藥物的雜質(zhì)檢查解析課件

1、藥物分析主講: 羅容珍Pharmaceutical Analysis第三章 藥物的雜質(zhì)檢查7/29/2022Contents一般雜質(zhì)的檢查3藥物雜質(zhì)與限量1雜質(zhì)檢查方法2特殊雜質(zhì)的檢查47/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量一、藥物的雜質(zhì)與純度1.純度（Purities）藥物的純凈程度2.雜質(zhì) (Impurities) 藥物中存在的無(wú)治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。簡(jiǎn)言之:任何影響藥品純度的物質(zhì)。7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量一、藥物的雜質(zhì)與純度藥物的純度需綜合考慮藥物的外觀(guān)性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定,綜合評(píng)定。7/29/20223.藥物純度

2、與試劑純度第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量共同點(diǎn)均規(guī)定所含雜質(zhì)的種類(lèi)和限量.不同點(diǎn)藥物純度從用藥安全、有效和對(duì)藥物穩(wěn)定性等方面考慮,只有合格品和不合格品. 試劑純度是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的加以規(guī)定,它不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用.化學(xué)試劑一般分為4個(gè)等級(jí)基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測(cè)級(jí))、分析純和化學(xué)純化學(xué)試劑不能代替藥品！7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi)雜質(zhì)的來(lái)源生產(chǎn)過(guò)程儲(chǔ)藏過(guò)程合成過(guò)程中，原料不純或反應(yīng)不完全，中間體、副產(chǎn)物在精制中未除盡制劑過(guò)程試劑、溶劑、還原劑殘留異構(gòu)體、多晶體使用的金屬

3、器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量生產(chǎn)過(guò)程中引入雜質(zhì)例子: 雙氯非那胺7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量貯藏過(guò)程中引入的雜質(zhì)例子:抗甲狀腺藥卡比馬唑7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量自然界分布廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)，它們含量的高低與生產(chǎn)工藝水平密切相關(guān)。所以也常稱(chēng)為信號(hào)雜質(zhì)。是指在特定的藥物生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中引入的雜質(zhì)，也稱(chēng)有關(guān)物質(zhì)。這類(lèi)雜質(zhì)隨藥物不同則不同。7/29/2022三、雜質(zhì)的限

4、量(Limit Test)藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾 (parts per million, ppm )雜質(zhì)限量控制限量檢查對(duì)照法靈敏度法比較法定量測(cè)定雜質(zhì)含量注意平行原則第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量對(duì)照法：取一定量的被檢測(cè)雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液和一定量供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)限量。該法應(yīng)該注意平行原則，即供試溶液和對(duì)照溶液應(yīng)在完全相同的條件下反應(yīng)。如加入的試劑、反應(yīng)的溫度、放置的時(shí)間均應(yīng)相等，這樣的結(jié)果才有可比性。7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量靈敏度法：在供試品溶液中加入一定量試劑，在

5、一定條件下反應(yīng)，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。比較法：取供試品一定量依法檢查，測(cè)定特定的雜質(zhì)參數(shù)，與規(guī)定的限量相比，不得更大。雜質(zhì)限量計(jì)算法如下：7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量注意單位統(tǒng)一！7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量示例一 茶苯拉明中氯化物檢查取本品0.30g 置200 ml量瓶中，加水50ml、氨試液3ml和10%硝酸銨溶液6ml，置水浴上加熱5min，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置水浴上加熱15min，并時(shí)時(shí)振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，放置15min，濾過(guò)，取續(xù)濾液25ml置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5min，與標(biāo)準(zhǔn)

6、氯化鈉溶液(10g Cl-/ml)1.5 ml制成的對(duì)照液比較，求氯化物的限量。C=10 g/mlV=1.5 mlS=?7/29/2022第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量示例二谷氨酸鈉中重金屬的檢查：取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖溶液（pH3.5)2ml，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10gPb/ml）所呈的顏色相比不得更深，已知重金屬的限量為百萬(wàn)分之十，求算應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（V）多少毫升？7/29/2022示例三 腎上腺素上酮體的檢查取本品0.2g,置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9-2000)溶解并稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測(cè)定吸光度不得超過(guò)0.05，酮體的百分吸收系數(shù)為435，求

7、酮體的限量V樣品=100 mlC酮體=?S樣品=0.2 g第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量7/29/2022習(xí)題一 磷酸可待因中嗎啡的檢查取本品0.10 g,加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15min，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡試液取無(wú)水嗎啡2.0mg，加鹽酸溶液(9-1000)使溶解成100ml 5.0ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深。問(wèn)限量是多少？第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量7/29/2022習(xí)題二 苯巴比妥鈉中重金屬的檢查取本品2.0g,加水32ml，溶解后緩緩加入1mol/L鹽酸溶液8ml，充分振搖，靜置數(shù)分鐘，濾過(guò)，取濾液20ml，加酚酞指示液1滴

8、與氨試液恰顯粉紅色，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量成25ml，依法檢查，含重金屬不得超過(guò)10ppm。試計(jì)算應(yīng)取得標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(每1ml相當(dāng)于10g Pb)的體積。第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)與限量7/29/2022第二節(jié) 雜質(zhì)的檢查方法一般有化學(xué)方法、色譜方法、光譜方法、物理方法化學(xué)方法：顯色7/29/2022顯色反應(yīng)7/29/2022沉淀反應(yīng)鹽酸肼屈嗪中游離肼的檢查:生成沉淀7/29/2022其它:生成氣體或者滴定法生成氣體:NH3滴定法:如硫酸亞鐵中的高鐵鹽檢查書(shū)上反應(yīng)式有誤，你們發(fā)現(xiàn)了嗎？碘的顯色7/29/2022第二節(jié) 雜質(zhì)的檢查方法二:色譜法是雜質(zhì)檢查的首選方法1TLC法：(1)雜質(zhì)

9、對(duì)照法:取供試品溶液和一定濃度雜質(zhì)對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一薄層板上展開(kāi)，進(jìn)行斑點(diǎn)定位。將雜質(zhì)斑點(diǎn)進(jìn)行對(duì)應(yīng)比較判斷。(2)供試品溶液自身稀釋法:將一定濃度供試品溶液進(jìn)行稀釋并作為對(duì)照溶液，然后與供試品溶液在同一板上展開(kāi)比較。(3)雜質(zhì)對(duì)照品與供試品溶液自身稀釋對(duì)照并用法。(4)對(duì)照藥物法:采用與供試品相同藥物作為對(duì)照，比較斑點(diǎn)、顏色。 并進(jìn)行對(duì)比控制。以后常用術(shù)語(yǔ)，要知道操作方法7/29/2022第二節(jié) 雜質(zhì)的檢查方法HPLC色譜法，注意計(jì)算方法，外標(biāo)法，加校正因子的計(jì)算方法。s：已知藥物對(duì)照品；R：已知雜質(zhì)對(duì)照品；X：未知雜質(zhì)S：另一已知藥物7/29/2022氣相色譜法氣相色譜法：揮發(fā)性雜質(zhì)

10、的檢測(cè)計(jì)算方法：標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法光譜法:看書(shū)7/29/2022第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法(四)熱分析法（Thermal analysis） 測(cè)定物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)與溫度關(guān)系的儀器分析方法。熱重分析法(Thermogravimetric Analysis,TGA)差熱分析法(Differential Thermal Analysis,DTA)差示掃描量熱法(Differential Scanning Calorimetry,DSC)7/29/2022第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法1.熱重分析法 (TGA)供試品TGA熱重曲線(xiàn)WW結(jié)晶水失重臺(tái)階 應(yīng)用熱天平在程序控溫的條件下測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量隨溫度變化的熱分

11、析技術(shù),可計(jì)算出樣品在相應(yīng)溫度范圍內(nèi)減失質(zhì)量的百分率. 7/29/2022特 點(diǎn)分析樣品用量少, 適用于貴重藥材或在空氣中容易氧化藥物干燥失重測(cè)定.靈敏度高,可達(dá)1 g以下 測(cè)定速度快 可用于判斷結(jié)晶水或吸附水,并推斷結(jié)晶水含量.7/29/2022第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法2.差熱分析法 (DTA)在程序控制溫度下，測(cè)量供試品和惰性參比物(常用石英砂、煅制MgO)之間的溫度差與溫度(或時(shí)間) 關(guān)系的熱分析技術(shù)TT供試品發(fā)生吸熱反應(yīng)溫度低于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生吸熱峰參比物質(zhì)供試品發(fā)生放熱反應(yīng)溫度高于參比物質(zhì)從而產(chǎn)生放熱峰7/29/2022DTA用途(1) 熔點(diǎn)測(cè)定熔程T T=07/29/2022(2

12、) 定性和純度檢定根據(jù)峰的數(shù)目、形狀、位置對(duì)供試品進(jìn)行純度判別T供試品對(duì)照品7/29/2022G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()草酸鈣(CaC2O4H2O)的熱重曲線(xiàn)在溫度T1時(shí) CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在溫度T2時(shí) CaC2O4 CaCO3+CO在溫度T3時(shí) CaCO3 CaO+CO27/29/202210090807060DTAT(/min)196233鹽酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲線(xiàn)7/29/20223.差示掃描量熱法 (DSC)第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法 測(cè)量保持供試品和惰性參比物的溫度相同, 系統(tǒng)所

13、需輸給供試品或參比物的能量差隨溫度(或時(shí)間)變化的熱分析技術(shù).樣品參比加熱爐至信號(hào)放大器加熱器導(dǎo)線(xiàn)爐溫控制器7/29/2022用于待測(cè)物質(zhì)的鑒別、晶型鑒別、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測(cè)定，更適合于測(cè)量物質(zhì)在物理變化或化學(xué)變化中焓的變化。不純物質(zhì)的DSC圖t(min)T7/29/2022不同純度苯甲酸的DSC曲線(xiàn)溫度97.2%98.6%標(biāo)準(zhǔn)品低共熔雜質(zhì)7/29/2022應(yīng)用熱分析法檢查藥物純度的條件樣品純度在98.0%以上雜質(zhì)不與主成分反應(yīng)雜質(zhì)不與主成分形成共晶或固熔體雜質(zhì)與熔融試樣有化學(xué)相似性藥物在熔融過(guò)程中化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定藥物如存在多晶現(xiàn)象則必須全部轉(zhuǎn)變成某一晶型7/29/2022甲磺酸二氫麥角

14、毒堿的DSC-TGA曲線(xiàn)50100150200DSCTGA失溶劑失水分解7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一、氯化物檢查法供試品稀HNO310mlH2OAgNO31ml標(biāo)準(zhǔn)溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml 暗處放置5min(避免AgCl分解)7/29/2022二、硫酸鹽檢查法第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法三、鐵鹽檢查法1.硫氰酸鐵法 (Ch.P 和USP采用)紅色7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法供試品顯色，立即與同法制成的對(duì)照溶液比較加水溶解25ml稀HCl 4ml過(guò)硫酸銨 50mg加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液3ml加水定容7/29/20222.巰基醋酸法

15、(BP采用)第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法紅色7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法四、重金屬檢查法 (Pb)7/29/20221.第一法 硫代乙酰胺法第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法條件： 介質(zhì)：醋酸鹽緩沖液 (pH 3.5) 2ml 試劑：硫代乙酰胺(CH3CSNH2) 2ml 雜質(zhì)對(duì)照液：PbNO3 (10g/ml) 靈敏度范圍： 1020 g / 27ml黃色至棕黑色混懸液7/29/20222.第二法 熾灼后的硫代乙酰胺法第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法 緩緩熾灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品 炭化 加熱 HNO3 500-600H2SO4 除盡 放冷 完全灰化 蒸干HCl 2ml

16、 水15ml 中性 按第一法檢查 蒸干 氨試液注意：做空白試驗(yàn) 7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法3.第三法 硫化鈉法7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法五、砷鹽檢查法 (一)古蔡氏法 (Gutzeit) 黃色棕色黑色溴化汞試紙7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法 古蔡氏法檢砷器8cm有孔玻璃旋塞導(dǎo)氣管AsH3發(fā)生瓶溴化汞試紙醋酸鉛棉花(60mg)HCl Zn 粒碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液生成砷斑吸收硫化氫氣體7/29/2022注意事項(xiàng) 砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)干燥、避光、立即比較。 有機(jī)結(jié)合態(tài)的砷應(yīng)破壞后檢查（加酸或堿），但溫度應(yīng)低于600C。 供試品若為鐵鹽，能消耗碘化鉀和

17、氯化亞錫，可加酸性氯化亞錫，使高鐵離子還原后檢查。供試品（硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽）若在酸性條件下生成硫化氫或二氧化硫，與溴化汞試紙作用生成黑色硫化汞和金屬汞，可先用硝酸處理，使其氧化為硫酸鹽。銻鹽含量較多時(shí)，可改用白田道夫（Bettendorff）法檢查砷第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法7/29/2022(二)二乙基二硫代氨基甲酸銀法 Ag(DDC)法 第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法紅色膠態(tài)銀目視比色法510nm 測(cè)定A值7/29/2022線(xiàn)性范圍：110 g/40ml含銻藥物不干擾測(cè)定用于砷鹽的限量檢查和微量砷鹽的含量測(cè)定書(shū)中沒(méi)有D第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法7/29/2022(三)次磷酸法 第三

18、節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法棕色1) 用于硫化物、亞硫酸鹽以及含銻藥物的砷鹽檢查，不產(chǎn)生干擾。2）靈敏度較古蔡法低。7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法六、干燥失重法干燥失重：藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量。 用于檢查藥物中的水分及其他揮發(fā)性物質(zhì)。恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱(chēng)重的差異在0.3mg以下。（干燥至恒重的第二次及以后每次稱(chēng)重都應(yīng)在規(guī)定的條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行）7/29/2022七、水分測(cè)定法第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法A供試品消耗的Fisher試液的體積B空白消耗的Fisher試液的體積F每1mlFisher試劑相當(dāng)于水的重量(mg)W供試品的重量7/29/2022第

19、三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法催化劑硫酸吡啶，不穩(wěn)定氫碘酸吡啶甲基硫酸氫吡啶，穩(wěn)定7/29/2022指示終點(diǎn)方法：Fisher試液顏色 淡黃色紅棕色永停法(以后講）第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法催化劑忘記加甲醇了，起穩(wěn)定作用7/29/2022八、熾灼殘?jiān)?(Residue on ignition) 系指有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物加熱分解后，高溫?zé)胱扑a(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。0.1%0.2%12 mg第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法7/29/2022第三節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法殘留溶劑：在合成原料藥，輔料或制劑生產(chǎn)的過(guò)程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機(jī)溶劑。九、易炭化物檢查法十、殘留溶劑法7/2