油菜的自交和雜交技術(shù)

1、實驗七 油菜的自交和雜交技術(shù)一、目的了解油菜的花器構(gòu)造和開花習(xí)性；通過練習(xí)，初步掌握油菜的自交和雜交技術(shù)。二、內(nèi)容說明1、花器構(gòu)造 油菜屬十字花科（Cruciferae）蕓薹屬（Brassica），常異花授粉（甘 藍型和芥菜型，天然異交率一般為5%10%，最高不超過30%）或異花授粉（白菜 型，天然異交率一般為80%90%以上）作物。油菜的花序為總狀無限花序，由主 花序和分枝花序組成。在花序上互生許多單花，花由花柄、花萼、花冠和雄蕊等 組成?；ò?片與花萼4片互生，作十字形排列，稱十字花冠。雄蕊6枚，側(cè)面 的一對為短花絲，中央的兩對為長花絲，特稱四強雄蕊。雌蕊由2心皮組成，由 假隔膜（胚座框）

2、將子房隔成兩室。胚珠著生在心皮的邊緣，為側(cè)膜胚座。（圖7-1）甘整51白林球53圈7-1油菜的花橘梅瞳2、開花習(xí)性油菜的開花順序是先主花序，而后第一分枝、第二分枝花序依 次由上而下開放，同一花序的花朵無論是主花序還是分枝花序都是由下向上依次 開放。油菜單株花期的長短因品種、氣候和裁培條件而異，一般為20-30天， 每天開花時間一般在上午7時到12時，以9-11時開花最盛。油菜開花散粉的 最適相對濕度為75%85%，最適溫度約為1418C。10C以下開花數(shù)減少，5C 以下一般不開花。油菜花的雌蕊較雄蕊先熟，且生活力較強，開花前后7天內(nèi)柱頭均具有受精能力， 但以23天內(nèi)受精結(jié)實率最高。油菜的花粉落

3、在柱頭上45分鐘后即可萌發(fā)，經(jīng) 1824小時完成受精過程。3、油菜的自交不親和性在油菜雜種優(yōu)勢的利用上，可用優(yōu)良的自交不親和系作 母本，優(yōu)良品種作父本，產(chǎn)生強優(yōu)勢的雜交種用于生產(chǎn)，以提高油菜的產(chǎn)量。由 于甘藍型和白菜型油菜的自交不親和系具有自交不親和基因，在開花前12天 柱頭上可形成一種由特殊蛋白質(zhì)組成的“隔離層”，它作為一種“感受器”能識 別和阻止相同基因型的花粉發(fā)芽，一般套袋自交很難得到種子，因此自交不親和 系的保持和繁殖就必須在柱頭未形成這類蛋白質(zhì)的蕾期選株，并采用人工剝蕾后 套袋自交或其它方法進行。三、材料儀器藥品1、材料不同甘藍型油菜(B.napus L.)或白菜型油菜(B.camp

4、estris L.)品種。2、儀器用具喉頭噴霧器、剪刀、鑷子、培養(yǎng)皿、玻璃紙袋(10cmX30cm)、回 形針、塑料牌、鉛筆。3、藥品試劑70%酒精、10%NaCL。四、方法步驟(一)自交技術(shù)1、選株隔離自交前1天，選具有該品種典型性狀、健壯無病蟲害的植株，用鑷子摘除花 序上已開放的花朵，然后套袋隔離。次日上午9時后，取下隔離袋，用鑷子摘下主花序上當(dāng)天開放的花朵，置于 培養(yǎng)皿中，加蓋，待授粉時使用。2、剝蕾授粉整序用鑷子摘除同一株上將開放的較大的花蕾和花序頂端幼小花蕾，剩下開 花前24天的15-20個花蕾供剝蕾授粉。授粉用鑷子將花瓣逐一剝開，使柱頭外露(可以不去雄)，隨即用鑷子夾取培 養(yǎng)皿中已

5、開裂散粉的花藥，在剝開外露的柱頭上輕輕涂抹授粉。若有幾個組合同時授粉，每授完一個組合后用70%酒精棉球擦手和鑷子，殺死所 蘸著的花粉。3、套袋掛牌授粉后重新套袋，下端袋口斜折，用回形針固定，注意切忌將回形 針夾住莖稈，并在花序基部掛上塑料牌，寫明品種代號或名稱、自交日期和操作 者姓名。4、管理授粉套袋后，每隔23天提升紙袋，以利花序伸長和避免穿破紙袋，約1周后取下紙袋，以利角果和種子的發(fā)育。5、收獲 待角果成熟后，摘下整個花序連同塑料牌一起放入尼龍絲網(wǎng)袋中，曬十 脫粒后，將種子連同塑料牌一起放入種子袋中，寫明品種代號或名稱，妥為貯存， 并在工作本上作好記錄。除上述剝蕾自交外，近年來也有探索用噴

6、灑化學(xué)藥劑使隔離層蛋白溶解、沉淀和 變性，以克服自交不親和，如用10%NaCl噴灑當(dāng)天開放的花朵，510分鐘后授 以同株上的花粉，也可獲得自交種子。(二)雜交技術(shù)父本套袋隔離要雜交前1天，選具有父本品種典型性狀、健壯無病蟲害的植 株，用鑷子摘去花序上已開放的花朵，然后套袋隔離，以供采粉。母本選株整序在父本套袋隔離的同時，選具有母本品種典型性狀、健壯無病 蟲害的植株，用鑷子摘去花序上已開放的花朵和花序頂端的幼小花蕾，剩下次日 即將開放(花萼已裂開、微露黃色)的1015個花蕾供去雄。去雄用左手固定花序和花蕾，右手用鑷子分開萼片和花瓣，小心地將6枚雄 蕊摘去，切勿損傷柱頭和余留花藥，如遇花藥破裂，應(yīng)將該花去除，并將鑷子尖 浸入酒精中，以殺死所蘸花粉。套袋掛牌待所有花蕾去雄完畢后，立即套上紙袋，下端袋口斜折，用回形針 固定。授粉授粉于去雄后的當(dāng)天或次日選晴朗天氣進行。采粉用鑷子摘取事先已套袋父本花藥已開裂的花朵，置于培養(yǎng)皿中，加蓋。授粉 取下母本株上的紙袋，用鑷子夾取培養(yǎng)皿中的花藥，在母本柱頭上輕輕 涂抹授粉。授粉后立即套袋隔離，掛上塑料牌，寫明組合代號或名稱、雜交日期 和操作者姓名