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文檔簡介

1、植物器官培養(yǎng)植物花器官培養(yǎng)大姚二中 郭躍邦花器官培養(yǎng)是指整個花器及其組成部分(如花托、花瓣、花絲、花柄、子房、花莖和花藥等)的無菌培養(yǎng)背景:花期培養(yǎng)技術(shù)是由Nitsch(1949)建立的花器官培養(yǎng)定義:取材接種培養(yǎng)花過程取材從健壯植株上摘取未開放的花蕾(已開花的不宜用于培養(yǎng),因為消毒和培養(yǎng)都較困難),先用70%酒精消毒20s,再用飽和漂白粉溶液浸10到20min,或用0.1%升汞消毒4到6min,再用無菌水沖洗3到5次接種培養(yǎng)用整個花蕾培養(yǎng)時,只要把花梗插入固體培養(yǎng)基中。若用花器的某個部分,則分別取下,切成0.3cm0.5cm左右的小片,接種到培養(yǎng)基中,放到培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。幾周之后便可以得到完整

2、的植株了。培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基:供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。一般培養(yǎng)溫度下呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基都稱固體培養(yǎng)基;固體培養(yǎng)基的對應(yīng)詞,是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基 . ( 1)基本培養(yǎng)基MS、N6、B5等(2)激素愈傷組織誘導(dǎo):基本培養(yǎng)基+2,4-D分化培養(yǎng)基:基本培養(yǎng)基+6-BA +IAA 生根培養(yǎng)基:生長素培養(yǎng)基的選擇及植物激素對花器官培養(yǎng)的影響培養(yǎng)實例材料的選擇與消毒1,選材母株上取下還未開放的花蕾(以小的為好)2,沖洗在清水中沖洗,把萼片與花柄上的表皮毛輕輕擦去,再用流水沖洗

3、幾次后,再用蒸餾水沖洗3,消毒 在無菌超凈工作臺上,用70%酒精表面消毒半分鐘,再在飽和漂白粉溶液中消毒20min左右,取出用無菌水清洗34次接種培養(yǎng)及植物再生1,用鑷子把花蕾上的萼片與花瓣、雌蕊、雄蕊去掉,2,并切下花托接種于MS+6-BA1mg/L+NAA0.22mg/L的培養(yǎng)基上,3,然后培養(yǎng)在溫度為26左右光照強(qiáng)度為1500lx,光照時間為10h的培養(yǎng)室內(nèi),約兩個星期后即可形成少量愈傷組織,約一個月后便分化出綠色芽點,并抽莖 展葉長大成苗21NO21YES選擇生長末期或已進(jìn)入休眠期的組織 ,則外植體對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)材料越小存活率越低大多數(shù)植物應(yīng)在生長開始的季節(jié)采樣選擇生理年齡小的器官注意事項克服后

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