方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例

1、方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)范例1序言方劑實(shí)驗(yàn)課，可提高學(xué)生的現(xiàn)代化意識(shí)、創(chuàng)新意識(shí)，并可培養(yǎng)其科研能力與動(dòng)手能力，是適應(yīng)時(shí)代發(fā)展而培養(yǎng)現(xiàn)代型中醫(yī)人才的需要。為了配合方劑實(shí)驗(yàn)課，使學(xué)生初步了解實(shí)驗(yàn)過程，我們拍攝了部分方劑實(shí)驗(yàn)觀察的視聽教材，以供使用。麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?麻黃湯、桂枝湯均為發(fā)汗解表劑，麻黃湯主要用于外感風(fēng)寒引起的太陽表實(shí)證，桂枝湯主要用于外感風(fēng)寒引起的太陽表虛證。兩者皆能發(fā)汗，但有強(qiáng)弱之分，通過麻黃湯、桂枝湯在發(fā)汗作用方面的比較，認(rèn)識(shí)麻黃湯為發(fā)汗之峻劑，從而在臨床上能更好地選擇應(yīng)用二方。 麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實(shí)驗(yàn)器材 藥物：麻黃湯：麻黃50g、桂枝30g、杏仁30g、炙

2、甘草30g；桂枝湯：桂枝50g、芍藥50g、生姜45g、炙甘草30g、大棗70g；制劑制備：洗凈藥材，煎煮三次，合并煎液，然后濾紙過濾。制劑濃縮為50的煎液，pH值為67；生理鹽水適量；動(dòng)物：小白鼠；實(shí)驗(yàn)用品：注射器(1ml)、針頭(5號(hào))、臺(tái)式天平、鼠籠。麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實(shí)驗(yàn)方法 取小白鼠30只，隨機(jī)分為麻黃湯組、桂枝湯組、生理鹽水組，每組10只。分別給小白鼠腹腔注射025ml10g的藥液或生理鹽水。 給藥后20分鐘，觀察三組小白鼠出汗情況。麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實(shí)驗(yàn)結(jié)果小青龍湯平喘作用的觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?小青龍湯為辛溫解表之劑，又為平喘之良方，本實(shí)驗(yàn)主要觀察該方的平喘作

3、用。用組織胺噴霧致敏，引起豚鼠哮喘，觀察小青龍湯的平喘作用。小青龍湯平喘作用的觀察 實(shí)驗(yàn)器材 200g左右的豚鼠若干只、噴霧玻璃鐘罩(直徑約20-25cm，高20cm)、噴霧器(也可用空氣壓縮機(jī)代用、但要加測(cè)壓器以檢測(cè)進(jìn)氣的壓力)、秒表，04磷酸組織胺溶液(即40mg磷酸組織胺加水10ml)、注射器(10ml、5ml)、生理鹽水、玻璃噴霧頭一只；小青龍湯制劑：每ml含1g生藥：麻黃10g、芍藥10g、五味子10g、半夏10g、干姜10g、炙甘草10g、細(xì)辛10g、桂枝10g；先加水600ml煎至120ml左右，去渣，加70酒精100ml，沉淀24小時(shí)，次日把沉淀后藥汁經(jīng)抽濾瓶抽濾后放在60恒溫

4、水浴鍋中蒸發(fā)濃縮至80ml。小青龍湯平喘作用的觀察 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)前l(fā)天，先作初步篩選，將豚鼠逐一放在玻璃鐘罩內(nèi)，在恒溫下噴入04磷酸組織胺液，持續(xù)噴60秒，然后密切觀察豚鼠反應(yīng)，若在25分鐘內(nèi)抽搐跌倒，表明該豚鼠對(duì)磷酸組織胺敏感，可以選用；反之。若超過25分鐘不跌倒則為不敏感，不予選用；每次實(shí)驗(yàn)都用豚鼠2只，分別涂上不同顏色作標(biāo)記，然后分別腹腔注射小青龍湯15ml和生理鹽水15ml，半小時(shí)后放入鐘罩內(nèi)并噴入組織胺1分鐘，觀察二組豚鼠引喘反應(yīng)。小青龍湯平喘作用的觀察 實(shí)驗(yàn)結(jié)果大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?大承氣湯是峻下熱結(jié)的主方，適用于以“痞、滿、燥、實(shí)”等癥狀為主的陽明腑實(shí)證

5、。本實(shí)驗(yàn)通過測(cè)定10炭末的大承氣湯在胃腸道內(nèi)的移動(dòng)速度，觀察此方對(duì)胃腸道蠕動(dòng)功能的影響。大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察 實(shí)驗(yàn)器材 藥物：大承氣湯：大黃30g、芒硝l0g、枳實(shí)20g、厚樸20g；制劑制備：將大承氣湯水煎液配制成10炭末的大承氣湯藥液，10炭末生理鹽水混懸液適量；動(dòng)物：小白鼠；實(shí)驗(yàn)用品：灌胃器、尺子、解剖器械、天平。大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察 實(shí)驗(yàn)方法 取空腹24小時(shí)的小白鼠10只(1822g)分為二組，稱重、編號(hào)；灌胃：大承氣湯藥液和生理鹽水混懸液用量均為02ml10g，每灌1只，記錄下時(shí)間；20分鐘后，處死小白鼠，打開腹腔，取出腸管，分離腸系膜，將腸管拉成直線，以

6、幽門為起點(diǎn)，量出炭末移動(dòng)距離和小腸的總長度；計(jì)算每只小白鼠炭末在腸內(nèi)移動(dòng)的距離占小腸全長的百分率為： 碳末移動(dòng)的距離 100% 小腸的總長度大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 大承氣湯對(duì)小白鼠胃腸蠕動(dòng)作用的觀察 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?十棗湯具有攻逐水飲的作用，通過觀察十棗湯對(duì)腸管蠕動(dòng)的影響，以探討其瀉下攻逐的作用。十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響 實(shí)驗(yàn)器材 動(dòng)物：家兔1只；藥物：芫花、甘遂、大戟、大棗制成100濃度十棗湯煎液；實(shí)驗(yàn)用品：麥?zhǔn)显〔?、恒溫水浴箱、二?dǎo)生理記錄儀、萬能杠桿、溫度計(jì)、滴管、燒杯、臺(tái)氏液。 十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響 實(shí)驗(yàn)方法 先裝好一套麥?zhǔn)?/p>

7、浴槽，浴槽內(nèi)盛38臺(tái)氏液，將充滿空氣的球胎經(jīng)由橡皮管連至麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤苌?，調(diào)節(jié)橡皮管上的螺絲皮管夾，使氣泡一個(gè)一個(gè)地不斷地通至浴槽，以供氧氣；用木錘猛擊兔頭部，使其昏迷后，剖開腹腔，在靠十二指腸附近，取出一段3-4cm長的小腸，迅速將該段小腸一端的一結(jié)扎線結(jié)于乙型通氣管彎頭上，小腸另一端的結(jié)扎線系于杠桿上； 十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響 實(shí)驗(yàn)方法 將浴槽放在盛水的恒溫水浴箱內(nèi)，使臺(tái)氏液溫度保持在38-40之間；記錄腸段在38-40臺(tái)氏液中的運(yùn)動(dòng)曲線；待臺(tái)氏液穩(wěn)定，描記一段腸段正常運(yùn)動(dòng)曲線后滴加100十棗煎液l0ml于浴槽中，觀察腸活動(dòng)的改變并做好標(biāo)記。十棗湯對(duì)家兔腸管蠕動(dòng)的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)

8、驗(yàn)完畢后，將結(jié)果剪貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上并分析之。 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?發(fā)熱是外感熱病過程中十分重要的癥狀和體征，通過運(yùn)用銀翹散、白虎湯、大承氣湯對(duì)發(fā)熱動(dòng)物模型的解熱實(shí)驗(yàn)，分析比較各種方劑的不同解熱作用，增強(qiáng)對(duì)銀翹散、白虎湯、大承氣湯的感性認(rèn)識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作能力，從而加深對(duì)“汗”、“清”、“下”三法的理解，了解其對(duì)臨床和科研的指導(dǎo)意義。 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實(shí)驗(yàn)器材 藥物：銀翹散：銀花，連翹，桔梗，薄荷，竹葉，生甘草，荊芥，淡豆豉，牛蒡子，蘆根。白虎湯：石膏，知母，甘草，粳米。大承氣湯：大黃，芒硝，枳實(shí)，厚樸。傷寒或副傷寒菌苗及生理鹽水。動(dòng)物：家兔(每只

9、要求15kg以上)。實(shí)驗(yàn)用品：肛表，嬰兒秤，兔固定架，注射器(1ml、20ml)，酒精棉球，胃管，灌胃開口器，量杯，石蠟油。 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實(shí)驗(yàn)方法 給家兔逐一測(cè)體溫。每次取家兔1只，待安靜后將兔臀部抬高，右手拿肛表，將水銀柱甩到35C以下，末端涂石蠟油少許，插入兔肛門，深度5cm，3分鐘后取出讀取體溫度數(shù)； 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實(shí)驗(yàn)方法 用上法選取肛溫在383-396的家兔4只，編號(hào)，稱體重，觀察其正常表現(xiàn)，分別給家兔靜脈注射傷寒副傷寒菌苗lmlkg，使之發(fā)熱，待肛溫升高超過1后(約需經(jīng)05-1小時(shí))再分別灌胃給藥，甲兔用100銀翹散煎液20ml

10、kg，乙兔用100白虎湯煎液20mlkg，丙兔用100大承氣湯20mlkg，丁兔用等量生理鹽水。給藥后30、60、120分鐘各測(cè)肛溫一次，比較各兔給藥前后肛溫的變化。銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 注意事項(xiàng)測(cè)溫時(shí)操作盡量柔和，勿使家兔掙扎，以免引起體溫波動(dòng)同一兔用同一肛表，測(cè)肛溫時(shí)將肛溫表水銀柱甩在35以下測(cè)量條件要一致家兔擇健康、體重在15kg以上，體溫在383396為宜3小時(shí)后，凡肛溫上升08以上的家兔應(yīng)予剔除，然后按編號(hào)分組銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?四逆加人參湯具有回陽救逆作用，適用于陽氣暴脫之厥證，本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)

11、離體蛙心縮的影響觀察，了解其強(qiáng)心作用。 四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響 實(shí)驗(yàn)器材 動(dòng)物：蟾蜍；藥品：四逆加人參湯：制附子10g、人參10g、干姜10g、炙甘草6g，任氏液適量；實(shí)驗(yàn)用品：二導(dǎo)生理記錄儀、蛙心夾杠桿、蛙心插管、試管夾、線、雙凹夾、鐵支架、蛙手術(shù)器械、滴管。 四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響 實(shí)驗(yàn)方法 離體蟾蜍蛙心臟的制備： 取蟾蜍1只，破壞腦和脊髓，暴露心臟，在左側(cè)主動(dòng)脈下穿兩根絲線，結(jié)扎右側(cè)和左側(cè)主動(dòng)脈上端的絲線，將左側(cè)下端絲線打一松結(jié)。在左側(cè)主動(dòng)脈結(jié)扎線下端，用小剪刀輕輕將主動(dòng)脈剪一小斜口，將盛有少量任氏液的蛙心插管由此斜口插入動(dòng)脈，然后將插管稍向后退再轉(zhuǎn)向心室中央的方向，

12、插入心室腔內(nèi)，插管是否插入心室，可看插管中的任氏溶液面是否隨心搏而上、下移動(dòng)。如已進(jìn)入心室，則將松結(jié)的絲線扎緊，固定于蛙心插管的小突起上。 四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響 實(shí)驗(yàn)方法最后將蛙心與插管一同提起，剪斷周圍軟組織后，在靜脈竇部位穿一絲線，并結(jié)扎，在結(jié)扎線以下剪斷軟組織，摘出心臟。吸出蛙心及插管內(nèi)血液，并用任氏液灌洗數(shù)次，以防血液凝固，堵塞插管。在蛙心尖部用蛙心夾夾住蛙心尖，夾蛙時(shí)注意在舒張期夾。將蛙心夾的線連于二導(dǎo)的換能器，作好描記曲線的準(zhǔn)備。 觀察：啟開二導(dǎo)記錄裝置，描記正常蛙心收縮曲線，觀察心跳頻率和強(qiáng)度。將準(zhǔn)備好的四逆加人參湯溶液用滴管吸出后加兩滴于插管的任氏液中，觀察蛙心心跳

13、變化，并做好記錄。 四逆加人參湯對(duì)離體蛙心收縮的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 將描記的曲線貼上。獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?獨(dú)參湯大補(bǔ)元?dú)猓緦?shí)驗(yàn)通過對(duì)小白鼠注射人參藥液和注射生理鹽水作一對(duì)照，以觀察在缺氧環(huán)境下抗御能力的差異。 獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察 實(shí)驗(yàn)器材 藥物：1：1生曬人參水提液、生理鹽水適量；動(dòng)物：1820g小白鼠10只；實(shí)驗(yàn)用品：250ml廣口瓶及橡皮塞各10只、注射器、針頭(6號(hào))、秒表、紗布、天平。 獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察 實(shí)驗(yàn)方法 將生曬參以1：1濃度水煎至所需量，冷卻待用；取小白鼠10只，分成二組。一組為實(shí)驗(yàn)組，一組為對(duì)照組并稱好體重，作好標(biāo)記；將實(shí)驗(yàn)組小

14、白鼠腹腔注射生曬人參藥液，以025ml/l0g的劑量；對(duì)照組注射等量的生理鹽水；待用藥半小時(shí)后，將小白鼠放到廣口瓶內(nèi)，迅速用橡皮塞塞緊瓶口，同時(shí)按下秒表；仔細(xì)觀察小白鼠窒息致死的時(shí)間，并做好記錄。獨(dú)參湯對(duì)小白鼠耐缺氧作用的觀察 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?機(jī)體通過酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多種不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過氧化物。脂質(zhì)過氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑，通過鏈?zhǔn)交蛘哝準(zhǔn)街ф湻磻?yīng)，放大活性氧的作用，因此初始的一個(gè)活性氧能導(dǎo)致很多脂類分解產(chǎn)物的形成，這些分解產(chǎn)物中一些是無害的，另一些則能引起細(xì)胞代謝

15、功能障礙，甚至死亡。本實(shí)驗(yàn)通過觀察四君子湯對(duì)小鼠肝組織勻漿MDA的作用以驗(yàn)證其功效。四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實(shí)驗(yàn)器材 1動(dòng)物 小鼠，雌雄不限。 2藥物 (1)四君子湯水煎液，1g生藥ml。 (2)1號(hào)為10ml溶液，室溫保存，天冷時(shí)會(huì)凝固每次測(cè)試前適當(dāng)加溫以加 速溶解，直到透明方可應(yīng)用。 (3)2號(hào)試劑為10ml溶液，用時(shí)加290ml雙蒸水稀釋。 (4)3號(hào)為粉劑，用時(shí)加100ml雙蒸水，適當(dāng)加溫溶解。 (5)4號(hào)為標(biāo)準(zhǔn)品，為10nmolml的四氧基丙烷10ml。 3實(shí)驗(yàn)用品 天平、試管、濾紙、可見光分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、勻漿器等。 四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(M

16、DA)的影響 實(shí)驗(yàn)方法 1小鼠10只，分為對(duì)照組和四君子組，對(duì)照組1g生理鹽水02ml10g，四君子組1g黃芪水煎液02ml10g，每日一次，共三天。 2小鼠斷頭處死，取出部分肝組織，用濾紙吸干表面血液，稱重，在冰浴條件下用冰冷的生理鹽水制成10肝勻漿； 3按照以下步驟在試管中依次加入試劑：四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實(shí)驗(yàn)方法甲液的配制方法：1號(hào):2號(hào):3號(hào)01:3:1乙液的配制方法：1號(hào):2號(hào):雙蒸水01:3:1四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實(shí)驗(yàn)方法4以上用旋渦混勻器混勻，沸水浴40分鐘，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，吸取上清液，蒸餾水調(diào)零，1cm的杯子532n

17、m處比色。5計(jì)算測(cè)定管吸光度測(cè)定空白管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度標(biāo)準(zhǔn)空白管吸光度 10mol/L=測(cè)定樣品中丙二醛含量四君子湯對(duì)小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表中：四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?SOD對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，此酶能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，因而SOD的活力與衰老、腫瘤、炎癥、自身免疫、血液、心、腦血管病、腎病、消化系統(tǒng)疾病、輻射等有密切聯(lián)系，對(duì)疾病的病因?qū)W探討、診斷、治療、術(shù)后觀察有著重要的意義?？蓽y(cè)血清、血漿、腦脊液、胸腹水、尿液、紅白細(xì)胞、各種培養(yǎng)液中的SOD，并可檢測(cè)藥物、食品、化妝

18、品中的SOD的活力；借黃嘌呤以及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基，后者氧化羥胺成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈紫紅色，而SOD則抑制此反應(yīng)，根據(jù)抑制率的高低算出SOD的含量。 四君子湯可補(bǔ)中益氣，具有抗衰老的作用，本實(shí)驗(yàn)通過四君子湯對(duì)小鼠血清SOD的影響以驗(yàn)證其抗衰老作用。四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實(shí)驗(yàn)器材 1動(dòng)物 小鼠，雌雄不限。 2藥物 (1)黃芪水煎液，1g生藥ml。 (2)R1一瓶80ml用時(shí)對(duì)倍稀釋，R2一瓶、R3一瓶、R4一支、09ml，用R199ml稀釋，4保存。 (3)測(cè)定試劑的配制：R1：R2：R3=1：01：01,視需要量配制。 (4)R5

19、、R6各一支、為粉劑，用時(shí)加雙蒸水100ml溶解后備用，配制后的試劑要避光冷藏保存。 (5)顯色劑的配制：R5：R6：冰醋酸=3：3：2,4保存。 3實(shí)驗(yàn)用品：試管、濾紙、可見光分光光度計(jì)、離心機(jī)、眼科鑷等。四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實(shí)驗(yàn)方法 1小鼠10只，分為對(duì)照組和黃四君子組，對(duì)照組1g生理鹽水02ml10g，四君子組1g四君子水煎液02ml10g，每日一次，共三天。 2.小鼠摘眼球取血，滴入小試管中，2000rmin離心5分鐘，得血清。 3.按照以下步驟在測(cè)定管和對(duì)照管中加入試劑：四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實(shí)驗(yàn)方法四君子湯對(duì)老年小鼠

20、血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 4、混勻10分鐘后，550nm，1cm的比色杯蒸餾水調(diào)零比色。5、計(jì)算對(duì)照管光密度測(cè)定管光密度 3.93（總反應(yīng)量）對(duì)照管光密度 50% 0.03（取樣量）SOD Nu/ml四君子湯對(duì)老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表中： 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康?酸棗仁湯具有養(yǎng)血安神、清熱除煩作用，適用于失眠之癥，本實(shí)驗(yàn)通過觀察酸棗仁湯對(duì)安定引起小鼠睡眠時(shí)間的影響，以驗(yàn)證其方的催眠作用。 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察 實(shí)驗(yàn)器材 動(dòng)物：20g左右小白鼠6只，分為兩組；藥物：酸棗仁湯：酸棗仁20g、甘草30g、知母3g、茯苓20g、川芎

21、10g，配制成100酸棗仁湯注射液。01安定注射液、生理鹽水適量；實(shí)驗(yàn)器械：2ml注射器2具、針頭、天平、鼠籠。 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察 實(shí)驗(yàn)方法 將二組小鼠均按02mll0g體重的劑量腹腔注入安定注射液，逐一記錄小鼠入睡時(shí)間(翻正作用消失)；注射安定10分鐘后給第l組小鼠腹腔注入05mll0g生理鹽水，給第2組小鼠腹腔注射同等劑量的酸棗仁湯注射液；記錄各鼠蘇醒開始爬行的時(shí)間，算出各小鼠睡眠的時(shí)間。 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果 金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?金鈴子散具有疏肝泄熱，行氣止痛的作用，適用于胸腹脅肋痛、痛經(jīng)等癥。本實(shí)驗(yàn)用熱板法或扭體法了解金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用。 金鈴子散鎮(zhèn)痛

22、作用的觀察 實(shí)驗(yàn)器材 動(dòng)物：小白鼠(18-22g) 雌性1830只；藥物：金鈴子散：金鈴子50g、玄胡索30g,制成100金鈴子散煎液；01咖啡；06冰乙酸；生理鹽水適量。實(shí)驗(yàn)用品：注射器(1ml)、針頭(5號(hào))、熱板鎮(zhèn)痛裝置、鐘罩。 金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察實(shí)驗(yàn)方法 小鼠熱板法：取18-22g雌性小白鼠，先將動(dòng)物在溫度保持于55的熱板上進(jìn)行篩選，測(cè)定各小白鼠的正常痛覺反應(yīng)(踢后腿、跳躍后足)時(shí)間，共測(cè)二次，每次間隔5分鐘，求平均值(以平均值不超過30秒為合格)，然后將各鼠分別腹腔注射生理鹽水025ml只、01鹽酸嗎啡02ml10g、金鈴子散水煎液02ml10g，給藥后第10、20、30以及60

23、分鐘測(cè)定痛覺反應(yīng)時(shí)間二次，求平均值。如小白鼠在60秒內(nèi)無痛反應(yīng)，立即取出。按60秒計(jì)算，將所得的痛覺反應(yīng)時(shí)間，按下列公式計(jì)算，算出用藥后各不同時(shí)間的痛閾提高百分率。 金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察以痛閾提高百分率作縱坐標(biāo)，繪出各藥的鎮(zhèn)痛作用時(shí)程曲線，加以比較。 痛閾提高百分率用藥后平均反應(yīng)時(shí)間用藥前平均反應(yīng)時(shí)間 用藥前平均反應(yīng)時(shí)間 100% 小鼠扭體法：選用18-22g小鼠，分二組，每組10只，分別注射同劑量的生理鹽水04mll0g、金鈴子散藥液04mll0g，注射后半小時(shí)，分別腹腔注射06冰乙酸01mll0g，引起扭體反應(yīng)，5分鐘后開始記錄20分鐘小鼠的扭體次數(shù)。 實(shí)驗(yàn)組無扭體反應(yīng)的百分?jǐn)?shù)對(duì)照組無扭

24、體反應(yīng)的百分?jǐn)?shù) 鎮(zhèn)痛百分率 對(duì)照組扭體反應(yīng)的動(dòng)物百分?jǐn)?shù) 100%金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn)金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (2)扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗(yàn) 木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?觀察木香檳榔丸對(duì)腸管平滑肌蠕動(dòng)的影響，以探討本方藥物瀉下、理氣的機(jī)理；學(xué)習(xí)離體組織實(shí)驗(yàn)操作方法。木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)器材 100的木香檳榔丸煎液，麥?zhǔn)显〔邸⒑銣厮∠?、萬能杠桿、球胎、溫度計(jì)、滴管、臺(tái)氏液、燒杯。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 家兔1只。 木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)方法 先裝好一套麥?zhǔn)显〔?，放于恒溫水浴箱?nèi)，麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)盛38-40臺(tái)氏液。將充滿空氣的球胎經(jīng)由橡皮管至麥?zhǔn)显?/p>

25、槽乙型通氣管上，調(diào)節(jié)橡皮管上的鏍絲皮管夾，使氣泡一個(gè)一個(gè)地不斷通至浴槽以供氧氣；用木錘猛擊兔的頭部，使其昏迷后，剖開腹腔，在靠十二指腸附近，取出一段3-4cm長的小腸，迅速將該段小腸一端的結(jié)扎線結(jié)于乙型通氣管彎頭上，小腸另一端的結(jié)扎線系于杠桿上； 木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)方法 將浴槽放在盛水的恒溫水浴箱內(nèi)使臺(tái)氏液溫度保持在38-40之間。記錄腸段在3040臺(tái)氏液中的運(yùn)動(dòng)曲線；待臺(tái)氏液穩(wěn)定，描記一段腸段正常運(yùn)動(dòng)曲線后，滴加100木香檳榔丸溶液10滴于浴槽中，觀察腸段活動(dòng)的改變并做好標(biāo)記，然后將預(yù)先準(zhǔn)備的38左右新鮮臺(tái)氏液自接連浴槽底部的側(cè)管倒入，原有臺(tái)氏液便從另一側(cè)管流出。如此更換兩次。

26、木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)完畢，將標(biāo)記結(jié)果剪貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上，分析該結(jié)果。 注 (1)小腸標(biāo)本制備：取出20-30cm長腸段，置于臺(tái)氏液內(nèi)輕輕漂洗，將腸內(nèi)容物洗凈后，用35左右臺(tái)氏液浸泡待出現(xiàn)較大活動(dòng)時(shí)將其分成數(shù)段，每段長3-4cm備用。 (2)臺(tái)氏液的制備：每1000ml蒸餾水中含氯化鈉8g、氯化鉀02g、硫酸鎂026g、磷酸二氫鈉0065g、碳酸氫鈉1g、氯化鈣02g、葡萄糖1g。木香檳榔丸對(duì)離體腸蠕動(dòng)的影響 注意事項(xiàng) (1)加藥前必須先準(zhǔn)備好更換用的38臺(tái)氏液。 (2)每次加藥出現(xiàn)效果后，必須立即更換浴槽內(nèi)的臺(tái)氏液，待腸段恢復(fù)正?；顒?dòng)后再觀察下一項(xiàng)目。瘀血證模型與失笑散的

27、活血化瘀作用的觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?失笑散具有活血祛瘀、散結(jié)止痛之功，用于瘀血停滯之證。本實(shí)驗(yàn)通過觀察失笑散對(duì)高分子右旋糖酐所致瘀血模型的作用，以驗(yàn)證其功用。 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察實(shí)驗(yàn)器材 動(dòng)物：家兔(雌雄不分)；藥品：失笑散：五靈脂、蒲黃，制成100失笑散煎液；25烏拉坦溶液、臺(tái)氏液、10高分子右旋糖酐溶液、生理鹽水。實(shí)驗(yàn)用品：生物顯微鏡、恒溫灌流槽、兔手術(shù)器械一套。 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察實(shí)驗(yàn)方法 麻醉、手術(shù)：25烏拉坦4mlkg靜脈注射。將兔固定于兔臺(tái)上，腹壁剪毛，正中線開腹壁；安置觀察裝置：將灌流槽置于顯微鏡載物臺(tái)上、恒溫灌流槽內(nèi)注入38臺(tái)氏液，通入氧氣，恒

28、溫灌流。灌流槽一側(cè)與兔一側(cè)腹壁切口緣相固定；實(shí)驗(yàn)觀察：a將長度合適、血管豐富的小腸固定于恒溫灌流槽的觀察平臺(tái)上，用低倍鏡觀察4-5個(gè)視野，詳細(xì)填寫下表； b由耳緣靜脈快速注射10高分子右旋糖酐75mlkg，5分鐘后觀察各項(xiàng)指標(biāo)有無變化，以后5分鐘觀察一次各項(xiàng)指標(biāo)變化，并將其結(jié)果詳細(xì)填表； c血瘀形成后，立即由耳緣靜脈注射100失笑散注射液2mlkg，5分鐘后觀察各項(xiàng)指標(biāo)有無變化，20分鐘后各項(xiàng)指標(biāo)變化不顯著可酌情加量。 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察注意事項(xiàng) （1）每次觀察的視野必須相同，以利對(duì)照。 （2）觀察結(jié)果中出血即在血管周圍見有紅

29、細(xì)胞滲出、泥沙樣流即紅細(xì)胞聚面團(tuán)粒狀流動(dòng)，血管交叉(橫點(diǎn))數(shù)則代表了血流通暢的毛細(xì)血管網(wǎng)數(shù)。十灰散對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響 十灰散屬止血?jiǎng)?，有良好的收斂止血作用，常用于咯血、衄血、崩漏、尿血等多種出血癥。本方縮短凝血時(shí)間的作用可能與其抑制纖溶過程，增加血小板數(shù)有關(guān)。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?用玻片法測(cè)定小白鼠凝血時(shí)間；觀察十灰散水煎液對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響。十灰散對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)器材 注射器、載玻片、大頭針、秒表、眼科彎鑷、棉球、鼠籠、天平、十灰散水煎液015g/ml、生理鹽水、苦味酸溶液。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 小白鼠，體重1822g。 十灰散對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響 實(shí)驗(yàn)方法 取小白鼠6只，隨機(jī)分為給藥組和對(duì)照

30、組，稱重并作標(biāo)記。給藥組腹腔注射仙鶴草水煎液03ml10g，對(duì)照組腹腔注射生理鹽水03ml10g。30分鐘后，用眼科彎鑷迅速摘去一側(cè)眼球，即有血液流出。于載玻片的兩端各滴1滴血，血滴直徑5mm，立即用秒表記時(shí)。每隔30秒用清潔大頭針自血滴邊緣向里輕輕拔動(dòng)一次，并觀察有無血絲挑起。從采血開始至挑起血絲止，所用時(shí)間即凝血時(shí)間，另一滴血最后復(fù)驗(yàn)，記錄凝血時(shí)間。十灰散對(duì)小白鼠凝血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 注意事項(xiàng) (1)凝血時(shí)間可受室溫等因素的影響，室溫15 左右較好。 (2)每次挑血滴時(shí)，不應(yīng)從各方向多次挑動(dòng)，以免影響纖維蛋白的形成。牽正散抗驚厥作用實(shí)驗(yàn)觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?牽正散具有祛風(fēng)化痰，通絡(luò)止痛的作用。

31、本實(shí)驗(yàn)以小鼠為對(duì)象，用士的寧復(fù)制成小鼠驚厥模型，觀察牽正散延長小鼠驚厥潛伏期和死亡潛伏期的效果。牽正散抗驚厥作用實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)器材 OT注射器、秒表、電子秤、苦味酸、鼠籠、鼠盒、夾子等。藥物制備 50天麻液：先將天麻置于溫水中浸泡12小時(shí)，切片，入煎，煎煮1小時(shí)過濾取汁，藥渣以60乙醇浸泡18小時(shí)，過濾去渣蒸發(fā)乙醇，將水煎汁傾人，濃縮成50的藥液，裝瓶置冷，放冰箱保存?zhèn)溆谩?土的寧注射液：用2mg/ml士的寧注射液加鹽水或蒸餾水稀釋成0.15mg/ml的液體，放冰箱保存?zhèn)溆谩?牽正散抗驚厥作用實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)方法 取小鼠稱重標(biāo)號(hào)，隨機(jī)分成牽正散組和生理鹽水組，每組510只。天麻組每鼠腹腔注射天麻液0

32、2mgl0g。30分鐘后，兩組小鼠均分別腹腔注射士的寧液01ml10g，比較兩組小鼠驚厥潛伏期和死亡潛伏期時(shí)間。牽正散抗驚厥作用實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果注驚厥潛伏期：即注射士的寧液畢至產(chǎn)生驚厥時(shí)的一段時(shí)間。死亡潛伏期：即產(chǎn)生驚厥開始至死亡時(shí)的一段時(shí)間。鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯對(duì)家兔血壓的影響 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯具有鎮(zhèn)肝熄風(fēng)、滋陰潛陽的作用。適用于肝腎陰虧、肝陽上亢、氣血逆亂之證，本實(shí)驗(yàn)通過觀察鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯的降低血壓作用，以證實(shí)其功用。鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯對(duì)家兔血壓的影響 實(shí)驗(yàn)器材 動(dòng)物：家兔(雌雄不限)；藥品：鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯：懷牛膝、代赭石、生龍骨、生牡蠣、龜版、杭芍、玄參、天冬、川楝子、麥芽、茵陳、甘草，制備成100鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯

33、煎液；25烏拉坦溶液；05肝素；1：1000腎上腺素；實(shí)驗(yàn)用品：兔固定臺(tái)、二導(dǎo)生理記錄儀、手術(shù)剪刀、手術(shù)刀、鑷子、止血鉗、動(dòng)脈夾、塑料管、注射器(50、l0ml)、針頭、大小燒杯、紗布、線。鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯對(duì)家兔血壓的影響實(shí)驗(yàn)方法 (1)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 校正二導(dǎo)生理記錄儀。麻醉動(dòng)物：用25烏拉坦按4mlkg的劑量靜脈麻醉。 (2)手術(shù)步驟 固定和剪毛：將麻醉兔仰臥位固定在兔臺(tái)上，剪去頸部毛。 切口：由甲狀軟骨開始沿正中線切開皮膚約8-10cm，并切開頸部淺筋膜，露出頸部肌肉。 找出頸總動(dòng)脈，在頸部一側(cè)的胸鎖乳頭肌與胸舌骨肌之間，用止血鉗向深處分開肌肉，即可看到頸動(dòng)脈，再用小鑷子仔細(xì)地剝開頸動(dòng)脈約4cm長，

34、內(nèi)側(cè)為頸總動(dòng)脈，外側(cè)較粗的神經(jīng)是迷走神經(jīng)和減壓神經(jīng)。插塑料管：將一側(cè)頸總動(dòng)脈用事先穿好的線結(jié)扎其遠(yuǎn)心端，以另一條線于近心端做一虛結(jié)，以備結(jié)扎塑料插管之用。 鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯對(duì)家兔血壓的影響實(shí)驗(yàn)方法 在近心端用動(dòng)脈夾將頸動(dòng)脈夾閉，阻斷血流。在動(dòng)脈夾的上方，以小鑷子提起動(dòng)脈后，用小剪刀逆血流方向?qū)?dòng)脈剪一小口，以剪開動(dòng)脈壁的12為宜，不可剪斷。然后將充滿肝素溶液的塑料管插入動(dòng)脈內(nèi)，以事先做好虛結(jié)的粗線結(jié)扎之。由兔耳緣靜脈注入lml肝素溶液，防止凝血。 調(diào)節(jié)好描記裝置后，即可打開動(dòng)脈夾，血壓波動(dòng)便可描記在記錄紙上，最后把塑料管按動(dòng)脈走向固定好，勿使其扭轉(zhuǎn)或脫套。 (3)觀察項(xiàng)目 觀察正常血壓曲線：啟動(dòng)描記裝置，描記一段正常血壓曲線，家兔的正常血壓約90mmHg。 在血壓較為平穩(wěn)的基礎(chǔ)上，從耳緣靜脈注入1：1000腎上腺素05-lml，觀察血壓變化。然后耳緣靜脈注射100鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯煎液6mlkg，觀察血壓的變化情況。 鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯對(duì)家兔血壓的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 正 常 血 壓靜脈注射1：1000腎上腺素0.51ml靜脈注射100%鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯煎液參麥針升壓作用的觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?參麥(生脈)針為生脈散的針劑，具有益氣養(yǎng)陰固脫的作用。本實(shí)驗(yàn)通過參麥針對(duì)失血性休克家兔血壓的影響，觀察該方的功能。 參麥針升