辣根過氧化物酶

1、辣根過氧化物酶催化機理及應(yīng)用1目錄辣根過氧化物酶的來源辣根過氧化物酶（HRP)簡介其同工酶HRP C辣根過氧化物酶的催化機制辣根過氧化物酶的應(yīng)用2一、辣根過氧化酶的來源辣根是十字花科多年生草本植物，它的根有辛辣味，可用作調(diào)味品或烹飪食用，根同時還含有一種含量豐富的過氧化物酶辣根過氧化物酶。3二、辣根過氧化酶(HRP)1、HRP廣泛分布于植物界，它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟林結(jié)合而成的糖蛋白，在過氧 化氫存在時能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合。2、HRP的同工酶種類極多。3、雖然它們都是以鐵卟林為輔機的血紅素蛋白，但是彼此間在分子量、含糖量和等電點等方面卻不太相同。4同工酶1、同工酶：指能催化相

2、同化學反應(yīng)，但酶本身的分子結(jié)構(gòu)組成、理化性質(zhì)、免疫功能和調(diào)控特性等方面有所不同的一組酶。2、同工酶不僅存在于同一個體的不同組織中，也存在于同一組織、同一細胞的不同亞細胞結(jié)構(gòu)中，甚至存在于不同發(fā)育期的組織中。5三、辣根過氧化物酶同工酶C 其中以中性辣根過氧化物酶同工酶C的含量頗為豐富，也是應(yīng)用最廣泛的一種 。 HRP C單肽鏈是由308個氨基酸構(gòu)成的，肽鏈上存有二硫鍵（4個由兩分子Cys組成的），還含有一個鹽橋（是Arg123和Asp99構(gòu)成）。6HRP C二級結(jié)構(gòu) HRP C 含有兩個不同的金屬中心:血紅素和兩個鈣原子。 血紅素中鐵原子的一個軸向結(jié)合點與肽鏈上His170側(cè)鏈的N原子結(jié)合, 使

3、血紅素垂直連接在His170上。7HRP C三級結(jié)構(gòu) 酶的結(jié)構(gòu)總體上看來大部分是-螺旋,但其中也包含一些小的-折疊。 網(wǎng)狀為血紅素; 球型為鈣原子; 螺旋型為 螺旋; 尖頭所指為折疊。8四、辣根過氧化物酶的作用機理辣根過氧化物酶的作用機理可分以下幾步： 第一步，形成有活性的酶一底物復合物： HRP + H2O2 復合物第二步，復合物轉(zhuǎn)變成有活性的復合物： 復合物+AH 復合物+A(AH：表示還原型氫供體）第三步，復合物被還原，釋放出酶： 復合物+AH HRP+A+2H2O 在一定程度上復合物可自發(fā)地分解成HRP和產(chǎn)物(P)，亦可與過量的過氧化氫形成無活性的復合物。 910五、辣根過氧化酶的應(yīng)用

4、神經(jīng)生物學研究：作為工具酶使用，研究不同核團和神經(jīng)元之間的相互聯(lián)系。環(huán)境生物修復的應(yīng)用：HRP具有極強的催化苯酚及其衍生化合物的氧化的能力。廣泛用于臨床化學和食品工業(yè)等領(lǐng)域。用于廢水處理、生物傳感和酶聯(lián)免疫吸附分析。11酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA) ELISA中酶標記抗體或抗原上的標記酶是整個免疫分析體系中催化底物，提供可檢測信號的成分。12HRP作為免疫標記酶的檢測方法13化學發(fā)光法14參考文獻1田婧.辣根過氧化物酶HRP-DL性質(zhì)及其在環(huán)境檢測中的應(yīng)用D.2012,6.2洪偉杰,張朝暉,蘆國營.辣根過氧化物酶的結(jié)構(gòu)與作用機制J.生命的化學，2005,25（1）：33-36.3姜子濤.辣根過氧化物酶在食品分析中的應(yīng)用D.2007,4.4馮春梁,趙新,王漢,李言,韓玉花. 辣根過氧化物酶H2O2的響應(yīng)J. 遼寧師范大學學報. 2011