1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)20160829

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心網(wǎng)址：第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（Laboratory Animal）:是指經(jīng)人工飼育，對(duì)其攜帶的微生物實(shí)行控制，遺傳背景明確或來(lái)源清楚的，用于科研、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物定義 KM小鼠C57小鼠裸 鼠SD大鼠新西蘭兔Hartely豚鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)（Laboratory Animal Science） ：是一個(gè)綜合性學(xué)科，主要研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物學(xué)特點(diǎn)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的普遍規(guī)律，包括 ：馴化、育種、生理、解剖、生化、獸醫(yī)、營(yíng)養(yǎng)及環(huán)境生態(tài)等。實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物（Animal for research）：以研究、實(shí)驗(yàn)、教育、藥品生產(chǎn)等為目的而使用的動(dòng)物

2、。包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、野生動(dòng)物、經(jīng)濟(jì)動(dòng)物。如牛、羊、貓、未實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化的土種狗等。一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物定義 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的試劑，必須實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)化（質(zhì)量控制）才能得到正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。質(zhì)量控制包括環(huán)境、微生物、遺傳、營(yíng)養(yǎng)四方面。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類：按照國(guó)標(biāo)中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所攜帶的病原微生物及寄生蟲(chóng)1）普通級(jí)動(dòng)物 2）清潔級(jí)動(dòng)物 3）無(wú)特定病原體動(dòng)物 4）無(wú)菌級(jí)動(dòng)物按照遺傳背景1）近交系動(dòng)物 2）突變系動(dòng)物 3）雜交群動(dòng)物 4）封閉群動(dòng)物二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量控制與分級(jí) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的類型及作用二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量控制與分級(jí) 疾病模型動(dòng)物：研究阿茲海默、糖尿病、癌癥等基因敲除動(dòng)物：研究心血管疾病、神經(jīng)退化性疾病等轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：研究動(dòng)

3、物基因表達(dá)調(diào)控、癌癥動(dòng)物模型、基因治療與腫瘤學(xué)等圖為由嵌合體得到基因敲除的純合體小鼠一級(jí)為普通系統(tǒng)(Conventional)：能進(jìn)行普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)與實(shí)驗(yàn)。它不需進(jìn)行嚴(yán)格的環(huán)境控制和微生物控制，但仍需維持對(duì)環(huán)境條件的基本要求二級(jí)為屏障系統(tǒng)(Barrier System)：是清潔級(jí)、SPF級(jí)動(dòng)物生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)的設(shè)施。人、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、飼料、飲水、墊料、空氣及其它物品均需進(jìn)行嚴(yán)格的微生物控制。隔離系統(tǒng)(Insulation system) ：是以隔離器為主體及其附屬裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)。用作飼養(yǎng)無(wú)菌動(dòng)物和已知菌動(dòng)物。工作人員通過(guò)隔離器上組裝的無(wú)菌手套進(jìn)行操作，不直接接觸動(dòng)物。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類 三、

4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類 屏障環(huán)境 屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施設(shè)備三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類 隔離器實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全是避免由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的各種危害的綜合防護(hù)措施。由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的各種危害包括：1.生產(chǎn)和使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的各個(gè)環(huán)節(jié)，如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的引種、保種、繁育、運(yùn)輸、進(jìn)出口。2.使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(包括感染和非感染動(dòng)物實(shí)驗(yàn))進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、從事科研活動(dòng)等過(guò)程中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的各種危害。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全2022/8/13實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不安全因素實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不安全因素：生物因素物理因素化學(xué)因素動(dòng)物的尸體、血液、體液或其他分泌物直接接觸或呼入動(dòng)物性氣溶膠人獸共患病實(shí)驗(yàn)室獲得性疾病動(dòng)物抓咬傷、針刺傷、銳器傷血源性傳播疾病消毒劑、臭氧、麻

5、醉廢氣保存組織的化學(xué)劑等咽炎、職業(yè)性哮喘等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證，適用于從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)繁育和商業(yè)性經(jīng)營(yíng)的單位。未取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證的單位，一律不準(zhǔn)飼養(yǎng)、繁育和經(jīng)營(yíng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證，適用于從事動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)藥品、生物制品的單位。未取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證的單位，進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)藥品和生物制品所使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，一律視為不合格。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用許可證制度是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全的重要保障。五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用許可證制度五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用許可證制度完善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境，嚴(yán)格使用合格實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)必須在有使用許可證的設(shè)施環(huán)境中進(jìn)行。14第二節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):是以科學(xué)實(shí)

6、驗(yàn)研究為目的，以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為研究對(duì)象，在動(dòng)物福利得到保障的前提下，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行各種處理，獲得可靠、科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的實(shí)驗(yàn)研究。醫(yī)學(xué)研究常用的方法和手段解決醫(yī)學(xué)科研中許多以往不能解決的實(shí)驗(yàn)問(wèn)題和重大理論問(wèn)題的科學(xué)基礎(chǔ)。在人類疾病的調(diào)查和防治研究等諸多方面發(fā)揮著巨大作用。生命科學(xué)、藥物研發(fā)與評(píng)價(jià)和生物醫(yī)藥技術(shù)產(chǎn)業(yè)的重要支撐條件。衡量一個(gè)國(guó)家、一個(gè)地區(qū)科學(xué)技術(shù)水平的重要標(biāo)志之一。培養(yǎng)高水平科研人才的關(guān)鍵基礎(chǔ)之一。一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的意義 一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的意義 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)被廣泛用于以下幾個(gè)方面：基礎(chǔ)研究：生物醫(yī)學(xué)研究 ：我國(guó)生物醫(yī)學(xué)科研課題有60%以上需要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基因工程：用基因工程與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物追溯人類進(jìn)化產(chǎn)品試驗(yàn)：食

7、品、日用品、化妝品的毒性檢測(cè)教學(xué)與訓(xùn)練：醫(yī)學(xué)院生理機(jī)能實(shí)驗(yàn)17動(dòng)物因素：包括遺傳因素、性別、年齡、疾病因素環(huán)境因素：包括理化因素（溫度、濕度、通風(fēng)、光照、噪聲、有害氣體等）、營(yíng)養(yǎng)因素（飼料、飲水等）、微環(huán)境（房舍、籠具、墊料、 飲食器具等）、生物因素（飼養(yǎng)密度、微生物、寄生蟲(chóng)等）人為因素：包括動(dòng)物的飼養(yǎng)管理，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)、操作技術(shù)及結(jié)果的處理等 二、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素18“3R”優(yōu)化：優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、規(guī)范條件、規(guī)范操作減少：利用已有數(shù)據(jù)、動(dòng)物的重復(fù)使用、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的共享、使用高質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物、合理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、規(guī)范實(shí)驗(yàn)的管理替代：人群資料、低等動(dòng)物代替高等動(dòng)物、體外培養(yǎng)、理化技術(shù)應(yīng)用、數(shù)學(xué)與計(jì)算

8、機(jī)模型的應(yīng)用三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與動(dòng)物福利 四、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則對(duì)照原則 ：消除和減少隨機(jī)化原則所不能控制的抽樣誤差及實(shí)驗(yàn)者誤差。 陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照、自身對(duì)照、歷史性對(duì)照 隨機(jī)原則 ：使樣本具有極好的代表性 重復(fù)原則 ：顯示隨機(jī)變量的統(tǒng)計(jì)規(guī)律性 均衡原則 ：保證各組的非處理因素一致 盲法原則 ：避免用主觀指標(biāo)判斷的偏倚 福利原則 ：3R原則 ，IACUC的批準(zhǔn) 五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則相似性重復(fù)性可靠性可控性經(jīng)濟(jì)性3R標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)、公認(rèn)的模型解剖、組織結(jié)構(gòu)、機(jī)能、代謝標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物嚴(yán)格控制各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件生物安全是重中之重實(shí)驗(yàn)過(guò)程可控量入為出Reduction Replacem

9、entRefine六、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果因素的控制自然因素（動(dòng)物本身和環(huán)境）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素實(shí)驗(yàn)誤差因素動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施環(huán)境指標(biāo)（ GB14925-2010靜態(tài)）項(xiàng)目指標(biāo)小鼠、大鼠豚鼠、地鼠犬、猴、貓、兔、小型豬雞屏障環(huán)境隔離環(huán)境普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境屏障環(huán)境溫度/202618292026162620261626最大日溫差/4相對(duì)濕度/%4070最小換氣次數(shù)/（次/h）15a208b15a208b15a20動(dòng)物籠具處氣流速度/（m/s）0.20相通區(qū)域的最小靜壓差/Pa1050c1050c1050c50c空氣潔凈度/級(jí)75或7d75或7d75或7d5沉降菌最大平均濃度/（C

10、FU/0.5h90mm平皿）3無(wú)檢出3無(wú)檢出3無(wú)檢出無(wú)檢出氨濃度/（mg/m3）14噪聲/dB（A）60照度最低工作照度200動(dòng)物照度1520100200510晝夜明暗交替時(shí)間/h12/12或10/14適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)環(huán)境精確的儀器設(shè)備可靠的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)可靠而完整的實(shí)驗(yàn)記錄科學(xué)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究方案準(zhǔn)確而可靠的研究結(jié)果合格的試驗(yàn)材料客觀而完整的總結(jié)報(bào)告合理的設(shè)施正確的實(shí)驗(yàn)操作七、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告-指南標(biāo)題 盡可能對(duì)文章內(nèi)容提供一個(gè)精確和簡(jiǎn)明的描述摘要 對(duì)研究背景、目的、所用動(dòng)物的種系、關(guān)鍵方法、主要結(jié)果和結(jié)論提供一個(gè)準(zhǔn)確的摘要前言背景 1）包括充分、科學(xué)的背景(既往工作的相關(guān)參考文獻(xiàn)) , 以明確研究目的和內(nèi)

11、容, 并解釋實(shí)驗(yàn)方法和基本原理；2）解釋所用動(dòng)物種類和模型的選擇依據(jù), 闡述科學(xué)目的、適用范圍, 該研究與人體生物學(xué)的關(guān)聯(lián)程度目的 清楚地描述研究的主要和次要目的，或者將被驗(yàn)證的具體研究假設(shè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告 方法倫理聲明 倫理審查權(quán)限的性質(zhì)，相關(guān)證書(shū)，與研究相關(guān)的國(guó)家或機(jī)構(gòu)的動(dòng)物管理和使用指南研究設(shè)計(jì)：對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)，給出簡(jiǎn)明扼要的研究設(shè)計(jì)細(xì)節(jié)：1）實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的數(shù)量；2）旨在減少主觀性偏倚影響而采取的任何步驟；分配實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如隨機(jī)化分組程序)，評(píng)估結(jié)果(如是否施盲并描述被施盲對(duì)象和時(shí)機(jī)) ；3）實(shí)驗(yàn)單位：如以單個(gè)動(dòng)物、群組或以一籠動(dòng)物為單位等；4）用時(shí)線圖或流程圖來(lái)解釋復(fù)雜的研究設(shè)計(jì)是如何實(shí)

12、施的。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告 實(shí)驗(yàn)步驟：對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)或每個(gè)實(shí)驗(yàn)組(包括對(duì)照組)，應(yīng)提供所有實(shí)施過(guò)程中準(zhǔn)確的詳細(xì)資料。如：1）何法(藥物配方和劑量，給藥部位和途徑，麻醉鎮(zhèn)痛藥物的應(yīng)用和監(jiān)測(cè)，手術(shù)步驟，動(dòng)物處死方法)，提供所使用的任何專業(yè)設(shè)備的詳細(xì)信息，包括供應(yīng)商；2）何時(shí)(實(shí)驗(yàn)日期)；3）何處(飼養(yǎng)籠、實(shí)驗(yàn)室和水迷宮) ；4）何因(特定麻醉藥的選擇緣由、給藥途徑和藥物劑量)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 1）提供研究動(dòng)物的詳細(xì)資料，包括種類、品系、雌雄、發(fā)育階段(年齡均值或中位數(shù))和體重(均值或中位數(shù)及其范圍)；2）提供進(jìn)一步的相關(guān)信息，如動(dòng)物來(lái)源、國(guó)際命名、遺傳修飾狀態(tài)(如基因敲除或轉(zhuǎn)基因)、基因型、健康/免疫狀況、未

13、使用藥物或未進(jìn)行測(cè)試和先前的程序等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告 飼養(yǎng)設(shè)施和飼養(yǎng) 1）飼養(yǎng)場(chǎng)所(如設(shè)備類型、無(wú)特定病原、籠舍類型、墊底材料、同籠同伴數(shù)量、飼養(yǎng)魚(yú)類水箱的形狀和材料等)；2）飼養(yǎng)條件(如繁殖計(jì)劃、光/暗周期、溫度和水質(zhì)等；魚(yú)類飼養(yǎng)食物的種類、食物和水的獲取和環(huán)境凈化等)；3）實(shí)驗(yàn)前、中和后期動(dòng)物福利有關(guān)的評(píng)估和干預(yù)。樣本量 1）特別說(shuō)明實(shí)驗(yàn)中使用的動(dòng)物總數(shù)和每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中分配的動(dòng)物數(shù)；2）解釋動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需樣本量的算法及計(jì)算公式；3）標(biāo)明每個(gè)實(shí)驗(yàn)的獨(dú)立重復(fù)的動(dòng)物數(shù)量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告動(dòng)物實(shí)驗(yàn)組分配 1）詳細(xì)描述動(dòng)物如何分配到各實(shí)驗(yàn)組的詳細(xì)信息, 包括隨機(jī)化分組, 如果進(jìn)行配對(duì)應(yīng)介紹匹配條件；2）描述各實(shí)驗(yàn)組對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行處理和評(píng)估的順序。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 明確界定主要和次要實(shí)驗(yàn)測(cè)量指標(biāo)的評(píng)估(如細(xì)胞死亡、分子標(biāo)記和行為改變)。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 1）提供每種分析所使用統(tǒng)計(jì)方法的詳細(xì)信息；2）特別說(shuō)明每個(gè)數(shù)據(jù)集的分析單位(如單個(gè)動(dòng)物、一組動(dòng)物和單神經(jīng)元) ；3）描述用來(lái)評(píng)估數(shù)據(jù)是否滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的假設(shè)及所采用的任何方法。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告 結(jié)果基線數(shù)據(jù) 對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)組，報(bào)告治療或測(cè)試前動(dòng)物的有關(guān)特征和健康狀況(如體重、微生物狀況和藥物測(cè)試)，以表格形式表示。數(shù)據(jù)分析1）報(bào)告進(jìn)入每一項(xiàng)分析中每組的動(dòng)物數(shù)量, 報(bào)告絕對(duì)數(shù)(如10/20, 而不是50%)；2）對(duì)于分析中未納入的任何動(dòng)