辣根過氧化物酶

1、辣根過氧化物酶催化機(jī)理及應(yīng)用1目錄辣根過氧化物酶的來源辣根過氧化物酶（HRP)簡(jiǎn)介其同工酶HRP C辣根過氧化物酶的催化機(jī)制辣根過氧化物酶的應(yīng)用2一、辣根過氧化酶的來源辣根是十字花科多年生草本植物，它的根有辛辣味，可用作調(diào)味品或烹飪食用，根同時(shí)還含有一種含量豐富的過氧化物酶辣根過氧化物酶。3二、辣根過氧化酶(HRP)1、HRP廣泛分布于植物界，它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟林結(jié)合而成的糖蛋白，在過氧 化氫存在時(shí)能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合。2、HRP的同工酶種類極多。3、雖然它們都是以鐵卟林為輔機(jī)的血紅素蛋白，但是彼此間在分子量、含糖量和等電點(diǎn)等方面卻不太相同。4同工酶1、同工酶：指能催化相

2、同化學(xué)反應(yīng)，但酶本身的分子結(jié)構(gòu)組成、理化性質(zhì)、免疫功能和調(diào)控特性等方面有所不同的一組酶。2、同工酶不僅存在于同一個(gè)體的不同組織中，也存在于同一組織、同一細(xì)胞的不同亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中，甚至存在于不同發(fā)育期的組織中。5三、辣根過氧化物酶同工酶C 其中以中性辣根過氧化物酶同工酶C的含量頗為豐富，也是應(yīng)用最廣泛的一種 。 HRP C單肽鏈?zhǔn)怯?08個(gè)氨基酸構(gòu)成的，肽鏈上存有二硫鍵（4個(gè)由兩分子Cys組成的），還含有一個(gè)鹽橋（是Arg123和Asp99構(gòu)成）。6HRP C二級(jí)結(jié)構(gòu) HRP C 含有兩個(gè)不同的金屬中心:血紅素和兩個(gè)鈣原子。 血紅素中鐵原子的一個(gè)軸向結(jié)合點(diǎn)與肽鏈上His170側(cè)鏈的N原子結(jié)合, 使

3、血紅素垂直連接在His170上。7HRP C三級(jí)結(jié)構(gòu) 酶的結(jié)構(gòu)總體上看來大部分是-螺旋,但其中也包含一些小的-折疊。 網(wǎng)狀為血紅素; 球型為鈣原子; 螺旋型為 螺旋; 尖頭所指為折疊。8四、辣根過氧化物酶的作用機(jī)理辣根過氧化物酶的作用機(jī)理可分以下幾步： 第一步，形成有活性的酶一底物復(fù)合物： HRP + H2O2 復(fù)合物第二步，復(fù)合物轉(zhuǎn)變成有活性的復(fù)合物： 復(fù)合物+AH 復(fù)合物+A(AH：表示還原型氫供體）第三步，復(fù)合物被還原，釋放出酶： 復(fù)合物+AH HRP+A+2H2O 在一定程度上復(fù)合物可自發(fā)地分解成HRP和產(chǎn)物(P)，亦可與過量的過氧化氫形成無活性的復(fù)合物。 910五、辣根過氧化酶的應(yīng)用

4、神經(jīng)生物學(xué)研究：作為工具酶使用，研究不同核團(tuán)和神經(jīng)元之間的相互聯(lián)系。環(huán)境生物修復(fù)的應(yīng)用：HRP具有極強(qiáng)的催化苯酚及其衍生化合物的氧化的能力。廣泛用于臨床化學(xué)和食品工業(yè)等領(lǐng)域。用于廢水處理、生物傳感和酶聯(lián)免疫吸附分析。11酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA) ELISA中酶標(biāo)記抗體或抗原上的標(biāo)記酶是整個(gè)免疫分析體系中催化底物，提供可檢測(cè)信號(hào)的成分。12HRP作為免疫標(biāo)記酶的檢測(cè)方法13化學(xué)發(fā)光法14參考文獻(xiàn)1田婧.辣根過氧化物酶HRP-DL性質(zhì)及其在環(huán)境檢測(cè)中的應(yīng)用D.2012,6.2洪偉杰,張朝暉,蘆國營.辣根過氧化物酶的結(jié)構(gòu)與作用機(jī)制J.生命的化學(xué)，2005,25（1）：33-36.3姜子濤.辣根過氧化物酶在食品分析中的應(yīng)用D.2007,4.4馮春梁,趙新,王漢,李言,韓玉花. 辣根過氧化物酶H2O2的響應(yīng)J. 遼寧師范大學(xué)學(xué)報(bào). 2011