臨床免疫學(xué)思考題

1、抗原抗體反應(yīng)的原理、特點(diǎn)、種類以及主要影響因素原理：1.Ag、Ab能特異性結(jié)合(內(nèi)因)：Ag、Ab能特異性結(jié)合，是由于Ag表位(抗原決 定簇)和Ab V區(qū)之間的特異性結(jié)合，二者在空間結(jié)構(gòu)上是嚴(yán)格互補(bǔ)的。Ag、Ab結(jié)合力(外因)：靜電引力、范德華力、氫鍵以及疏水作用力特點(diǎn)：特異性、比例性、可逆性、階段性種類：沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補(bǔ)體參與的溶血反應(yīng)/補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、免疫標(biāo)記技 術(shù)。影響因素：1.自身因素：(1) Ag:與Ag的理化性質(zhì)、抗原表位的數(shù)目及種類有關(guān)；(2) Ab:與Ab的來源有關(guān)：是R型抗體或H 型抗體；與Ab的特異性、親合性、濃度有關(guān)。環(huán)境因素：(1)電解質(zhì)：一般實(shí)驗(yàn)室所用電

2、解質(zhì)都是生理鹽水(0.9% NaCl),濃 度不能過高。濃度過高，會(huì)使Ab蛋白質(zhì)優(yōu)先沉淀而出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。PH： 一般為PH 6-9。當(dāng)PH 觀察結(jié)果間接法測抗體包被已知Ag+待測標(biāo)本（測Ab?） 反應(yīng)一段時(shí)間后，洗加酶標(biāo)抗抗體 （酶標(biāo)羊抗人IgG） 洗滌加底物加終止液，觀察結(jié)果。影響因素（一）固相載體常用固相載體材料：聚苯乙烯。其特點(diǎn)為吸附Ag或Ab的能力強(qiáng)，一但吸附后，不 能被洗脫。固相載體：酶標(biāo)板（微量反應(yīng)板，12X8；可分軟、硬板一次性使用，不可回收（二）抗原、抗體Ag：需純化Ab：需效價(jià)高、親和力強(qiáng)、純化試驗(yàn)條件包被(coating)： 一 般用 pH 9.6 CB(carbonate

3、 buffer)， 0.05M,有利于蛋白質(zhì)吸附包被濃度：0.1100口g/ml，一般常用 10 口g/ml包被時(shí)間、溫度：4 C過夜或37 C 1-3h包被量：100ul封閉(blocking)：用1%5%牛血清白蛋白或5%20%小牛血清或脫脂牛奶緩沖液浸泡12h抗原抗體反應(yīng)的條件微堿性有利于抗原抗體結(jié)合，故用pH 7.4 PBS(phosphate buffer saline)洗滌去污劑有利于AgAb形成，洗液中加0.05% Tween-20Ag、Ab 反應(yīng)時(shí)間、溫度： 一般 37C、3040min洗滌采用PH7.2-7.4PBS洗滌，規(guī)一化，每次浸泡12min，拍干，共洗滌34次酶促反應(yīng)

4、條件溫度 37C10min5.5底物量一致5.排除干擾：多設(shè)對(duì)照時(shí)間pH15. ELISA試驗(yàn)應(yīng)設(shè)哪些對(duì)照，為什么？ELISA試驗(yàn)應(yīng)設(shè)對(duì)照應(yīng)設(shè)對(duì)照操作應(yīng)得結(jié)果陽性對(duì)照同標(biāo)本一樣顏色深陰性對(duì)照同標(biāo)本一樣顏色淺g無色酶結(jié)合物對(duì)照加酶步加入無色底物對(duì)照加底物步加入無色16.判斷 ELISA試驗(yàn)結(jié)果的方法。無色肉眼判定：與陽性、陰性對(duì)照顏色比較：若待檢孔顯色淺于陰性對(duì)照則判定為陰性；若待檢孔顯色深于或等于陽性對(duì)照孔則判定為陽性；若待檢孔顯色介于陰性對(duì)照孔和陽性對(duì)照孔之間則判定為弱陽性。酶標(biāo)光度儀檢測A492值(吸光率)：比色法與陽性、陰性對(duì)照測定值比較P/N比值：大于2.0為陽性，小于2.0為陰性P:

5、 positive (待測吸光度值)N: negative免疫血清制備的主要程序。 抗血清（免疫血清）：含有某種抗體的血清。它是將抗原按一定的程序免疫動(dòng)物，一定時(shí)間 后，采集動(dòng)物血液，經(jīng)分離得到。（1）動(dòng)物的選擇（2）抗原的條件（3）佐劑的應(yīng)用（4）免疫方法試血和放血（6）鑒定和保存佐劑概念、作用機(jī)理、福氏不完全/完全佐劑的組成。佐劑（adjuvant）:同Ag 一起或預(yù)先注入機(jī)體，能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該Ag的免疫應(yīng)答或改變免疫 應(yīng)答類型的物質(zhì)。作用機(jī)理：增加Ag的免疫原性，從而提高抗血清的效價(jià)福氏不完全佐劑（Freund IA）：組成：羊毛脂+石臘油，二者比例為4： 1福氏完全佐劑（FCA）：組成：

6、羊毛脂+石臘油+卡介苗分離提純免疫球蛋白有哪些方法，其原理是什么？鹽析法在不同濃度的中性鹽中蛋白質(zhì)會(huì)脫水，降低帶電電勢，由親水性變?yōu)槭杷?，分子間相互凝 聚而沉淀（鹽析作用）。不同蛋白質(zhì)鹽析所需中性鹽的濃度不同，故可分離不同蛋白質(zhì)。離子交換層析法利用不同的蛋白質(zhì)在緩沖溶液中所帶電荷不同，與某一載體上的具有相反電荷的離子基團(tuán)進(jìn) 行吸附，然后進(jìn)行解脫，達(dá)到純化蛋白質(zhì)目的。凝膠過濾法凝膠顆粒是網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)，當(dāng)分子大小不同的混合物通過凝膠柱時(shí)，分子大的先下來，分子小 的則嵌入凝膠顆粒的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中后下來，從而將分子大小不同的物質(zhì)分離，即為分子篩的作 用。親和層析法利用抗原抗體的結(jié)合具有特異性、可逆性，將純

7、化抗原先交聯(lián)到載體上，制成親和層析柱， 當(dāng)Ab （Ig）通過時(shí)，與抗原在柱上特異性結(jié)合，Ab中雜質(zhì)流出。然后通過改變緩沖液pH、 離子強(qiáng)度，使Ab解脫下來。人體免疫功能包括哪些組成部分?數(shù)量B細(xì)胞數(shù)量T細(xì)胞非特異免 疫功能特異性免 疫功能體液中殺菌物質(zhì)補(bǔ)體、溶菌酶吞噬細(xì)胞大、小吞噬細(xì)胞（數(shù)量、功能）.i細(xì)胞免疫（?功能 ，體液免疫功能實(shí)驗(yàn)室中檢測人細(xì)胞免疫和體液免疫最常用哪些試驗(yàn)，這些試驗(yàn)的原理如何？正常值應(yīng) 為多少？T細(xì)胞的計(jì)數(shù)（T細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測）（一）特異性抗原的檢測淋巴細(xì)胞表面有一些特異的CD抗原，根據(jù)不同的CD抗原可鑒定出不同的細(xì)胞群體CD抗原：淋巴細(xì)胞群（簇）分化抗原：不同群淋巴

8、細(xì)胞在分化成熟過程中，細(xì)胞表面出現(xiàn) 或消失的抗原分子正常值：CD4+/CD8+31.5（二）、T細(xì)胞特異性受體（E受體）的檢測 E花環(huán)形成試驗(yàn)原理：T淋巴細(xì)胞表面含有綿羊紅細(xì)胞（SRBC）受體（CD2），當(dāng)T淋巴細(xì)胞與綿羊紅細(xì)胞 相遇時(shí)，T細(xì)胞通過該受體吸附綿羊紅細(xì)胞而形成花環(huán)。Et花環(huán)形成試驗(yàn)（total，總E花環(huán)）正常值：60%80%Ea花環(huán)形成試驗(yàn)（active，活性E花環(huán)）正常值：20%30%T細(xì)胞功能的檢測檢測T細(xì)胞功能的試驗(yàn)有：（一）T細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化試驗(yàn)原理淋巴細(xì)胞在某些物質(zhì)刺激下，細(xì)胞增殖、分化（如細(xì)胞變大、胞漿增多、出現(xiàn)空泡） DNA合成增加（核染色質(zhì)疏松，核仁出現(xiàn)），轉(zhuǎn)化成為淋

9、巴母細(xì)胞。（二）T細(xì)胞分泌功能測定（細(xì)胞因子檢測）（三）T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）具有殺傷靶細(xì)胞的功能，它是評(píng)價(jià)機(jī)體細(xì)胞免疫水平的指標(biāo)。檢測該殺傷作用的試驗(yàn)稱為細(xì)胞毒試驗(yàn)。細(xì)胞免疫功能體內(nèi)檢測法（體內(nèi)試驗(yàn)）W型超敏反應(yīng)皮試原理：W型超敏反應(yīng)的本質(zhì)是細(xì)胞免疫，因此W型超敏反應(yīng)為陽性，可反映機(jī)體細(xì)胞免疫 功能好。特異性抗原皮膚試驗(yàn)：所用Ag: OT或PPD以O(shè)T為例：OT 1:2000 0.1ml皮內(nèi)注射，4872h觀察結(jié)果，紅腫硬結(jié)直徑大于0.5cm為陽性PHA皮膚試驗(yàn)：將定量PHA注射到受試者前臂皮內(nèi)，612h后出現(xiàn)紅斑和硬結(jié)，2448h達(dá)高峰，直 徑15mm為陽性反應(yīng)。

10、該法敏感性高，安全可靠。B細(xì)胞數(shù)量的檢測（一）B細(xì)胞表面識(shí)別抗原受體（BCR）（SmIg, Surface membrane Ig）的檢測l.SmIg是B細(xì)胞表面膜免疫球蛋白，存在于成熟B淋巴細(xì)胞膜上，為B細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白。類型為：IgM、IgD型。正常值：15%25%二）B細(xì)胞表面抗原的檢測B細(xì)胞表面特有的CD抗原有：CD19、CD20、CD21等。用抗CD21的單抗（免疫熒光法、酶免疫組化法）檢測外周血淋巴細(xì)胞，陽性細(xì)胞為B淋 巴細(xì)胞，約占總淋巴細(xì)胞的10%15%。B細(xì)胞功能的檢測（一）血清中Ig的測定檢測人免疫球蛋白常用方法：單向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)、免疫比濁法正常值：IgG12g/L （7.616

11、.6）IgM1.3g/L （0.42.2）IgA2.0g/L （0.73.5）（二）血型抗體效價(jià)的測定反映體內(nèi)IgM水平正常6月嬰兒抗A 1 : 8,或抗B 1 : 4;1歲后抗A1:16，或抗B 1 : 8如3歲以上抗A或抗B效價(jià)仍 1 : 4，表明IgM缺乏，提示先天性體液免疫功能缺陷。（三）抗原刺激機(jī)體后抗體應(yīng)答反應(yīng)（體內(nèi)試驗(yàn)）將抗原注射到體內(nèi)，一段時(shí)間后檢測相應(yīng)抗體效價(jià)，如抗體效價(jià)低，說明機(jī)體體液免疫 功能差補(bǔ)體的定義、組成及性質(zhì)（一）補(bǔ)體的定義及性質(zhì)：complement:補(bǔ)體是存在于人和動(dòng)物血清中的一組經(jīng)激活后具有酶活性的球蛋白， 一般情況下處于未激活狀態(tài)。補(bǔ)體的特性：穩(wěn)定性差，各

12、種理化因素都可使之失活：如酸、堿、紫外線照射、劇 烈震蕩等約90%的補(bǔ)體成分由肝細(xì)胞合成，少數(shù)由巨噬細(xì)胞、腸上皮細(xì)胞、脾細(xì)胞等產(chǎn)生補(bǔ)體成分均為糖蛋白，大多為8球蛋白，少數(shù)為a或Y球蛋白。實(shí)驗(yàn)室滅活補(bǔ)體的條件為：56C、30；室溫下2天補(bǔ)體也可自然失活；由于補(bǔ)體的穩(wěn)定性差，容易失活，因此作補(bǔ)體的檢測必須用新鮮血清（二）補(bǔ)體的組成：由三部分組成1,補(bǔ)體的固有成分：C1-C9，其中C1又包括C1q、C1r、C1s，共9種成分11種蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3含量最高；2.補(bǔ)體的調(diào)節(jié)蛋白：如C4調(diào)節(jié)蛋白、C1抑制物、S蛋白等；3.補(bǔ)體受體；如C1qR、C3aR等；CH50實(shí)驗(yàn)的原理、正常值及意

13、義總補(bǔ)體活性檢測原理：組成和功能完整的補(bǔ)體系統(tǒng)能使致敏羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血；羊紅細(xì)胞的溶血程度與補(bǔ)體的活性成正比；整個(gè)曲線呈倒“S型，即隨著補(bǔ)體量增加， 溶血程度也增加 在50%溶血附近(30%70%之間)，稍微改變 補(bǔ)體量，溶血程度變化明顯，因此以 50%判定溶血終點(diǎn)較100%更為敏感，所以該試驗(yàn)稱為50%溶血試驗(yàn)(CH50)?？傃a(bǔ)體活性參考范圍：50100U/ml補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)的原理、結(jié)果判斷及評(píng)價(jià)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)原理：補(bǔ)體可與任何一組AgAb復(fù)合物結(jié)合；一旦與某一 AgAb復(fù)合物結(jié)合后，便不再與另一復(fù)合物結(jié)合。結(jié)果判斷：不溶血為陽性，即待測物中有相應(yīng)的Ab或Ag；溶血為陰性，即待測物中無

14、相應(yīng)的Ab或Ag.優(yōu)點(diǎn)：該試驗(yàn)既可測Ag、又可測Ab；Ag既可以是顆粒性Ag、也可是可溶性Ag、甚至可以是塊狀物，因此檢測Ag的范 圍廣；可以用于病毒、立克次氏體、細(xì)菌等多種病原體的檢測(實(shí)際上是測Ag)；比較敏感(0.05p g/ml)、特異；結(jié)果判斷明顯：通過有無溶血來觀察，無需特殊儀器檢測。缺點(diǎn)：參與反應(yīng)的物質(zhì)多，影響因素也多；(反應(yīng)體系中有Ag、Ab、C、羊紅細(xì)胞、溶血 素)在正式試驗(yàn)前需要找出幾種物質(zhì)間最恰當(dāng)?shù)谋壤?，比較復(fù)雜。25 I、W型超敏反應(yīng)皮試的原理I型超敏反應(yīng)皮試-當(dāng)變應(yīng)原再次進(jìn)入致敏者皮膚，與吸附在肥大細(xì)胞或/和嗜堿性粒細(xì)胞上的特異IgE 高變區(qū)結(jié)合，導(dǎo)致肥大細(xì)胞或嗜堿性

15、粒細(xì)胞脫顆粒，釋放生物活性介質(zhì)：如組胺、 白三烯、激肽等。-在2030分鐘內(nèi)局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)以及搔癢感，數(shù)小時(shí)后消失。-出現(xiàn)此現(xiàn)象者判斷為皮試陽性，即對(duì)該變應(yīng)原過敏；未出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)者為 陰性，即對(duì)該變應(yīng)原不過敏。W型超敏反應(yīng)皮試用皮內(nèi)注射、皮膚斑貼等方法使變應(yīng)原進(jìn)入已致敏機(jī)體，體內(nèi)致敏的CD4+Th1再次遇 到相應(yīng)抗原后，釋放出大量細(xì)胞因子，如IL-2、IFN-Y、TNF、IL-3、GM-CSF,活化巨噬細(xì)胞及NK，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞作用；吸引WBC到達(dá)Ag所在部位，促進(jìn)吞噬；促進(jìn)T細(xì)胞增生和分泌細(xì)胞因子，加重局部炎癥反應(yīng)，最后造成局部以單核細(xì)胞和淋 巴細(xì)胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)。4

16、8-72小時(shí)后局部出現(xiàn)紅腫、硬結(jié)或水泡，以此來判斷變應(yīng)原是否引起機(jī)體W型超敏反應(yīng)或了解機(jī)體的細(xì)胞免疫功能。比較I、W型超敏反應(yīng)皮試（抗原、時(shí)間、結(jié)果、意義）免疫復(fù)合物的含義及免疫復(fù)合物病的致病原因免疫復(fù)合物含義：（一）含義：immune complex,IC 它主要指AgAb復(fù)合物及AgAbC復(fù)合物兩種。致病機(jī)理：中等大小的IC沉積在體內(nèi)，通過激活補(bǔ)體、激活血小板、中性粒細(xì)胞作用而致 病。免疫復(fù)合物檢測使用的標(biāo)準(zhǔn)品、出現(xiàn)的問題及WHO推薦的檢測方法目前普遍應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)品是HAHG熱聚合人IgG問題：（1）到目前為止，所有檢測IC的試驗(yàn)，還沒有另人滿意的標(biāo)準(zhǔn)化措施；（2）在體外制備的IC還很不穩(wěn)定

17、，因此用人工合成的復(fù)合物作為定量標(biāo)準(zhǔn)不適宜。 WHO推薦的檢測方法：C1q結(jié)合試驗(yàn)、-膠固素試驗(yàn)、類風(fēng)濕因子（RF）試驗(yàn)、Raji細(xì)胞試驗(yàn)AID的基本特征及常見的AID有哪些？基本特征：誘因可有可無。有一定的遺傳傾向。女性患者多見，發(fā)病率隨年齡增長而增加?；颊哐逯锌蓹z出高效價(jià)的自身抗體和（或）自身致敏T淋巴細(xì)胞。一些自身抗體 在自身免疫病中呈現(xiàn)交叉重疊現(xiàn)象:即在同一種自身免疫病患者體內(nèi)可檢測到多種 自身抗體，而不同的自身免疫病也可存在同一種自身抗體。IgG、IgA、IgM升高，尤其IgG升高明顯。病損局部可發(fā)現(xiàn)有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞浸潤及免疫復(fù)合物沉積。免疫抑制劑治療可取得一定療效

18、。常見的AID：系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)、自身免疫性溶血性貧、重癥肌無力ANA的定義及ANAs的組成抗核抗體（antinuclear antibody, ANA）：大多數(shù)屬IgG類，也有IgM和IgA。無器官特異性和種屬特異性，主要存在于血清 中，也可存在滑膜液、胸水和尿液中。ANA原指抗細(xì)胞核抗原成分的自身抗體的總稱。ANA廣義地指抗細(xì)胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的總和。ANA所針對(duì)的靶抗原由 細(xì)胞核擴(kuò)展到整個(gè)細(xì)胞，包括細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架及細(xì)胞周期等?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有幾十種具不同臨床意義的ANA，形成抗核抗體譜（antinuclear antibodies, ANAs）ANAs的組成抗DN

19、A抗體：抗*QN4、抗ssDNA抗體抗組蛋白抗體（AHA）： 抗 H1、H2A、H2B、H3、H4 等抗ENA抗體：抗Sm、抗核糖核蛋白R(shí)NP）、抗SSM、抗SS-B等-抗非組蛋白抗體：抗Scl-70、抗Jo-1、抗Ku、抗增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）、抗PL-7、 抗PL-12、抗著絲點(diǎn)抗體等抗核仁抗體：抗PM-Scl、抗NOR-90、抗U3nRNA-抗細(xì)胞其它成分抗體：抗高爾基體、抗中心體、抗線粒體抗肌動(dòng)蛋點(diǎn)抗核層蛋 白等各種AID檢測時(shí)的代表性自身抗體有哪些？1、抗dsDNA抗體對(duì)SLE有較高特異性，70-90%活動(dòng)性SLE患者該抗體陽性，是SLE 的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。2、抗組蛋白抗體（ant

20、i-histonic antibody, AHA）在藥物性狼瘡患者中陽性率達(dá)90-100%， 而SLE病人陽性率僅有20-35%，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人為36%。3、抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigen， ENA）抗體1）抗Sm抗體：抗Sm抗體是SLE的特異性標(biāo)志，疾病特異度達(dá)99%，為提高 SLE的診斷準(zhǔn)確率，可將抗Sm抗體和抗dsDNA抗體同時(shí)檢測。2）抗SS-A、SS-B抗體：抗SS-A和抗SS-B抗體并存是干燥綜合癥的特異標(biāo)志。3）抗核糖核蛋白抗體 核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP），又稱u1RNP?？?u1RNP抗體在混合性結(jié)締組

21、織?。∕CTD）陽性率為95%以上，是MCTD的標(biāo)志 抗體。4、抗Jo-1抗體對(duì)肌炎和間質(zhì)性肺纖維化有高度特異性，抗體的效價(jià)與疾病的活動(dòng)性相關(guān)。5、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）時(shí)AMA （抗線粒體抗體）陽性率可達(dá)90%以上。AMA是 PBC的血清學(xué)指標(biāo)。6、抗Scl-70是進(jìn)行性全身性硬化癥（PSS）的標(biāo)志抗體，陽性率為50-64%。在原發(fā)性免疫缺陷病中哪一種發(fā)生最多？原發(fā)性B細(xì)胞免疫缺陷?。ㄕ糚IID的5070%），如X連鎖無丙球蛋白血癥懷疑體液免疫缺陷應(yīng)作哪些過篩試驗(yàn)和確診試驗(yàn)？過篩試驗(yàn)（1）血清蛋白電泳 丙球定量：丙球應(yīng)占總蛋白的15%，大于9.0g/L為正常；若小于 2.5g/L，應(yīng)考

22、慮ID（2）同種血型凝集素測定-ABO血型抗體檢測（反映IgM水平）正常：抗A大于1： 8，抗B大于1： 4，若3歲以上，抗A或抗B仍小于1： 4，應(yīng)考慮ID（3）血清抗鏈球菌溶血素抗體的測定（抗0）的測定一反應(yīng)IgG水平3歲以上應(yīng)大于100單位確診試驗(yàn)（1）血清Ig（IgG、M、A）測定：采用免疫比濁法：若IgG小于2.5g/L、IgA缺乏、IgM 小于0.2g/L，可確診為無丙球蛋白血癥（2）特異性Ab產(chǎn)生能力測定：三聯(lián)傷寒菌苗試驗(yàn)：正常人注射0.25ml，每周1次，連續(xù)3 次，抗H應(yīng)為1： 160，若低于1： 40，表示體液免疫功能差B細(xì)胞計(jì)數(shù)：SmIg檢測免疫熒光法，正常15%左右T

23、細(xì)胞亞群測定：CD4/CD8(Th/Ts)正常(1 3.5)/1，若小于0.5,可確診為AIDS懷疑細(xì)胞免疫缺陷應(yīng)作哪些過篩試驗(yàn)和確診試驗(yàn)？過篩試驗(yàn)淋巴細(xì)胞絕對(duì)值測定：正常大于2.5X109/L,若 小于1.5X109/L為缺乏遲發(fā)型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)：OT皮試等胸腺X線檢查：觀察胸骨是否發(fā)育不全確診試驗(yàn)T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及其亞群檢測：E花環(huán)實(shí)驗(yàn)：正常Et 6070%免疫熒光法：CD3+TLC、CD4+TLC、CD8+ TLC 計(jì)數(shù)(3) T細(xì)胞功能體外試驗(yàn)：PHA刺激的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)：正常60 70%35.HLA-I、II類分子的結(jié)構(gòu)、分布及意義。結(jié)構(gòu)分布意義HLA-I 類由一條a鏈和一條0鏈組

24、成，a 鏈的N端胞外區(qū)分為a1、a2、a3 三個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū)，其中a1、a2構(gòu)成抗 原結(jié)合槽，與處理后的抗原肽結(jié) 合形成MHC-抗原肽復(fù)合體所有有核細(xì)胞 膜上識(shí)別和提呈內(nèi)源性抗原肽對(duì)CTL的識(shí)別起限制性作 用TCR抗原肽；TCR MHC-IHLA-II 類由一條a鏈和一條0鏈組成，兩 條肽鏈的胞外區(qū)分別有a1、a2和 01、02兩個(gè)功能區(qū)，由a1與01 共同形成抗原結(jié)合槽抗原提呈細(xì)胞 (如B細(xì)胞、巨 噬細(xì)胞、樹突狀 細(xì)胞)及活化的 T細(xì)胞等識(shí)別和提呈外源性抗原肽對(duì)Th的識(shí)別起限制性作 用TCR 抗原肽 ；TCRMHC-II36 .移植排斥反應(yīng)的類型及產(chǎn)生的原因和避免方法。超急性排斥反應(yīng)原因：受者體內(nèi)

25、預(yù)存有抗供體細(xì)胞的抗體(針對(duì)HLA),抗體與供體細(xì)胞的HLA Ag結(jié)合， 激活補(bǔ)體，細(xì)胞破壞；補(bǔ)體活化產(chǎn)物使血小板凝聚，釋放凝血因子XII,產(chǎn)生血管內(nèi)凝血 避免方法：移植前取受體血清與供體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞毒試CDC試驗(yàn)，檢測受者血清中是否預(yù) 存有抗供體細(xì)胞的抗體。急性排斥反應(yīng)原因：供、受者HLA Ag型別不完全一致早期以細(xì)胞免疫為主(CTL直接殺傷、活化的Th1 介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng))晚期體液免疫為主(抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用，NK) 避免方法：盡可能選擇HLA Ag型別一致的供體慢性排斥反應(yīng)機(jī)理：供、受者HLA Ag型別不完全一致體液免疫為主(W型超敏反應(yīng)引起的免疫損 傷；特異性Ab活化補(bǔ)體及通過A

26、DCC作用破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞；急性排斥反應(yīng)引起的退行性病變等）避免方法：盡可能選擇HLA Ag型別一致的供體移植物抗宿主反應(yīng)的概念及產(chǎn)生原因。在骨髓移植時(shí)，由于移植的骨髓也含有豐富的免疫細(xì)胞，且受體處于嚴(yán)重的免疫抑制狀態(tài)， 因而對(duì)供體骨髓表現(xiàn)免疫無能，以使供者骨髓中的免疫細(xì)胞不僅得以生長，而且以受者細(xì)胞 衛(wèi)康元產(chǎn)生免疫應(yīng)答，引起攻擊者的移植物抗宿主反應(yīng)。產(chǎn)生原因：（1）供、受者HLA Ag型別不完全一致（2）移植物中含有大量的免疫活性細(xì)胞，尤其是TLC（3）受體免疫活性細(xì)胞處于反應(yīng)無能狀態(tài)移植前選擇供體應(yīng)做哪些檢測？（一）交叉配合試驗(yàn)（P345）預(yù)存抗體檢測一檢測測受體血清中有無抗供體細(xì)胞的抗體（1）補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒試驗(yàn)（complement dependen