山大《 人體結(jié)構(gòu)與功能II 》實驗課程教學大綱

1、山東大學基礎(chǔ)醫(yī)學院 人體結(jié)構(gòu)與功能II 實驗課程教學大綱一、課程基本信息課程名稱人體結(jié)構(gòu)與功能II 神經(jīng)系統(tǒng)英文名稱System of the Body II-The Nervous System課程編碼sd02331591開課單位基礎(chǔ)醫(yī)學院實驗類型專業(yè)基礎(chǔ)實驗 專業(yè)實驗 綜合實驗 創(chuàng)新實驗 開放實驗課程性質(zhì)必修 選修實驗類別獨立設(shè)課 非獨立設(shè)課學分總學時36實驗學時36適用專業(yè)臨床醫(yī)學八年制先修課程人體解剖學、細胞分子遺傳學課程網(wǎng)站二、課程描述本課程理論課程是醫(yī)學基礎(chǔ)實驗課程整合的基礎(chǔ)上，理論課程整合，將組織學與胚胎學、生理學、生物化學（部分）、病理學、病理生理學、藥理學、神經(jīng)生物學和診斷學

2、等相關(guān)內(nèi)容進行整合，按照器官系統(tǒng)的順序重新編排，形成了系列課程人體結(jié)構(gòu)與機能（英文名稱 System of the Body）I-IV，本課程是該系列課程的第二部分，重點講授神經(jīng)系統(tǒng)理論部分。The System of the Body II course is the second part of System of the Body series, which are integrated medical foundation courses for students majoring in clinical medicine. The related content of histolo

3、gy and embryology, physiology, biochemistry (part), pathology, pathophysiology, pharmacology, neurobiology and diagnostics were integrated and carried out in accordance with the organ system arrangement, forming a series of course System of the Body I - IV. System of the Body II covers the basic sci

4、ence required to understand the structure and function of the nervous system, and its major pathologies. The early chapters introduce the development and organization of the nervous system, and the cellular and molecular mechanisms that govern its function. The other chapters are devoted to the diso

5、rders and clinical examination of the nervous system.三、課程性質(zhì)和教學目標【教學目標】能掌握部分神經(jīng)系統(tǒng)經(jīng)典實驗技術(shù)方法，通過實驗掌握神經(jīng)系統(tǒng)的基本概念及原理，。緊密結(jié)合臨床，初步了解一些常見神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)生時的診斷方法。應(yīng)用生理學、病理學、藥理學、解剖學、組織胚胎學、診斷學等理論及實驗方法，提出相應(yīng)的科學問題并進行探討?！窘虒W要求】教學要求1、知識點的掌握教學要求2、實驗技能培養(yǎng)，理解、綜合、分析等能力。教學要求3、培養(yǎng)創(chuàng)新能力、批判思維、溝通協(xié)作、和終身學習能力等。四、課程教學內(nèi)容及學時分配實驗一：神經(jīng)系統(tǒng)觀察（4學時）【教學目標和要求

6、】充分發(fā)揮學生學習的積極性和主動性，把所學知識消化吸收，轉(zhuǎn)化為自己的知識，將所學知識和平時PBL教學和臨床實踐結(jié)合起來，在實踐中鞏固提高。1.掌握大腦皮質(zhì)的神經(jīng)元分層 2.掌握小腦皮質(zhì)的神經(jīng)元分層 3.了解脊髓灰質(zhì)的結(jié)構(gòu)【主要儀器設(shè)備和藥品】一儀器設(shè)備：光學顯微鏡二.醫(yī)學形態(tài)學數(shù)字化教學平臺組織學切片庫：神經(jīng)系統(tǒng)三.觀察切片1.大腦皮質(zhì)(cerebralcortex)取材：大腦垂直切片固定：Bouin染色：H & E肉眼觀：標本外周染成紫色的為皮質(zhì)，中央染色稍呈紅色的為髓質(zhì)，在皮質(zhì)表面有許多凹凸不平的溝與回。低倍鏡觀：在H & E染色切片上，只能觀察皮質(zhì)中神經(jīng)細胞的分層狀態(tài)，各種神經(jīng)元的外部形

7、態(tài)需用特殊染色方法才能顯示。找一個大腦回進行觀察，根據(jù)細胞體的大小及排列的疏密進行分層。皮質(zhì)可分為六層，但各層無明顯分界，而是互相移行的。最好先找出兩層細胞體較小且排列較密的區(qū)域即淺層的外顆粒層(第二層)和深層的內(nèi)顆粒層(第四層)，然后再分別觀察其它各層的形態(tài)結(jié)構(gòu)。也可先找出主要具有中、小型錐體細胞的區(qū)域和具有分散的巨大的錐體細胞的區(qū)域，即淺層的外錐體細胞層(第三層)和深層的內(nèi)錐體細胞層(第五層)。細觀各層特點，由淺到深為：第一層：分子層，在外顆粒層表面，染色淺，細胞小而少。第二層：外顆粒層，細胞小而密集，染色較深，此層可見許多小錐體細胞的胞體。第三層：外錐體細胞層，在內(nèi)外顆粒層之間，主要由中

8、、小型錐體細胞組成。第四層：內(nèi)顆粒層，細胞比較密集，可見一些形態(tài)不規(guī)則的星形細胞胞體。第五層：內(nèi)錐體細胞層，可見分散的巨大的錐體細胞。第六層：多形層，細胞形態(tài)不一，排列稀疏，與第五層分界不明顯，主要可見梭形細胞體。2.小腦皮質(zhì)(cerebellar cortex)取材：小腦垂直切片固定：Bouin染色：H & E肉眼觀：小腦皮質(zhì)表面有凹凸不平的溝與小葉片，其表面染成粉紅色的為分子層，深部紫色的為顆粒層，再向內(nèi)方的紫紅色區(qū)域為髓質(zhì)。低倍鏡及高倍鏡觀：從表面依層次觀察，小腦皮質(zhì)共分三層：(1)分子層：表面染色較淺的一層，比較厚。此層內(nèi)細胞成分較少，主要是無髓神經(jīng)纖維。(2)蒲肯野細胞層：在分子層下

9、方是一層排列較稀、胞體大呈梨形的細胞層，可見細胞有23個樹突伸入分子層內(nèi)。(3)顆粒層：在蒲肯野細胞層深面，細胞排列很密，主要由顆粒細胞所組成。3.脊神經(jīng)節(jié)(spinal ganglion)取材：脊神經(jīng)節(jié)縱斷面固定：Bouin染色：HE低倍鏡及高倍鏡觀：脊神經(jīng)節(jié)外面包有結(jié)締組織被膜，內(nèi)有許多神經(jīng)節(jié)細胞和一些神經(jīng)纖維。神經(jīng)節(jié)細胞的胞體呈圓形，體積較大，大小不等，成群分布，細胞質(zhì)染成淡紫紅色，細胞核大而圓，異染色質(zhì)少，故呈空泡狀，核仁明顯，每個神經(jīng)節(jié)細胞體的周圍可見到很多圓形或卵圓形的衛(wèi)星細胞核。神經(jīng)節(jié)細胞的突起多被切斷。神經(jīng)纖維多為有髓神經(jīng)纖維。4.交感神經(jīng)節(jié)(sympathetic gangl

10、ia)取材：交感神經(jīng)節(jié)縱切面固定：Bouin染色：H & E低倍鏡及高倍鏡觀：其結(jié)構(gòu)與脊神經(jīng)節(jié)大致相同，觀察時注意和脊神經(jīng)節(jié)區(qū)別。可從神經(jīng)纖維的類型、神經(jīng)節(jié)細胞的大小、分布及衛(wèi)星細胞的多少，同脊神經(jīng)節(jié)比較。實驗二：耳蝸微音器電位和聽神經(jīng)動作電位（4學時）【教學目標和要求】目標：1.掌握打開鼓室的方法。2.掌握微音器電位的引導方法。3.理解微音器電位的原理。4.通過本次實驗進一步掌握聽覺產(chǎn)生的傳導路徑，學習耳蝸部位產(chǎn)生發(fā)生器電位的原理,了解外界聲音在耳蝸部位如何轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒆罱K產(chǎn)生聽覺的機制?！局饕獌x器設(shè)備和藥品】1. 小動物手術(shù)器械一套、探針銀絲-銀球電極（裸露銀球部，電極其余部分表面絕緣，

11、可用適當粗細塑料管絕緣） 、參考電極（可用針灸針代替） BL-420 生物機能實驗系統(tǒng)（或雙線示波器、前置放大器、刺激器、監(jiān)聽器）。 2. 藥品：20%氨基甲酸乙酯溶液?！緦嶒炓蟆繉嶒灥碾y點和重點、實驗安全和環(huán)保要求等。1.挑選豚鼠時選擇 300400g耳廓反應(yīng)良好的幼年豚鼠為宜，因其耳蝸位置較淺，骨質(zhì)松，有利于手術(shù)操作。 2.骨孔周圍組織必須刮凈，避免產(chǎn)生滲液進入鼓室而影響實驗。 3.安放引導電極要謹慎精確，不可反復(fù)多次插入，最好先找準位置后再安放。 4.電極安放好后，用棉球蓋住骨孔，保持鼓室內(nèi)溫度和濕度，也要給動物保溫。 5.觀察短聲微音器電位與聽神經(jīng)動作電位時房間應(yīng)安靜，以免形成白噪聲

12、對聽神經(jīng)動作電位的掩蔽效應(yīng)。實驗三：藥物的鎮(zhèn)痛作用（4學時）【教學目標和要求】目標：1.掌握動物實驗的常用致痛方法，具體本實驗為扭體法。2. 掌握鎮(zhèn)痛藥物的研究方法。3.通過本次實驗學習不同類型鎮(zhèn)痛藥的鎮(zhèn)痛原理，鍛煉解決實際問題的能力?！局饕獌x器設(shè)備和藥品】1. 儀器設(shè)備：天平，注射器，小鼠籠，計時器。2. 藥品：0.6%醋酸溶液，生理鹽水，2mg/ml鹽酸曲馬多溶液，2mg/ml羅通定溶液，30mg/ml苦味酸溶液?！緦嶒炓蟆?0.6% 醋酸溶液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，因存放過久常使其作用減弱。2觀察扭體反應(yīng)時，應(yīng)將小鼠放于小鼠籠中觀察，切忌放于平滑桌面上。3. 觀察扭體反應(yīng)（腹部內(nèi)凹、后肢伸張、臀部

13、高起、軀體扭曲）的陽性標準應(yīng)保持一致。4為避免主觀因素對實驗結(jié)果的影響，可采取單盲法，即不告知學生各藥名稱，而以甲、乙、丙代替，待實驗觀察完畢，通過分析實驗結(jié)果，再明確所用藥物。5為減少組間差異，可將學生分為6組，每個實驗小組從3組動物中分別取3只小鼠進行觀察，最后匯總整個實驗室結(jié)果進行分析。實驗四：藥物對離體豚鼠回腸的作用（4學時）【教學目標和要求】目標：1.掌握離體器官體外生存的基本三要素。2.掌握離體豚鼠回腸標本的制作方法。3.掌握膽堿能系統(tǒng)和腎上腺素能系統(tǒng)藥物的作用及作用機制。4.通過本次實驗掌握離體實驗的相關(guān)實驗方法，學習根據(jù)實驗結(jié)果分析藥物的作用機制，鍛煉學生的獨立思考問題及根據(jù)實

14、驗現(xiàn)象推測作用機制的能力?！局饕獌x器設(shè)備和藥品】1. 儀器設(shè)備：BL-420生物機能實驗系統(tǒng)，超級恒溫水浴，雙層浴管，張力換能器，L型鉤，線鉤，空氣泵，加樣器，手術(shù)器械，鐵支架，雙凹夾，螺旋夾，培養(yǎng)皿，小燒杯，量筒，手術(shù)器械。2. 藥品：10-3M乙酰膽堿， 510-3 M 阿托品，0.1mg/ml腎上腺素，10mg/ml酚妥拉明，10mg/ml普萘洛爾，新斯的明，去甲腎上腺素，氯化鋇，臺式液?！緦嶒炓蟆繉嶒灥碾y點和重點、實驗安全和環(huán)保要求等。1制備腸段標本時動作要輕柔，避免損傷腸段。懸掛腸段時動作要迅速，盡量減少腸段的缺氧時間。2. 懸掛標本時注意對角懸掛，并注意鏈接標本的絲線必須與換能器

15、的連線垂直，且不可與浴管的管壁接觸。3. 加藥時注意直接加到液面上，加藥時不可觸碰絲線。實驗五：海馬毀損對大鼠空間記憶的影響（4學時）【教學目標和要求】不能僅說明掌握、了解等低階目標，要突出能力和素質(zhì)培養(yǎng)。目標：1.掌握定點毀損不同腦區(qū)的方法，具體本實驗為毀損大鼠海馬腦區(qū)。2.掌握Morris水迷宮實驗研究空間學習記憶的實驗方法。3.掌握聯(lián)合學習記憶的原理和方法，具體本實驗為聲音關(guān)聯(lián)的條件恐懼記憶模型。4.通過本次實驗了解與學習記憶相關(guān)的腦內(nèi)結(jié)構(gòu)，學習確定相關(guān)腦區(qū)具體功能的邏輯思維方法，鍛煉解決實際問題的能力?！局饕獌x器設(shè)備和藥品】1. 儀器設(shè)備：數(shù)字式腦立體定位儀，手術(shù)器械一套，顱鉆，微量注

16、射器，微量輸液泵，天平，Morris水迷宮，驚恐條件反射裝置，灌注針，注射器，輸液器，恒冷切片機2. 藥品： 1戊巴比妥鈉，3雙氧水，骨蠟，生理鹽水， 20g/l NMDA，4多聚甲醛，30蔗糖緩沖液，蘇木素溶液，伊紅溶液，0.5%鹽酸酒精，70、80% 、95%、100%酒精，二甲苯，封片劑。【實驗要求】實驗的難點和重點、實驗安全和環(huán)保要求等。1避免過度麻醉造成動物死亡或麻醉太淺動物活動而影響定位的準確性。2海馬損傷時嚴格按照提供數(shù)據(jù)進行，避免損傷其它腦組織。3藥物微量注射時速度不宜過快，注射完畢后留針5分鐘后拔出，防止藥物外漏。4水迷宮實驗時水溫應(yīng)不低于20度，以免影響大鼠的運動，并對水進

17、行處理使之不透明，保證實驗的準確性。5應(yīng)在迷宮周圍提供一些可見標志，并且在實驗期間位置保持不變，以便大鼠建立空間記憶。6驚恐條件反射實驗中通電電流，時間嚴格按照實驗數(shù)據(jù)進行設(shè)置，防止過強或過弱影響實驗的準確性。7驚恐條件反射實驗時，更換測試動物前應(yīng)使用70乙醇徹底清潔實驗裝置，以免遺留的氣味影響動物行為。8用鹽酸酒精分化時間要嚴格掌握，需要顯微鏡下觀察。9伊紅染色要適中，不可染色太深。10在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。實驗六：大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的制備【教學目標和要求】目標：1.掌握線栓法制作大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型。2. 了解局灶性腦缺血模型

18、的常用制備方法。3.了解大鼠局灶性腦缺血模型制備成功的標志。4. 通過本次實驗，將目前常用的腦缺血經(jīng)典動物模型介紹給學生，激發(fā)學生們的創(chuàng)新思維，為學生提供新的研究方法，對研究腦缺血再灌注損傷的發(fā)生發(fā)展的機制和預(yù)防治療等都具有非常重要的意義?！局饕獌x器設(shè)備和藥品】1. 儀器設(shè)備：手術(shù)器械，尼龍栓線，腦模具，恒溫水浴，2. 藥品：1% TTC溶液，生理鹽水，戊巴比妥鈉【實驗要求】實驗的難點和重點、實驗安全和環(huán)保要求等。1. 分離頸總動脈及頸內(nèi)頸外動脈時動作盡量輕柔，鈍性分離，以免手術(shù)視野出血影響栓線插入。2. 麻醉動物時不宜麻醉過深3. 栓線插入時注意不要插入太深，以免引起蛛網(wǎng)膜下腔出血。五、實驗教學要求對應(yīng)關(guān)系教學要求1教學要求2教學要求3實驗一XXX實驗二XX實驗三XXX實驗四XXX實驗五XX實驗六XX六、教材及參考書目【教材】 編著者，教材名，出版社，出版年，教材類別（規(guī)劃、獲獎教材等）1. 高英茂主審，李和，李繼承主編，組織學與胚胎學，人民衛(wèi)生出版社，2005年8月第一版，2015年8月第三版， （“十二五”普通高等教育本