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1、醫(yī)院感染環(huán)境監(jiān)測(cè)微生物標(biāo)本采集檢驗(yàn)科 徐東雪環(huán)境監(jiān)測(cè)類環(huán)境:采用空氣潔凈技術(shù)的診療場(chǎng)所,分潔凈手術(shù)部和其他潔凈場(chǎng)所類環(huán)境:非潔凈手術(shù)部、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、血液病病區(qū)、燒傷病房 等保護(hù)性隔離病區(qū)、重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)、新生兒室等類環(huán)境:母嬰同室、消毒供應(yīng)中心的檢查包裝滅菌區(qū)和無菌物品存放區(qū)、血液透析室、其他普通住院病區(qū)類環(huán)境:普通門(急)診及其檢查、治療室、感染性疾病科門診和病區(qū)各類環(huán)境空氣、物體表面菌落總數(shù)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境類別空氣平均菌落數(shù)物體表面平均菌落數(shù)CFU/皿CFU/立方米CFU/平方厘米類環(huán)境=4.0(30min)=150=5.0類環(huán)境=4.0(15min)=5.0類環(huán)境=4.0(5min)=10.
2、0類環(huán)境=4.0(5min)=10.0CFU/皿為平板暴露法,CFU/立方米為空氣采樣器法。平板暴露法檢測(cè)時(shí)的平板暴露時(shí)間。衛(wèi)生手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)=10CFU/平方厘米外科手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)=5CFU/平方厘米環(huán)境監(jiān)測(cè)的采樣方法空氣采樣時(shí)間:在消毒或規(guī)定的通風(fēng)換氣后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣方法: 、類環(huán)境采用平板暴露法室內(nèi)面積30平方米,設(shè)4角及中央5點(diǎn),4角的布點(diǎn)部位應(yīng)距墻壁1m處采樣高度為距地面0.8m-1.5m,采樣時(shí)將平皿蓋打開,扣放于平皿旁,暴露規(guī)定時(shí)間( 類環(huán)境15min)后蓋上平皿蓋及時(shí)送檢送檢平皿置于恒溫箱中培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)采樣后應(yīng)盡快對(duì)標(biāo)本進(jìn)
3、行相應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè),送檢時(shí)間不得超過4h,若標(biāo)本保存于0-4度時(shí),送檢時(shí)間不得超過24h環(huán)境監(jiān)測(cè)的采樣方法表面采樣時(shí)間:潛在污染區(qū)或者污染區(qū),消毒后采樣面積:被采表面100平方厘米,取100平方厘米方法:用5cm*5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面,用浸有無菌生理鹽水的棉拭子1支在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次,并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子,連續(xù)采樣1-4個(gè)規(guī)格板面積,剪掉手接觸部分,將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管中送檢。 門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體表面。環(huán)境監(jiān)測(cè)的采樣方法醫(yī)務(wù)人員手采樣時(shí)間:采取手衛(wèi)生以后,在接觸病人或從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣方法:將浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子一支在雙手指曲面從
4、指跟到指端來回涂擦各兩次(一只手涂擦面積約30平方厘米),并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子,減去手接觸部位,將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管內(nèi)送檢。醫(yī)院感染醫(yī)院感染:是指住院病人在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染,包括在住院期內(nèi)發(fā)生的感染和在醫(yī)院內(nèi)獲得出院后發(fā)生的感染,但不包括入院前已開始或入院時(shí)已存在的感染。醫(yī)院工作人員在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染也屬于醫(yī)院感染。下列情況屬于醫(yī)院感染1、無明確潛伏期的感染,規(guī)定入院48小時(shí)后發(fā)生的感染為醫(yī)院感染,有明顯潛伏期的感染,自入院時(shí)起超過平均潛伏期后發(fā)生的感染為醫(yī)院感染。2、本次感染直接與上次住院有關(guān)。3、在原有感染基礎(chǔ)上出現(xiàn)其他部位新的感染(除外膿毒血癥遷徙灶),或在原感染已知病原
5、體基礎(chǔ)上又分離出新的病原體(排除污染和原來的混合感染)的感染。4、新生兒在分娩過程中和產(chǎn)后獲得的感染。5、由于診療措施激活的潛在性感染,如皰疹病毒、結(jié)核桿菌等的感染。6、醫(yī)務(wù)人員在醫(yī)院工作期間獲得的感染。幾點(diǎn)說明1、醫(yī)院感染的診斷并不全部都依賴實(shí)驗(yàn)室的診斷,如肺部感染。血培養(yǎng)是菌血癥確診依據(jù),但不一定都能獲得陽性培養(yǎng),尤其在大量使用抗菌藥物后,故可診斷為臨床菌血癥。2、醫(yī)院感染檢測(cè)中以顯性感染為主,但有流行病學(xué)意義的多重耐藥菌株的攜帶者可包括在內(nèi)。3、痰、尿(接尿者)、燒傷創(chuàng)面可以存有多種細(xì)菌,因此連續(xù)幾天幾次的培養(yǎng)有不同的細(xì)菌生長(zhǎng)只算1次感染。4、病人發(fā)生急性多發(fā)性創(chuàng)傷、燒傷和急性腦卒中,幾
6、小時(shí)內(nèi)即入院,病前健康無感染。這類病人發(fā)生感染即使發(fā)生在48小時(shí)以內(nèi)也列入醫(yī)院感染,因?yàn)槊庖吖δ艿拖抡咦陨砑?xì)菌短期即可感染。5、感染性疾病本身并發(fā)癥不列入醫(yī)院感染,如闌尾炎穿孔并腹膜炎,菌血癥并肝膿腫。另外臨近部位感染的自然擴(kuò)散也不列入醫(yī)院感染統(tǒng)計(jì),如肺部感染所致膿胸。醫(yī)院感染2006年衛(wèi)生部頒布的醫(yī)院感染管理辦法中規(guī)定:醫(yī)院感染暴發(fā)是指在醫(yī)療機(jī)構(gòu)或其科室的患者中,短時(shí)間內(nèi)發(fā)生3例以上同種同源感染病例的現(xiàn)象。2009年頒布的醫(yī)院感染暴發(fā)報(bào)告及處置管理規(guī)范中明確:疑似院感暴發(fā)是指在醫(yī)療機(jī)構(gòu)或其科室的患者中,短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)3例以上臨床癥候群相似,懷疑有共同感染源的感染病例,或者3例以上懷疑有共同感染
7、源或感染途徑的感染病例現(xiàn)象。醫(yī)院感染表現(xiàn)形式同種病原體 ,同一感染部位,同一醫(yī)療機(jī)構(gòu)血培養(yǎng)臨床采樣指征:菌血癥:患者出現(xiàn)發(fā)熱(38)或低溫(36),或寒戰(zhàn);白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多(計(jì)數(shù)10.0109/ L,中性粒細(xì)胞增多;或白細(xì)胞計(jì)數(shù)減少(計(jì)數(shù)38)、寒顫或低血壓等全身感染表現(xiàn),不能除外由血管內(nèi)導(dǎo)管引起感染可能的,應(yīng)多次進(jìn)行血培養(yǎng)檢測(cè)。血培養(yǎng)標(biāo)本采集:菌血癥:盡可能在患者寒戰(zhàn)開始時(shí),發(fā)熱高峰前30-60分鐘內(nèi)采血。盡可能在使用抗菌藥物治療前采集血培養(yǎng)標(biāo)本;如患者已經(jīng)使用抗菌藥物治療,應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)。采血部位:通常為肘靜脈,切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采血。除非懷疑有導(dǎo)管相關(guān)的血流感染,否則不
8、應(yīng)從留置靜脈或動(dòng)脈導(dǎo)管取血,因?yàn)閷?dǎo)管常伴有定植菌存在。采血工具:真空血培養(yǎng)瓶,同一部位采集兩瓶血培養(yǎng)時(shí)不建議更換針頭。采血次數(shù)、血培養(yǎng)瓶選擇:對(duì)于成人患者,應(yīng)同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本;每個(gè)部位應(yīng)需氧和厭氧培養(yǎng)各一瓶。對(duì)于兒童患者,應(yīng)同時(shí)分別在兩個(gè)部位采集血標(biāo)本,分別注入兒童瓶,厭氧瓶一般不需要,除非懷疑患兒存在厭氧菌血流感染。采血量:采血量是影響血培養(yǎng)檢出陽性率的重要因素,采血量過少會(huì)明顯降低血培養(yǎng)陽性率。成人每次每培養(yǎng)瓶應(yīng)采血5-10ml注入成人瓶;嬰幼兒根據(jù)孩子的體重確定采血總量,每培養(yǎng)瓶(兒童瓶)采血2-4ml。皮膚、血培養(yǎng)瓶消毒:為減少皮膚、培養(yǎng)瓶口等對(duì)血培養(yǎng)造成的污染,在穿刺前,
9、應(yīng)對(duì)皮膚和培養(yǎng)瓶口進(jìn)行消毒并充分干燥,以減少假陽性的發(fā)生機(jī)率。避免采血管內(nèi)空氣注入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶。避免在靜脈留置導(dǎo)管連接處(如肝素帽處)采血標(biāo)本,避免標(biāo)本污染。血培養(yǎng)感染性心內(nèi)膜炎建議在經(jīng)驗(yàn)用藥前30分鐘內(nèi) 在不同部位采集2-3套外周靜脈血培養(yǎng)標(biāo)本。 如果24小時(shí)內(nèi)3套血培養(yǎng)標(biāo)本均為陰性,建議再采集3套血培養(yǎng)標(biāo)本送檢。懷疑左心心內(nèi)膜炎時(shí),采集動(dòng)脈血提高血培養(yǎng)陽性率。導(dǎo)管相關(guān)血流感染:分為保留導(dǎo)管和不保留導(dǎo)管兩種情況。保留導(dǎo)管:分別從外周靜脈和導(dǎo)管內(nèi)各采取1套血培養(yǎng)標(biāo)本,在培養(yǎng)瓶上標(biāo)注采集部位,送往微生物實(shí)驗(yàn)室,同時(shí)進(jìn)行上機(jī)培養(yǎng)。2套血培養(yǎng)檢出同種細(xì)菌,且來自導(dǎo)管的血培養(yǎng)標(biāo)本報(bào)陽時(shí)間比來自外周的血
10、培養(yǎng)標(biāo)本報(bào)陽時(shí)間早2小時(shí)以上,可診斷導(dǎo)管相關(guān)血流感染。不保留導(dǎo)管:在外周靜脈采集2套血培養(yǎng)標(biāo)本。同時(shí),通過無菌操作剪取已拔出的導(dǎo)管尖端5cm,在血平板上交叉滾動(dòng)4次進(jìn)行送檢?;虿捎贸曊鹗幏羧【航臃N。從導(dǎo)管尖端和外周血培養(yǎng)培養(yǎng)出同種同源細(xì)菌,且導(dǎo)管尖端血平皿的菌落計(jì)數(shù)超過15CFU有意義。血培養(yǎng)標(biāo)簽和申請(qǐng)單:每套血培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽應(yīng)有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,并注明標(biāo)本采集時(shí)間和部位。如疑似感染性心內(nèi)膜炎或疑似導(dǎo)管相關(guān)血流感染患者的標(biāo)本,申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,一定要注明疑似診斷。標(biāo)本運(yùn)輸:血液標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,最好在2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。不能及時(shí)送檢者,應(yīng)置室溫暫存。血培養(yǎng)瓶接種前后都禁止放
11、冰箱。運(yùn)送的裝置要足夠安全,避免血培養(yǎng)瓶的運(yùn)送過程中因碰撞發(fā)和破裂。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn):由于血培養(yǎng)標(biāo)本采取不易,且血流感染患者往往病情急重,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡可能接受血培養(yǎng)標(biāo)本,并盡快進(jìn)行培養(yǎng)檢測(cè)。除非以下幾種情況:血培養(yǎng)瓶破裂、滲漏;血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)注入非無菌標(biāo)本;呼吸道標(biāo)本 咽拭子標(biāo)本咽拭子標(biāo)本僅用于診斷上呼吸道感 染,常規(guī)僅報(bào)告A群鏈球菌。臨床采樣指征: 突發(fā)的咽痛、扁桃體腫大、頸部或頜下淋巴結(jié)腫痛,常伴有發(fā)熱,通常沒有咳嗽和明顯的鼻溢。 Centor標(biāo)準(zhǔn)可作為A群鏈球菌上呼吸道感染的臨床預(yù)測(cè)指標(biāo)。 Centor標(biāo)準(zhǔn)包括下列4項(xiàng)內(nèi)容:扁桃體膿性滲出;頸部或頜下淋巴結(jié)腫大伴壓痛;發(fā)熱;無咳嗽。對(duì)符合3條或以
12、上Centor標(biāo)準(zhǔn)的成人患者建議進(jìn)行咽拭子培養(yǎng)。標(biāo)本采集囑病人張口發(fā)“啊”音,以暴露咽喉部,必要時(shí)用壓舌板;取出咽拭子中的無菌長(zhǎng)棉簽,快速擦拭兩側(cè)腭弓和咽、扁桃體的分泌物,扁桃體有膿點(diǎn)時(shí)最好擠破膿點(diǎn)并采集膿性物,將棉簽插入運(yùn)送管,蓋緊送檢。標(biāo)簽和申請(qǐng)單申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測(cè)目的,一定要注明標(biāo)本采集時(shí)間。標(biāo)本盒上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明標(biāo)本采集時(shí)間、檢測(cè)目的。標(biāo)本運(yùn)送 咽拭子標(biāo)本的運(yùn)送宜采用帶保濕功能的運(yùn)送培養(yǎng)基,避免由于送檢時(shí)間過長(zhǎng)而干燥。如未采用運(yùn)送培養(yǎng)基,應(yīng)于半小時(shí)內(nèi)送檢。即使采用運(yùn)送培養(yǎng)基,室溫保存也不應(yīng)超過24小時(shí)。呼
13、吸道標(biāo)本 痰液標(biāo)本 痰培養(yǎng)僅用于下呼吸道感染,主要是肺部感染的診斷。但它不是診斷肺部感染的最佳標(biāo)本。血培養(yǎng)、肺泡灌洗液或經(jīng)氣管吸取物的培養(yǎng)結(jié)果更加準(zhǔn)確。痰標(biāo)本不能進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)。 痰標(biāo)本采集前,要判斷患者是否有能力配合完成深部咳痰。要向患者充分說明口腔清潔、深咳、避免口咽部菌群污染的意義,指導(dǎo)患者如何正確留取痰標(biāo)本?;颊邞?yīng)在醫(yī)生或護(hù)士直視下留取痰液標(biāo)本。 咳嗽、膿性痰,伴有發(fā)熱,影像學(xué)檢查出現(xiàn)新的或擴(kuò)大的浸潤影;氣道開放患者,出現(xiàn)膿痰或血性痰;考慮下呼吸道感染患者采集痰液標(biāo)本,同時(shí)送血培養(yǎng)標(biāo)本。采集要求 由于肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌等苛養(yǎng)菌是最常見的肺部感染病原體,標(biāo)本盒內(nèi)細(xì)菌在室
14、溫環(huán)境下很容易自溶死亡,如不能在采集標(biāo)本后2小時(shí)內(nèi)接種將明顯影響檢出率。因此痰標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)十分關(guān)鍵,應(yīng)嚴(yán)格遵循以下原則采集標(biāo)本:爭(zhēng)取首劑抗菌藥物治療使用前及更換抗菌藥物前采集;標(biāo)本采集后保證2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室并得到接種;只要有可能得到合格的痰標(biāo)本,應(yīng)馬上采集、送檢;宜在醫(yī)護(hù)人員直視下留取合格痰標(biāo)本;送檢痰標(biāo)本后三天內(nèi)不主張?jiān)俅嗡蜋z。標(biāo)本采集 采集前準(zhǔn)備無菌杯(螺口、有蓋、密封)、清水。并向患者提供口頭及書面采樣指導(dǎo),以保證患者充分理解口腔清潔、深咳、避免口咽部菌群污染的意義和方法。用清水漱口2-3次,有假牙者應(yīng)先取下假牙;再用力咳嗽咳出深部痰液;將痰液咳入無菌杯內(nèi);蓋好并擰緊杯蓋,盡快送達(dá)實(shí)
15、驗(yàn)室。標(biāo)簽及申請(qǐng)單 申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測(cè)目的,標(biāo)識(shí)是普通培養(yǎng)、抗酸桿菌還是真菌培養(yǎng)。一定要注明標(biāo)本采集時(shí)間。標(biāo)本盒上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明痰標(biāo)本采集時(shí)間和檢測(cè)目的。痰液標(biāo)本標(biāo)本運(yùn)輸標(biāo)本采集后需盡快送到實(shí)驗(yàn)室,不能超過2小時(shí)。不及時(shí)運(yùn)送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡;不能及時(shí)送達(dá)或待處理標(biāo)本應(yīng)置于4冰箱保存(疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列),以免雜菌生長(zhǎng)。但不能超過24小時(shí);實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量不合格標(biāo)本:顯微鏡下細(xì)胞學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)標(biāo)本受口咽部菌群污染。合格痰標(biāo)本應(yīng)鱗狀上皮細(xì)
16、胞25個(gè)/低倍視野,或白細(xì)胞:鱗狀上皮細(xì)胞2.5;沒有標(biāo)簽或標(biāo)簽貼錯(cuò);標(biāo)識(shí)信息不明,未提供采集時(shí)間及送檢目的等;超過2小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,且沒有正確保存的標(biāo)本;運(yùn)送容器有滲漏;同一天同一項(xiàng)目重復(fù)送檢的痰標(biāo)本。支氣管鏡-肺泡灌洗液(BAL)支氣管鏡-肺泡灌洗液(BAL) 采集肺泡灌洗液進(jìn)行檢測(cè),可減少口咽部菌群的污染,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。須做定量或半定量接種培養(yǎng)。臨床采樣指征 對(duì)于疑似肺炎患者,如有機(jī)會(huì)進(jìn)行氣管鏡檢查,則可同時(shí)采集肺泡灌洗液進(jìn)行培養(yǎng)。不能進(jìn)行深部咳痰的患者,也可考慮通過氣管鏡獲取標(biāo)本。標(biāo)本采集 患者咽喉局部麻醉后,導(dǎo)入纖維支氣管鏡。通過纖維支氣管鏡對(duì)病灶所在支氣管以下肺段或亞肺段水
17、平,用37或室溫?zé)o菌生理鹽水多次灌洗,每次注入2060ml(常規(guī)進(jìn)行45次),直到總共灌洗100300ml,并充分吸引回收,從回收液中取出10ml標(biāo)本,放入無菌管中,旋緊蓋子,即刻送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。標(biāo)簽及申請(qǐng)單 申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測(cè)目的,標(biāo)識(shí)是普通培養(yǎng)、抗酸桿菌還是真菌培養(yǎng)。一定要注明標(biāo)本種類為肺泡灌洗液,以及采集時(shí)間。無菌管上的標(biāo)簽要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明標(biāo)本采集時(shí)間、檢測(cè)目的。標(biāo)本運(yùn)輸標(biāo)本采集后需盡快送到實(shí)驗(yàn)室;不要冷藏標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)沒有標(biāo)簽或標(biāo)簽貼錯(cuò);標(biāo)識(shí)信息不明,未提供采集時(shí)間及送檢目的等;無菌管無蓋子,有污染可能;未及時(shí)
18、送至實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本;運(yùn)送容器有滲漏。氣道吸取標(biāo)本氣道吸取標(biāo)本臨床采樣指征 有氣管插管或氣管切開等人工氣道患者,無法自行咳痰,可通過吸痰管從氣道吸取標(biāo)本。標(biāo)本采集 通過氣管內(nèi)插管將一次性無菌吸痰管推進(jìn)呼吸道直至遇到阻力后開始抽吸,留取標(biāo)本在吸痰杯內(nèi)。標(biāo)簽及申請(qǐng)單 每個(gè)標(biāo)本都應(yīng)在申請(qǐng)單上詳細(xì)填寫患者姓名、病歷號(hào)、采集日期時(shí)間、診斷、檢驗(yàn)項(xiàng)目等。在標(biāo)本上粘貼條碼,條碼中應(yīng)包括患者姓名、病歷號(hào)、采集時(shí)間等。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。標(biāo)本運(yùn)輸標(biāo)本采集后需盡快送到實(shí)驗(yàn)室,不能超過2小時(shí)。不及時(shí)運(yùn)送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡;不能及時(shí)送達(dá)或待處理標(biāo)本應(yīng)置于4
19、冰箱保存(疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列),以免雜菌生長(zhǎng)。但不能超過24小時(shí);對(duì)可疑烈性呼吸道傳染病(SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)的患者標(biāo)本,在采集、運(yùn)送或保存過程中必須注意生物安全保護(hù)。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)沒有標(biāo)簽或標(biāo)簽貼錯(cuò);標(biāo)識(shí)信息不明,未提供采集時(shí)間等;超過2小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,且沒有正確保存的標(biāo)本;運(yùn)送容器選擇不當(dāng)或有滲漏;同一天同一項(xiàng)目重復(fù)送檢。尿液標(biāo)本泌尿系統(tǒng)感染可分為單純性尿路感染、復(fù)雜性尿路感染及尿膿毒血癥,診斷主要通過采集尿液標(biāo)本進(jìn)行微生物學(xué)檢測(cè)。其中90%的門診病人和50%左右的住院病人,其病原菌是大腸埃希菌;其致病微生物還包括其它細(xì)菌、念珠菌等。泌尿系統(tǒng)感染微生物學(xué)檢
20、測(cè)的方法為尿培養(yǎng)、免疫學(xué)檢測(cè)等。尿液標(biāo)本通常是無菌的或有暫時(shí)性少量定植菌存在。但在標(biāo)本采集過程中,應(yīng)避免尿液被尿道或尿道周圍的正常菌群污染。臨床采樣指征:當(dāng)患者出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛、血尿、腎區(qū)疼痛等癥狀,同時(shí)可能伴有寒戰(zhàn)、高熱、白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高,懷疑存在泌尿系感染時(shí);尿常規(guī)結(jié)果提示泌尿系感染時(shí);無癥狀的患者不建議常規(guī)進(jìn)行尿培養(yǎng)檢測(cè);留置導(dǎo)尿管患者出現(xiàn)發(fā)熱時(shí)。尿液標(biāo)本標(biāo)本采集:清潔中段尿清潔的中段尿標(biāo)本,是泌尿系感染診斷的主要標(biāo)本;如何避免采集過程中周圍皮膚粘膜及尿道定植菌的污染,是標(biāo)本采集的關(guān)鍵。中段尿標(biāo)本的采集往往由患者獨(dú)立完成,應(yīng)向患者充分說明留取無污染中段尿的意義和具體采集方法。盡可能在未
21、使用抗菌藥物前送檢,晨尿最佳。采集方法如下:女性:在采集標(biāo)本前充分清洗或消毒尿道口部位。分開兩腿;用肥皂水清洗尿道口部位,或用碘酒、碘伏消毒尿道口; 手持采樣杯外側(cè),避免接觸杯口邊緣。先將少量尿液排入廁所,然后用采樣杯采集半杯尿液;將蓋子蓋好、旋緊;檢查杯蓋是否密封,避免溢灑。男性:在采集標(biāo)本前充分清洗尿道口縮回包皮(如果沒有割包皮),充分暴露龜頭;用肥皂清洗尿道口; 手持采樣杯外側(cè),避免接觸杯口邊緣。先將少量尿液排入廁所,然后用采樣杯采集半杯尿液;將蓋子蓋好、旋緊;檢查杯蓋是否密封,避免溢灑。尿液標(biāo)本導(dǎo)尿管采集尿液因存在著極大的污染可能,禁止從集尿袋中采集標(biāo)本,。可直接穿刺導(dǎo)尿管近端側(cè)壁采集
22、尿液標(biāo)本。具體操作如下:夾閉導(dǎo)尿管不超過30分鐘;用酒精棉球消毒清潔導(dǎo)管近端采樣部位周圍外壁;將注射器針頭穿刺進(jìn)入導(dǎo)管腔,抽吸出尿液;收集的尿液置于無菌尿杯或試管中;檢查杯蓋是否密封,避免灑溢。恥骨上膀胱穿刺如需進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)或兒童及其他無法配合獲得清潔尿液標(biāo)本時(shí),應(yīng)采用恥骨上膀胱穿刺;消毒臍部至尿道之間區(qū)域的皮膚;對(duì)穿刺部位進(jìn)行局麻;在恥骨聯(lián)合和臍部中線部位將針頭插入充盈的膀胱;用無菌注射器從膀胱吸取尿液;無菌操作將尿液轉(zhuǎn)入無菌螺口杯,盡快送至實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。尿液標(biāo)本標(biāo)簽及申請(qǐng)單申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,一定注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本留取方式和采集時(shí)間。尿杯上的標(biāo)簽要
23、求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼,注明標(biāo)本種類和采集時(shí)間,此信息尤其重要。標(biāo)本運(yùn)輸尿標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。如不能在采集30分鐘內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),應(yīng)放入4冰箱保存,但也不能超過24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)識(shí)不明,未提供采集時(shí)間及采集方法;標(biāo)本類型與標(biāo)簽信息不符;尿標(biāo)本采集后超過30分鐘送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,且未冷藏保存的;患者集尿袋中的尿液標(biāo)本;申請(qǐng)做厭氧菌培養(yǎng)但未從恥骨弓上穿刺采集尿液。容器破損、尿液滲漏;明顯污染的標(biāo)本;標(biāo)本量太少。腦脊液 腦脊液是診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染最主要的標(biāo)本。臨床采樣指征:臨床出現(xiàn)不明原因的頭痛、發(fā)熱、腦膜刺激征(頸強(qiáng)直、克氏征、布氏征陽性)、腦神經(jīng)病理征象;腦積水;腦性低鈉血癥等癥狀,懷疑中樞神經(jīng)
24、系統(tǒng)感染時(shí)應(yīng)送檢腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本,并同時(shí)送檢血培養(yǎng)標(biāo)本。標(biāo)本采集:懷疑患者細(xì)菌性腦膜炎時(shí),應(yīng)立即采集腦脊液和血培養(yǎng),應(yīng)在抗菌藥物使用前采集。懷疑分枝桿菌、隱球菌或慢性腦膜炎時(shí),可能需多次采集腦脊液標(biāo)本。如懷疑存在顱內(nèi)壓增高時(shí),應(yīng)先行檢查頭顱CT,必要時(shí),可先予以脫水治療再行穿刺。懷疑細(xì)菌性腦膜炎時(shí),建議同時(shí)送檢2-4套血培養(yǎng)。由臨床醫(yī)師采集,嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。消毒采集部位皮膚,通常在第3、4腰椎或第4、5腰椎間隙插入帶有管芯針的空針,進(jìn)針至蛛網(wǎng)膜間隙,拔去管芯針,收集腦脊液5ml10ml,分別置于3支無菌試管中,第一管做化學(xué)或免疫學(xué)檢查,第二管做細(xì)菌學(xué)檢查,第三管做細(xì)胞學(xué)檢查。細(xì)菌學(xué)檢查要求適量
25、標(biāo)本:細(xì)菌1ml,真菌2ml,分枝桿菌2ml。腦脊液采集量不能少于1ml。盡可能多收集腦脊液,可以提升培養(yǎng)的陽性檢出率,尤其是針對(duì)真菌和分枝桿菌的培養(yǎng)。如送檢T-SPOT.TB,還需注意添加肝素抗凝。標(biāo)簽及申請(qǐng)單:標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。血培養(yǎng)瓶及無菌管需清晰標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的、臨床診斷、申請(qǐng)醫(yī)師等。應(yīng)注明是否已經(jīng)使用抗菌素。特殊病原菌檢查如奴卡菌、真菌、分枝桿菌應(yīng)注明。腦室分流的標(biāo)本應(yīng)注明“腦室分流液”,而不是“腦脊液”。標(biāo)本運(yùn)輸:標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,不超過1小時(shí);腦脊液標(biāo)本不可冷藏。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符;樣本外漏
26、、容器破損或明顯受到污染;標(biāo)本量少,送檢延遲,未按規(guī)定保存。胸水胸水胸水以細(xì)菌性胸膜炎最為常見,也可見于膈下炎癥、肺結(jié)核、肺炎、肺結(jié)核等疾病。低蛋白或腫瘤性疾病也可以引起的胸腔積液。臨床采樣指征:患者聽診、影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)胸腔積液,胸腔穿刺后發(fā)現(xiàn)胸腔積液渾濁、乳糜性、血性或膿性,考慮感染性胸腔積液 (肺結(jié)核、肺炎、胸膜炎)患者應(yīng)送檢,進(jìn)行涂片染色、細(xì)菌培養(yǎng)等細(xì)菌學(xué)檢測(cè)。標(biāo)本采集:盡可能在抗菌藥物使用前采集。由臨床醫(yī)師經(jīng)皮穿刺或外科方式獲得;嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。通過影像學(xué)或叩診定位穿刺部位,消毒穿刺部位皮膚,麻醉穿刺部位,用中空孔針穿刺至胸膜腔內(nèi),抽取胸水標(biāo)本;標(biāo)本采集后可注入可直接注入血培養(yǎng)瓶送檢
27、,或?qū)?biāo)本收集到帶螺旋帽內(nèi)無菌管送檢,以便微生物室進(jìn)行涂片檢查。標(biāo)本量分別為細(xì)菌培養(yǎng)1ml,真菌培養(yǎng)10ml,分枝桿菌培養(yǎng)10ml。不要拭子蘸取標(biāo)本。如送檢T-SPOT.TB,還需注意添加肝素抗凝。標(biāo)簽及申請(qǐng)單:申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本來源、檢測(cè)目的,注明胸水的類型、性狀,以及特殊檢驗(yàn)需求。血培養(yǎng)瓶及無菌管要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。需標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的等。標(biāo)本運(yùn)輸:標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,通常室溫15分鐘內(nèi)應(yīng)送至實(shí)驗(yàn)室,若不能及時(shí)送檢,不可冷藏。室溫保存不得超過24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽
28、與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符;樣本外漏、容器破損或明顯受到污染;標(biāo)本量過少,或凝固;送檢延遲,未按規(guī)定保存腹水腹水腹腔積液分為漏出液和滲出液,滲出液多由感染引起,常見細(xì)菌、結(jié)核分枝桿菌、厭氧菌感染。臨床采樣指征:出現(xiàn)但不局限于發(fā)熱、腹脹、腹部疼痛、壓痛、反跳痛;并經(jīng)影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)積液者。 標(biāo)本采集:盡可能在抗菌藥物使用前采集。由臨床醫(yī)師經(jīng)皮穿刺或外科方式獲得;嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作??捎沙暥ㄎ?。消毒采集部位皮膚,麻醉穿刺部位,用中空孔針穿刺,標(biāo)本采集后可注入無菌瓶或無菌試管送檢。標(biāo)簽及申請(qǐng)單:申請(qǐng)單除應(yīng)包括患者基本信息外,注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標(biāo)本來源、檢測(cè)目的,注明腹水的類型、
29、性狀,以及特殊檢驗(yàn)需求。標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一標(biāo)識(shí)號(hào)或條碼。無菌管需標(biāo)注患者基本信息、標(biāo)本來源、標(biāo)本采集時(shí)間、送檢目的等。標(biāo)本運(yùn)輸:標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,通常室溫15分鐘內(nèi)應(yīng)送至實(shí)驗(yàn)室,若不能及時(shí)送檢,不可冷藏。室溫保存不得超過24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)室拒收標(biāo)準(zhǔn)樣本容器上未貼標(biāo)簽,或標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符;樣本外漏、容器破損或明顯受到污染;標(biāo)本量過少,或凝固;送檢延遲,未按規(guī)定保存皮膚、軟組織標(biāo)本皮膚及軟組織感染(SSTI)是致病菌侵犯表皮、真皮和皮下組織引起的炎癥性疾病。皮膚及軟組織感染包括燒傷創(chuàng)面感染、手術(shù)后切口感染、急性蜂窩織炎、外傷感染、咬傷感染及褥瘡感染等。對(duì)大多數(shù)開放性損傷感染部位的取樣,應(yīng)在清潔
30、創(chuàng)面后,在無菌條件下于深層基底或病變中心及邊緣取樣。一、燒傷創(chuàng)面感染標(biāo)本:燒傷患者的創(chuàng)面、組織活檢、血培養(yǎng)等的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)結(jié)果對(duì)臨床醫(yī)生進(jìn)行燒傷感染的診斷和治療十分重要。創(chuàng)面的拭子標(biāo)本或組織活檢標(biāo)本都可以進(jìn)行細(xì)菌定量培養(yǎng)。出現(xiàn)全身感染癥狀時(shí),應(yīng)同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本。在采集表面拭子或組織活檢標(biāo)本之前,應(yīng)對(duì)創(chuàng)面徹底清潔,且未局部應(yīng)用抗菌藥物燒傷創(chuàng)面感染標(biāo)本臨床采樣指征:由于燒傷的早期創(chuàng)面無菌,燒傷后12小時(shí)勿采集標(biāo)本。當(dāng)患者出現(xiàn)發(fā)熱、創(chuàng)面惡化時(shí),考慮采樣標(biāo)本采集 首先應(yīng)應(yīng)無菌生理鹽水或注射用水清潔創(chuàng)面表面拭子:采用無菌棉拭子用力刮取創(chuàng)面,置無菌試管內(nèi),封閉管口;組織細(xì)菌定量培養(yǎng)的標(biāo)本采?。涸跓o菌條件下,切取深度燒傷痂下組織,以0.3-0.5克為宜,厭氧培養(yǎng):不能用拭子,而應(yīng)采用注射器抽吸的方法采集深部、創(chuàng)面邊緣的標(biāo)本。標(biāo)簽及申請(qǐng)單:標(biāo)本標(biāo)識(shí)要求有唯一
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