生物制品及其應(yīng)用

1、第十二章免疫學(xué)應(yīng)用第二節(jié)生物制品及其應(yīng)用一、生物制品的概念利用微生物、寄生蟲及其組織成分或代謝產(chǎn)物以及動物或人的血液與組織液 等生物材料為原料，通過生物學(xué)、生物化學(xué)以及生物工程學(xué)的方法制成的， 用于 傳染病或其他疾病的預(yù)防、診斷和治療的生物制劑稱為生物制品。狹義的生物制 品是指利用微生物及其代謝產(chǎn)物或免疫動物而制成的，用于傳染病的預(yù)防、診斷 和治療的各種抗原或抗體制劑。主要包括疫苗、免疫血清和診斷液三大類。二、生物制品的命名原則根據(jù)中華人民共和國獸用新生物制品管理辦法 規(guī)定，生物制品命名原則 有10條。.生物制品的命名原則以明確、簡練、科學(xué)為基礎(chǔ)原則。.生物制品名稱不采用商品名或代號。.生物制

2、品名稱一般采用“動物種名+病名+制品名稱”的形式。診斷制劑 則在制品種類前加診斷方法名稱。 如：牛巴氏桿菌病滅活疫苗、馬傳染性貧血活 疫苗、豬支原體肺炎微量間接血凝抗原。 特殊的制品命名可參照此方法。 病名應(yīng) 為國際公認(rèn)的、普遍的稱呼，譯音漢字采用國內(nèi)公認(rèn)的習(xí)慣定法。.共患病一般可不列動物種名。如：氣月中疽滅活疫苗、狂犬病滅活疫苗。.由特定細(xì)菌、病毒、立克次氏體、螺旋體、支原體等微生物以及寄生蟲 制成的主動免疫制品，一律稱為疫苗。例如：仔豬副傷寒活疫苗、牛瘟活疫苗、 牛環(huán)形泰勒蟲疫苗。.凡將特定細(xì)菌、病毒等微生物及寄生蟲毒力致弱或采用異源毒制成的疫苗，稱“活疫苗”；用物理或化學(xué)方法將其滅活后制

3、成的疫苗，稱“滅活疫苗”0.同一種類而不同毒（菌、蟲）株（系）制成的疫苗。可在全稱后加括號 注明毒（菌、蟲）株（系）。例如：豬丹毒活疫苗（GC42株）、豬丹毒活疫苗（G4T10 株）。.由兩種以上的病原體制成的一種疫苗，命名采用“動物種名+若干病名+x聯(lián)疫苗”的形式。例如：羊黑疫、快疫二聯(lián)滅活疫苗，豬瘟、豬丹毒、豬肺 疫三聯(lián)活疫苗。.由兩種以上血清型制備的一種疫苗，命名采用“動物種名 +病名+若干型 名+x價疫苗”的形式。例如：口蹄疫 O型、A型雙價活疫苗。.制品的制造方法、劑型、滅活劑、佐劑一般不標(biāo)明。但為區(qū)別已有的制 品，可以標(biāo)明。三、獸醫(yī)臨床常用的生物制品及應(yīng)用獸醫(yī)臨床常用的生物制品有疫

4、苗、免疫血清和診斷液三大類，主要用于傳染 病的預(yù)防、診斷和治療。（一）疫苗利用病原微生物、寄生蟲及其組分或代謝產(chǎn)物制成的，用于人 工主動免疫的生物制品稱為疫苗。 通過接種疫苗，刺激動物體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從 而抵抗特定病原微生物或寄生蟲的感染，以達(dá)到預(yù)防疫病的目的。.疫苗的種類 已有的疫苗概括起來分為活疫苗、滅活疫苗、代謝產(chǎn)物和 亞單位疫苗以及生物技術(shù)疫苗。其中生物技術(shù)疫苗又分基因工程亞單位疫苗、 合 成肽疫苗、抗獨特型疫苗、基因工程活疫苗以及 DNA疫苗。(1)活疫苗 簡稱活苗，有強毒苗、弱毒苗和異源苗三種。強毒苗是應(yīng)用最早的疫苗種類，如我國古代民間預(yù)防天花所使用的痂皮粉末 就含有強毒。使用強毒

5、進(jìn)行免疫有較大的危險， 免疫的過程就是散毒的過程，所 以在現(xiàn)在的生產(chǎn)中應(yīng)嚴(yán)格禁止。弱毒苗是目前使用最廣泛的疫苗。在一定條件下，使病原微生物毒力減弱， 但仍保持良好的免疫原性或篩選自然弱毒株，擴大培養(yǎng)后制成的疫苗為弱毒疫 苗，如雞新城疫R系、IV系弱毒苗。弱毒苗的優(yōu)點是能在動物體內(nèi)有一定程度的 增殖，免疫劑量小，免疫保護(hù)期長，不需要使用佐劑，應(yīng)用成本低。缺點是弱毒 苗有散毒的可能或有一定的組織反應(yīng)， 難以制成聯(lián)苗，運輸保存條件要求高，現(xiàn) 多制成凍干苗。異源苗是用具有共同保護(hù)性抗原的不同種病毒制成的疫苗。例如用火雞皰疹病毒(HVT)預(yù)防雞馬立克氏病，用鴿痘病毒疫苗預(yù)防雞痘等。(2)滅活疫苗 簡稱死

6、苗。是選用免疫原性強的病原微生物經(jīng)人工培養(yǎng)后 用理化方法將其滅活制成的疫苗稱為滅活疫苗。如雞傳染性法氏囊油乳劑滅活 苗。滅活苗的優(yōu)點是研制周期短，使用安全，易于保存和運輸，容易制成聯(lián)苗或 多價苗；缺點是不能在動物體內(nèi)增殖，使用劑量大，免疫保護(hù)期短，通常需加佐 劑以增強免疫效果，常需多次免疫且只能注射免疫。(3)代謝產(chǎn)物疫苗 是利用細(xì)菌的代謝產(chǎn)物如毒素、酶等制成的疫苗。破 傷風(fēng)毒素、白喉毒素、肉毒毒素經(jīng)甲醛滅活后制成的類毒素有良好的免疫原性， 可作為主動免疫制劑，如預(yù)防破傷風(fēng)用的破傷風(fēng)類毒素就是成功的例子。另外， 致病性大腸桿菌腸毒素、多殺性巴氏桿菌的攻擊素和鏈球菌的擴散因子等都可用 作代謝產(chǎn)物

7、疫苗。(4)亞單位疫苗 是將病毒的衣殼蛋白與核酸分開，除去核酸用提純的蛋 白質(zhì)衣殼制成的疫苗。此類苗僅含有病毒的抗原成分，無核酸，因而無不良反應(yīng)， 使用安全，效果較好。豬口蹄疫、偽狂犬病、狂犬病等亞單位疫苗已有成功的試 驗報道。亞單位疫苗的不足之處是制備困難，價格昂貴。降低成本是推廣的關(guān)鍵。(5)生物技術(shù)疫苗 生物技術(shù)疫苗是利用生物技術(shù)制備的分子水平的疫苗， 包括基因工程亞單位疫苗、合成肽疫苗、抗獨特型疫苗、基因工程活苗以及DNA 疫苗?；蚬こ虂唵挝灰呙纾夯蚬こ虂唵挝灰呙缡怯?DNA重組技術(shù)，將編碼病 原微生物保護(hù)性抗原的基因?qū)胧荏w菌 (如大腸桿菌)或細(xì)胞，使其在受體細(xì)胞 中高效表達(dá)，分

8、泌保護(hù)性抗原肽鏈。提取保護(hù)性抗原肽鏈，加入佐劑即制成基因 工程亞單位疫苗。預(yù)防仔豬和犢牛下痢的大腸桿菌菌毛基因工程疫苗是一個成功 的例子。合成肽疫苗：合成肽疫苗是用化學(xué)合成法人工合成病原微生物的保護(hù)性多 肽，并將其連接到大分子載體上，再加入佐劑制成疫苗。合成肽疫苗的優(yōu)點是可 在同載體上連接多種保護(hù)性肽鏈或多個血清型的保護(hù)性抗原肽鏈，這樣只要一次免疫就可預(yù)防幾種傳染病或幾個血清型。但合成肽免疫原性一般較弱，而且只能 具有線性構(gòu)型，是其不足之處?？躬毺匦砸呙纾嚎躬毺匦砸呙缡敲庖哒{(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)學(xué)說發(fā)展到新階段的產(chǎn)物?？?獨特型抗體可以模擬抗原物質(zhì)，可刺激機體產(chǎn)生與抗原特異性抗體具有同等免疫 效應(yīng)的抗體，由

9、此制成的疫苗稱抗獨特型疫苗或內(nèi)影像疫苗0 抗獨特型疫苗不僅 能誘導(dǎo)體液免疫，亦能誘導(dǎo)細(xì)胞免疫，并不受 MHC的限制，而且具有廣譜性， 即對發(fā)生抗原性變異的病原能提供良好的保護(hù)力。但制備不易，成本較高。DNA疫苗：這是一種最新的分子水平的生物技術(shù)疫苗，將編碼保護(hù)性抗原 的基因與能在真核細(xì)胞中表達(dá)的載體 DNA重組，重組的DNA可直接注射（接 種）到動物（如小鼠）體內(nèi)，刺激機體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫。基因工程活疫苗：包括基因缺失苗、重組活載體疫苗及非復(fù)制性疫苗三類?；蛉笔б呙纾菏怯没蚬こ碳夹g(shù)將毒株毒力相關(guān)基因切除構(gòu)建的疫苗。該苗安全性好，不易返祖，其免疫接種與強毒感染相似，機體可對病毒的多種抗

10、 原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，免疫力堅實，尤其是適于局部接種，誘導(dǎo)產(chǎn)生粘膜免疫力，因 而是較理想的疫苗。目前已有多種基因缺失苗問世，如霍亂弧菌A亞基基因中切除94%的A1基因缺失變異株，獲得無毒的活菌苗。另外，將某些皰疹病毒的 TK基因切除，其毒力下降，而且不影響病毒復(fù)制及其免疫原性，成為良好的基 因缺失苗。豬偽狂犬病基因缺失苗已商品化并普遍使用。重組活載體疫苗：是用基因工程技術(shù)將保護(hù)性抗原基因（目的基因）轉(zhuǎn)移 到載體中，使之表達(dá)。痘病毒、腺病毒和皰疹病毒等都可用作載體，痘病毒的 TK基因可插入大量的外源基因，大約能容納 25Kb,而多數(shù)目的基因都在 2Kb 左右。因此可在TK基因中插入多種病原的保護(hù)性抗

11、原基因， 制成多價苗或聯(lián)苗， 國外已研制出以腺病毒為載體的乙肝疫苗、以皰疹病毒為載體的新城疫疫苗。非復(fù)制性疫苗：又稱活一死苗，與重組活載體疫苗類似，但載體病毒接種 后只產(chǎn)生頓挫感染，不能完成復(fù)制過程，無排毒的隱患，同時又可表達(dá)目的抗原， 產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)。如用金絲猴痘病毒為載體，表達(dá)新城疫病毒HF基因，用于預(yù)防雞的新城疫。（6）多價苗和聯(lián)苗 多價苗是指將細(xì)菌（或病毒）的不同血清型混合制成的疫苗，如巴氏桿菌多價苗、大腸桿菌多價苗、口蹄疫 O、A型雙價苗。聯(lián)苗是指由兩種以上的細(xì)菌或病毒聯(lián)合制成的疫苗， 一次免疫可達(dá)到預(yù)防幾 種疾病的目的。如豬瘟一豬丹毒一豬肺疫三聯(lián)苗，新城疫一減蛋綜合癥一傳染性

12、法氏囊病三聯(lián)苗，犬的六聯(lián)苗等。聯(lián)苗或多價苗的應(yīng)用可減少接種次數(shù)， 減少接種動物的應(yīng)激反應(yīng)，因而利于 畜牧生產(chǎn)管理。（7）寄生蟲疫苗 由于寄生蟲大多有復(fù)雜的生活史，具有功能抗原和非功能抗原，具蟲體抗原極其復(fù)雜并具有高度多變性，因此，較為理想的寄生蟲疫苗不多。多數(shù)研究者認(rèn)為，只有活的蟲體才能誘發(fā)機體產(chǎn)生保護(hù)性免疫。國際上有些國家使用犬鉤蟲疫苗及抗球蟲活苗等收到了良好的免疫效果，有些國家還相繼生產(chǎn)了旋毛蟲蟲體組織佐劑苗、豬全囊蟲勻漿苗、弓形體佐劑苗和伊氏錐蟲致弱 苗等。2.疫苗使用的注意事項（1）疫苗的質(zhì)量 首先，疫苗應(yīng)購自國家批準(zhǔn)的生物制品廠家。購買及使 用前檢查是否過期，并剔除破損、封口不嚴(yán)及物

13、理性狀（色澤、外觀、透明度、 有無異物等）與說明不符者。（2）疫苗的保存和運輸 供免疫接種的疫苗購買后，必須按規(guī)定的條件保 存和運輸，否則會使疫苗的質(zhì)量明顯下降而影響免疫效果甚至?xí)斐擅庖呤　?一般來說，滅活苗要保存于215c的陰暗環(huán)境中，非經(jīng)凍干的活菌苗（濕苗） 要保存于48c的冰箱中，這兩種疫苗都不應(yīng)凍結(jié)保存。凍干的弱毒苗，一般 都要求低溫冷凍-15C以下保存，并且保存溫度越低，疫苗病毒（或細(xì)菌）死亡 越少。如豬瘟兔化弱毒凍干苗在-15C可彳存1年，08c保存6個月，25c約 10do有些國家的凍干苗因使用耐熱保護(hù)劑而保存于 46C。所有疫苗的保存溫 度均應(yīng)保持穩(wěn)定，溫度高低波動大，尤其

14、是反復(fù)凍融，疫苗病毒（或細(xì)菌）會迅 速大量死亡。馬立克氏病疫苗有一種細(xì)胞結(jié)合型疫苗， 必須于液氮罐中保存和運 輸，要求更為嚴(yán)格。疫苗運輸?shù)睦硐霚囟葢?yīng)與保存的溫度一致，在疫苗運輸時通常都達(dá)不到理想 的低溫要求，因此，運輸時間越長，疫苗中病毒（或細(xì)菌）的死亡率越高，如果 中途轉(zhuǎn)運多次，影響就更大，生產(chǎn)中要注意此環(huán)節(jié)。（3）疫苗的稀釋與及時使用器械的消毒：一切用于疫苗稀釋的器具，包括注射器、針頭及容器等，使用 前必須洗滌干凈，并經(jīng)高壓滅菌或煮沸消毒，不干凈的和未經(jīng)滅菌的用具，容易 造成疫苗的污染或?qū)⒁呙绮《荆ɑ蚣?xì)菌）殺死。注射器和針頭盡量做到一頭（只） 換一個。絕不能一個針頭從頭打到尾。用清潔的針頭

15、吸藥，使用完畢的疫苗瓶、 剩余疫苗及給藥用具一起消毒滅菌處理。稀釋劑的選擇：必須選擇符合要求的稀釋劑來稀釋疫苗， 除馬立克氏病疫苗 等個別疫苗要用專用的稀釋劑以外，一般用于滴鼻、滴眼、刺種、擦肛及注射的 疫苗，可用滅菌的生理鹽水或滅菌的蒸儲水作為稀釋劑；飲水免疫時，稀釋劑最好用蒸儲水或去離子水，也可用潔凈的深井水，但不能用含消毒劑的自來水；氣 霧免疫時，稀釋劑可用蒸儲水或去離子水，如果稀釋水中含有鹽類，霧滴噴出后， 由于水分蒸發(fā)，鹽類的濃度增高，亦會使疫苗病毒死亡。為了保護(hù)疫苗病毒，可 在飲水或氣霧的稀釋劑中加入 0.1%的脫脂奶粉或山梨糖醇。稀釋方法 稀釋疫苗時，首先將疫苗瓶蓋消毒，然后用注

16、射器把少量的稀釋 劑注入疫苗瓶中，充分搖振，使疫苗完全溶解后，再加入其余量的稀釋劑。如果 疫苗瓶太小，不能裝入全部的稀釋劑，應(yīng)把疫苗吸出來放于一容器中，再用稀釋 劑把原疫苗瓶沖洗若干次，以便將全部疫苗病毒(或細(xì)菌)都洗下來。疫苗應(yīng)于臨用前才由冰箱內(nèi)取出，稀釋后應(yīng)盡快使用。尤其是活毒疫苗稀釋 后，于高溫條件下或被太陽光照射易死亡，時間越長，死亡越多。一般來說，馬 立克氏病疫苗應(yīng)于稀釋后12h內(nèi)用完，其它疫苗也應(yīng)于24h內(nèi)用完，超過此 時間的要滅菌后廢棄，更不能隔天使用。(4)選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩?接種疫苗的方法有滴鼻、點眼、刺種、皮下或 肌肉注射、飲水、氣霧、滴肛或擦肛等，應(yīng)根據(jù)疫苗的類型、疫病特

17、點及免疫程 序來選擇每次的接種途徑，一般應(yīng)以疫苗使用說明為準(zhǔn)。例如滅活疫苗、類毒素 和亞單位疫苗不能經(jīng)消化道接種，一般用于肌肉或皮下注射。注射時應(yīng)選擇活動 少的易于注射的部位，如頸部皮下，禽胸部肌肉等。(5)制定合理的免疫程序 目前沒有適用于各地區(qū)及各飼養(yǎng)場的固定的免 疫程序，應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)氐膶嶋H情況制定。由于影響免疫的因素很多，免疫程序應(yīng)根 據(jù)疫病在本地區(qū)的流行情況及規(guī)律、畜禽的用途(種用、肉用或蛋用)、年齡、母源抗體水平和飼養(yǎng)條件，以及使用疫苗的種類、性質(zhì)、免疫途徑等方面的因素 制定，不宜作統(tǒng)一要求。免疫程序應(yīng)隨情況的變化而作適當(dāng)調(diào)整， 不存在普遍適 用的最佳免疫程序。血清學(xué)抗體檢測是重要的參

18、考依據(jù)。(6)免疫劑量、接種次數(shù)及時間間隔在一定限度內(nèi)，疫苗用量與免疫效果成正相關(guān)。過低的劑量刺激強度不夠，不能產(chǎn)生足夠強烈的免疫反應(yīng)； 而疫苗 用量超過了一定限度后，免疫效果不但不增加，還可能導(dǎo)致免疫受到抑制，稱為 免疫麻痹。因此疫苗的劑量應(yīng)按照規(guī)定使用，不得任意增減。疫苗使用時，在初次應(yīng)答之后，間隔一定時間重復(fù)免疫，可刺激機體產(chǎn)生再 次應(yīng)答和回憶反應(yīng)，產(chǎn)生較高水平的抗體和持久免疫力。所以生產(chǎn)中常進(jìn)行23次的連續(xù)接種，時間問隔視疫苗種類而定，細(xì)菌或病毒疫苗免疫產(chǎn)生快，間隔 710d或更長一些。類毒素是可溶性抗原，免疫反應(yīng)產(chǎn)生較慢，時間問隔至少4 6周。(7)疫苗的型別與疫病型別的一致性 有些

19、傳染病的病原有多種血清型， 并且各血清型之間無交互免疫性，因此對于這些傳染病的預(yù)防就需要對型免疫或 用多價苗。如口蹄疫、禽流感、雞傳染性支氣管炎的免疫就應(yīng)注意對型免疫或使 用多價苗。(8)藥物的干擾 使用活菌苗前后10d不得使用抗生素及其他抗菌藥，活 菌苗和活病毒苗不能隨意混合使用。(9)防止不良反應(yīng)的發(fā)生 免疫接種時，應(yīng)注意被免疫動物的年齡、體質(zhì) 和特殊的生理時期(如懷孕和產(chǎn)蛋期)。幼齡動物應(yīng)選用毒力弱的疫苗免疫，如 雞新城疫的首次免疫用IV系而不用I系， 雞傳染性支氣管炎首次免疫用 H120,而 不用H52;對體質(zhì)弱或正患病的動物應(yīng)暫緩接種；對懷孕母畜和產(chǎn)蛋期的家禽使 用弱毒疫苗，可導(dǎo)致胎

20、兒的發(fā)育障礙和產(chǎn)蛋下降，因此，生產(chǎn)中應(yīng)在母畜懷孕前、 家禽產(chǎn)蛋前做好各種疫病的免疫工作， 必要時，可選擇滅活疫苗，以防引起流產(chǎn) 和產(chǎn)蛋下降等不良后果。免疫接種完畢，要將用過的用具及剩余的疫苗高壓滅菌。同時注意觀察動物 的狀態(tài)和反應(yīng)，有些疫苗使用后會出現(xiàn)短時間的輕微反應(yīng)， 如發(fā)熱、局部淋巴結(jié) 月中大等，屬正常反應(yīng)。如出現(xiàn)劇烈或長時間的不良反應(yīng)，應(yīng)及時治療。(二)免疫血清 動物經(jīng)反復(fù)多次注射同一種抗原物質(zhì)(菌苗、疫苗、類毒 素等)后，機體體液中尤其血清中產(chǎn)生大量抗體， 由此分離所得的血清稱為免疫 血清，又稱高免血清或抗血清。免疫血清注入機體后免疫產(chǎn)生快， 但免疫持續(xù)期 短，常用于傳染病的緊急預(yù)防和

21、治療，屬人工被動免疫。臨床上常用的有抗炭疽 血清、抗豬瘟血清、抗小鵝瘟血清、抗鴨病毒性肝炎血清、破傷風(fēng)抗毒素等。.免疫血清的分類 根據(jù)制備免疫血清所用抗原物質(zhì)的不同，免疫血清可 分為抗菌血清、抗病毒血清和抗毒素(抗毒素血清)0根據(jù)制備免疫血清所用動物的不同，免疫血清還有同種血清和異種血清之 分。用同種動物制備的血清稱同種血清， 用異種動物制備的血清稱異種血清， 抗 細(xì)菌血清和抗毒素通常用大動物(馬、牛等)制備，如用馬制備破傷風(fēng)抗毒素， 用牛制備豬丹毒血清均為異種血清。 抗病毒血清常用同種動物制備，如用豬制備 豬瘟血清、用雞制備雞新城疫血清等，同種動物血清的產(chǎn)量有限，但免疫后不引 起應(yīng)答反應(yīng)，因

22、而比異種血清免疫期長。除了用免疫血清進(jìn)行人工被動免疫外，在家禽常用卵黃抗體制劑進(jìn)行人工接 種，例如雞群暴發(fā)雞傳染性法氏囊炎(舊D)時，用高效價舊D卵黃抗體進(jìn)行緊 急接種，可起到良好的防治效果。卵黃抗體的應(yīng)用應(yīng)考慮防止內(nèi)源和外源病原微 生物的污染。.免疫血清使用的注意事項 免疫血清一般保存于28c的冷暗處，凍干 制品在-15C以下保存。使用時應(yīng)注意以下幾點。(1)早期使用 抗毒素具有中和外毒素的作用，抗病毒血清具有中和病毒 的作用，這種作用僅限于未和組織細(xì)胞結(jié)合的外毒素和病毒，而對已和組織細(xì)胞 結(jié)合的外毒素、病毒及產(chǎn)生的組織損害無作用。因此，用免疫血清治療時，愈早 愈好，以便使毒素和病毒在未達(dá)到侵害部位之前，就被中和而失去毒性。(2)多次足量 應(yīng)用免疫血清治療雖然有收效快，療效高的特點，但維持 時間短，因此必須多次足量注射才能收到好的效果。(3)血清用量 要根據(jù)動物的體重、年齡和使用目的來確定血清用量，一 股大動物預(yù)防用量為1020ml,中等動物510ml,家禽預(yù)防用量0.51ml, 治療用量23ml。(4)途徑適當(dāng) 使用免疫血清適