全國(guó)挑戰(zhàn)杯大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽獲獎(jiǎng)作品

1、序號(hào)： 編碼： 第九屆“挑戰(zhàn)杯”全國(guó)大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽作品申報(bào)書 作品名稱：線粒體分析結(jié)果佐證三峽懸棺古人來(lái)源于百越 學(xué)校全稱： 復(fù)旦大學(xué) 申報(bào)者姓名 （集體名稱）： 閆鵬榮 類別：自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文哲學(xué)社會(huì)科學(xué)類社會(huì)調(diào)查報(bào)告和學(xué)術(shù)論文科技發(fā)明制作A類科技發(fā)明制作B類 報(bào)送方式：省級(jí)報(bào)送作品高校直送作品申報(bào)書目錄A1申報(bào)者情況（個(gè)人項(xiàng)目）5B1申報(bào)作品情況61.作品撰寫的目的和基本思路62.作品的科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處63.作品的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義74.學(xué)術(shù)論文文摘85.相關(guān)文獻(xiàn)檢索目錄9C當(dāng)前國(guó)內(nèi)外同類課題研究水平概述11D推薦者情況及對(duì)作品的說(shuō)明14E全國(guó)組織委員會(huì)秘書處資格

2、和形式審查意見18F參賽作品打印處（參看附錄一）19G1全國(guó)評(píng)審委員會(huì)預(yù)審意見粘貼處20G2全國(guó)評(píng)審委員會(huì)終審意見粘貼處21附錄：附錄一：論文正文22附錄二：立題依據(jù)及原理流程闡述381. 立題依據(jù)381.1 綜述381.2 懸棺簡(jiǎn)介及分布背景391.3 古DNA研究背景411.4 目的民族背景介紹422. 原理及方法的闡述452.1 考古調(diào)查部分452.2分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)部分45 原理闡述45 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：47 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)流程47附錄三:2004恩施考古實(shí)踐紀(jì)行48附錄四：恩施行采訪實(shí)錄53說(shuō) 明1申報(bào)者應(yīng)在認(rèn)真閱讀此說(shuō)明各項(xiàng)內(nèi)容后按要求詳細(xì)填寫。2申報(bào)者在填寫申報(bào)作品情況時(shí)只需根

3、據(jù)個(gè)人項(xiàng)目或集體項(xiàng)目填寫A1或A2表，根據(jù)作品類別（自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文、哲學(xué)社會(huì)科學(xué)類社會(huì)調(diào)查報(bào)告和學(xué)術(shù)論文、科技發(fā)明制作）分別填寫B(tài)1、B2或B3表。所有申報(bào)者可根據(jù)情況填寫C表。3表內(nèi)項(xiàng)目填寫時(shí)一律用鋼筆或打印，字跡要端正、清楚，此申報(bào)書可復(fù)制。4序號(hào)、編碼由第九屆“挑戰(zhàn)杯”全國(guó)大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽全國(guó)組委會(huì)填寫。5學(xué)術(shù)論文、社會(huì)調(diào)查報(bào)告及所附的有關(guān)材料必須是中文（若是外文，請(qǐng)附中文本），請(qǐng)以4號(hào)楷體打印在A4紙上，附于申報(bào)書后，字?jǐn)?shù)在8000字左右（文章版面尺寸14.522cm）。6發(fā)起高校的三件直送作品和各?。▍^(qū)、市）通過(guò)初評(píng)的作品（數(shù)量參照“作品數(shù)額分配方案”）各一式四份分別按

4、全國(guó)組委會(huì)規(guī)定的時(shí)間用特快專遞寄至全國(guó)競(jìng)賽組委會(huì)辦公室。7作品申報(bào)書須按要求由各省或各校競(jìng)賽組織協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)統(tǒng)一寄送。8其他參賽事宜請(qǐng)向本校競(jìng)賽組織協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)咨詢。9寄送地址：復(fù)旦大學(xué)團(tuán)委第九屆“挑戰(zhàn)杯”全國(guó)大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽組委會(huì)辦公室聯(lián) 系 人：丁 力聯(lián)系 ：02165642631傳 真：02165642631郵政編碼：200433A1申報(bào)者情況（個(gè)人項(xiàng)目）說(shuō)明：1必須由申報(bào)者本人按要求填寫，申報(bào)者情況欄內(nèi)必須填寫 個(gè)人作品的第一作者（承擔(dān)申報(bào)作品60%以上的工作者）； 2本表中的學(xué)籍管理部門簽章視為對(duì)申報(bào)者情況的確認(rèn)。姓 名閆鵬榮性別男出生年月申報(bào)者情況學(xué)校全稱復(fù)旦大學(xué)專 業(yè)生物科學(xué)現(xiàn)

5、學(xué)歷本科在讀年級(jí)四學(xué)制4年入學(xué)時(shí)間作品全稱線粒體分析結(jié)果佐證三峽懸棺古人來(lái)源于百越畢業(yè)論文題目多阿片受體基因多態(tài)同海洛因依賴的相關(guān)性研究通訊地址上海市政肅路210弄7#4023郵政編碼200433單位 65114005常住地通訊地址上海市政肅路210弄7#4023郵政編碼200433住宅 65114005合作者情況姓 名性別年齡學(xué)歷所在單位資 格 認(rèn)定學(xué)校學(xué)籍管理部門意見 是否為2005年7月1日前正式注冊(cè)在校的全日制非成人教育、非在職的各類高等院校中國(guó)學(xué)生（含專科生、本科生和研究生）。是 否若是，其學(xué)號(hào)為： 0170060 （部門蓋章） 年 月 日院系負(fù)責(zé)人或?qū)熞庖?本作品是否為課外學(xué)術(shù)科

6、技或社會(huì)實(shí)踐活動(dòng)成果 是 否 負(fù)責(zé)人簽名： 年 月 日B1申報(bào)作品情況（自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文）說(shuō)明：1必須由申報(bào)者本人填寫；2本部分中的科研管理部門簽章視為對(duì)申報(bào)者所填內(nèi)容的確認(rèn)；3作品分類請(qǐng)按作品的學(xué)術(shù)方向或所涉及的主要學(xué)科領(lǐng)域填寫；4碩士研究生、博士研究生作品不在此列。作品全稱線粒體分析結(jié)果佐證三峽懸棺古人來(lái)源于百越作品分類 D生命科學(xué)（包括生物、農(nóng)學(xué)、藥學(xué)、醫(yī)學(xué)、健康、衛(wèi)生、食品等）作品撰寫的目的和基本思路循著跨學(xué)科整合性研究的理念，以便為三峽地區(qū)的族群及其相關(guān)研究提供全新思路和研究視角，我們將線粒體分析技術(shù)引入三峽地區(qū)的人類學(xué)研究，對(duì)墓葬出土的懸棺古人骨骼進(jìn)行采樣和古DNA檢測(cè)，同時(shí)參考

7、已發(fā)表的線粒體的單倍型數(shù)據(jù)對(duì)周圍地區(qū)的現(xiàn)代族群如土家族,侗族等進(jìn)行民族聚類分析.本作品擇定湖北省恩施地區(qū)為采樣考察目的地，通過(guò)對(duì)當(dāng)?shù)睾臀錆h、宜昌兩市博物館的參觀、采訪，以調(diào)研實(shí)踐的形式完成對(duì)當(dāng)?shù)匚幕?、民族遷徙記錄的調(diào)查，然后同考古隊(duì)，文保部門合作取得古代人骨骼樣本，以遺傳學(xué)基因分析的方法確定其的民族組屬，科學(xué)地補(bǔ)充佐證所取的30004000年前的恩施懸棺古人樣品可能是更早年代時(shí)分布在中國(guó)東南地區(qū)的百越族的后裔的假說(shuō)。作品的科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處人類線粒體DNA(mtDNA)是閉合環(huán)狀分子，由16,569個(gè)堿基組成，同細(xì)胞核遺傳相對(duì)應(yīng)的，mtDNA具有復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的獨(dú)立性。由于其嚴(yán)格母系遺傳、無(wú)

8、重組、拷貝數(shù)多、有效群體小、突變率高等的特殊遺傳性，它被廣泛應(yīng)用于人類群體進(jìn)化、古病理學(xué)以及古人類學(xué)等領(lǐng)域。而位于mtDNA D-環(huán)區(qū)被稱為高變序列的1222個(gè)堿基區(qū)，更以不到7% mtDNA的堿基長(zhǎng)度攜帶大量遺傳多態(tài)性信息。這樣,找到可信的高變序列就變成關(guān)系到能否進(jìn)行進(jìn)化分析的關(guān)鍵，一旦找到，就可以根據(jù)其突變位點(diǎn)來(lái)確定單倍型,進(jìn)而尋找其與現(xiàn)代族群的單倍型聯(lián)系，找到突變位點(diǎn)的特異指向，推測(cè)可能的古代人群分布信息。現(xiàn)在，非洲起源說(shuō)已經(jīng)得到普遍的認(rèn)可，但走出非洲后的遷徙以及東亞地區(qū)的遷徙路線還存在很多的爭(zhēng)議。對(duì)現(xiàn)代人數(shù)據(jù)的分析，只能建立在假設(shè)與解釋上，更直接的辦法則是從古人身上得到數(shù)據(jù)來(lái)反映人類歷

9、史，因此，只要分析一個(gè)地區(qū)的古人類數(shù)據(jù)，就可以讓已有的現(xiàn)代人得到溯源，尋到他們的根。本作品以湖北恩施地區(qū)的箱子巖、巴布埡兩處距今約30004000年前的懸棺古人長(zhǎng)骨及齒骨為樣品，以跨學(xué)科的理念對(duì)懸棺的族屬界定問(wèn)題進(jìn)行溯源，期望破解“懸棺之謎”。一方面文化方面的背景知識(shí)承認(rèn)它們可歸于長(zhǎng)江中游的大溪文化區(qū), 另一方面我們選擇mtDNA上的第一高變區(qū)和第二高變區(qū)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，在母系遺傳上，恩施懸棺古人和歷史上的百越族后裔有更近的親緣關(guān)系，從而支持恩施懸棺古人可能來(lái)源于百越的假說(shuō)。作品的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義本作品開創(chuàng)性地從基因遺傳標(biāo)記入手對(duì)中國(guó)南方的懸棺古人遺骸進(jìn)行分析，旨在提供恩施古人族屬同

10、現(xiàn)代民族的相關(guān)性論證, 以及古今人類群體關(guān)系變遷和人類學(xué)所涉領(lǐng)域研究的實(shí)證根據(jù)與結(jié)論，并對(duì)民族學(xué)上的三峽懸棺族屬問(wèn)題給出遺傳學(xué)上的科學(xué)合理解釋，為民族學(xué)，古人類學(xué)提供新的研究思路和方法。另一方面，實(shí)驗(yàn)結(jié)果既為該地區(qū)古人類基因庫(kù)的建立奠定基礎(chǔ),同時(shí)也給其他地區(qū)相關(guān)民族的人類學(xué)分析提供參考和分析的依據(jù), 更為開展功能基因組學(xué)的研究打下基礎(chǔ)學(xué)術(shù)論文文摘摘 要：古人類DNA的研究方興未艾，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、限制性酶切和測(cè)序等多種分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展，為古DNA的研究逐漸深入提供了良好的手段，使之成為新興的多學(xué)科交叉研究領(lǐng)域，而作為有著五千年悠久歷史的東方古國(guó)，中國(guó)無(wú)疑更具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)

11、。本文以中國(guó)湖北恩施地區(qū)仙人洞、巴布埡兩處約3000年前的懸棺古人骨及牙齒樣品為對(duì)象，進(jìn)行線粒體D環(huán)上第一高變區(qū)的多態(tài)性研究，并結(jié)合已發(fā)表的現(xiàn)代人線粒體數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果展示，3000年前的古恩施人為古越人后裔，該地區(qū)現(xiàn)代人為古越人西遷途中民族融合的產(chǎn)物，并且，這個(gè)過(guò)程伴隨中有南北方線粒體的融合現(xiàn)象。關(guān)鍵詞：懸棺；線粒體DNA；單倍型；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）；NetworkAbstract: The research on the ancient human DNA is a newly heated field with promising prospects, especially as

12、 the appliance and fast development of kinds of molecular biotechniques, such as PCR （polymerase chain reaction）, restriction enzyme and sequencing in large scales. All these techniques and methods provide indispensable means to carry on the researches on ancient DNA to an even deeper extent. As an

13、Asian country with 5000 years of history, China undoubtedly owns advantaged convenience on this project. In this article, based on the ancient human skeletons and teeth colleted from the Clif-Coffins in two sites - Fairy Cave, and Babuya in Enshi of Hubei province, which can trace to 3000 years befo

14、re present, we analyzed the polymorphism of the HVSI and HVSII on the mtDNA, with reference to the released data of the modern humans. The result showed that the colony of ancient Enshians that existed 3000 years ago should be the descendants of the ancient clan - Yue, and was formed when the latter

15、 migrated to the west. Keywords: Clif-Coffin; mtDNA; haplotype; PCR (polymerase chain reaction); Network 作品在何時(shí)、何地、何種機(jī)構(gòu)舉行的會(huì)議上或報(bào)刊上發(fā)表及所獲獎(jiǎng)勵(lì) 擬投遺傳學(xué)報(bào)鑒定結(jié)果請(qǐng)?zhí)峁?duì)于理解、審查、評(píng)價(jià)所申報(bào)作品具有參考價(jià)值的現(xiàn)有技術(shù)及技術(shù)文獻(xiàn)的檢索目錄1 Anderson S, Bankier AT, Barell BG, de Bruijn MH, Coulson AR, Drouin J, EperonIC, Nierlich DP, Roe BA, Sanger F, S

16、chreier PH, Smith AJ, Staden R, Young IG, Sequence and organization of the human mitochondrial genome, Nature 290:457-65 (1981)2 Ballinger SW, Schurr TG, Torroni A, Gan YY, Hodge JA, Hassan K, Chen KH, Wallace DC (1992) Southeast Asian mitochondrial DNA analysis reveals genetic continuity of ancient

17、 mongoloid migrations. Genetics 130:139-1523 Bo Wen, Hui Li, Daru Lu, Xiufeng Song, Feng Zhang, Yungang He, Feng Li, Yang Gao, Xianyun Mao, Liang Zhang, Ji Qian, Jingze Tan, Jianzhong Jin, Wei Huang, Ranjan Deka, Bing Su, Ranajit Chakraborty & Li Jin, Genetic evidence supports demic diffusion of Han

18、 culture, Nature 431:302-305 (2004)4 Bo Wen, Xuanhua Xie, Song Gao, Hui Li, Hong Shi, Xiufeng Song, Tingzhi Qian, Chunjie Xiao, Jianzhong Jin, Bing Su, Daru Lu, Ranajit Chakraborty, and Li Jin, Analyses of genetic structure of Tibeto-Burman populations reveals sex-biased admixture in southern Tibeto

19、-Burmans. Am. J. Hum. Genet., 74(5):856-65(2004)5 Bo Wen, Hong Shi, Ling Ren, Huifeng Xi, Kaiyuan Li, Wenyi Zhang, Bing Su, Shiheng Si, Li Jin, Chunjie Xiao, The origin of Mosuo people as revealed by mtDNA and Y chromosome variation. Science in China Series C-Life Sciences 47 (1): 1-10(2004)6 Bo Wen

20、, Hui Li, Song Gao, Xianyun Mao, Yang Gao, Feng Li, Feng Zhang, Yungang He, Yongli Dong, Youjun Zhang, Wenju Huang, Jianzhong Jin, Chunjie Xiao, Daru Lu, Ranajit Chakaraborty, Bing Su, Ranjan Deka and Li Jin, Genetic structure of Hmong-Mien speaking populations in East Asia as revealed by mtDNA line

21、ages. Molecular Biology and Evolution. 22(3):725734.(2004)7 Cann RL, Stoneking M, Wilson AC (1987) Mitochondrial DNA and human evolution. Nature 325:31-368 Fily ML, Crubezy E, Courtaud P, Keyser C, Ebrard D, Ludes B, Paleogenetic analysis of the skeletons from the sepulchral cave of Elzarreko Karbia

22、 (Bronze Age, Basque Country), C R Acd Sci Paris 321:79-98 (1998)9 Henryk W. Witas. Przeglad Antropologiczny Anthropological Review, Vol. 64, 41-56 (2001)10 Horai S., K. Murayama, K. Hayasaka, S. Matsubayashi, Y. Hattori, G. Fucharoen, S. Harihara, K. S. Park, K. Omoto, I. H. Pan, 1996 mtDNA polymor

23、phism in East Asian populations, with special reference to the peopling of Japan, Am. J. Hum. Genet 59:579-59011 Kolman C., N. Sambuughin, E. Bermingham, 1996 Mitochondrial DNA analysis of Mongolian populations and implications for the origin of New World founders, Genetics 142:1321-133412 Lee S., C

24、. Shin, K. Kim, Y. Lee, J. Lee, 1997 Sequence variation of mitochondrial DNA control region in Koreans, Forensic Sci. Int 87:99-11613 Matthias Krings, Anne Store, Ralf W. Schmitz, Heike Krainitzki, Mark Stoneking and Svante Pbo. Neandertal DNA sequences and the origin of modern humans, Cell 90:19-30

25、 (1997)14Oota, H.; Kitano, T.; Jin, F.; Yuasa, I.; Wang, L.; Ueda, S.; Saitou, N.; Stoneking, M. Extreme mtDNA homogeneity in continental Asian populations, American Journal of Physical Anthropology, vol. 118, pp. 146-5315 Pbo S. Molecular cloning of Ancient Egyptian mummy DNA. Nature 314:644-645 (1

26、985)16 Pbo S.,Gifford J A,and Wilson A C. Mitochondrial DNA Sequences from a 7000-year old brain.Nucleic Acids Research,1988.16:9775-9787.17 Qing-Peng Kong, Yong-Gang Yao, Chang Sun, Hans-Jurgen Bandelt, Chun-Ling Zhu and Ya-Ping Zhang, Phylogeny of East Asian Mitochondrial DNA Lineages Inferred fro

27、m Complete Sequences, Am. J. Hum. Genet. 73:000000 (2003)18 Torroni A, Schurr TG, Cabell MF, Brown MD, Neel JV, Larsen M, Smith DG, Vullo CM, Wallace DC (1993). Asian affinities and continental radiation of the four founding Native American mtDNAs.Am J Hum Genet. 53:563-90.19 Wallace DC, Brown MD, L

28、ott MT(1999) Nucleotide Mitochondrial DNA variation in human evolution and disease. Gene 238:211-30.20 Yong-Gang Yao, Qing-Peng Kong, Hans-Jurgen Bandelt, Toomas Kivisild, and Ya-Ping Zhang，Phylogeographic Differentiation of Mitochondrial DNA in Han Chinese， Am. J. Hum. Genet. 70:635651 (2002)21 陳明芳

29、，中國(guó)懸棺葬M，重慶出版社，199222 J.東南文化,155(3):55-63 (2002)23 李輝,百越族群結(jié)構(gòu)分析的初步思考, 2002 現(xiàn) 代 人 類 學(xué) 國(guó) 際 研 討 會(huì) 論 文 集24 彭華,百仞高崖之上的千古奇觀中國(guó)懸棺葬管窺J,宜賓師專學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版),Vol 3: 98-101 (1994)25 謝應(yīng)光，三峽懸棺葬的文化內(nèi)涵J，四川文物,Vol 02: 7-10(1997)26 葉文憲,越人石室土墩墓與華南懸棺葬J,浙江社會(huì)科學(xué),Vol 5: 162-166 (2003)27 張帆,李輝,黃穎,譚婧澤,DNA樣本的初步探索J,中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）,12(1):

30、 40-44 (2003)申報(bào)材料清單（申報(bào)論文一篇，相關(guān)資料名稱及數(shù)量） 論文正文一篇科研管理部門簽章 年 月 日C.當(dāng)前國(guó)內(nèi)外同類課題研究水平概述 說(shuō)明：1.申報(bào)者可根據(jù)作品類別和情況填寫； 2.填寫此欄有助于評(píng)審。1. 懸棺存疑我國(guó)的華南地區(qū)普遍存在著一種特殊的墓葬懸棺葬，主要分布在閩、贛交界的武夷山地區(qū)，浙南金衢地區(qū)與溫州一帶，湘西沅江流域，鄂西川東長(zhǎng)江三峽地區(qū)，鄂西南清江流域，川南南廣河與滇東北金沙江一帶，川黔湘鄂交界處的烏江、酉水流域，湘南桂北的湘江流域，桂西南左右江流域以及臺(tái)灣地區(qū)。這些懸棺葬的年代先后不一：福建武夷山懸棺葬的年代最早。從時(shí)間上看， 溯長(zhǎng)江西去，懸棺葬的年代越來(lái)越

31、晚，年代最早的在東南沿海地區(qū)，越往西南內(nèi)地年代越晚；從空間上看，懸棺葬有逆長(zhǎng)江水系西上的特點(diǎn)。歷史學(xué)家在華南懸棺葬墓主的族屬的研究上一直有兩種觀點(diǎn)：有的學(xué)者認(rèn)為長(zhǎng)江三峽地區(qū)的懸棺葬為與東南人群十分密切的南島語(yǔ)族的古越人后裔，另外則有學(xué)者認(rèn)為懸棺墓主是以西南蜀地為聚居地的古巴人。古懸棺人究竟來(lái)自哪里，又到哪里去?本作品對(duì)湖北恩施地區(qū)十六個(gè)古人骨及牙齒為樣品進(jìn)行分析，它們?nèi)∽韵渥訋r、巴布埡兩處約3000年前的懸棺中，文化上可歸于長(zhǎng)江中游大溪文化區(qū)。以mtDNA上的HVSI區(qū)段進(jìn)行分析，正是從母系上解釋懸棺古人的族屬問(wèn)題.2. 古DNA研究現(xiàn)狀古DNA的研究在國(guó)際上的發(fā)展僅僅大約20年，但是已經(jīng)取得

32、了令人矚目的成就，如1997年尼安德特人的研究，在科學(xué)界內(nèi)外引起轟動(dòng)，更被權(quán)威雜志Science評(píng)為當(dāng)年十大科學(xué)成就之一。80年代以來(lái)，中國(guó)考古學(xué)開始了更加廣泛地與物理、化學(xué)、生物和地理學(xué)相結(jié)合，利用自然科學(xué)手段分析考古材料，新技術(shù)和新方法也被不斷地引入考古學(xué)當(dāng)中，滲透到考古學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。當(dāng)今, 分子生物學(xué)技術(shù)和理論的成熟，尤其在DNA研究領(lǐng)域技術(shù)平臺(tái)的建立，使得分子生物學(xué)和考古學(xué)的交叉研究也成為可能。近年來(lái)，中國(guó)社會(huì)科學(xué)院考古所、中科院遺傳所、吉林大學(xué)考古系等單位對(duì)安陽(yáng)殷墟、鄭州西山、內(nèi)蒙龍頭山、河北姜家梁等遺址的人骨遺傳基因的實(shí)驗(yàn)研究，已經(jīng)取得了相當(dāng)?shù)某尚?。?fù)旦大學(xué)和上海博物館也對(duì)以上

33、海馬橋遺址為代表的上海地區(qū)古人類遺骨樣品，進(jìn)行了線粒體DNA的)Region V區(qū)段研究。所有這些，都為解決與各地考古學(xué)文化相關(guān)的問(wèn)題提供了一種新的思路和方法，并把我國(guó)的體質(zhì)人類學(xué)研究逐步提高到分子水平，有利于利用、開發(fā)和保護(hù)我國(guó)古人骨的遺傳資源。這次，引入分子生物學(xué)技術(shù)手段考古，是目前國(guó)內(nèi)為數(shù)不多的將古DNA技術(shù)運(yùn)用于考古學(xué)研究的有益嘗試，這無(wú)疑會(huì)為這一地區(qū)文物的搶救性發(fā)掘和研究注入新的活力，提供新的信息，開拓新的領(lǐng)域。3. mtDNA遺傳標(biāo)記的優(yōu)越性mtDNA比核DNA擁有更多的拷貝數(shù)(每個(gè)細(xì)胞有100-1000線粒體拷貝)，對(duì)它的檢測(cè)比核DNA具有更高的靈敏度。另外,mtDNA具有若干與

34、核DNA不同特征，使其在進(jìn)化研究上具有特殊的意義：mtDNA很少會(huì)發(fā)生重組；mtDNA存在著個(gè)體之間的差異，大多數(shù)變異主要集中于mtDNA非編碼區(qū)D-環(huán)的兩個(gè)高變片段HVSI、HVSII；mtDNA存在著種族群體特征，所具有的母系單倍體遺傳特點(diǎn)，能完整地記錄母系遺傳史；mtDNA有效群體大?。‥ffective Population Size）僅為核DNA的四分之一，突變率在核DNA的10倍以上（常染色體及Y染色體1.910-9410-9/位點(diǎn)年,mtDNA 3.510-8/位點(diǎn)年）這些特點(diǎn)，一方面使mtDNA能在較短時(shí)間內(nèi)積累比較多的突變，另一方面，在隨機(jī)遺傳漂變的作用下，產(chǎn)生了高度的地區(qū)性

35、群體差異，提高了mtDNA在進(jìn)化研究中的信息量和分辨率。實(shí)驗(yàn)對(duì)象選擇在mtDNA上的高變序列HVS,位于mtDNA DLoop區(qū)約1000bp的片段，因?yàn)檫@里沒(méi)有功能限制，具有相當(dāng)多的突變，突變率為編碼區(qū)的10倍以上，可分為HVSI和HVSII兩個(gè)區(qū)域，其中HVSI具有更高的信息量。D.推薦者情況及對(duì)作品的說(shuō)明說(shuō)明：1由推薦者本人填寫； 2推薦者必須具有高級(jí)專業(yè)技術(shù)職稱，并是與申報(bào)作品 相同或相關(guān)領(lǐng)域的專家學(xué)者或?qū)I(yè)技術(shù)人員（教研組 集體推薦亦可）； 3推薦者填寫此部分，即視為同意推薦； 4推薦者所在單位簽章僅被視為對(duì)推薦者身份的確認(rèn)。推薦者情況姓 名性別年齡職稱工作單位通訊地址郵政編碼單位

36、住宅 推薦者所在單位簽章 （簽章） 年 月 日請(qǐng)對(duì)申報(bào)者申報(bào)情況的真實(shí)性作出闡述 請(qǐng)對(duì)作品的意義、技術(shù)水平、適用范圍及推廣前景作出您的評(píng)價(jià)其它說(shuō)明推薦者情況姓 名性別年齡職稱工作單位通訊地址 單位 住宅 推薦者所在單位簽章 簽章日期 年 月 日 請(qǐng)對(duì)申報(bào)者申報(bào)情況的真實(shí)性作出闡述 請(qǐng)對(duì)作品的意義、技術(shù)水平、適用范圍及推廣前景作出您的評(píng)價(jià)其它說(shuō)明推薦者情況姓 名性別年齡職稱工作單位通訊地址 單位 住宅 推薦者所在單位簽章 簽章日期 年 月 日 請(qǐng)對(duì)申報(bào)者申報(bào)情況的真實(shí)性作出闡述 請(qǐng)對(duì)作品的意義、技術(shù)水平、適用范圍及推廣前景作出您的評(píng)價(jià)其它說(shuō)明學(xué)校組織協(xié)調(diào)機(jī)構(gòu)確認(rèn)并蓋章 （團(tuán)委代章） 年 月 日

37、校主管領(lǐng)導(dǎo)或校主管部門確認(rèn)蓋章 年 月 日 各?。▍^(qū)、市）評(píng)審委員會(huì)初評(píng)意見 評(píng)委簽名： 年 月 日 各省（區(qū)、市）組織協(xié)調(diào)委員會(huì)審定意見 團(tuán) 委 科 協(xié) 教 育 廳 學(xué) 聯(lián)（簽章） （簽章） （簽章） （簽章） 年 月 日E全國(guó)組織委員會(huì)秘書處資格和形式審查意見組委會(huì)秘書處資格審查意見 審查人（簽名） 年 月 日組委會(huì)秘書處形式審查意見 審查人（簽名） 年 月 日組委會(huì)秘書處審查結(jié)果合格 不合格 負(fù)責(zé)人（簽名） 年 月 日F參賽作品打印處參看附錄一G1全國(guó)評(píng)審委員會(huì)預(yù)審意見粘貼處G2全國(guó)評(píng)審委員會(huì)終審意見粘貼處附錄一：論文正文線粒體佐證三峽懸棺古人來(lái)源于百越閆鵬榮1,4,張帆1,鄧輝5,錢吉

38、1,盧大儒2,金建中1,高蒙河3,金力1（1.復(fù)旦大學(xué)現(xiàn)代人類學(xué)研究中心,上海200433; 2.復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室, 上海200433;3.復(fù)旦大學(xué)文物與博物館學(xué)系, 上海200433; 4.復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 上海200433; 5. 武漢市省文物考古研究所, 武漢430077）摘 要：古人類DNA的研究方興未艾，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、限制性酶切和測(cè)序等多種分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展，為古DNA的研究逐漸深入提供了良好的手段，使之成為新興的多學(xué)科交叉研究領(lǐng)域，而作為有著五千年悠久歷史的東方古國(guó)，中國(guó)無(wú)疑更具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。本文以中國(guó)湖北恩施地區(qū)仙人洞、巴布埡兩處約3000年

39、前的懸棺古人骨及牙齒樣品為對(duì)象，進(jìn)行線粒體D環(huán)上第一高變區(qū)和第二高變區(qū)的多態(tài)性研究，并結(jié)合已發(fā)表的現(xiàn)代人線粒體數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果展示，3000年前的恩施古懸棺人可能為古越人后裔，該地區(qū)現(xiàn)代人為古越人由東南向西遷途中民族融合的產(chǎn)物，并且，這個(gè)遷徙過(guò)程也影響了南北方線粒體的融合。關(guān)鍵詞：懸棺；線粒體DNA；單倍型；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）；Network人類線粒體DNA（Mitochondrial DNA, mtDNA）是一個(gè)閉合環(huán)狀分子，由16,569個(gè)堿基組成（Anderson et al. 1981），同細(xì)胞核遺傳相對(duì)應(yīng)的，mtDNA具有復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的獨(dú)立性。由于其嚴(yán)格母系遺傳、無(wú)重組、拷貝數(shù)

40、多（每個(gè)細(xì)胞有100-1000線粒體拷貝）、有效群體小（約核DNA的1/4）、突變率高（核基因組的10-20倍）的特殊遺傳性，它被廣泛應(yīng)用于人類群體進(jìn)化、古病理學(xué)以及古人類學(xué)等領(lǐng)域（Henryk 2001，Matthew N. 1997,Pbo 1985&1988）。而位于mtDNA D-環(huán)區(qū)被稱為高變序列（hypervariable sequence, HVS）的1222個(gè)堿基區(qū)，更以不到7%mtDNA的堿基長(zhǎng)度攜帶大量遺傳多態(tài)性信息。近年來(lái)，由于傳統(tǒng)RFLP分析系統(tǒng)（Ballinger et al 1992, Torroni et al 1993, Wallace 1999）同HVS系統(tǒng)顯

41、示出具有信息的平行性，兩種多態(tài)性分析常能得到相同的單倍型（haplotype）結(jié)果。但是，因?yàn)閺墓湃祟惞趋乐谐樘岢龅腄NA片斷往往是散亂不整的短片斷，所以這時(shí)能否找到可信的高變序列就變成關(guān)系到能否進(jìn)行進(jìn)化分析的關(guān)鍵，一旦找到，就可以根據(jù)確定的單倍型尋找其與現(xiàn)代族群的單倍型聯(lián)系，找到突變位點(diǎn)的特異指向，進(jìn)而推測(cè)可能的古代人群分布信息。人類起源的“夏娃學(xué)說(shuō)”的聚類分析結(jié)果顯示，來(lái)自世界各地的mtDNA RFLP分作兩個(gè)大支，其中較為古老的直接指向非洲，另一支則散布于各大洲人群，據(jù)此提出現(xiàn)代人可能享有同一個(gè)母系起源地非洲（Cann RL et al.1987）。這些非洲現(xiàn)代人在大約10-20萬(wàn)年前離

42、開他們的棲居地，逐步向各地?cái)U(kuò)散并取代當(dāng)?shù)毓湃祟?，演化為現(xiàn)代各洲的原始祖先。現(xiàn)在，非洲起源說(shuō)已經(jīng)得到普遍的認(rèn)可，但走出非洲后的遷徙以及東亞地區(qū)的遷徙路線還存在很多的爭(zhēng)議。我們對(duì)現(xiàn)代人數(shù)據(jù)的分析，只能建立在假設(shè)與解釋上，然而，更直接的辦法則是從在時(shí)間上連續(xù)的古人身上得到數(shù)據(jù)來(lái)反映人類歷史，因此，分析一個(gè)地區(qū)的古人類數(shù)據(jù)可以讓已有的現(xiàn)代人得到溯源，尋到他們的根。我國(guó)的華南地區(qū)普遍存在著一種特殊的墓葬懸棺葬（陳明芳1992, 葉文憲2003），主要分布在閩、贛交界的武夷山地區(qū)，浙南金衢地區(qū)與溫州一帶，湘西沅江流域，鄂西川東長(zhǎng)江三峽地區(qū)，鄂西南清江流域，川南南廣河與滇東北金沙江一帶，川黔湘鄂交界處的烏江

43、、酉水流域，湘南桂北的湘江流域，桂西南左右江流域以及臺(tái)灣地區(qū)。這些懸棺葬的年代先后不一：福建武夷山懸棺葬的年代最早。從時(shí)間上看， 溯長(zhǎng)江西去，懸棺葬的年代越來(lái)越晚，年代最早的在東南沿海地區(qū)，越往西南內(nèi)地年代越晚；從空間上看，懸棺葬有逆長(zhǎng)江水系西上的特點(diǎn)。歷史學(xué)家在華南懸棺葬墓主的族屬的研究上一直有兩種觀點(diǎn)：有的學(xué)者認(rèn)為長(zhǎng)江三峽地區(qū)的懸棺葬為與東南人群十分密切的南島語(yǔ)族的古越人后裔，另外則有學(xué)者認(rèn)為懸棺墓主是以西南蜀地為聚居地的古巴人（謝應(yīng)光1997）。古懸棺人究竟來(lái)自哪里，又到哪里去了呢?在本次研究中我們對(duì)湖北恩施地區(qū)三十四個(gè)古人骨及牙齒為樣品進(jìn)行分析，它們?nèi)∽韵渥訋r、巴布埡兩處約3000年前

44、的懸棺中，文化上可歸于長(zhǎng)江中游大溪文化區(qū)。我們選擇mtDNA上的HVSI和HVSII區(qū)段進(jìn)行分析，期望從母系上解釋懸棺古人的族屬問(wèn)題。1. 材料和方法1.1材料圖1: 中國(guó)部分懸棺分布圖懸棺神秘莫測(cè)，距今大都在2000年以上，被稱為世界文化史上的一大奇觀。它是古代特別是中國(guó)華南地區(qū)古人采用的最多的一種墓葬祭祀方式，其方法是將去世之人的棺材安置于人跡難至的懸崖峭壁之上，或者停放于天然洞穴之中，或者人工打樁將棺材架于其上，高距地面一般為幾十米至上百米，其景觀令人嘆為觀之（彭華1994）。這種方法在南方的少數(shù)民族地區(qū)普遍存在，主要分布在長(zhǎng)江流域和南部十幾個(gè)省區(qū)（圖6），上下延續(xù)幾千年，一直被視為“千

45、古之謎”。已發(fā)現(xiàn)懸棺葬的形式有多種：有的把棺材置于懸崖上的洞內(nèi)；有的在懸崖上橫開石縫，把棺材橫放其上；有的在峭壁上尋找樹蔸或鑿石孔栽樁，把棺材懸擱在外；有的選擇懸崖上的大巖洞，將多具棺材堆放在一處等等。從已發(fā)現(xiàn)的棺材樣式來(lái)看，既有船形，又有長(zhǎng)方形的；既有獨(dú)木挖成的，又有用厚木板合成的。本文所研究的古懸棺，一部分取自巴東水布埡巖屋頂墓葬M2，另一部分得自恩施市三叉箱子巖，在七里區(qū)矛壩鄉(xiāng)與三叉區(qū)交界的寨溝自然山洞中，距地高約百米。據(jù)恩施市考古專家介紹，該懸棺群距今約有3000-4000年的歷史，可上溯到周末春秋時(shí)期。1.2方法1.2.1 樣品的預(yù)處理用無(wú)水乙醇清洗樣品并烘干，用手術(shù)刀等器具刮去樣品

46、表面23毫米，再經(jīng)紫外線照射30分鐘以上。處理后的樣品用骨科工具破碎成合適的小塊，通過(guò)磨具磨成粉末。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中采用液氮冷凍研磨機(jī)（SPEX CertiPrep 6750 Freezer/Mill）粉碎樣品，可以得到極細(xì)的顆粒。1.2.2 DNA抽提抽提方法參照Fily的DNA硅膠吸附法（Fily 1998），它是根據(jù)在高濃度GuSCN條件下核酸能與硅藻或硅顆粒結(jié)合并在較高溫度下被洗脫釋出的特性，建立起的一種簡(jiǎn)便、快速、可靠的DNA分離純化方法。張帆等對(duì)該法同傳統(tǒng)酚-氯仿法的比較實(shí)驗(yàn)初步證明：基于硅膠吸附原理的DNA提取方法，對(duì)于后期的PCR反應(yīng)效率，要高于傳統(tǒng)的酚-氯仿法 （張帆2003）。

47、1.2.3 mtDNA HVSI，HVSII的擴(kuò)增PCR擴(kuò)增反應(yīng)所用引物為：L16016: 5-ATTCTCTGTTCTTTC ATGGG-3；H16403: 5-ATTGATTTCACGGAGGATGG-3； L15:5-CACCCTATTAACCACTCACG-3；H420:5-GCATACCG CCTAAAGATAAA-3由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù) 合成。反應(yīng)循環(huán)條件為955min35（9430sec，5540sec，7240sec）727min。反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)1瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后進(jìn)行正反兩個(gè)方向測(cè)序，測(cè)序反應(yīng)在ABI 3100型測(cè)序儀上完成。1.3PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的可靠性和防污染措施為了能

48、使實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)、準(zhǔn)確，我們采?。?、實(shí)驗(yàn)環(huán)境隔離。除了本實(shí)驗(yàn)之外，不再用于其它實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁與本實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室；2、選取那些外觀上保存得好，有足夠長(zhǎng)密閉髓部、結(jié)構(gòu)致密的骨骼樣品用于實(shí)驗(yàn)（牙齒因?yàn)楸４鏁r(shí)間久不在篩選列）；3、嚴(yán)格的樣品預(yù)處理。所有樣品的外表面被徹底清潔滅菌（紫外30min以上）后再行取樣；長(zhǎng)骨類樣品先將表面及表面以下2-3mm的一層刮去，經(jīng)清洗滅菌后再破碎取樣；4、實(shí)驗(yàn)前將整個(gè)實(shí)驗(yàn)室用紫外燈照射30分鐘以上滅菌；5、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均佩帶一次性口罩與手套且在超凈臺(tái)完成操作；6、每一步操作均加入陰性對(duì)照，并進(jìn)行獨(dú)立重復(fù)性試驗(yàn)來(lái)對(duì)結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)。7、每個(gè)樣品均通過(guò)正反兩個(gè)方向測(cè)序，并重

49、復(fù)一次以上，克服技術(shù)誤差；8、所得序列均與所有參與試驗(yàn)人員序列數(shù)據(jù)比較，去偽存真。2.結(jié)果與討論2.1 單倍型頻率分布SamplesHVSI motifHVSII motifHaplogroupAmelData Ref.ns11111 129 266 304NDF1cFKong QP, 2003ns14111 129 223 257A 26173 150 195 263 309+CC 315+CN9aFKong QP, 2003ns19290 319 362ND 131 152 207 235 315+CAFKong QP, 2003ns20182C 183C 189 261NDB4a/B5a

50、MKong QP, 2003ns2192 223 36273 94 263 309+C 315+CD4/DMKong QP, 2003ns28136 189 217 270 298 309NDB4bNDKong QP, 2003表1: 性別和單倍型判定ns31136 182C 183C 189 217 270 29873 150 152 263 309+CC 315+CB4b1MKong QP, 2003從總計(jì)34個(gè)恩施古懸棺骨骼樣品中，我們共得到7個(gè)樣品的HVSI和HVSII序列信息。在陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)證實(shí)這些序列信息的確得到可信恢復(fù)后，我們參考已發(fā)表的現(xiàn)代人線粒體單倍型數(shù)據(jù)對(duì)其進(jìn)行判型，確定n

51、s11，ns14，ns19分別屬于F1c，N9a，A；ns28和ns31均為B4b單倍型，其中ns31更是指向更細(xì)致的分支B4b1；ns21的指向不清晰，現(xiàn)代人數(shù)據(jù)中與它相同的突變組合在單倍型D，D4中都有分布；ns20因?yàn)槿鄙貶VSII信息，同樣不具有非常確定的單倍型，但可以肯定ns20屬于單倍群B，包含于B4a或者B5a內(nèi)。從判型結(jié)果來(lái)看，可以發(fā)現(xiàn)超過(guò)一半的成功樣品屬于單倍型B和F，參考中國(guó)各地區(qū)漢族mtDNA單倍群分布頻率(圖2和表2Yong-Gang Yao 2002)和93個(gè)人群的4390個(gè)現(xiàn)代人數(shù)據(jù)，這兩種單倍型一方面具有很高的南方成分，另一方面在分布上愈偏向東南分布頻率愈高。例如

52、B4b單倍型頻率在新疆和青海為別為2.1%和2.6，而在東南位置的廣東廣州和廣東湛江則高達(dá)5.8%和10.0%，單倍型B的總頻率更顯著支持這條規(guī)律3.02%)；同它類似的，雖然單純的F1c3.14%)。因此，懸棺古人樣品中出現(xiàn)多的單倍型B和F一定程度上說(shuō)明它們可能起源于南方系統(tǒng)的民族。圖2: 線粒體DNA單倍群B, F和D在中國(guó)各地區(qū)漢族人群的頻率展示 (Yong-Gang Yao 2002)對(duì)于結(jié)果中出現(xiàn)的單倍型A和N9a9.14%)，這可能由于線粒體遺傳信息的不均勻融合所造成。Region/populationnABFNDData Ref.B4aB4bB5aTotalF1cTotalN9a

53、TotalNorth Northern Han5028.167 2.988 0.797 1.394 10.757 1.394 12.151 2.988 5.179 26.494 Altai8617.317 1.161 1.858 1.510 8.246 0.465 6.388 2.439 4.762 27.294 .5 Japan1397.194 1.439 3.597 /8.633 /2.158 3.597 5.755 20.144 Frequency in North15027.590 1.798 1.664 1.332 9.121 0.732 7.923 2.730 4.993 26.3

54、65 /South Southern Han7545.570 5.172 3.581 3.581 19.363 1.061 15.782 4.244 6.366 16.313 .6 South Asian1220.820 4.098 4.098 4.098 14.754 0.820 31.967 3.279 9.016 12.295 Kam-Tai8165.147 6.985 2.083 6.495 20.588 1.225 18.260 0.980 4.167 12.132 Tibeto-Berman5679.700 3.175 0.529 3.880 13.580 1.058 18.519

55、 1.587 2.646 19.929 Miao-Yao5372.980 9.311 3.352 10.987 30.168 0.372 15.456 2.793 3.166 13.408 7Frequency in South27965.579 6.044 2.504 5.937 20.422 0.966 17.704 2.432 4.471 15.093 /表3: 中國(guó)大陸地區(qū)單倍型A, B, F, N, D頻率的分布注：1.實(shí)驗(yàn)室未發(fā)表數(shù)據(jù)；2. Oota et al 2002；3. Ya-Ping Zhang 4. Lee et al. 1997；5. Kolman et al. 19

56、96；6. Horai et al. 1996；7. Li Jin2.2 network分析我們利用所得HVSI數(shù)據(jù)同已發(fā)表的58個(gè)人群和本實(shí)驗(yàn)室未發(fā)表的中國(guó)33個(gè)民族的單倍型信息分別構(gòu)建Network聚類結(jié)構(gòu)圖（network 4.0， :/ fluxus-techno logy. com）。ns11圖3：ns11 Network聚類圖如圖中所顯示的，對(duì)于NS11，它同吉林的鄂溫克，越南的莽族，云南的苗族和白仡佬，西安漢族，廣西的夜郎，壯族和仫佬族，上海的揚(yáng)越，貴州的紅仡佬，湖北的侗族等單倍型為F1c的現(xiàn)代人個(gè)體聚類在一起，并與星狀結(jié)構(gòu)的中心-云南白族，貴州的紅仡佬只相差一個(gè)16266突變，

57、表現(xiàn)出很強(qiáng)的共祖關(guān)系。這些民族中，除了西安漢族，阿爾泰語(yǔ)系的鄂溫克族表現(xiàn)出一定的北方特征，其余諸族的都是特征性的中國(guó)南方民族，而且，除了苗族，其它更可以歸類于漢藏語(yǔ)系的侗臺(tái)語(yǔ)族中，享有類似的語(yǔ)言文化背景。應(yīng)當(dāng)注意到，聚類民族中的上海揚(yáng)越是公認(rèn)的一支百越后裔，而我國(guó)境內(nèi)的許多較大的少數(shù)民族如壯、傣、侗、黎等屬于侗臺(tái)語(yǔ)族的少數(shù)民族也一直被認(rèn)為是同古百越族有密切的聯(lián)系，有學(xué)者認(rèn)為它們同樣是古百越族的后裔（李輝，2002）。據(jù)此可以推測(cè)，單倍型為F1c的NS11可能是早期古百越擴(kuò)張人群的一個(gè)，很可能是分布于湖北長(zhǎng)江流域以及西南等地的現(xiàn)代人群的祖先。ns20, ns28 & ns31從圖4可以發(fā)現(xiàn)，因?yàn)?/p>

58、缺少HVSII而不能準(zhǔn)確肯定是單倍型為B4a或者B5a的ns20，以及單倍型為B4b的ns28和ns31的聚類結(jié)構(gòu)圖有著遠(yuǎn)比F1c更為復(fù)雜的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，這表示它們?cè)?jīng)有過(guò)強(qiáng)烈的群體擴(kuò)張，從而造成其后裔民族間復(fù)雜的聯(lián)系。ns20一方面在B4a的Network圖中隸屬于由臺(tái)灣的阿美族，卑南族，魯凱族，鄒族，雅美族，海南的占族，加茂族，村人，以及廣西的仫佬族和湖北侗族等組成的星狀結(jié)構(gòu)的一個(gè)側(cè)支；另一方面，在根據(jù)單倍型為B5a的現(xiàn)代人數(shù)據(jù)所完成的另一張聚類分析圖中，ns20清晰地聚類于由西南的青仡佬，海南的黎族，貴州的木佬族，廣西的水族等組成的星狀結(jié)構(gòu)周圍。有意思的是，B4a聚類圖中最近星狀結(jié)構(gòu)的組成民

59、族全部屬于侗臺(tái)語(yǔ)族或者南島語(yǔ)族，而B5a中的星狀結(jié)構(gòu)更無(wú)一例外全部屬于侗臺(tái)語(yǔ)族，這種明確的語(yǔ)系關(guān)系使ns20將古懸棺人直接指向侗臺(tái)語(yǔ)系，南島語(yǔ)系的民族及同它們密切相關(guān)的民族。圖4：ns20在單倍型B4a和B5a的 Network聚類圖另外，根據(jù)Network軟件對(duì)民族分離時(shí)間的估測(cè)功能，B5a聚類圖中還顯示出另一個(gè)重要信息，那就是以侗臺(tái)語(yǔ)系星狀結(jié)構(gòu)為原始單倍型庫(kù)到ns20的分離，大約需要80004000年，這與廣西的五色人，云南的普標(biāo)族，拉基族同該星狀中心分離時(shí)間非常相似，暗示了這三個(gè)民族同ns20不但有可能有著相同的來(lái)源，也 有著相似的進(jìn)化地位。圖5：ns31&ns28 Network聚類圖

60、對(duì)于同為單倍型B4b的ns28和ns31，ns31同廣西融水地區(qū)的一個(gè)水族個(gè)體HS01聚類在一起，僅比另一個(gè)水族個(gè)體HS14則多含一個(gè)突變16239，說(shuō)明水族和古恩施人有著密切的聯(lián)系。應(yīng)當(dāng)注意到的，ns31最近星狀結(jié)構(gòu)中的民族如臺(tái)灣臺(tái)中的巴宰族（BZ），日月潭地區(qū)的邵族（TH）， 宜蘭地區(qū)的泰雅族（ATA）， 花蓮地區(qū)的布農(nóng)族（BUN），他們的共同特點(diǎn)是都分布在現(xiàn)代臺(tái)灣地區(qū)。ns31這個(gè)遠(yuǎn)在中國(guó)大陸內(nèi)地三峽地區(qū)的懸棺樣品同臺(tái)灣的民族具有密切聚類關(guān)系，不能說(shuō)它們沒(méi)有共同的祖先來(lái)源。ns28雖然同ns31在圖中比較遠(yuǎn)，但它所在側(cè)支的民族如海南臨高人，村人，黎族，廣西的毛南族，海南的邵族和布農(nóng)族卻無(wú)