生物技術(shù)實踐和知識點梳理

1、生物技術(shù)實踐和知識點梳理2.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) （1）實驗原理用 培養(yǎng)基篩選菌株統(tǒng)計菌落數(shù)目設(shè)置對照方法： 法稀釋涂布平板選擇（2）實驗流程土壤取樣 樣品的稀釋培養(yǎng)與觀察3.分解纖維素的微生物的分離（1）實驗原理纖維素+ 染料紅色復(fù)合物（纖維素+ ）+剛果紅染料培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的 剛果紅纖維素酶透明圈（2）實驗流程土壤取樣選擇培養(yǎng) 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落將樣品涂布到鑒別 的培養(yǎng)基上纖維素分解菌梯度稀釋二、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌種及控制條件的比較 制作內(nèi)容比較項目 果酒 果醋 腐乳 泡菜 菌種 控制條件 O2的有無 有氧 無氧 最適溫

2、度 1825 1518 酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌無氧無氧3035常溫2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作過程比較及亞硝酸鹽含量的檢測果酒和果醋的制作 腐乳的制作 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 制作原理 果酒： 果醋：多種微生物發(fā)酵 乳酸菌無氧呼吸在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料 無氧呼吸有氧呼吸果酒和果醋的制作 腐乳的制作 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 操作提示 的選擇與處理；防止 被污染；控制好發(fā)酵條件 控制好 ；防止雜菌污染 的選擇；腌制的條件；測定的操作 材料發(fā)酵液 材料的用量泡菜壇 亞硝酸鹽含量三、植物有效成分的提取1.植物芳

3、香油三種提取方法的比較 提取方法 實驗原理 方法步驟 適用范圍 水蒸氣蒸餾 （1）水蒸氣蒸餾（2）分離油層（3）除水過濾 適用于提取 、 等揮發(fā)性強的芳香油 玫瑰油薄荷油利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來壓榨法 （1）石灰水浸泡、漂洗（2）壓榨、過濾、靜置（3）再次過濾 適用于 、 等易焦糊原料的提取 有機溶劑萃取 （1）粉碎、干燥（2）萃取、過濾（3）濃縮 適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細小，能充分浸泡在有機溶液中 柑橘檸檬通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油2.實驗流程設(shè)計（1）玫瑰精油的提取實驗流程 鮮玫瑰花+清水（14） 油水

4、混合物 分離油層 玫瑰油。 （2）橘皮精油的提取實驗流程 橘皮漂洗 靜置再次過濾橘皮油。（3）提取胡蘿卜素的實驗流程胡蘿卜 干燥 過濾 胡蘿卜素。水蒸氣蒸餾加入NaCl加入無水Na2SO4除水過濾石灰水浸泡壓榨過濾粉碎萃取濃縮四、植物組織培養(yǎng)技術(shù)和血紅蛋白的提取和分離 1.植物的組織培養(yǎng)技術(shù) （1）菊花的組織培養(yǎng)原理：植物細胞的 基本過程：離體的組織或細胞 幼苗 影響因素：營養(yǎng)、 、 、 等實驗操作：制備培養(yǎng)基 全能性愈傷組織移栽pH溫度光照外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培（2）月季的花藥培養(yǎng) 花粉發(fā)育經(jīng)歷了小孢子 時期、單核期、雙核期等階段四分體影響花藥培養(yǎng)的因素：選擇的 、 的組成、親本植株的生

5、長條件、材料的 預(yù)處理以及 等實驗操作：材料的選取 材料培養(yǎng)基低溫接種密度消毒接種培養(yǎng)2.血紅蛋白的提取和分離 凝膠色譜法：根據(jù) 分離蛋白質(zhì)電泳：在電場作用下，帶電粒子發(fā)生遷移的過程。利用了待分離樣品中各種分子 ，相對分子質(zhì)量的大小帶電性質(zhì)的差異 以及分子本身的 的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而使樣品中各種分子分離大小、形狀樣品處理：通過紅細胞的洗滌、 、 等操作收集到血紅蛋白溶液粗提?。和ㄟ^ 去除血紅蛋白溶液中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)（3）實驗操作步驟血紅蛋白的釋放 分離血紅蛋白溶液透析法純化：通過 去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)純度鑒定：用 進行樣品純度鑒定凝膠色譜法SDS-聚丙烯酰胺

6、凝膠電泳考點一 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1.培養(yǎng)基 （1）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。（2）培養(yǎng)基類型 按培養(yǎng)基物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種，其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定、菌落計數(shù)等。而液體培養(yǎng)基常用于科研或工業(yè)生產(chǎn)等。 按培養(yǎng)基的功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。 按照人們對培養(yǎng)基中成分的了解程度可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩種。 說明代謝類型不同的微生物，對培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的要求不同，如自養(yǎng)型微生物可以利用無機碳源，而異養(yǎng)型微生物則必須利用有機碳源。不論代謝類型如何，微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的要求都包括碳源

7、、氮源、水、無機鹽、生長因子五類。2.關(guān)于無菌技術(shù) （1）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化學(xué)藥劑消毒。對不同的對象需采用不同的消毒或滅菌方法。（2）在微生物培養(yǎng)時，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括四方面的內(nèi)容： 對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒。 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。 實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。3.菌種的純化（1）利用不同的菌體的菌落

8、特征不同分離菌種，常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種： 平板劃線法是同一接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，以形成標(biāo)準(zhǔn)菌落。稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋程度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，以形成標(biāo)準(zhǔn)菌落。（2）選擇培養(yǎng)，利用不同微生物對營養(yǎng)需要的不同或?qū)Νh(huán)境要求的不同，將不同微生物分開。4.微生物數(shù)量測定 測定土壤中的細菌數(shù)，一般選用104、105、106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)，測定放線菌一般選用104和105倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)，測定真菌一般用102、103和104倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)。實驗時，每一濃

9、度至少涂布3個平板，以增強實驗的說服力和準(zhǔn)確性。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品大約含有多少個活菌。 （1）方法：稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌數(shù)（2）計數(shù)規(guī)則計算方法：每克樣品中的菌落數(shù)=（CV）MC代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)V代表涂布平板時所用稀釋液的體積（mL）M代表稀釋倍數(shù)設(shè)置對照：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。 選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)若某兩個或多個稀釋濃度下獲得的菌落數(shù)均符合條件時，要看兩者菌落數(shù)的比值，若小于2，則取兩者的平均值；若大于2，則取較小值 苯

10、酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作 為碳源B.如果要測定中活細菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C.若圖中為對照實驗，則其中應(yīng)以苯酚作為惟一碳源D.使用平板劃線法可以在上獲得單菌落解析 用苯酚作為選擇培養(yǎng)基的特殊的碳源，也是微生物的能源物質(zhì)，所以會影響其生長。測定培養(yǎng)液中細菌數(shù)目多用稀釋涂布平板法。若為對照實驗，則應(yīng)含除苯酚外的其他碳源，以苯酚作為惟一碳源。使用

11、稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在上獲得單菌落。答案 C考點二 果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的注意事項1.果酒、果醋制作的注意事項 （1）材料的選擇與處理 選擇新鮮的葡萄，榨汁前應(yīng)先沖洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。（2）防止發(fā)酵液被污染需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮，因為操作的每一步都可能混入雜菌。為避免雜菌污染：榨汁機要洗凈并晾干，發(fā)酵裝置要洗凈并用70%的酒精消毒；若用簡易的發(fā)酵裝置，每隔一定時間排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。（3）控制發(fā)酵條件果酒 果醋溫度20左右，最適合繁殖；1825，酒精發(fā)酵 3035，最適合生長 氧氣 前期通O2，然

12、后控制無O2 氧氣充足其他時間：1012天；pH:5.06.0 時間：約78天 2.腐乳制作的注意事項 （1）影響腐乳品質(zhì)的條件：水、鹽、酒、溫度、發(fā)酵時間等。 水的控制：含水量約70%，用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。 鹽的控制：鹽濃度過高，會影響腐乳的口味，濃度過低，腐乳易腐敗變質(zhì)。 酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量過高，使腐乳成熟期延長。酒精含量過低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗。 溫度的控制：溫度為1518,適合毛霉生長。發(fā)酵時間易控制在6個月左右。 （2）防止雜菌污染 用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。 裝瓶時，操作要迅速小心。加放鹵湯后，要用膠條將瓶口密封

13、。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。3.泡菜制作的注意事項（1）泡菜壇的選擇：選擇氣密性好的泡菜壇。用水封閉壇口使壇內(nèi)與壇外空氣隔絕，這是最簡易的造成無氧環(huán)境的方法。這樣，壇內(nèi)可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌進行乳酸發(fā)酵。如不封閉，則會有許多需氧菌生長，蔬菜會腐爛。（2）腌制條件的控制：腌制過程中要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。發(fā)酵時間受到溫度的影響：1820，腌制15天左右。溫度高，時間短一些。溫度過高、食鹽用量不足10%、腌制時間過短，都容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。 圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期接種醋酸菌，適

14、當(dāng)升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個發(fā)酵過程培養(yǎng)液pH變化的曲線是（ ）A.B.C.D.解析 果醋制作的基本過程是挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵獲得果醋。在酒精發(fā)酵過程中，產(chǎn)生的CO2溶于水后形成碳酸（酸性較弱），pH會下降，但不會急劇下降；當(dāng)接入醋酸菌后，在有氧會下降，但不會急劇下降；當(dāng)接入醋酸菌后，在有氧的情況下，醋酸菌能將乙醇變成乙醛，再將乙醛變成醋酸，酸性物質(zhì)持續(xù)增加，pH持續(xù)下降，4條曲線中曲線是比較符合pH變化的。答案 B （09浙江自選模塊）下面是有關(guān)食醋和泡菜制作的實驗。請完成下列問題：（1）食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作：第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀

15、粉酶，將原料中的淀粉分解成 （填中間產(chǎn)物），然后進一步分解成葡萄糖，這一過程可用 （填淀粉指示劑）來檢測，因為該試劑遇淀粉呈藍色，遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。第二步：用 菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā)酵過程中，玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是 。第三步：用 菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，這一過程 氧氣。（2）泡菜發(fā)酵過程中，會產(chǎn)生多種酸，其中主要是 ，還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽的定量測定可以用 法，因為亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)成 色化合物。進行樣品測定時，還要取等量水進行同樣的測定，目的是 。考點三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)1.植物組織培養(yǎng)原理 植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的全能性。

16、不同細胞的全能性不一樣。生物體的所有細胞全能性大小比較如下： 受精卵生殖細胞體細胞；體細胞中：幼嫩植物組織（如芽尖）成熟組織細胞。答案 （1）糊精 碘液 酵母 發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量CO2，使瓶內(nèi)壓力升高而可能引起爆裂 醋酸桿 需要消耗 （2）乳酸（或有機酸） （光電）比色 紫紅 作為對照植物組織培養(yǎng)技術(shù) 花藥培養(yǎng)技術(shù) 相同點 理論依據(jù)植物細胞的全能性 基本過程外植體 愈傷組織 叢芽 生根移栽；無菌技術(shù)及接種操作基本相同 影響因素選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等 不同點 選材體細胞生殖細胞（精子） 脫分化再分化誘導(dǎo)2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥培養(yǎng)技術(shù)的異同3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)、微生物培養(yǎng)技術(shù)和

17、無土栽培技術(shù)比較植物組織培養(yǎng)技術(shù) 微生物培養(yǎng)技術(shù) 無土栽培技術(shù) 概念 在無菌條件下，將離體的植物體器官或組織接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整植株 在無菌條件下，在適宜的營養(yǎng)和環(huán)境條件下對微生物的培養(yǎng) 將植物生長發(fā)育過程中所需各種礦質(zhì)元素按一定比例配成營養(yǎng)液，并利用這種營養(yǎng)液栽培植物 培養(yǎng)基成分 水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、有機添加物和植物激素等 水、無機鹽、碳源、氮源等 水、必需礦質(zhì)元素 特殊操作要求 嚴(yán)格控制無菌操作，在培養(yǎng)過程中要更換培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)細胞分裂素和生長素的比例 嚴(yán)格控制無菌操作，整個培養(yǎng)過程無需更換培養(yǎng)基 適宜的環(huán)境條件，基質(zhì)墊底并固定幼苗，不需要保證無菌條件 請回答

18、下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的幾個問題。（1）離體植物組織和細胞培養(yǎng)常用的一種培養(yǎng)基是，其主要成分包括大量元素和 。培養(yǎng)中常用的兩種植物激素是 和 ，兩者使用時的 、 、 等，都會影響實驗的結(jié)果。（2）植物組織培養(yǎng)的一般步驟為 。（3）下圖為植物組織培養(yǎng)的部分過程。 過程是 ，過程是 ，A是 。（4）植物組織培養(yǎng)過程中還需要維持一定的外界條件，一是要有適宜的 ，二是 。離體的器官、組織或細胞 A植物體解析 MS培養(yǎng)基包括大量元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素、有機物和植物激素（生長素和細胞分裂素）。使用激素時要特別注意激素的濃度、使用順序、用量的比例，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向。答案

19、（1）MS培養(yǎng)基 微量元素 生長素 細胞分裂素 濃度 使用的先后順序 用量的比例（2）制備MS固體培養(yǎng)基、外植體消毒、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培（3）脫分化 再分化 愈傷組織（4）溫度和pH等 無菌（環(huán)境） （09山東卷）人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：請回答：（1）配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進行 。接種前，要對人參根進行 。（2）用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做 。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于 污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于 污染。 （3）用少量 酶處理愈傷組織，獲取單細胞或小細胞團，在液體培養(yǎng)

20、基中進行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。（4）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機溶液，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用 方法，操作時應(yīng)采用 加熱。解析 （1）滅菌是指用強烈的物理或化學(xué)的方法，殺死物體內(nèi)外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物。在組織培養(yǎng)過程中要防止雜菌的污染，需要對固體培養(yǎng)基進行滅菌，對人參根進行消毒。（2）用于離體培養(yǎng)的離體的植物組織或器官（或切塊）稱為外植體。單個或少數(shù)微生物細胞生長繁殖后，會形成以母細胞為中心的一堆肉眼可見、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細胞集團，這就是菌落。我們可以根據(jù)菌落的特征判斷微生物的

21、種類。霉菌的菌落較大，肉眼可見許多毛狀物，呈棕色、青色等，細菌菌落常表現(xiàn)為濕潤、黏稠，有光澤。（3）果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細胞壁和胞間層，使愈傷組織分離。（4）人參皂苷溶于水溶性有機溶劑，可以用萃取法從培養(yǎng)物干粉中提取。萃取時要采用水浴加熱，這是因為有機溶劑都是易燃物，用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。 答案 （1）滅菌 消毒（2）外植體 真菌（霉菌） 細菌（3）果膠 （4）萃取 水浴例1 下列對生物技術(shù)在實踐中應(yīng)用的敘述，錯誤的是 （ ） A.在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色 B.普通洗衣粉只是缺少酶，不會污染環(huán)境 C.制葡萄醋所需的溫度要比制葡萄酒所需的溫度高些 D.凝膠色

22、譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 的一種方法 解析 果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌在20左右的環(huán)境中最適合代謝和繁殖；果醋的制作需要醋酸菌，醋酸菌的最適生長溫度為3035；普通洗衣粉雖然沒有酶，但含有一定量的磷，所以使用較多時也會污染環(huán)境。B 錯因分析 本題錯因主要是對各種現(xiàn)代生物技術(shù)的原理的識記不到位，所以，熟記不同技術(shù)的原理、操作程序等是解此類試題的關(guān)鍵。 例2 請分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐方面的問題： （1）微生物培養(yǎng)基一般都含有：水和無機鹽以及 。 （2）在微生物接種過程中，試管口需要通過酒精燈火焰12次，其目的是 。 （3）分離分解尿素的微生物的實驗流程包括：土壤取樣、梯度稀

23、釋、樣品涂布 到培養(yǎng)基上、挑選 。 （4）在植物組織培養(yǎng)過程中，往往需要使用植物激素啟動細胞分裂，人為地控制細胞的。（5）通過電泳分離提純蛋白質(zhì)時，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素是蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)、分子大小及 。（6）根據(jù)果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用的系列實驗結(jié)果回答下列問題：能正確表示pH對果膠酶活性影響的曲線是 。在原材料有限的情況下，能正確表示相同時間內(nèi)果膠酶的用量對果汁產(chǎn)量影響的曲線是 。解析 培養(yǎng)基的成分一般包括四大部分：碳源、氮源、水、無機鹽。微生物接種的過程中一定要注意無菌操作，在酒精燈火焰旁的操作就是滅菌。在分離微生物時是運用選擇培養(yǎng)基進行篩選，能夠生長形成菌落的就是所需要的微生物。

24、組織培養(yǎng)需要把得到的外植體通過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化才會形成新植物。電泳法分離蛋白質(zhì)時影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素是蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)、分子大小以及帶電荷量、分子形狀。溫度過高或過低都會降低酶的活性，酶的催化作用具有一個最適溫度。由于原材料是有限的，因此相同時間內(nèi)果膠酶的用量對果汁產(chǎn)量影響有一個最大值。方法點評 本題綜合考查生物技術(shù)實踐多個專題內(nèi)容，綜合性強，比較基礎(chǔ)。針對高考，復(fù)習(xí)基礎(chǔ)知識理解生物技術(shù)實踐的基本過程，強化要點的記憶，是獲得高分的最好辦法。答案 （1）碳源和氮源 （2）滅菌 （3）選擇 菌落（4）脫分化、再分化 （5）帶電荷量、分子形狀 （6）乙 丙1.（09海南卷）

25、請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題： （1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、 和 。（2）芳香油溶解性的特點是不溶于 ，易溶于 ，因此可用 作為提取劑來提取芳香油。（3）橘子果實含有芳香油，通?？捎?作為材料提取芳香油，而且提取時往往選用新鮮的材料，理由是 。（4）對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是 。（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后，芳香油將分布于液體的 層，原因是 。加入氯化鈉的作用是 。（6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是 。答案 （1）蒸餾法 萃取法（2）水 有機溶劑 有機溶劑（3）橘子皮 芳香油含量

26、較高（4）過濾 （5）上 油層的密度比水層小 增加水層密度，使油和水分層（6）吸收芳香油中殘留的水分2.（09遼寧、寧夏卷）（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮 、 和 滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇 、 等優(yōu)點，因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。 （2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行 （消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進行清洗和 ；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能 。（3）若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測

27、樣品稀釋的 。（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的 。 （5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是 。（6）若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過 處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。解析 （1）影響微生物培養(yǎng)的因素除了營養(yǎng)條件外，外界條件主要包括溫度、酸堿度和滲透壓等。由于大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點，所以常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。（2）對于培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿要進行滅菌，對操作者的雙手需要進行清洗和用酒精消毒，靜止空氣中的細菌在用紫外線照射后能夠

28、使蛋白質(zhì)變性，并損傷DNA結(jié)構(gòu)，使細菌死亡。（3）樣品的稀釋直接影響平板上生長的菌落的數(shù)目，實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得的菌落數(shù)在30300之間。（4）菌落的特征是判斷微生物的種類的重要依據(jù)。對獲得的純菌可以依據(jù)菌落的特征對細菌進行初步檢測。（5）要判斷固體培養(yǎng)基是否被污染，可將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，若發(fā)現(xiàn)有菌落說明培養(yǎng)基已被污染。（6）進行微生物培養(yǎng)時，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)滅菌后才能丟棄，防止培養(yǎng)的微生物擴散到環(huán)境中，造成危害。答案 （1）溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短（2）滅菌 消毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu)（3）比例合適 （4）鑒別（

29、或分類）（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 （6）滅菌3.（09上海卷）回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題。 （1）用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為 。 （2）組織培養(yǎng)中的細胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為 。 （3）在再分化階段所用培養(yǎng)基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細胞群的變化情況如下圖所示。據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系： 當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時， ； ； 。（4）若植物激素Y是生長素，在植物組織培養(yǎng)中其主要作用是 ；則植物激素X的名稱是 。（5）生產(chǎn)

30、上用試管苗保留植物優(yōu)良性狀，其原因是 。解析 （1）植物組織培養(yǎng)時所取材料稱為外植體。（2）讓已經(jīng)分化的細胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞的過程，稱為脫分化。（3）據(jù)圖可得當(dāng)激素X與激素Y的濃度比為1時，未分化的細胞群形成愈傷組織；當(dāng)激素X與激素Y的濃度比大于1時，未分化的細胞群分化形成芽；當(dāng)激素X與激素Y的濃度比小于1時，未分化的細胞群分化形成根。（4）生長素的作用是促進細胞生長、分裂和分化；植物激素X能促進細胞分裂，是細胞分裂素。（5）試管苗為無性繁殖系，能夠保持親本的一切性狀，不發(fā)生性狀分離。答案 （1）外植體 （2）去分化（脫分化）（3）未分化細胞群經(jīng)分裂形成愈

31、傷組織當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時，未分化細胞群分化形成芽當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時，未分化細胞群分化形成根（4）促進細胞的生長（伸長）、分裂和分化 細胞分裂素（5）組織培養(yǎng)形成試管苗的過程屬于無性生殖，后代不發(fā)生性狀分離4.根據(jù)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的相關(guān)知識及胡蘿卜素的性質(zhì)，回答下列問題。（1）胡蘿卜素是 色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，常用 作為溶劑，原因是 。（2）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是 法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、 、 、 。（3）在胡蘿卜顆粒的加熱過程中，應(yīng)嚴(yán)格將 和 控制在一定范圍內(nèi)，原因是 。（4）提取的胡蘿卜素

32、可通過 法進行鑒定，在鑒定過程中需要用 對照。（5）一般情況下，提取胡蘿卜素時，提取效率與原料顆粒的含水量成 比。解析 （1）胡蘿卜素的顏色是橘（橙）黃色，胡蘿卜素是脂類物質(zhì)，根據(jù)相似相溶原理，易溶于親脂性有機溶劑。（2）提取胡蘿卜素常用萃取方法，步驟：胡蘿卜粉碎干燥萃取過濾濃縮胡蘿卜素。（3）胡蘿卜顆粒在加熱過程中，應(yīng)嚴(yán)格將溫度和時間控制在一定范圍內(nèi)，防止胡蘿卜素因溫度過高和時間過長而導(dǎo)致分解。（4）提取到的胡蘿卜素通過紙層析法鑒定，該過程需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品作為對照。（5）一般情況下，提取胡蘿卜素時，提取效率與原料顆粒含水量成反比。 答案 （1）橘（橙）黃 親脂性有機溶劑（或有機溶劑） 胡蘿卜素是脂類物質(zhì)（2）萃取 萃取 過濾 濃縮（3）溫度 時間 溫度過高和時間過長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解（4）紙