分鐘后蓋緊瓶塞，放入38-40熱水，開始計時。 9實驗方法二、CO中毒小鼠3：一氧化碳發(fā)生器，甲酸（下，3-4ml）+濃硫酸（上，2-3ml），小鼠放入廣口瓶，從濃硫酸開始滴下時計時至小鼠死亡，心臟取血小

3、鼠4：正常小鼠頸椎脫位法處死，心臟取血 兩滴血分別滴加等量氫氧化鈉觀察顏色變化10材料與方法三、亞硝酸亞中毒小鼠5：腹腔注入5%亞硝酸鈉0.1ml/10g，緊接著腹腔注射1%美蘭0.2ml/10g。 小鼠6：腹腔注入5%亞硝酸鈉0.1ml/10g 四、疊氮鈉中毒小鼠7：腹腔注射0.05%疊氮鈉溶液（0.4ml/10g）實驗方法觀察項目 藥物注射后小鼠呼吸，運動情況。記錄各組小鼠存活時間。小鼠口唇，耳廓顏色。尸檢取血，對比血液顏色。l. 小白鼠腹腔注射，宜從左下腹進針，避免傷及肝臟，也應注意勿將藥液注入腸腔。 2. 注意強調兩個缺氧瓶容積相等，即瓶子大小和瓶塞大小均要一致。3. 缺氧瓶須密閉，蓋

4、緊瓶塞前先放入一小袋鈉石灰(約 5g)，以吸收小白鼠呼出的CO2。4. 復制CO中毒模型時，通入CO濃度不宜過高，注意控制濃硫酸的滴入速度， 防止小白鼠迅速死亡，影響觀察。5. 小白鼠死后立即心臟取血，加NaOH的量與血液的量相仿。6. 氰化物為劇毒，用后要洗手。CO為有毒氣體，實驗中通風要好，注意安全，實驗結束后應妥善處理死亡動物。 【注意事項】實驗結果一般行為呼吸皮膚、粘膜、血液的顏色存活時間冬眠靈，0-4咖啡因38-40一氧化碳正常對照亞硝酸鈉亞硝酸鈉美蘭疊氮鈉一般行為呼吸皮膚、粘膜、血液的顏色存活時間冬眠靈，0-4青紫20分鐘咖啡因38-40青紫10分鐘一氧化碳櫻桃紅NaOH后不變色5

5、分鐘正常對照紅加NaOH后棕褐亞硝酸鈉棕褐5分鐘亞硝酸鈉美蘭藍不死亡疊氮鈉很紅數(shù)十秒結果討論（1）小鼠注射冬眠靈（2）小鼠注射咖啡因 （3）小鼠CO中毒 （4）小鼠亞硝酸鹽中毒+美蘭 （5）小鼠注射疊氮鈉中毒 冬眠靈抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)加上寒冷環(huán)境，代謝率降低，單位時間耗氧量減少，所以同樣量的氧，利用時間較長。 咖啡因興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)加上高溫環(huán)境，代謝率增加，單位時間耗氧量增加，所以同樣量的氧，利用時間較短。 CO與Hb親和力比氧大210倍，故在較低濃度即優(yōu)先于氧合，使血液攜氧能力顯著下降。CO通過使紅細胞中2,3-DPG降低及與Hb結合后的別構效應使氧離曲線左移，使HbO2釋放氧能力下降。 加入NaOH后血液顏色改變的原因：HbCO性質穩(wěn)定所以不變化，正常血液中的血紅蛋白反應生成MHb，由于MHb中含三價鐵離子故呈棕褐色或鐵銹色。 亞硝酸鈉有微弱的氧化性可以將血液中的Hb氧化為MHb，使血液攜氧能力降低，同時可通過變構效應使氧離曲線左移釋氧減少。 美