非液基脫落細(xì)胞學(xué)講解課件

1、脫落細(xì)胞學(xué) 病理科脫落細(xì)胞學(xué)細(xì)胞固定的方法常見固定問題的處理體腔液樣本的制備 細(xì)胞固定的方法將細(xì)胞標(biāo)本制作完成后，在細(xì)胞濕潤時(shí)，立即放入以醇性溶液為主的固定液（95%酒精、無水酒精、甲醇、乙醚酒精液等）內(nèi)，稱濕固定法。這種方法是目前最好的固定方法，可以完好的保存細(xì)胞內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)，對(duì)正確認(rèn)識(shí)各種細(xì)胞的性質(zhì)，減少細(xì)胞學(xué)的誤診有很大的幫助。細(xì)胞固定的方法此方法在痰涂片、婦科涂片、穿刺物涂片、各種刷片、食道拉網(wǎng)涂片、腫塊印片等水分較少的標(biāo)本上使用非常方便，但在胸腹水、尿、心包積液、腦脊液等含水量較高的標(biāo)本制作時(shí)，需要一定的技術(shù)，才能避免細(xì)胞的脫落，這在后面各章節(jié)具體會(huì)講。細(xì)胞固定的方法細(xì)胞經(jīng)過濕固定后

2、，應(yīng)該直接從固定液內(nèi)拿出放入染色液中，無需水洗或干燥，水洗容易使細(xì)胞脫落，干燥會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞褪變，也就是說無論在固定前還是固定后細(xì)胞干燥都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞褪變。細(xì)胞固定的方法濕固定后的固定液，一定要過濾或更換，防止細(xì)胞的脫落和污染。在固定和染色時(shí)，最好能將痰與其他液體標(biāo)本分開處理，盡可能不要使用相同的蘇木素液或使用前過濾，因?yàn)樘禈?biāo)本很容易吸附脫落的細(xì)胞，造成人為的污染，有時(shí)會(huì)導(dǎo)致誤診 常見固定問題的處理 1、細(xì)胞褪變：通常是由于涂片在干燥過程中，細(xì)胞氧化，導(dǎo)致細(xì)胞褪變。解決方法，在半濕狀態(tài)下立即固定。其二，也可能是由于細(xì)胞不能及時(shí)送檢。解決方法：及時(shí)送檢，或在送檢液體內(nèi)加入福爾馬林（送檢液體：福爾馬林=

3、9：1）。常見固定問題的處理2、細(xì)胞掉片：最常見的原因是涂片上水分福爾馬林太多，導(dǎo)致放入酒精時(shí)有大量細(xì)胞脫落。解決方法，離心后要把試管內(nèi)的液體全部吸干。其次可能是細(xì)胞量太多或玻片不干凈，解決方法，把玻片洗干凈，涂片要薄、均勻。 體腔液樣本的制備 體腔液樣本包括胸水、腹水、心包積液、尿、腎囊腫穿刺液等制作。當(dāng)送檢標(biāo)本為尿液時(shí)，應(yīng)該要求患者排空清晨第一次尿液，因?yàn)檫@時(shí)的尿液中含鹽量高，非上皮性物質(zhì)較多。應(yīng)該選擇第二次以后的中段尿?yàn)榧?。體腔液樣本的制備如果患者有有嚴(yán)重的尿道或陰道炎癥，應(yīng)采用導(dǎo)尿管插管取尿，連續(xù)三天送檢。根據(jù)送檢標(biāo)本沉淀物量的多少，區(qū)別對(duì)待：一、制片1、取液：輕輕的把送檢液體上部倒掉

4、，取下層液體15-50ml二管，放入離心管。2、轉(zhuǎn)速2000/分，5分鐘 。體腔液樣本的制備 3、觀看離心管內(nèi)沉淀物的量：（1）量少：離心后肉眼只能看到少許沉淀，快速倒去上清液，再加入送檢標(biāo)本，重復(fù)離心，反復(fù)多次。最后將上清液倒去，把試管豎直倒立于吸水紙上，用吸水紙吸干管口的水分，然后用吸管吸出沉淀物（濕固定的關(guān)鍵就在于如何把沉淀物上的水分去除干凈，過多的水分會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫片）。體腔液樣本的制備如果沉淀物太少，又沒有多余的標(biāo)本可以反復(fù)離心，或多次離心后細(xì)胞量還是很少，可將上清液倒去后，把試管口向上靜置幾秒，試管壁上的液體會(huì)流入管底，用吸管反復(fù)抽吸這點(diǎn)液體，把管底的細(xì)胞全部洗刷到液體里，然后吸出，

5、放在0.5或1ml的尖底離心管內(nèi)，重新離心，離心完成后，用200微升加樣槍吸取上清液，最后吸出沉淀物。此時(shí)，由于離心管較小，底較尖，細(xì)胞會(huì)非常集中，容易吸出。 體腔液樣本的制備（2）量多：離心后用吸管吸掉上清液，然后，用吸管吸取沉淀物上層細(xì)胞。（3）紅細(xì)胞多的標(biāo)本處理：離心后吸取上層沉淀物，放入酒精冰醋酸液（25%酒精95ml+5ml冰醋酸）內(nèi)，打勻，再離心沉淀。然后，吸取沉淀物。 體腔液樣本的制備4、涂片：吸取沉淀物后，滴在載玻片上，可采用二張載玻片對(duì)拉法。吸取沉淀物涂片的關(guān)鍵：吸取沉淀物內(nèi)不能帶有水分。涂片的關(guān)鍵在于平整，均勻，不能太厚。當(dāng)細(xì)胞太少時(shí)，涂片面積應(yīng)以量為標(biāo)準(zhǔn)，范圍盡可能小而集中，這樣才不容易漏診。然后立即放入95%酒