(版)生物藥物分析重點(diǎn)版

1、第一章緒論1.生物藥物解析：是生物工程制藥專業(yè)設(shè)置的一門專業(yè)課，是應(yīng)用微生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、數(shù)學(xué)、解析化學(xué)、生化工程等學(xué)科的理論及其技術(shù)成就，檢測(cè)和研究各種生物藥物質(zhì)量的一門綜合性學(xué)科。2.藥典：是國(guó)家對(duì)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢測(cè)方法所做的技術(shù)規(guī)定，是藥物生產(chǎn)、監(jiān)控、供應(yīng)、使用及管理部門共同依照的法律。3.我國(guó)的第一部藥典1953年初版，從1963年版開始，中國(guó)藥典分一、二部，藥典內(nèi)容一般包括凡例、正文、附錄、索引四部分，生物藥物收載在第三部分。美國(guó)藥典USP英國(guó)藥典BP日本藥局方JP英國(guó)副藥典或英國(guó)準(zhǔn)藥典BPC國(guó)際藥典Ph.Int5.基因工程藥物的質(zhì)量控制規(guī)則（暫時(shí)未找

2、到）6.生物藥物質(zhì)量的科學(xué)管理：（5個(gè)）優(yōu)異藥物實(shí)驗(yàn)研究規(guī)范GLP優(yōu)異藥品生產(chǎn)規(guī)范GMP優(yōu)異藥品供應(yīng)規(guī)范GSP優(yōu)異藥品臨床試驗(yàn)規(guī)范GCP解析工作的質(zhì)量管理AQC第二章生物藥物的雜質(zhì)檢查1.藥物的雜質(zhì)：（定義）指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的牢固性和療效，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。2.藥物中存在的雜質(zhì)其本源主要有兩個(gè)：1）是由生產(chǎn)過程中引入；2）是儲(chǔ)藏過程中受外界條件的影響，引起藥物理化性質(zhì)發(fā)生變化而產(chǎn)生。3.雜質(zhì)限量：（定義）指藥物中所含雜質(zhì)的最大同意量，它平時(shí)不要求正確測(cè)定其含量，只要在雜質(zhì)含量在必然限度內(nèi)。4.雜質(zhì)限量檢查法的特點(diǎn)：只需經(jīng)過與比較液比較即可判斷藥物中所含雜質(zhì)量可否吻合限

3、量規(guī)定，不需測(cè)定雜質(zhì)的正確含量。第1頁共12頁5.一般雜質(zhì)的檢查方法在藥典附錄中加以規(guī)定。一般雜質(zhì)檢查項(xiàng)目有氯化物、硫酸鹽、水分、酸、堿、硫化物、硒、氟、氰化物、鐵鹽、重金屬、砷鹽、銨鹽、易炭化物、干燥失重、熾濁殘?jiān)⑷芤侯伾c澄清度以及有機(jī)溶劑殘留量等。氯化物檢查法：Cl-Ag+AgCl原理：藥物中微量的氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng)，生成氯化銀的膠體微粒而顯白色渾濁，與必然量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁程度比較，判斷供試品中氯化物可否吻合限量規(guī)定。重金屬檢查法：重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。檢查常常以鉛為代表。砷鹽檢查法：砷為毒性雜質(zhì)，

4、須嚴(yán)格控制其限量。砷鹽的檢查主若是古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法。中國(guó)藥典（2000版）和英國(guó)藥典（1998）主要采用古蔡法檢查藥物中微量砷。原理：利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生再生態(tài)的氫，與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成擁有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與同條件下必然量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較，判斷砷鹽的含量。溶液澄清度檢查法：級(jí)號(hào)0.51234濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（ml）2.505.010.030.050.0水（ml）97.5095.090.070.050.0當(dāng)供試品溶液的澄清度與所用試劑相同或未高出0.5級(jí)濁度標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)，稱為澄清；當(dāng)供試品溶液的乳色比0.5級(jí)明顯，而不及1級(jí)時(shí)，稱為濁度0

5、.5級(jí)；其他依次類推，分別稱為濁度1，2，3級(jí)。熾灼殘?jiān)鼨z查法：有機(jī)藥物經(jīng)炭化或無機(jī)藥物加熱分解后，加硫酸濕潤(rùn)，先低溫再高溫（700800）熾灼，使完好炭化，有機(jī)物分解揮發(fā)，殘留的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)（多為金屬的氧化物或無機(jī)鹽類）成為硫酸鹽，稱為熾灼殘?jiān)˙P稱硫酸灰分），稱重，判斷可否吻合限量規(guī)定。干燥失重檢查法：1）常壓恒溫干燥法；2）干燥劑干燥法6.特別雜質(zhì)的檢查：P31對(duì)于生物藥物來說，還有一類特別雜質(zhì)需要檢查，它們是痕量地存第2頁共12頁在于生物藥物中，對(duì)生物體能產(chǎn)生特別生理作用，嚴(yán)重影響用藥安全的雜質(zhì)，故對(duì)這類特別雜質(zhì)的檢查又稱為安全性檢查。生物藥物的安全性檢查包括：1）異常毒性檢查法

6、2）熱原檢查法3）升壓物質(zhì)檢查法4）降壓物質(zhì)檢查法5）致敏物質(zhì)檢查法第三章生物藥物的微生物限度檢查1.微生物限度檢查：指微生物的染菌不能夠高出必然限度。生物藥物的微生物限度檢查法：染菌檢查是嚴(yán)格依照藥典規(guī)定進(jìn)行計(jì)準(zhǔn)檢查：（1）細(xì)菌、霉菌、酵母菌數(shù)量的檢查；細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定是觀察每克或每毫升供試品所污染的活細(xì)菌數(shù)量。霉菌和酵母菌數(shù)的測(cè)定是觀察每克或毫升供試品中所污染的活霉菌和酵母菌數(shù)量2）控制菌的檢查染菌限度檢查原則：檢出的菌量較本質(zhì)菌量偏低2.藥檢結(jié)果判斷：細(xì)菌菌落數(shù)、霉菌（酵母菌）菌落數(shù)、控制菌三項(xiàng)均吻合該品種微生物限度項(xiàng)下規(guī)定，應(yīng)判供試品合格；其中任何一項(xiàng)不吻合該品種項(xiàng)下規(guī)定，應(yīng)判供試品不合

7、格。3.控制菌的檢查法：增菌培養(yǎng)：為了以提高各種控制菌的檢出率為目的的細(xì)菌培養(yǎng)方法。增菌培養(yǎng)目的：提高各種控制菌的檢出率。大腸桿菌（重點(diǎn)）：流程（每一步做什么，用什么培養(yǎng)基，現(xiàn)象，結(jié)論）1）配培養(yǎng)基和稀釋液2）供試液的制備（3）增菌培養(yǎng)（膽鹽乳糖培養(yǎng)基），現(xiàn)象：培養(yǎng)基為黃色，有氣泡產(chǎn)生（4）熒光檢查（MUG4甲基傘形酮葡糖苷酸）現(xiàn)象：當(dāng)供試品MUG管出現(xiàn)熒光，陽性；無熒光，陰性。5）靛基質(zhì)實(shí)驗(yàn)（二甲基氨基苯甲醛）（蛋白胨水培養(yǎng)基）現(xiàn)象：液面呈玫瑰紅色為陽性，液面呈試劑本色為陰性【注意：培養(yǎng)基中蛋白胨的質(zhì)量影響本反應(yīng)的陽性率，可采用乙醚提取培養(yǎng)液中的靛基質(zhì)，提高陽性率】第3頁共12頁（6）檢查結(jié)

8、果判斷雙陰或雙陽陰/陽或陽/陰（蛋白熒光玫瑰紅色液面）分別純化EMB曙紅亞甲藍(lán)瓊脂現(xiàn)象：菌落呈紫黑色或紫色為陽性，不著色為陰性。麥康凱MacC平板現(xiàn)象：菌落呈嬌艷的桃紅、粉紅色為陽性革蘭染色、鏡檢、生化試驗(yàn)（乳糖發(fā)酵、IMVC）書寫檢驗(yàn)記錄單檢查結(jié)果判斷與報(bào)告：當(dāng)空白比較試驗(yàn)呈陰性，陽性比較正常，供試品檢查為革蘭陰性無芽孢短桿菌；MUG反應(yīng)為陽性；IMVC試驗(yàn)為+或+，判斷為檢出大腸桿菌。沙門菌：特點(diǎn)性試驗(yàn)1）靛基質(zhì)試驗(yàn)2）脲酶試驗(yàn)3）氰化鉀試驗(yàn)4）賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)5）動(dòng)力檢查6）血清凝集試驗(yàn)銅綠假單胞菌：特點(diǎn)性試驗(yàn)1）氧化酶試驗(yàn)2）綠膿菌素試驗(yàn)3）硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)4）明膠液化實(shí)驗(yàn)5）42生

9、長(zhǎng)試驗(yàn)4.含抑菌成分的生物藥物的菌檢方法：主要指抗生素含抑菌成分供試液的制備：1）稀釋法2）離心積淀集菌法第4頁共12頁3）薄膜過濾法4）中和法第四章酶聯(lián)免疫測(cè)定法在生物藥解析中的應(yīng)用1.酶聯(lián)免疫解析法（ELISA）：是固相免疫測(cè)定法，非均相。包括（P63）1）雙抗體夾心法2）雙位點(diǎn)一步法3）間接法4）競(jìng)爭(zhēng)法2.酶聯(lián)方法1）戊二醛法2）過碘酸鈉法3.ELISA間接法操作步驟：1）包被抗原，沖洗2）封閉3）加抗體，沖洗4）酶標(biāo)抗抗體，沖洗5）底物顯色6）停止反應(yīng)7）檢測(cè)第五章酶法解析1.酶法解析：利用酶作為解析工具或解析試劑，測(cè)定樣品中用一般化學(xué)方法難以檢測(cè)的物質(zhì)（這些物質(zhì)能夠是酶的底物，也能夠

10、是酶的控制劑或活化劑以及酶的輔助因子）的方法。根據(jù)測(cè)定原理，又分為終點(diǎn)法、反應(yīng)速度法和循環(huán)放大法三大類。終點(diǎn)法：（定義）先借助酶反應(yīng)（單獨(dú)的反應(yīng)或幾種酶組成的耦聯(lián)酶反應(yīng)）使被測(cè)物質(zhì)定量地進(jìn)行轉(zhuǎn)變，在轉(zhuǎn)變完成后，測(cè)定底物、產(chǎn)物或輔酶物質(zhì)（第二底物）等的變化量，因此稱為終點(diǎn)測(cè)定法，是應(yīng)用最寬泛、最寬泛的酶法解析。第5頁共12頁酶的循環(huán)放大法：（重點(diǎn)掌握）酶循環(huán)放大法檢測(cè)超微量前列腺素（PG）酮戊二酸谷氨酸（Glu）第一步：變換反應(yīng)：試樣中的PG在過分NAD+存在，經(jīng)前列腺Glu脫氫酶素脫氫酶PDGH催化進(jìn)行變換反應(yīng)，生成與PG相當(dāng)?shù)腘ADHPG+NAD+前列腺素脫氫酶15脫羧PG+NADH+H+第

11、二步：循環(huán)反應(yīng)：用必然的方法除掉節(jié)余的NAD+后進(jìn)行循化反應(yīng)，在過分的3-磷酸甘油醛、酮戊二酸和銨鹽存在下，經(jīng)3-磷酸甘油醛脫氫酶和谷氨酸脫氫酶催化。NADH被氧化成NADH+H+NAD+NAD+，并生成與NADH量相當(dāng)?shù)墓劝彼帷ｋS后，NAD+又被還原成NADH，并產(chǎn)生與NADH量相當(dāng)?shù)?-磷酸甘油酸，若是反復(fù)進(jìn)行n次，則存儲(chǔ)的谷氨酸及3-磷酸甘油酸的量即n倍于3-磷酸甘油醛脫氫酶NADH第三步：指示反應(yīng)：存儲(chǔ)的谷氨酸在過分NAD+存在下，經(jīng)谷氨酸脫氫酶能進(jìn)行指示反應(yīng)，利用終點(diǎn)法測(cè)的谷氨酸的量。谷氨酸+NAD+谷氨酸脫氫酶（GDH）酮戊二酸+NADH3-磷酸甘油酸3-磷酸甘油醛+H+（由谷氨酸

12、的量及循環(huán)次數(shù)n則可求出待測(cè)物PG的量）第六章電泳技術(shù)1.聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中有三種物理效應(yīng)：（1）樣品的濃縮效應(yīng)（2）分子篩效應(yīng)（3）電荷效應(yīng)2.蛋白質(zhì)染色方法：常用的有考馬斯亮藍(lán)R250和銀染色法能保持蛋白質(zhì)活性的方法有：1苯胺基8萘磺酸，簡(jiǎn)稱ANS法3.SDS電泳技術(shù)原理（P122）：SDS是一種陰離子去污劑，它能破壞蛋白質(zhì)分子之間以及與其他物質(zhì)分子之間的非共價(jià)鍵。在強(qiáng)還原劑（比方巰基乙醇或二硫蘇糖醇）的存在下，蛋白質(zhì)分子內(nèi)的二硫鍵被打開并解聚成組分它們的多肽鏈。解聚后的蛋白質(zhì)分子與SDS充分結(jié)合形成帶負(fù)電的蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物。此復(fù)合物所帶的SDS負(fù)電荷大大高出了蛋白質(zhì)分子原有的電荷

13、量，這就除掉了不相同種類蛋白質(zhì)分子之間原有的電荷差異，蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物在水溶液中的形狀像一個(gè)長(zhǎng)橢圓棒。橢圓棒的短軸對(duì)不相同的蛋白質(zhì)亞基SDS復(fù)合物基本上是相同的，約為18A。但長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度則與蛋白質(zhì)分子量的大小成正比，因此，這類復(fù)合物在SDS聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中的電泳遷移率不再受蛋白質(zhì)原有電荷量的影響，而主要取決于橢圓棒的長(zhǎng)軸長(zhǎng)度即蛋白質(zhì)及其亞基分子量的大小。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的分子量在15000到200000之間時(shí)，電泳遷移率與分子量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系。第6頁共12頁LogMW=bmR+KMW蛋白質(zhì)的分子量，mR相對(duì)遷移率，b斜率，K截距在必然條件下，b和K均為常數(shù)。因此可知，SDS電泳不但能夠分別蛋白

14、質(zhì)，而且能夠根據(jù)遷移率大小測(cè)定蛋白質(zhì)亞基的分子量。這個(gè)規(guī)律對(duì)大部分蛋白質(zhì)是適用的，只有少許蛋白質(zhì)例外。等電聚焦技術(shù)：利用蛋白質(zhì)分子也許其他兩性分子的等電點(diǎn)的不相同在一個(gè)牢固、連續(xù)的、線性的PH梯度中進(jìn)行分別解析的一種電泳方法。等電聚焦突出的優(yōu)點(diǎn)是濃縮效應(yīng)。第七章色譜法1.色譜法：（定義）是一種物理或物理化學(xué)的分別方法，分別原理是：混雜物中各組分在兩相間進(jìn)行分配，其中一相是不動(dòng)的，稱為固定相；另一相是攜帶混雜物流過固定相的，稱為流動(dòng)相。當(dāng)流動(dòng)相中所含的混雜物經(jīng)過固定相時(shí)，就會(huì)與固定相發(fā)生作用，由于混雜物中各組分在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上存在差異，他它們與固定相發(fā)生作用的大小、強(qiáng)弱就有差異，因此，在同一條件下

15、，不相同組分在固定相中滯留時(shí)間不相同，從而按先后不相同次序從固定想中流出而得到分別。這類借助在兩相間分配的原理而使混雜物中各組分分其他技術(shù)，稱為色譜分別技術(shù)或色譜法，又稱層析法。2.紙色譜：影響因素：物質(zhì)極性的影響溶劑的影響PH的影響濾紙的影響溫度和時(shí)間的影響3.薄層色譜法4.高效液相色譜第八章抗生素類藥物的解析1.抗生素的效價(jià)：（定義）以它的生物活性如抗見效能來衡量其活性標(biāo)準(zhǔn)，因此以效價(jià)的高低作為抗生素質(zhì)量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。2.抗生素效價(jià)的最初衡量標(biāo)準(zhǔn)是用牛津單位衡量青霉素的的質(zhì)量。牛津單位定義：在標(biāo)準(zhǔn)情況下能完好控制50ml肉湯培養(yǎng)液中的金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（牛津標(biāo)準(zhǔn)菌株）生長(zhǎng)的青霉素最低含量

16、為一個(gè)牛津單位（即1個(gè)生物活性單位，1個(gè)單位）。一個(gè)牛津單位（IU）相當(dāng)于0.6g青霉素G鈉鹽所擁有的抗生活力，1mg青霉素G鈉鹽含第7頁共12頁有1667個(gè)牛津單位。3.抗生素的效價(jià)有兩種單位：1）稀釋單位2）重量單位4.抗生素微生物檢定用標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品：是指與商品同質(zhì)的純度較高的抗生素，每mg含有必然的活性單位。用作供試品效價(jià)測(cè)準(zhǔn)時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品是經(jīng)過國(guó)際相關(guān)機(jī)構(gòu)協(xié)議認(rèn)定的每mg含有必然單位的標(biāo)準(zhǔn)品。單位是國(guó)際單位。5.抗生素類藥物的鑒別：1）-內(nèi)酰胺類2）氨基糖苷類茚三酮反應(yīng)：氨芐青霉素，氨基糖苷類坂口反應(yīng)：是鏈霉素水解產(chǎn)物鏈霉胍的特有反應(yīng)，在堿性溶液中，鏈霉胍和8羥基喹啉（或萘酚）

17、分別同次溴酸鈉反應(yīng)，生成的各自產(chǎn)物再相互反應(yīng)而形成橙紅色化合物，加入尿素使顏色牢固。6.抗生素效價(jià)微生物檢定法1）稀釋法2）比濁法3）瓊脂擴(kuò)散法（即管碟法）管碟法是目前國(guó)際上測(cè)定抗生素效價(jià)的通用方法，原理：利用抗生素在攤布特定試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散，形成含必然濃度抗生素的球型區(qū)，控制了試驗(yàn)菌的生殖，經(jīng)過透明瓊脂培養(yǎng)基，可觀察到透明的抑菌圈；而且在必然的抗生素濃度范圍內(nèi)，對(duì)數(shù)濃度（劑量）與抑菌圈面積或直徑成正比。生物檢定是利用對(duì)生物體（微生物細(xì)胞、細(xì)胞、離體組織，整體動(dòng)物等）所引起的藥理作用來測(cè)定藥物的生物活性或效價(jià)的一種方法。生物檢定包括微生物檢定。第九章維生素及輔酶類藥物的解析（P237）

18、維生素C（抗壞血酸）（一）鑒別試驗(yàn)-C=C-TPA1.利用還原性維生素C分子中的二個(gè)烯醇基（OHOH）擁有強(qiáng)還原性能夠被氧化為二酮第8頁共12頁基，應(yīng)用這個(gè)性質(zhì)能夠進(jìn)行維生素C的鑒別和含量測(cè)定。如硝酸銀，2,6-二氯吲哚酚、高錳酸鉀、亞甲藍(lán)、氯化汞、磷鉬酸。堿性酒石酸酮溶液（婓林試劑）等多種氧化劑均可氧化維生素C，使其轉(zhuǎn)變?yōu)槿渚S生素C，而這些試劑自己則被還原產(chǎn)生積淀或發(fā)生顏色變化等現(xiàn)象，可用于鑒別。中國(guó)藥典采用硝酸銀反應(yīng)和2,6-二氯吲哚酚反應(yīng)進(jìn)行鑒別。USP（XXIV）采用婓林試劑反應(yīng)鑒別。（二）雜質(zhì)檢查中國(guó)藥典、BP（1998）用原子吸取光譜法檢查微量銅、鐵鹽的含量。（三）含量測(cè)定容量解

19、析法1）碘量法：抗壞血酸可在酸性溶液中以淀粉為指示劑，用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液直接滴定。2）2,6-二氯吲哚酚：維生素C在酸性溶液中用2,6-二氯吲哚酚滴準(zhǔn)時(shí)，滴定至溶液顯玫瑰紅色時(shí)，即為終點(diǎn)，無需另加指示劑。第十一章氨基酸與蛋白質(zhì)藥物的解析（p270）蛋白質(zhì)含量測(cè)定：凱式定氮法、雙縮脲法、福林酚法、紫外光吸取法；染色法（如氨基黑、考馬斯亮藍(lán)）；熒光激發(fā)、氯胺丁、放射性核素計(jì)數(shù)等矯捷度較高的方法。（1）凱式定氮法凱式定氮法常用來測(cè)定有機(jī)物（如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸）的含氮量。當(dāng)含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱時(shí)，分解出氮、二氧化碳、水。氮轉(zhuǎn)變出的氨與硫酸化合生成硫酸銨。分解反應(yīng)進(jìn)行的很慢，可加入硫酸銅及硫酸鉀或硫酸鈉

20、促進(jìn)反應(yīng)，其中硫酸銅為催化劑，硫酸鉀或硫酸鈉可提高沸點(diǎn)。過氧化氫也能加速反應(yīng)。消化完了今后，在凱式定氮瓶中加入強(qiáng)堿（氫氧化鈉溶液）消化液，使硫酸銨分解，放出氨。用水蒸汽蒸餾法，將氨蒸入過分的硼酸溶液中，氨與溶液中的氫離子結(jié)合，生成銨離子，使溶液中氫離子濃度降低。爾后用強(qiáng)酸滴定，直至恢復(fù)溶液中原來氫離子濃度為止。所用強(qiáng)酸的摩爾系數(shù)即相當(dāng)于被測(cè)樣品中的氨的摩爾數(shù)。凱式定氮法有兩種常用方法：常量法和半微量法。（2）雙縮脲法與肽鍵反應(yīng)雙縮脲法也分為兩種方法，即常量法和微量法。常量雙縮脲法第9頁共12頁微量雙縮脲法胰島素（Insulin）的質(zhì)量解析效價(jià)測(cè)定目前各國(guó)藥典均采用生物判斷法作為胰島素效價(jià)測(cè)定的

21、法定方法。其中有些國(guó)家采用兔血糖法，我國(guó)及另一些國(guó)家采用小鼠血糖下降法，也適用小鼠驚厥法。第十二章多肽因子類藥物的解析（P292）多肽藥物的鑒別：基因重組藥物的鑒別主要采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡法。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS）見第六章免疫印跡法（轉(zhuǎn)移電泳、蛋白印跡法、westernblot）2.多肽藥物的檢查肽圖檢查：肽圖解析是指用酶解或化學(xué)降解蛋白質(zhì)后，對(duì)生成的肽段進(jìn)行分別、解析的技術(shù)。純度：基因工程產(chǎn)品蛋白質(zhì)純度是一項(xiàng)重要指標(biāo)，但它也是一項(xiàng)相對(duì)的指標(biāo)，需依照本質(zhì)要求而定，純度的要求是95%、99%或99.9%，正如化學(xué)試劑有化學(xué)純、解析純或光譜純度。蛋白質(zhì)的純度一般是

22、指可否含有其他雜質(zhì)蛋白，而不包括鹽、緩沖液離子、SDS等小分子在內(nèi)。-定義第十三章酶類藥物的解析（P320）酶是由生物細(xì)胞產(chǎn)生的擁有催化能力的蛋白質(zhì)。在生物體內(nèi)，酶能降低生化反應(yīng)活化能，加速可逆反應(yīng)的進(jìn)行速度，使之趕忙達(dá)到平衡，而不改變生化反應(yīng)的平衡點(diǎn)，不改變反應(yīng)的平衡常數(shù)。酶的化學(xué)組成酶是擁有生物催化活性的特別蛋白，可分為簡(jiǎn)單酶和結(jié)合酶兩大類。酶的專一性和催化效率取決于酶蛋白，輔助因子起到對(duì)原子、電子或基團(tuán)的傳達(dá)作用。酶的活力單位與酶的比活力（1）酶的活性單位（U）是酶活性高低的一種胸襟，用U/g或U/ml表示。一個(gè)單位（U）定義為：在規(guī)定條件下，每分鐘轉(zhuǎn)變1umol底物所需要的酶量；當(dāng)?shù)孜锇?個(gè)以上的酶作用鍵時(shí)，可定義為每1min內(nèi)使1umol相關(guān)的基因轉(zhuǎn)變所需要的酶量（2）酶的比活力：是指沒毫克酶蛋白所含有的酶活力，用U/mg表示。用來比較