同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件1.05CK-MB檢測操作指導(dǎo)書

1、同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院檢驗科臨檢組血項操作指導(dǎo)書TJYYJYKLJ/XYZ105第2版標(biāo)題：CK-MB測定操作指導(dǎo)書第1章 第5節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的：保證CK-MB的測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。2. 適用范圍：血漿3. 項目名稱：CK-MB。4. 檢驗方法：采用雙位點酶免法檢測 (“雙抗體夾心法”)5. 檢測原理：樣品、標(biāo)記了堿性磷酸酶的大鼠抗人CK-MB抗體（酶結(jié)合物）以及包被了大鼠抗CK-BB抗體的磁性顆粒被一起加入到反應(yīng)管中，樣品中的CK-MB和固相在磁性顆粒表面的CK-BB抗體的B亞單位（與CK-BB 和 CK-MB為同分異構(gòu)體）抗原結(jié)合點進行反應(yīng)，同時

2、酶結(jié)合物特異性的與血清或血漿中的CK-MB相結(jié)合（不與CK-BB 和 CK-MB同分異構(gòu)體反應(yīng)）。孵育后，反應(yīng)管被傳送到磁性分離區(qū)域進行多次沖洗，去除未和固相結(jié)合的其它成分。最后在反應(yīng)管中加入化學(xué)發(fā)光底物（Lumi-Phos* 530）, 已與固相結(jié)合的堿性磷酸酶會使該底物發(fā)出光子并被光電比色計所檢測。最后，對照儀器中儲存的多點定標(biāo)曲線中所描述的光量子與標(biāo)準(zhǔn)品CK-MB的對應(yīng)關(guān)系而計算出樣品中的CK-MB濃度，反應(yīng)產(chǎn)生的光子與樣品中CK-MB的含量成正比。6. 試劑：6.1 品牌：Beckman Coulter6.2 貨號：No：3863716.3 包裝規(guī)格：2個包裝，50測試/包裝6.4 內(nèi)

3、含物：R1a：包被了羊抗生物素抗體和生物素化的大鼠抗人CK-BB單克隆抗體的磁性顆粒懸浮于緩沖液中，含小牛血清白蛋白(BSA)，0.1%的疊氮鈉和0.2% ProClin* 950。R1b：純化的大鼠IgG和純化的羊IgG懸浮于緩沖液中，含小牛血清白蛋白(BSA)，0.1%的疊氮鈉和0.1%ProClin*300。R1c：大鼠抗人CK-MB單克隆抗體堿性磷酸酶復(fù)合物懸浮在緩沖液中，含BSA，0.1%ProClin*300，和0.1%的疊氮鈉。7. 操作步驟：具體操作步驟見庫爾特ACCESSII免疫發(fā)光儀操作指導(dǎo)書編號JYYJYKLJ/YQZ406。8. 線性范圍：0.3-300ng/ml9.

4、參考范圍：正常人：0.3-4.0ng/ml10. 臨床意義：10.1急性心肌梗死后（AMI），心肌壞死后釋放的CK-MB進入外周血，在12小時內(nèi)達到其高峰值，隨后逐漸降低，于3672小時后恢復(fù)正常。CK-MB的升高和下降、心電圖（ECG）的改變以及臨床主訴胸痛通?？捎脕砜紤]診斷急性心肌梗死。10.2 CK-MB測定還可作為溶栓治療后心肌再灌注的非創(chuàng)傷性評估指標(biāo)。10.3 CK-MB的升高還可見于骨骼肌的創(chuàng)傷，但沒有AMI時出現(xiàn)的上升下降的特點。11. 病人準(zhǔn)備、標(biāo)本要求：血漿（肝素抗凝）。無溶血、脂血。12. 注意事項：12.1抽血后2小時內(nèi)分離血漿，去除所有可能存在的纖維蛋白和細(xì)胞成分，否則會得到假陽性結(jié)果。48小時內(nèi)不能完成檢測應(yīng)將標(biāo)本放入-20凍藏。12.2標(biāo)本只能復(fù)溶一次，檢測前將復(fù)溶標(biāo)本離心處理，不要用水浴方法復(fù)溶標(biāo)本。12.3如果樣本濃度低于項目的最低檢測限，系統(tǒng)會將結(jié)果報告為0.1ng/mL。12.4CK-MB檢測在濃度為20,000ng/ml時未發(fā)現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。12.5樣品中至多含有10mg/dL的膽紅素、3000mg/dl的甘油三脂、500mg/dL的血紅素，或6000mg/dL的人血清白蛋白不影響CK-MB檢測的結(jié)果。在存在上述每一種干擾物的情況下得到的所有CK-MB檢測結(jié)果