2022年《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》教案

1、微生物的試驗(yàn)室培育一、課題目標(biāo)明白有關(guān)培育基的基礎(chǔ)學(xué)問(wèn),進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作,進(jìn)行微生物的培育；二、課題重點(diǎn)與難點(diǎn)課題重點(diǎn)：無(wú)菌技術(shù)的操作；課題難點(diǎn)：無(wú)菌技術(shù)的操作；三、課題背景分析課題背景通過(guò)生產(chǎn)中的實(shí)例,第一引導(dǎo)同學(xué)熟識(shí)在微生物的培育過(guò)程中,保持培育物純潔的重要性； 老師不必拘泥于教材中列舉的實(shí)例,可以充分發(fā)揮同學(xué)的主動(dòng)性,讓同學(xué)搜集列舉更多的生產(chǎn)生活中的實(shí)例,從中體會(huì)培育物純潔對(duì)于微生物培育的重要性；在此基礎(chǔ)上,教材讓同學(xué)進(jìn)一步明確培育微生物的要領(lǐng),是為所需要的微生物供應(yīng)良好的生存環(huán)境,同時(shí)阻擋或抑制其他微生物的生長(zhǎng)；四、基礎(chǔ)學(xué)問(wèn)分析與教學(xué)建議（一）培育基學(xué)問(wèn)要點(diǎn)： 1. 培育基的用途和種

2、類,指出培育基可分為液體和固體兩大類；2. 不同的微生物往往需要采納不同的培育基配方；3. 盡管培育基的配方各不相同,但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽；教學(xué)建議：老師在介紹液體和固體培育基時(shí),宜結(jié)合教材供應(yīng)的圖片進(jìn)行講解,以增進(jìn)同學(xué)的感性熟識(shí)；教材以表格的形式供應(yīng)了一個(gè)培育基配方的實(shí)例；老師可以采納資料分析的形式, 讓同學(xué)通過(guò)主動(dòng)的分析,熟識(shí)培育基的基本組成成分,并結(jié)合必修模塊“ 分子與細(xì)胞” 中的學(xué)問(wèn), 讓同學(xué)從生物體構(gòu)成的基本元素這一角度懂得培育基中為什么都需要具備這些基本成分；（二）無(wú)菌技術(shù)學(xué)問(wèn)要點(diǎn)： 1. 無(wú)菌技術(shù)的含義；消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)分；3. 常用的消毒與滅菌的

3、方法,接種環(huán)灼燒滅菌的方法；教學(xué)建議：老師可以第一結(jié)合同學(xué)的生活體會(huì),讓同學(xué)意識(shí)到日常的生活環(huán)境中,每時(shí)每刻每處都存在著微生物,任何一個(gè)不經(jīng)意的動(dòng)作都可能將某種微生物引入到培育物中,然后再?gòu)?qiáng)調(diào)無(wú)菌操作的重要性；無(wú)菌操作泛指在培育微生物的操作中,全部防止雜菌污染的方法； 無(wú)論是隨后將要學(xué)到的倒平板、平板劃線操作,仍是平板稀釋涂布法,其操作中的每一步都需要做到“ 無(wú)菌” ,即防止雜菌污染；地培育微生物；只有嫻熟、 規(guī)范地進(jìn)行無(wú)菌操作,才可能勝利教材中供應(yīng)了閱讀材料“ 試驗(yàn)室常用的消毒和滅菌方法” ,老師可以讓同學(xué)通過(guò)閱讀明白這些常用方法,并回答旁欄中的兩道摸索題,依據(jù)回答的情形, 檢查同學(xué)是否真正

4、懂得了上述內(nèi)容； 在此基礎(chǔ)上, 老師再介紹無(wú)菌操作的詳細(xì)內(nèi)容,的規(guī)范操作,以及試驗(yàn)中將要用到的材料與器具；五、試驗(yàn)支配及留意事項(xiàng)讓同學(xué)進(jìn)一步熟識(shí)培育微生物（一）從菌種保藏中心購(gòu)買(mǎi)菌種后,老師第一需要用平板劃線法純化培育所得菌種,并依據(jù)同學(xué)小組的數(shù)目,預(yù)備好數(shù)個(gè)平板；（二）第 1 課時(shí)完成基礎(chǔ)學(xué)問(wèn)的教學(xué),學(xué)習(xí)各種操作方法,并制備培育基；高壓蒸汽滅菌所需要的時(shí)間較長(zhǎng),因此需要利用課下時(shí)間完成；課下完成后, 再于第 2 課時(shí)完成大腸桿菌的純化培育；此后支配同學(xué)連續(xù)觀看記錄 34 d ；（三）配制培育基時(shí),老師需要提示同學(xué)依據(jù)每個(gè)培育基消耗 15 20 mL 的量來(lái)估算總用量；全班同學(xué)的培育基可以集中

5、起來(lái),分批滅菌；（四）滅菌后,培育基冷卻到55 后應(yīng)準(zhǔn)時(shí)進(jìn)行倒平板操作；假如不能準(zhǔn)時(shí)操作,需要將培育基放到 55 左右的電熱箱中保溫,以防止瓊脂凝固；（五）假如準(zhǔn)備做本專題的第2 或第 3 課題,建議此課題不僅要練習(xí)平板劃線操作,仍要練習(xí)稀釋涂布平板法操作；為此, 老師需要提前1 天用液體培育基培育大腸桿菌,培育一夜后,于第2 天將培育液分發(fā)到各小組；（六）試驗(yàn)后,全部用過(guò)的培育基、培育液等都需要統(tǒng)一進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后再丟棄,否就將會(huì)造成環(huán)境污染；六、課題成果評(píng)判（一）培育基的制作是否合格假如未接種的培育基在恒溫箱中保溫 的,否就需要重新制備；（二）接種操作是否符合無(wú)菌要求12 d 后無(wú)菌落生

6、長(zhǎng),說(shuō)明培育基的制備是勝利假如培育基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、外形、大小基本一樣,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),就說(shuō)明接種操作是符合要求的；假如培育基上顯現(xiàn)了其他菌落,就說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作仍未達(dá)到要求,需要分析緣由,再次練習(xí)；（三）是否進(jìn)行了準(zhǔn)時(shí)細(xì)致的觀看與記錄培育 12 h 與 24 h 后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,準(zhǔn)時(shí)觀看記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn), 并能觀看到其他一些微小的變化；與習(xí)慣；七、答案和提示（一）旁欄摸索題這一步的要求主要是培育同學(xué)良好的科學(xué)態(tài)度1. 無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止試驗(yàn)室的培育物被其他外來(lái)微生物污染外,仍有什么目的？答：無(wú)菌技術(shù)仍能有效防止操作者自身被微生物感染；2. 請(qǐng)

7、你判定以下材料或用具是否需要消毒或滅菌；假如需要,請(qǐng)?zhí)暨x合適的方法；（1） 培育細(xì)菌用的培育基與培育皿（2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管（3） 試驗(yàn)操作者的雙手 答：（ 1）、（ 2）需要滅菌；（3）需要消毒；（二）倒平板操作的爭(zhēng)論1. 培育基滅菌后,需要冷卻到 養(yǎng)基的溫度？50 左右時(shí),才能用來(lái)倒平板；你用什么方法來(lái)估量培提示：可以用手觸摸盛有培育基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了；2. 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答：通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培育基；3. 平板冷凝后,為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝聚水珠,凝固后的培育基表面的濕度也

8、比較高,將平板倒置, 既可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基,造成污染；4. 在倒平板的過(guò)程中,假如不當(dāng)心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板仍 能用來(lái)培育微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平 板培育微生物；（三）平板劃線操作的爭(zhēng)論 1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作終止時(shí),仍 然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物；每 次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終止后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的

9、菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐步削減, 以便得到菌落； 劃線終止后灼燒接種環(huán),防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者；能準(zhǔn)時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,2. 在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種；3. 在作其次次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)頭劃線？答：劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開(kāi)頭,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步削減,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁衍而來(lái)的菌落；（四）涂布平板操作的爭(zhēng)論涂布平板的全部操作都應(yīng)在火焰鄰近進(jìn)行；想一想,第 2 步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,提示：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“ 無(wú)菌” ；例如,酒精燈與培育皿的距離要合適、吸 管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰四周；等等；（五）練習(xí)1. 提示：可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)摸索；例如,微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、 相宜的溫度, 食品儲(chǔ)存可以通過(guò)保持干燥、物的生長(zhǎng)；真空的條件,以及冷藏等方法來(lái)阻擋微生2. 提示：可以從這三種培育技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納；例如,這三種培育技術(shù)都需要為培育物供應(yīng)充分的養(yǎng)分,的條件,而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件